检索结果-内蒙古大学图书馆

国际检验医学杂志 2021年第7期42卷 816-818,823页

作者：刘红仙段丽芬刘晓梅王惠萍王晓辉褚嘉祐孙浩杨昭庆中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 云南省昆明市儿童医院云南昆明650228

目的对1个腓骨肌萎缩综合征核心家系的致病突变进行鉴定和遗传学分析。方法采用全外显子组测序技术筛选先证者中的致病突变,用Sanger测序技术检测核心家系中致病突变位点的基因型,并对其进行生物信息学分析。结果先证者MFN2基因存在单... 详细信息

目的对1个腓骨肌萎缩综合征核心家系的致病突变进行鉴定和遗传学分析。方法采用全外显子组测序技术筛选先证者中的致病突变,用Sanger测序技术检测核心家系中致病突变位点的基因型,并对其进行生物信息学分析。结果先证者MFN2基因存在单碱基杂合突变c.1090C>T p.R364W,母亲与妹妹均为该位点单碱基杂合突变,且均呈现不同程度的肌肉萎缩,但严重程度和发病年龄有所不同,父亲表型正常且在该位点未见异常。先证者全外显子组测序结果显示未见其他报道的相关基因突变。结论先证者MFN2基因c.1090C>T为1个致病突变位点。

关键词：腓骨肌萎缩综合征 MFN2基因全外显子组测序

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2-羟基戊二酸联合谷氨酸及谷氨酰胺无创预测低级别胶质瘤异柠檬酸脱氢酶基因突变状态的磁共振波谱研究

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中华放射学杂志 2021年第8期55卷 823-828页

作者：俞梅美沈慧聪常天静葛颖王子璇陈绪珠季楠厉欣再帕尔·阿不力孜首都医科大学附属北京天坛医院放射科 100070 天然药物活性物质与功能国家重点实验室中国医学科学院北京协和医学院药物研究所 100050 首都医科大学附属北京天坛医院神经外科 100070 中央民族大学生物成像与系统生物学研究中心北京100081

目的采用长TE单体素不对称自旋回波点解析波谱(PRESS)成像探讨临床中有效判别异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因突变状态的功能影像学指标。方法前瞻性纳入术前拟诊为低级别胶质瘤的患者25例,并根据病理结果分为IDH基因突变组和IDH基因野生组。... 详细信息

目的采用长TE单体素不对称自旋回波点解析波谱(PRESS)成像探讨临床中有效判别异柠檬酸脱氢酶(IDH)基因突变状态的功能影像学指标。方法前瞻性纳入术前拟诊为低级别胶质瘤的患者25例,并根据病理结果分为IDH基因突变组和IDH基因野生组。所有患者均接受长TE PRESS MRS扫描。患者的IDH基因突变状态均以术后焦磷酸测序法获得的结果为金标准。采用t检验或Mann-Whitney U检验分析IDH基因突变组与IDH基因野生组间的2-羟基戊二酸(2HG)、谷氨酸(Glu)、谷氨酰胺(Gln)、2HG/Glu+Gln的差异,对有统计学意义的指标绘制ROC曲线,获得各自预测IDH基因突变状态的效能。结果25例低级别胶质瘤患者中IDH基因突变组19例、IDH基因野生组6例。IDH基因突变组的2HG蓄积浓度、Glu蓄积浓度、Gln蓄积浓度、2HG/Glu+Gln分别为1.42(1.09,1.93)mmol/L、(1.74±1.31)mmol/L、(1.68±0.66)mmol/L、0.55(0.28,0.77),IDH基因野生组分别为0.00(0.00,1.30)mmol/L、(3.28±1.02)mmol/L、(2.55±1.47)mmol/L、0.00(0.00,0.26)。两组间2HG、Glu、2HG/Glu+Gln差异具有统计学意义(P值分别为0.030、0.016、0.004)。2HG/Glu+Gln鉴别IDH突变型与IDH野生型低级别胶质瘤的ROC曲线下面积最大(0.877),对鉴别诊断的灵敏度也最高(84.2%)。结论2HG联合Glu及Gln可有效实现对IDH基因突变状态的无创评估。

