检索结果-内蒙古大学图书馆

中国疫苗和免疫 2016年第6期22卷 697-701页

作者：牟大超孙明波中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

联合疫苗是指由两种或两种以上不同的生物体或提纯抗原,加以佐剂、防腐剂、稳定剂等联合配制而成。联合疫苗可预防多种病原体或同一病原体的不同抗原所引发的疾病,包括多疾病联合疫苗和单疾病多价联合疫苗。随着中国国家免疫规划(Nation... 详细信息

联合疫苗是指由两种或两种以上不同的生物体或提纯抗原,加以佐剂、防腐剂、稳定剂等联合配制而成。联合疫苗可预防多种病原体或同一病原体的不同抗原所引发的疾病,包括多疾病联合疫苗和单疾病多价联合疫苗。随着中国国家免疫规划(National Immunization Program,NIP)的推进,儿童所需接种的第一类疫苗数量逐渐增加,联合疫苗的开发不仅可以减少接种次数、改善依从性、提高疫苗接种率;还能降低疫苗中佐剂和防腐剂的剂量,减少疫苗不良反应。因此,联合疫苗的开发势在必行。本文就国内外联合疫苗的研究进展作一综述。

关键词：联合疫苗免疫原性

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小鼠resistin基因慢病毒表达载体构建及在KMB17细胞中的表达

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生物技术 2016年第2期26卷 119-125,135页

作者：陈瑜赵远岳俊李鸿钧和占龙马开利马进吴正存唐东红鲁帅尧中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所中国医学科学院医学灵长类动物研究中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

[目的]构建携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体,并高效转导靶细胞。[方法]从小鼠脂肪组织提取总RNA,经PCR扩增、酶切、连接、转化后构建重组质粒;通过293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,然后感染KMB17细胞,检测小鼠resistin基因在靶细胞... 详细信息

[目的]构建携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体,并高效转导靶细胞。[方法]从小鼠脂肪组织提取总RNA,经PCR扩增、酶切、连接、转化后构建重组质粒;通过293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,然后感染KMB17细胞,检测小鼠resistin基因在靶细胞中的表达。[结果]PCR扩增到预期的342 bp大小的resistin基因目的片段;构建的重组质粒经酶切得到了342 bp大小的目的片段,测序鉴定为小鼠resistin基因序列;重组慢病毒包装可观察到很强的绿色荧光,说明具有较高的质粒转染效率;重组慢病毒感染KMB17后可检测到小鼠resistin基因转录水平和蛋白水平的表达,证明resistin基因得到有效转导并可在靶细胞中高水平表达。[结论]成功构建了携带小鼠resistin基因的慢病毒表达载体并可在KMB17靶细胞中获得高效表达。

关键词： resistin 慢病毒载体靶细胞表达小鼠

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埃博拉病毒GP和VP40蛋白在哺乳动物细胞中的共表达及病毒样颗粒装配

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中国生物工程杂志 2016年第12期36卷 66-71页

作者：孙鹏艳黎奎刘存宝姚宇峰褚晓杰白红妹杨旭黄惟巍孙文佳马雁冰昆明医科大学昆明650500 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 云南省重大传染病疫苗工程技术研究中心昆明650118

目的:制备基因重组埃博拉病毒样颗粒,为疫苗研究及埃博拉病毒特异抗原、抗体检测提供基础。方法:根据埃博拉病毒扎伊尔株的GP和VP40蛋白氨基酸序列,以哺乳动物细胞基因表达密码子偏好性进行基因优化设计;化学合成GP和VP40基因片段并分... 详细信息

目的:制备基因重组埃博拉病毒样颗粒,为疫苗研究及埃博拉病毒特异抗原、抗体检测提供基础。方法:根据埃博拉病毒扎伊尔株的GP和VP40蛋白氨基酸序列,以哺乳动物细胞基因表达密码子偏好性进行基因优化设计;化学合成GP和VP40基因片段并分别构建于表达质粒pcDNA3.1或同时构建到具有双表达单元的质粒pBudCE4.1;重组质粒经lipofectamine2000转染293FT细胞;以Western blot检测重组蛋白GP和VP40的表达;通过电镜观察病毒样颗粒。结果:构建的重组质粒经酶切鉴定及测序分析证实构建成功;Western blot结果显示,共转染分别表达GP和VP40的两个质粒或转染共表达两个蛋白的质粒都发现GP特异反应条带产生,且大小与预期相符,此外,转染共表达质粒产生的GP蛋白表达明显强于两个质粒共转染,并同时可检测到VP40的表达;电镜观察到典型的丝状的埃博拉病毒样颗粒。结论:在293FT细胞中基因优化的埃博拉病毒GP和VP40可有效表达并装配为病毒样颗粒,为进一步研究奠定了基础。

