检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2017年第1期42卷 26-30,35页

作者：檀林萍刘舒媛沈云松高雪李传印张新文杨勤兴王培智姚宇峰史荔中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 云南省第一人民医院&昆明理工大学附属医院云南昆明650032

目的:探讨云南汉族人群中microRNAs(miRNAs)基因多态性与HCV慢性感染的相关性。方法:选取云南汉族人群HCV慢性感染者384例,健康对照人群379例,采用Taq Man探针基因分型方法对4个miRNAs的SNPs(miR196a2中的rs11614913、miR146a中的rs2910... 详细信息

目的:探讨云南汉族人群中microRNAs(miRNAs)基因多态性与HCV慢性感染的相关性。方法:选取云南汉族人群HCV慢性感染者384例,健康对照人群379例,采用Taq Man探针基因分型方法对4个miRNAs的SNPs(miR196a2中的rs11614913、miR146a中的rs2910164、miR26a1中的rs7372209以及miR124a中的rs531564)进行基因分型,比较这4个SNPs位点基因型和等位基因频率在病例组和对照组中的分布,分析这4个SNPs与HCV慢性感染的相关性。结果 :rs11614913(C>T)、rs2910164(C>G)、rs7372209(T>C)、rs531564(C>G)4个SNPs位点的基因型频率和等位基因频率在病例组与对照组中的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:miR196a2中的rs11614913、miR146a中的rs2910164、miR26a1中的rs7372209以及miR124中的rs531564与云南汉族人群HCV慢性感染无相关性。

关键词：基因 miRNAs 肝炎丙型感染单核苷酸多态性云南

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肠道病毒71型体外感染树鼩肾细胞特性观察

肠道病毒71型体外感染树鼩肾细胞特性观察

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第十六届中国西部实验动物管理与学术研讨会

作者：王文广匡德宣尹博文陆彩霞罕园园李娜仝品芬孙晓梅蔡路奎代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所实验树鼩标准化与应用研究省创新团队昆明650118

目的探讨肠道病毒71型(EV71)对树鼩肾细胞的感染特性。方法通过组织块贴壁法分离培养树鼩原代肾细胞,观察细胞形态并进行传代培养,利用细胞角蛋白18对树鼩肾细胞进行间接免疫荧光鉴定。用肠道病毒EV71感染树鼩肾细胞,通过倒置显微镜... 详细信息

目的探讨肠道病毒71型(EV71)对树鼩肾细胞的感染特性。方法通过组织块贴壁法分离培养树鼩原代肾细胞,观察细胞形态并进行传代培养,利用细胞角蛋白18对树鼩肾细胞进行间接免疫荧光鉴定。用肠道病毒EV71感染树鼩肾细胞,通过倒置显微镜观察细胞病变情况,结合间接免疫荧光实验观察细胞中病毒蛋白的表达情况,采用实时荧光定量PCR技术检测病毒载量,以Vero细胞为对照,研究EV71对树鼩肾细胞的感染情况。结果通过组织块贴壁法可以快速获得树鼩原代肾细胞,并可进行多次传代培养,细胞为梭形,贴壁呈铺路石状,免疫荧光鉴定为肾上皮细胞。肠道病毒EV71可以感染树鼩肾细胞,使之出现明显的细胞变圆、脱落或解体等病变,免疫荧光实验可以观察到病毒蛋白的分布,实时荧光定量PCR检测病毒载量最高可达105拷贝/mL,病变情况和增殖趋势与Vero细胞相似。结论 EV71可以体外感染树鼩肾细胞,该细胞模型可为EV71药物筛选和感染机制研究提供平台。

关键词：树鼩肾细胞肠道病毒71型(EV71)

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HIV-Tat蛋白诱导神经细胞自噬的研究进展

HIV-Tat蛋白诱导神经细胞自噬的研究进展

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第十六届中国西部实验动物管理与学术研讨会

作者：李娟杨根梦仝品芬李桢曾晓锋代解杰中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学法医学院云南昆明650500