关键词：神经胶质瘤异柠檬酸脱氢酶磁共振波谱成像

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猴空泡病毒40感染 Vero细胞前后长链非编码RNA差异表达及功能分析

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中国病原生物学杂志 2020年第3期15卷 274-278,284页

作者：李志远邓荣珍徐梁子杞梦迪杨梦梅孙静胡凝珠施建东胡云章昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所疫苗研究室云南省虫媒传染病防控研究重点实验室

目的运用二代测序技术检测猴空泡病毒40(SV40)感染非洲绿猴肾细胞(Vero)后细胞内长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达情况,并分析差异表达lncRNA的生物学功能,为解析SV40和宿主细胞的互作机制提供新思路。方法用SV40病毒感染Vero细胞,72h... 详细信息

目的运用二代测序技术检测猴空泡病毒40(SV40)感染非洲绿猴肾细胞(Vero)后细胞内长链非编码RNA(lncRNA)的差异表达情况,并分析差异表达lncRNA的生物学功能,为解析SV40和宿主细胞的互作机制提供新思路。方法用SV40病毒感染Vero细胞,72h后收取样品,与对照组同时使用Trizol法提取RNA,并对其进行二代测序。使用CNCI、CPC和Cufflinks系列软件对来源于Vero细胞的lncRNA进行鉴定,筛选差异表达lncRNA。根据位置关系进行lncRNA靶基因预测,利用GO富集分析和KEGG富集分析进行靶基因功能富集分析。结果SV40感染Vero细胞后,共有274个lncRNA发生显著性差异表达,其中50个表达上调,224个表达下调。GO富集分析显示,差异表达lncRNA靶基因主要与胞内信号转导、染色质沉默、免疫反应、葡萄糖代谢和蛋白磷酸化调控等生物学过程密切相关。KEGG富集分析显示,差异表达lncRNA的靶基因主要富集在Notch信号通路、TGF-β信号通路、mTOR信号通路和抗原加工和呈递等多个信号通路上。结论SV40感染Vero细胞后重塑了Vero细胞的lncRNA表达谱,多个显著差异表达的lncRNA通过Notch、TGF-β、mTOR和抗原加工和呈递等信号通路参与细胞对病毒感染的反应调控。

关键词： SV40 lncRNA Vero细胞表达谱分析功能

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超高效液相色谱-四极杆线性离子阱串联质谱法测定他达拉非原料药中潜在基因毒性杂质的含量

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中南药学 2022年第6期20卷 1426-1429页

作者：刘家兴李丽美杨庆云臧清策吴松张瑞萍再帕尔·阿不力孜中国医学科学院/北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室北京100050 中央民族大学生物成像与系统生物学研究中心北京100081

目的建立超高效液相色谱-四极杆线性离子阱串联质谱法测定他达拉非原料药中潜在的基因毒性合成工艺杂质T2的含量。方法采用Waters ACQUITY UPLC-AB SCIEX QTRAP 5500液质联用仪,ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,... 详细信息

目的建立超高效液相色谱-四极杆线性离子阱串联质谱法测定他达拉非原料药中潜在的基因毒性合成工艺杂质T2的含量。方法采用Waters ACQUITY UPLC-AB SCIEX QTRAP 5500液质联用仪,ACQUITY UPLC HSS T3(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以0.02 mol·L^(-1)乙酸铵(含0.1%乙酸)-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.35 mL·min^(-1),进样量5μL,柱温25℃。ESI正离子多反应监测(MRM)模式测定,离子对为m/z 427.1→135.0,外标法定量。结果该杂质在0.10~80 ng·mL^(-1)内与峰面积线性关系良好。检测限和定量限分别为25 pg·mL^(-1)和80 pg·mL^(-1),加样回收率在90%~110%,精密度、稳定性试验的RSD值均小于10%,说明该方法适用于他达拉非潜在基因毒性杂质T2的检测。含量测定结果显示,TDLF01、TDLF02原料药中T2杂质含量低于检测限,符合毒理学关注阈值的要求。结论该方法快速、灵敏、准确,可用于他达拉非原料药中潜在基因毒性杂质T2的含量测定。