关键词：埃博拉病毒病毒样颗粒 293FT细胞表达

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CA16疫苗候选株特异性免疫血清保护性的初步评价

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中国生物制品学杂志 2016年第10期29卷 1013-1016页

作者：谢忠平李华杨水芝谢天宏杨婷刘正玲岳磊宋霞中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗工程技术研究中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的评价CA16 K168/8疫苗候选株免疫血清对不同CA16毒株的交叉中和能力及对致乳鼠麻痹CA16临床分离株的体内中和保护能力。方法将CA16 K168/8疫苗候选株病毒纯化液辅以弗氏佐剂经背部及侧腹部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,制备高效价... 详细信息

目的评价CA16 K168/8疫苗候选株免疫血清对不同CA16毒株的交叉中和能力及对致乳鼠麻痹CA16临床分离株的体内中和保护能力。方法将CA16 K168/8疫苗候选株病毒纯化液辅以弗氏佐剂经背部及侧腹部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,制备高效价免疫血清。采用微量细胞病变法检测中和抗体效价;用中和抗体效价终浓度为32 U的特异性免疫血清对18株不同CA16临床分离毒株及15株EV71毒株进行交叉中和指数检测;选取中和抗体效价为16、32、64、128、256 U的特异性免疫血清对可致乳鼠产生明显麻痹作用的CA16 FY-18株进行体内中和保护水平检测。结果获得的兔抗CA16 K168/8血清对14株CA16毒株的中和效价为1∶1 024~1∶6 144,GMT值为1∶3 153;可于体外完全中和18株不同CA16毒株,中和指数为100~5 623.4,平均值为794.1,而对15株EV71临床分离株中和指数仅为0.32~5.62,平均值为2.2;体内中和保护水平随抗体效价升高而增加,呈量-效关系,当中和抗体效价达128 U时,可完全保护乳鼠不发生临床麻痹反应。结论 CA16 K168/8疫苗候选株特异性免疫血清体内、外试验结果表明其具有良好的免疫保护性。

关键词：柯萨奇病毒A组16型疫苗候选株免疫血清交叉保护

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抑郁症动物模型与其发病机制研究的进展

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中国实验动物学报 2016年第3期24卷 321-326页

作者：罕园园代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

抑郁症在全球范围内高发,目前尚无有效的治疗手段,使其成为全球性卫生问题之一。抑郁症动物模型作为疾病机理研究以及药物筛选的主要手段,一直以来备受关注,现有的抑郁模型创新性地融合了比较行为学以及最新的分子生物学等相关技术。本... 详细信息

抑郁症在全球范围内高发,目前尚无有效的治疗手段,使其成为全球性卫生问题之一。抑郁症动物模型作为疾病机理研究以及药物筛选的主要手段,一直以来备受关注,现有的抑郁模型创新性地融合了比较行为学以及最新的分子生物学等相关技术。本文将结合模型的表面效度、结构效度及预测效度对现有的抑郁症动物模型及发病机制研究的最新进展进行综述,主要包括应激模型、损伤模型、化学诱导模型及转基因模型,这些模型均能不同程度的模拟人抑郁症的特征,在抗抑郁药物开发及发病机理研究中发挥重要作用。

关键词：抑郁症动物模型发病机制

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树鼩白细胞介素6的原核表达、纯化及免疫原性鉴定

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生物技术通讯 2017年第6期28卷 768-772页

作者：龙琼徐盟郝嘉茂毕研伟肖红剑李智华闫玲梅丁晨李育中姚月婷寸韡中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 吉林省万通药业四川分公司四川宜宾644000 昆明医科大学海源学院云南昆明650106

目的:克隆树鼩白细胞介素6(IL-6)基因,在大肠杆菌中高效表达、纯化,并鉴定免疫原性。方法:根据GenBank预测的树鼩IL-6基因序列设计引物并扩增基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建的重组表达质粒pET-30a(+)-IL-6转化大肠杆菌BL21,IPT... 详细信息