HIV-Tat蛋白是由HIV-1病毒感染细胞后分泌的反式转录激活因子，在HIV感染神经损害中发挥重要作用，是引起艾滋病相关脑病的重要致病因子.自噬即自我吞噬，主要作用是供给机体营养，但异常自噬则引起细胞死亡.HIV-Tat蛋白可以诱导神经细... 详细信息

HIV-Tat蛋白是由HIV-1病毒感染细胞后分泌的反式转录激活因子，在HIV感染神经损害中发挥重要作用，是引起艾滋病相关脑病的重要致病因子.自噬即自我吞噬，主要作用是供给机体营养，但异常自噬则引起细胞死亡.HIV-Tat蛋白可以诱导神经细胞自噬，从而使细胞死亡，但引起自噬的机制及信号转导通路不清楚.本文主要从HIV-Tat蛋白诱导神经细胞自噬的机制、信号转导通路等方面进行综述，旨在为进一步研究HIV-Tat蛋白与细胞自噬的关系及寻找新的治疗药物靶点提供参考.

关键词： HIV-Tat蛋白自噬调节机制信号转导通路

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一株柯萨奇病毒A9分离株的VP1基因遗传特征分析

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中国生物制品学杂志 2016年第1期29卷 18-22页

作者：王晓辉张海浩俞泽煦杨舜乔朱艳菊白巍邵聪文马绍辉中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的分析引起病毒性脑炎（viral encephalitis,VE）的一株柯萨奇病毒（Coxsackievirus,CV）A9分离株（CVA9）的VP1基因遗传特征。方法采用KMB17细胞对VE患儿粪便标本进行病毒分离,利用RT-PCR法从分离的病毒中扩增VP1全基因,并测序,采... 详细信息

目的分析引起病毒性脑炎（viral encephalitis,VE）的一株柯萨奇病毒（Coxsackievirus,CV）A9分离株（CVA9）的VP1基因遗传特征。方法采用KMB17细胞对VE患儿粪便标本进行病毒分离,利用RT-PCR法从分离的病毒中扩增VP1全基因,并测序,采用Mega 6.1和Geneious 5.6.5等软件分析其序列,并构建系统进化树。结果从5份VE患儿粪便中分离到一株人CVA9,命名为A108/YN/CHN/2009,其全长VP1基因的核苷酸长度与其他CVA9一致,均为906 bp。与中国其他分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为88.4%～98.2%和96.4%～99.3%,而与国外分离株的核苷酸和氨基酸序列同源性分别为81.0%～96.0%和92.7%～99.0%。在进化树上与其他中国分离株属同一分支中不同两个亚分支,与JB141230009亲缘关系较近。结论 A108/YN/CHN/2009分离株为肠道病毒CVA9血清型,与其他中国分离株同属一个基因簇。

关键词：柯萨奇病毒A9 VP1基因遗传特征

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肺炎支原体生物学及其疫苗研究状况

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中国生物制品学杂志 2016年第11期29卷 1221-1224页

作者：李泽华廖国阳中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

急性呼吸道感染的死亡率仅次于心血管疾病,成为威胁人类健康的公共卫生问题。已有多种肺炎相关病原体疫苗上市或研发,但针对支原体引发肺炎的有效疫苗却鲜有报道,加之其特殊的结构特点,使用常规药物很难进行有效治疗,导致发病率逐年增... 详细信息

急性呼吸道感染的死亡率仅次于心血管疾病,成为威胁人类健康的公共卫生问题。已有多种肺炎相关病原体疫苗上市或研发,但针对支原体引发肺炎的有效疫苗却鲜有报道,加之其特殊的结构特点,使用常规药物很难进行有效治疗,导致发病率逐年增加。对支原体引发肺炎的相关机制、预防及治疗手段的研究逐渐成为热点,通过对相关疫苗的研发降低其危险性愈发重要。

关键词：呼吸道感染肺炎支原体疫苗

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CXCL4基因敲除小鼠的饲养、繁殖及基因型鉴定

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中国生物制品学杂志 2016年第5期29卷 519-522,527页