关键词：超高效液相色谱-四极杆线性离子阱串联质谱法他达拉非基因毒性杂质含量测定

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Ⅰ型单纯疱疹病毒感染人二倍体成纤维细胞后长链非编码RNA表达谱分析

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中国病原生物学杂志 2020年第2期15卷 158-163页

作者：邓荣珍李志远徐梁子杞梦迪杨梦梅孙静胡凝珠施建东胡云章中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所疫苗研究室云南昆明650118 云南省虫媒传染病防控研究重点实验室昆明医科大学

目的探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB-17)对长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的调控作用。方法用HSV-1感染KMB-17细胞,于感染后48h提取RNA进行高通量测序。测序获得... 详细信息

目的探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB-17)对长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的调控作用。方法用HSV-1感染KMB-17细胞,于感染后48h提取RNA进行高通量测序。测序获得的转录本用Cufflinks、CPC和CNCI软件进行lncRNA的鉴定和注释,并利用cuffdiff软件进行差异表达lncRNA的筛选。对筛选的差异表达lncRNA进行靶基因的预测及其GO和KEGG功能富集分析。结果共筛选到891个差异表达的lncRNA,其中上调515个,下调376个。GO和KEGG功能富集分析表明,HSV-1感染诱导表达差异的lncRNA靶基因主要富集在Toll样受体信号通路,RIG?I样受体信号通路,Jak-STAT信号通路、Hedgehog信号通路、趋化因子信号通路和细胞代谢相关信号通路上。结论 HSV-1感染KMB-17细胞后诱导细胞lncRNA差异表达并通过靶基因来影响细胞抗病毒免疫和细胞代谢等相关信号通路,调控细胞抗病毒的响应机制。

关键词：单纯疱疹病毒1型人胚肺二倍体成纤维细胞长链非编码RNA 表达谱

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CFSE标记神经祖细胞方法的建立与验证

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基础医学与临床 2021年第5期41卷 648-652页

作者：周佳锋马孟杰彭小忠舒鹏程中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005 中国医学科学院医学生物学研究所云南昆明650118

目的建立并验证羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)荧光探针标记神经祖细胞(NPCs)的方法。方法在胚胎期小鼠侧脑室注射CFSE以标记室周区(VZ)细胞,在注射后的1 h和3 h分别收集组织,通过免疫荧光方法检测其特异性。在注射后的1 h分离... 详细信息

目的建立并验证羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)荧光探针标记神经祖细胞(NPCs)的方法。方法在胚胎期小鼠侧脑室注射CFSE以标记室周区(VZ)细胞,在注射后的1 h和3 h分别收集组织,通过免疫荧光方法检测其特异性。在注射后的1 h分离出背侧新皮质,通过流式细胞荧光分选术(FACS)分选强阳性细胞,并通过干细胞标志物、神经元标志物等验证。结果CFSE能够瞬时标记VZ区细胞,标记窗在3~6 h。CFSE进行长时程标记会出现衰减。利用CFSE分选所得细胞70%为神经祖细胞,少量为神经元等。结论CFSE能够用于瞬时及长时程在体标记。CFSE还可用于分选神经祖细胞,但尚需调整分选策略以提高特异性(FACS)。

关键词：羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE) 神经祖细胞流式细胞荧光分选术(FACS)

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环境激素对纹沼螺RXR基因表达的影响

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中国科学：生命科学 2021年第9期51卷 1328-1338页