目的:克隆树鼩白细胞介素6(IL-6)基因,在大肠杆菌中高效表达、纯化,并鉴定免疫原性。方法:根据GenBank预测的树鼩IL-6基因序列设计引物并扩增基因,克隆至原核表达载体pET-30a(+),构建的重组表达质粒pET-30a(+)-IL-6转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达;表达的融合蛋白经Ni柱纯化后,Western印迹和ELISA检测其免疫原性,并检测不同组织中IL-6的分布情况。结果:酶切及测序证实重组表达质粒pET-30a(+)-IL-6构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为29×10~3,纯化后复性的重组蛋白纯度可达95%以上,免疫兔子后Western印迹和ELISA鉴定其具有免疫原性,在气管、心、脾、肾中能检测到IL-6。结论:在大肠杆菌中高效表达了重组树鼩IL-6,纯化复性后具有良好的免疫原性。

关键词：树鼩白细胞介素-6 原核表达纯化免疫原性

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LMP2基因多态性与云南汉族人群非小细胞肺癌的发生发展的相关性

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贵州医科大学学报 2017年第1期42卷 15-20页

作者：刘舒媛李传印李盈甫马千里刘杰段金梅史荔姚宇峰中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学第一附属医院干疗科云南昆明650032 昆明医科大学第三附属医院云南昆明650118

目的:探讨云南汉族人群低相对分子量蛋白酶体(LMP)2基因单核苷酸多态性(SNP)与非小细胞肺癌的相关性。方法:选择云南汉族非小细胞肺癌患者467人(病例组)和健康正常对照490人(对照组),对病例组患者进行病例分型和临床分期,采用TaqMan探... 详细信息

目的:探讨云南汉族人群低相对分子量蛋白酶体(LMP)2基因单核苷酸多态性(SNP)与非小细胞肺癌的相关性。方法:选择云南汉族非小细胞肺癌患者467人(病例组)和健康正常对照490人(对照组),对病例组患者进行病例分型和临床分期,采用TaqMan探针基因分型法对所有对象进行LMP2基因的3个SNPs(rs1351383、rs17587和rs2127675)位点基因分型,用卡方检验比较病例和对照组间3个SNP等位基因和基因型的分布差异,用Haploview软件构件这3个SNP的个体单倍型,并分析两组间及不同病理类型肺癌患者与对照间的单倍型分布差异。结果:3个SNP位点的等位基因及基因型在病例组和对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05),但rs1351383位点的C等位基因在鳞癌组中的频率显著高于对照组,差异具有统计学意义(P=0.049,OR=0.769,95%CI:0.591~0.999);单倍型rs1351383-rs17587-rs2127675的G-C-G在病例组中(OR=1.461,95%CI:1.075~1.984)以及肺腺癌患者组(OR=1.608,95%CI:1.142~2.265)中的分布显著高于对照组,单倍型rs1351383-rs17587-rs2127675的G-C-A在总病例组中(OR=0.593,95%CI:0.422~0.834)以及肺腺癌患者组(OR=0.541,95%CI:0.365~20.823)中的分布显著低于对照组。结论:LMP2基因的3个SNPs(rs1351383、rs17587和rs2127675)单个位点与云南汉族人群肺癌无相关性,但3个SNPs构建的单倍型可能是云南汉族人群肺癌患病的风险因子。

关键词：低相对分子量蛋白酶体2 基因多态性单核苷酸肺肿瘤云南汉族

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树鼩HGF全长编码序列的克隆及分子特征分析

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中国比较医学杂志 2016年第5期26卷 10-18页

作者：李振宇陈玲霞尹博文苗雨润宋庆凯代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心昆明650118 云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的获取树鼩肝细胞生长因子的全长编码序列并进行分子特征分析。方法以树鼩肝组织总RNA为材料,通过RT-PCR扩增和序列拼接获得树鼩肝细胞生长因子全长编码序列,进而通过DNAMAN,Pymol等生物信息学软件对其序列和分子特征进行分析。结果树... 详细信息

目的获取树鼩肝细胞生长因子的全长编码序列并进行分子特征分析。方法以树鼩肝组织总RNA为材料,通过RT-PCR扩增和序列拼接获得树鼩肝细胞生长因子全长编码序列,进而通过DNAMAN,Pymol等生物信息学软件对其序列和分子特征进行分析。结果树鼩HGF分子结构在进化中相对保守,树鼩HGF整体结构与人相似。但树鼩HGFαNK1区域相比人HGF多出一个α螺旋,并且有两个更长的β折叠片,另外,树鼩在该区域存在一个很强的表面正电荷区域。这些差异可能会对树鼩HGF与其受体的作用方式产生影响。结论本实验为明确树鼩HGF与其受体的作用方式和树鼩HGF的合成与制备奠定了基础。