作者：宋杰胡云光胡雅洁王艳翠李嘉祺刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的饲养、繁殖并鉴定CXC趋化因子配体4[chemokine(C-X-C motif)ligand 4,CXCL4]基因敲除小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定基础。方法将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,剪取繁殖成功的子代小鼠耳朵,提取其基因组DNA,采用PCR法鉴... 详细信息

目的饲养、繁殖并鉴定CXC趋化因子配体4[chemokine(C-X-C motif)ligand 4,CXCL4]基因敲除小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定基础。方法将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,剪取繁殖成功的子代小鼠耳朵,提取其基因组DNA,采用PCR法鉴定小鼠的基因型;比较野生型小鼠和CXCL4敲除的纯合子小鼠的体重变化及结直肠的长度,通过HE染色观察野生型小鼠和CXCL4敲除的纯合子小鼠的结直肠形态结构;采用ELISA法验证CXCL4野生型和纯合子小鼠血清中CXCL4的表达。结果繁殖成功的子代小鼠有3种基因型:野生型、杂合子及纯合子;4、10周龄雌性纯合子小鼠体重明显重于同龄的野生型小鼠(P<0.05),6、10周龄雄性纯合子小鼠体重明显重于同龄的野生型小鼠(P<0.05);6周龄雌性纯合子小鼠结直肠长度明显长于同周龄的野生型小鼠(P<0.05),但结直肠的形态结构无显著改变;纯合子小鼠血清中CXCL4的表达量明显低于WT小鼠(P<0.05)。结论成功获得了CXCL4基因敲除纯合子小鼠,为深入研究CXCL4的生物学功能奠定了基础。

关键词： CXCL4 基因敲除小鼠基因型

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CpG ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性分析

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中国生物制品学杂志 2016年第7期29卷 681-685页

作者：赵玉娇蔡路奎王晓丹席珏敏陈俊英潘玥邱丽娟姜黎明孙强明中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的评价Cp G ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性,以评估IMB-AC5佐剂的应用前景。方法利用市售的单铝佐剂乙型肝炎疫苗,根据相同配比加入3种Cp G ODN（IMB-AC5及Coley 7909和Dynavax 1018）,作为实验组（V-AC5、V-7909和V-1... 详细信息

目的评价Cp G ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性,以评估IMB-AC5佐剂的应用前景。方法利用市售的单铝佐剂乙型肝炎疫苗,根据相同配比加入3种Cp G ODN（IMB-AC5及Coley 7909和Dynavax 1018）,作为实验组（V-AC5、V-7909和V-1018）,并以乙型肝炎疫苗为对照组,分别免疫BALB/c小鼠,于免疫后2、4、6、8周,经尾静脉采血,第10周处死小鼠采集全血,分离血清,采用乙肝表面抗体试剂盒检测anti-HBs抗体水平,ELISA法检测Ig G1/2a亚型抗体比例;ELISPOT法检测小鼠脾细胞IFNγ表达水平。结果免疫后0~4周内,各组小鼠血清抗体水平均无明显变化,第6周开始呈明显上升趋势,至第8周后趋于平缓;各实验组抗体水平均明显高于对照组（P〈0.05）,V-AC5显示出与V-7909同样良好的体液免疫效果,略优于V-1018。免疫后各实验组小鼠血清中Ig G2a/Ig G1比例明显高于对照组。各实验组小鼠脾细胞斑点数明显高于对照组（P〈0.05）;V-AC5斑点数介于其他两个实验组之间。结论 IMB-AC5佐剂能显著活化B细胞产生抗体并具有刺激细胞免疫的效果,可增强疫苗的免疫原性。

关键词： CpG ODN 佐剂乙型肝炎疫苗免疫原性

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狂犬病病毒CTN-1株G蛋白的原核表达及基本功能评价

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中国生物制品学杂志 2016年第10期29卷 1032-1036页