作者：刘人杰崔铁峰史文卓何建武安立会王宏伟王菲菲河北大学生命科学学院保定071002 河北大学生命科学与绿色发展研究院保定071002 中国环境科学研究院环境基准与风险评估国家重点实验室北京100012 中国医学科学院基础医学研究所&北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

维甲酸X受体(RXR)基因在调控软体动物内分泌行为过程中起着关键作用.为揭示环境激素对软体动物RXR基因表达的调控作用,在前期构建纹沼螺转录组基础上,利用RACE技术扩增获得纹沼螺RXR基因cDNA全序列,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对环... 详细信息

维甲酸X受体(RXR)基因在调控软体动物内分泌行为过程中起着关键作用.为揭示环境激素对软体动物RXR基因表达的调控作用,在前期构建纹沼螺转录组基础上,利用RACE技术扩增获得纹沼螺RXR基因cDNA全序列,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对环境激素暴露后纹沼螺RXR基因表达水平进行定量分析.研究结果显示,纹沼螺RXR基因与其他软体动物RXR具有较高的同源性,雌激素处理后RXR基因的表达先被抑制后被促进,雄激素处理后RXR基因的表达先被诱导后被抑制,并且不同暴露浓度组RXR基因表达差异不显著.研究结果表明,环境激素可能对纹沼螺有一定的毒理效应,为从分子水平上深入探究环境激素对软体动物危害机制提供了数据支持及理论基础.

关键词：纹沼螺维甲酸X受体(RXR) 雌二醇(E2) 甲基睾酮(MT)

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重组人禽流感H7N9疫苗株在Vero细胞上的适应性和传代稳定性研究

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激光生物学报 2020年第3期29卷 268-273页

作者：崔兆海赵卫忠马磊高菁霞朱文勇李卫东廖国阳中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650018

本文主要研究重组人感染高致病性禽流感H7N9株作为主工作种子批在Vero细胞连续传代中的高产特性和传代稳定性,为疫苗开发提供前期研究。将重组获得的H7N9流感病毒Vero细胞适应株(A/Anhui/1/2013Va)按照病毒感染复数(MOI)0.01的病毒量接... 详细信息

本文主要研究重组人感染高致病性禽流感H7N9株作为主工作种子批在Vero细胞连续传代中的高产特性和传代稳定性,为疫苗开发提供前期研究。将重组获得的H7N9流感病毒Vero细胞适应株(A/Anhui/1/2013Va)按照病毒感染复数(MOI)0.01的病毒量接种于Vero细胞,并连续传15代。血凝试验检测每代病毒血凝效价,并绘制病毒在Vero细胞上的生长曲线;每代病毒用MDCK细胞检测病毒的感染性滴度;通过单向免疫扩散试验对重组病毒H7N9的第1及第16代进行型别鉴定;取第1、5及16代病毒,用鸡胚半数感染量及致死量检测病毒在传代过程中毒力变化;分别提取第1和16代H7N9流感病毒的RNA,反转录及克隆后测序,对比病毒在连续传代过程中血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因的变化。试验结果表明:在连续传代过程中,病毒效价越来越趋于稳定,血凝效价稳定维持在384~448;病毒感染性滴度维持在7 Log10TCID50/mL左右;病毒在传代过程中毒力未发生显著变化;HA和NA在连续传代过程中并未出现因基因变异导致的编码氨基酸改变的状况。H7N9安徽株病毒在Vero细胞传代过程中不仅产量稳定,其毒力和基因也很稳定,可以将其作为H7N9流感疫苗候选株。

关键词： H7N9 Vero细胞适应株病毒滴度生长曲线 HA及NA序列

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BALB/c小鼠经不同途径感染单纯疱疹病毒Ⅱ型的病理学比较分析

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实验动物与比较医学 2020年第1期40卷 15-21页

作者：程继帅牟唐维柳蕾吴化叶李琦涵中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

目的比较BALB/c小鼠经不同途径感染单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)后的病理学变化.方法分别采用经阴道、鼻腔和眼角膜3种不同的攻毒方式使BALB/c小鼠感染HSV-2,观察小鼠的临床表现及攻毒部位和神经组织的病理变化,检测神经组织中的病毒载量.... 详细信息