关键词：树鼩肝细胞生长因子分子克隆结构预测

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云南汉族人群LMP基因多态性与丙型肝炎病毒慢性感染的相关性

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中华医学遗传学杂志 2016年第6期33卷 806-810页

作者：李彤刘城秀姚宇峰俞建昆史荔沈云松云南省第一人民医院昆明理工大学附属昆华医院昆明650032 中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的探讨低分子量蛋白酶体（low molecular weight polypeptide, LMP）基因多态性与丙型肝炎病毒（hepatitis C virus , HCV）慢性感染的相关性。方法选择云南地区汉族人群HCV慢性感染患者427例，健康对照者412名，采用TaqMan探针基因... 详细信息

目的探讨低分子量蛋白酶体（low molecular weight polypeptide, LMP）基因多态性与丙型肝炎病毒（hepatitis C virus , HCV）慢性感染的相关性。方法选择云南地区汉族人群HCV慢性感染患者427例，健康对照者412名，采用TaqMan探针基因分型方法对LMP2基因单核苷酸多态性（ single nucleotide polymorphism, SNP）rs1351383、rs17587、rs2127675和LMP7基因SNPrs2071543进行基因分型，并构建单倍型，统计LMP2和LMP7多态性位点的等位基因频率与基因型频率、单倍型频率，分析SNPs及单倍型与HCV慢性感染的相关性。结果病例组和对照组LMP2基因rs1351383和rs2127675的等位基因频率差异有统计学意义（P〈0．05），rs1351383／rs17587／rs2127675单倍型A-pA和C-G-G差异有统计学意义（P〈0．05）；其他位点基因型、等位基因型、单倍型频率在病例组和对照组中差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在云南汉族群体中，LMP2基因SNPrs1351383C等位基因和rs2127675G等位基因可能是HCV慢性感染的易感因素，rs1351383／rs17587／rs2127675单倍型A-GA可能是HCV慢性感染的保护因素，单倍型C-G-G可能是HCV慢性感染的危险因素。

关键词：丙型肝炎病毒慢性感染单核苷酸多态性 LPM2基因 LMP7基因

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成年树鼩骨骼系统CT三维可视化模型建立及分析

成年树鼩骨骼系统CT三维可视化模型建立及分析

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2017年第十五届中国北方实验动物科技年会

作者：罕园园徐昕陆彩霞匡德宣仝品芬王文广孙晓梅李娜代解杰中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所树鼩种质资源中心云南省科学技术院云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南大学第一医院云南省第二人民医院暨云南省红十字会医院

建立树鼩骨骼系统的三维可视化模型,为树鼩的骨骼系统疾病诊断提供依据。使用日本东芝Aquillon one320排螺旋CT进行扫描,100KV,80mA,球管转数0.35s/转,螺距1.35,图像为0.5mm,层间隔为0.5mm,使用骨算法重建。在并行计算环境中采用Vitrea... 详细信息

建立树鼩骨骼系统的三维可视化模型,为树鼩的骨骼系统疾病诊断提供依据。使用日本东芝Aquillon one320排螺旋CT进行扫描,100KV,80mA,球管转数0.35s/转,螺距1.35,图像为0.5mm,层间隔为0.5mm,使用骨算法重建。在并行计算环境中采用Vitrea软件包,选择Musculoskeletal CT选项,采用容积成像(VR)、多平面成像(MPR)、曲面成像(CPR)技术进行三维重建。结果重建后的可视化模型结构明显、清楚,可以真实地在计算机中重现出树鼩的骨骼系统三维模型。在此模型中,在头骨背面可见五条隆起的嵴,侧面观可见四个大孔:位于前端的外鼻孔、前颌骨后上方的眶下孔、由颧弓所范围着的眼窝和鼓泡外侧的外耳道。此外,可见一些较小的头骨孔,如视神经孔、颌下神经孔。利用该成像技术可定量测定各主要骨骼的长度、前后径、左右径和身长、尾长等数据。尤其是还获得了以往通过解剖难以测量准确的数据:如腭长、臼齿列长等较细微的数据,以及解剖不易获得脊椎前后径及左右径的数据。同时还利用三维可视化技术发现了树鼩存在有骨盆形态不对称、胸廓增大、骨折、跟腱周围滑膜囊钙化的骨骼异常情况。所建立的CT三维可视化技术可确定树鼩骨骼系统的特殊特征,对树鼩骨骼系统无侵入性的生态分类、鉴定、进化分析均有重要意义。

关键词：树鼩 CT三维重建骨骼系统

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