作者：巩蔚严丽蔚朱文兵张雪梅徐婧雯吴忠香卢孔杰孙明董少忠中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的原核表达狂犬病病毒(rabies virus,RV)CTN-1株G蛋白,并评价其基本功能。方法采用RT-PCR法扩增RV CTN-1株G蛋白基因,插入原核表达载体p GEX-5X-1,构建重组表达质粒p GEX-5X-1-CTN,转化入Rosetta(DE3)p Lys S,IPTG诱导表达。表达的重... 详细信息

目的原核表达狂犬病病毒(rabies virus,RV)CTN-1株G蛋白,并评价其基本功能。方法采用RT-PCR法扩增RV CTN-1株G蛋白基因,插入原核表达载体p GEX-5X-1,构建重组表达质粒p GEX-5X-1-CTN,转化入Rosetta(DE3)p Lys S,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经亲和层析纯化后,采用间接ELISA法检测其与阳性血清的结合性能及亲和力。结果重组表达质粒经双酶切及测序证实构建正确;纯化的重组蛋白RV-G相对分子质量约85 000,纯度可达85%,能与阳性血清特异性结合,且具有较好的区分性,与阳性血清的亲和力常数为1.2×1010 M-1。结论成功原核表达、纯化获得了纯度较高、特异性较好、亲和力较强、灵敏度较高的RV CTN-1株G蛋白,为研究G蛋白的抗原表位、建立针对RV G蛋白的ELISA抗体检测方法及其中和抗体的分选检测奠定了基础。

关键词：狂犬病病毒 CTN-1株 G蛋白原核细胞基因表达亲和力酶联免疫吸附测定

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树鼩脂肪转录组SNP位点发掘及其功能注释

树鼩脂肪转录组SNP位点发掘及其功能注释

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第十六届中国西部实验动物管理与学术研讨会

作者：罕园园孙晓梅匡德宣陆彩霞仝品芬王文广李娜余波代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南昆明 650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 云南省科学技术院云南昆明650118

从正常笼养树鼩腹部的脂肪转录组数据开发SNP分子标记.检测了6只动物共计274278568条unigene(总长度43138417bp)序列信息后,在262980条unigene(5.75％)中发现SNP位点263071 个,SNP发生频率为1/164bp,其中转换(transition)177562个,颠换(transversion)85509个.在所有变异类型中,A/G和C/T发生频率最高,分别达33.85％和33.66％.将包含SNP位点的262980条unigene通过参比序列进行注释,并对其进行GO分类、COG分类注释和代谢通路注释(KEGGpathway),结合已有研究,分别筛选到1187个有GO注释、77个有COG注释和1080条个有KEGG通路注释的脂肪转录组中的可能与脂肪形成和代谢有关的SNP标记.

关键词：树鼩转录组单核苷酸多态性功能注释

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树鼩脂肪转录组SNP位点发掘及其功能注释

树鼩脂肪转录组SNP位点发掘及其功能注释

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第八届北京实验动物科学国际论坛

作者：罕园园孙晓梅匡德宣陆彩霞仝品芬王文广李娜余波代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南昆明、650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室，云南昆明650118 云南省科学技术院，云南昆明650118

从正常笼养树鼩腹部的脂肪转录组数据开发SNP分子标记。检测了6只动物共计274278568条unigene(总长度43138417bp)序列信息后，在262980条unigene(5.75％)中发现SNP位点263071个，SNP发生频率为1/164bp，其中转换（transition)177562个，颠换（transversion)85509个。在所有变异类型中，A/G和C/T发生频率最高，分别达33.85%和33.66％。将包含SNP位点的262980条unigene通过参比序列进行注释，并对其进行GO分类、COG分类注释和代谢通路注释（KEGGpathway)，结合已有研究，分别筛选到1187个有GO注释、77个有COG注释和1080条个有KEGG通路注释的脂肪转录组中的可能与脂肪形成和代谢有关的SNP标记。

关键词：实验用树鼩脂肪转录组单核苷酸多态性基因序列

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