目的比较BALB/c小鼠经不同途径感染单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)后的病理学变化.方法分别采用经阴道、鼻腔和眼角膜3种不同的攻毒方式使BALB/c小鼠感染HSV-2,观察小鼠的临床表现及攻毒部位和神经组织的病理变化,检测神经组织中的病毒载量.结果鼻腔组小鼠无明显症状,但至观察期结束仅有27.27%的存活率;阴道组小鼠表现不同程度的外阴炎以及体质量下降等症状,观察至感染后8d,小鼠的存活率已为0;角膜组小鼠表现不同程度的角膜炎,观察期结束存活率仍有63.64%.病理变化结果显示,鼻腔组小鼠仅脑组织存在明显的病理变化;阴道组和角膜组小鼠攻毒部位均发生明显的病理变化,但阴道组小鼠脑和脊髓均可见明显的病理变化.神经组织病毒载量检测结果表明,与对照组相比,3个实验组小鼠脑和脊髓中HSV-2的病毒载量均显著升高,且随着感染时间的增加而升高.结论BALB/c小鼠经3种不同途径感染HSV-2均可引起小鼠不同程度的病理学变化.本研究为HSV-2感染引发的神经系统疾病的发病机制研究提供了理论基础.

关键词：单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2) BALB/c小鼠病理学分析感染途径

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中国中老年人自评健康与心血管疾病发病风险的关联分析

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中华预防医学杂志 2020年第2期54卷 149-154页

作者：赵志梅潘安温莹潘雄飞中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 华中科技大学同济医学院公共卫生学院流行病与卫生统计学系武汉430030 深圳市疾病预防控制中心分子流行病学研究室 518055

目的分析中国中老年人自评健康(SRH)与心血管疾病(CVD)发病风险的关联。方法资料来自2011至2012年启动的中国健康与养老追踪调查项目,采用与人口规模成比例的概率抽样,从28个省级行政单位的150个区(县)获取21133名研究对象,本研究最终将... 详细信息

目的分析中国中老年人自评健康(SRH)与心血管疾病(CVD)发病风险的关联。方法资料来自2011至2012年启动的中国健康与养老追踪调查项目,采用与人口规模成比例的概率抽样,从28个省级行政单位的150个区(县)获取21133名研究对象,本研究最终将11701名对象纳入分析。基线调查中采用问卷调查收集研究对象的基本情况和自评健康等资料,随访中收集研究对象自报CVD发病情况。采用Cox比例风险回归模型分析SRH与CVD发病风险的关联,按年龄、性别、体重指数(BMI)等因素分层进行亚组分析,采用似然比检验分析交互作用。结果研究对象年龄为(57.9±9.7)岁,男性占48.1%(5626名)。SRH极好、很好、好、一般和不好者分别占4.2%(487名)、13.5%(1583名)、33.6%(3932名)、35.4%(4147名)和13.3%(1552名)。随访累计42104人年,期间发生CVD 590例。与SRH极好(很好)者相比,SRH好、一般和不好者CVD发病风险的HR(95%CI)分别为1.36(1.02~1.80)、1.66(1.26~2.19)和1.89(1.38~2.59)。亚组分析显示,在45~59、≥75岁组、男性组、女性组和正常BMI组中,与SRH极好(很好)者相比,SRH不好者CVD发病风险的HR(95%CI)分别为2.00(1.32~3.04)、3.87(1.04~14.46)、1.76(1.07~2.91)、1.92(1.27~2.91)和2.30(1.42~3.72)。SRH与年龄、性别、BMI不存在交互作用(P>0.05)。结论中国中老年人群SRH与CVD发病风险有关,与SRH极好(很好)者相比,SRH好、一般和不好者CVD发病风险增加。

关键词：老年人身心健康评价自我评价心血管疾病队列研究

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