检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物制品学杂志 2011年第11期24卷 1264-1268,1277页

作者：严敏孙茂盛王文举谢天宏李太华李鸿钧中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

目的构建表达甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)的重组腺病毒,并检测其免疫原性。方法从质粒pMD19T-simple-NA中扩增NA基因,克隆至穿梭质粒pShuttleCMV中,经同源重组获得重组腺病毒质粒,转染Ad-293细胞,包装出重组腺病毒Ad-... 详细信息

目的构建表达甲型H1N1流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)的重组腺病毒,并检测其免疫原性。方法从质粒pMD19T-simple-NA中扩增NA基因,克隆至穿梭质粒pShuttleCMV中,经同源重组获得重组腺病毒质粒,转染Ad-293细胞,包装出重组腺病毒Ad-NA,RT-PCR和免疫荧光法检测NA基因在Vero细胞中的转录和表达。CsCl密度梯度离心纯化重组腺病毒,免疫小鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清中抗NA抗体滴度。结果重组腺病毒质粒经PacⅠ酶切鉴定表明带有目的基因的穿梭质粒已整合到腺病毒基因组中;NA基因在Vero细胞中成功转录和表达;重组腺病毒可刺激小鼠产生抗NA抗体,初免后4周,抗体水平达最高,为1∶100 000。结论成功构建了表达甲型H1N1流感病毒NA蛋白的重组腺病毒,其可刺激小鼠产生有效的免疫应答,为甲型H1N1流感病毒基因工程疫苗的研发奠定了基础。

关键词：流感病毒A型 H1N1亚型神经氨酸酶重组腺病毒免疫原性

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LPS/D-gal诱导小鼠急性肝炎模型及mTOR信号的变化

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中国实验动物学报 2015年第3期23卷 306-311页

作者：李晓菲陶玉芬刘建生李超梁新新叶尤松唐东红刘红旗中国医学科学院和北京协和医学院医学生物学研究所感染与免疫学实验室昆明650118 中国医学科学院医学生物学研究所小动物实验部昆明650118

目的探索LPS/D-gal诱导的急性肝炎中mTOR信号的变化。方法LPS/D-gal通过腹腔注射ICR雌性小鼠诱导急性肝炎模型。观察记录24h内的存活率或在注射后6h收集血清和肝脏组织样本,进行相关的分析。结果LPS/D-gal注射24h内引起小鼠急性死亡。... 详细信息

目的探索LPS/D-gal诱导的急性肝炎中mTOR信号的变化。方法LPS/D-gal通过腹腔注射ICR雌性小鼠诱导急性肝炎模型。观察记录24h内的存活率或在注射后6h收集血清和肝脏组织样本,进行相关的分析。结果LPS/D-gal注射24h内引起小鼠急性死亡。注射后6h,引起血清中转氨酶水平明显升高。肝脏组织炎性因子Tnfa和Il6表达水平上调。HE染色显示明显的炎症细胞浸润,研究结果表明LPS/D-gal可诱导ICR小鼠成为急性肝炎动物模型。此外,肝脏组织免疫印迹分析发现,mTOR和NF-κB信号通路被激活,凋亡相关蛋白Caspase-3的活性增加,凋亡特征性的DNA片段化也显著增强。然而mTOR信号的抑制剂雷帕霉素并不能控制LPS/D-gal引起的肝脏凋亡和提高存活率。结论mTOR信号在LPS/D-gal诱导的急性肝炎的致病机制中可能发挥多重作用。

关键词： LPS/D-gal 急性肝炎凋亡小鼠模型

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以重配技术制备H1N1流感病毒Vero细胞适应株

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中国生物制品学杂志 2009年第6期22卷 529-532页

作者：张英伟李卫东马娜姚忠萍燕景恩张勇刘雅灵杨佳吴忠香廖国阳杨净思李长贵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所生物制品五室昆明650118 中国药品生物制品检定所疫苗三室北京100050

目的以重配技术制备H1N1流感病毒Vero细胞适应株,为以Vero细胞为基质生产流感疫苗奠定基础。方法以流感病毒Vero细胞适应株A/Yunnan/1/2005Va(H3N2)为母本株,与WHO推荐的2007～2008年度北半球流感疫苗生产用毒株A/Caledonia/20/99(H1N1... 详细信息

目的以重配技术制备H1N1流感病毒Vero细胞适应株,为以Vero细胞为基质生产流感疫苗奠定基础。方法以流感病毒Vero细胞适应株A/Yunnan/1/2005Va(H3N2)为母本株,与WHO推荐的2007～2008年度北半球流感疫苗生产用毒株A/Caledonia/20/99(H1N1)共同感染SPF鸡胚和Vero细胞,用抗A/Yunnan/1/2005Va(H3N2)抗体筛选重配病毒,在Vero细胞连续传12代,采用血凝抑制试验和RT-PCR鉴定病毒型别。将重配病毒经Vero细胞大量培养,重配前的病毒经鸡胚大量培养,分别经甲醛灭活,制备灭活疫苗,免疫ICR小鼠,检测其免疫原性。结果获得了1株Vero细胞适应的高产H1N1流感病毒株,连续传9代后,病毒血凝滴度维持在512,免疫原性与重配前的毒株相比,差异无统计学意义。结论通过流感病毒Vero细胞适应株与流行株的重配和抗体筛选,可以获得H1N1流感病毒Vero细胞适应株。

关键词：流感病毒 H1N1亚型遗传重配 Vero细胞

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亚洲西尼罗河病毒的系统发育及E蛋白分子进化特征分析

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中国生物制品学杂志 2021年第1期34卷 20-25页

作者：蓝青萍冯凯王晓丹潘玥陈俊英孙强明中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的分析亚洲区西尼罗河病毒(West Nile virus,WNV)的流行情况,探讨其系统发育和分子进化特征。方法从NCBI数据库中分别获取亚洲区流行的WNV全基因组序列和E蛋白序列,进行比对和同源性分析后构建系统进化树,分析来自不同株型病毒的结构... 详细信息

目的分析亚洲区西尼罗河病毒(West Nile virus,WNV)的流行情况,探讨其系统发育和分子进化特征。方法从NCBI数据库中分别获取亚洲区流行的WNV全基因组序列和E蛋白序列,进行比对和同源性分析后构建系统进化树,分析来自不同株型病毒的结构蛋白E的核苷酸和氨基酸的突变率,进一步找出氨基酸的替代位点。结果在中国、马来西亚、印度、以色列、巴基斯坦、伊朗和土耳其等地有血清学感染或回顾性检测阳性报道。将获取的WNV全基因组序列进行系统进化树分析,发现WNV以色列株(HM152773、AF481864)在亲缘关系上与谱系1a株最为接近,而以色列株(AY688948)在亲缘关系上与谱系2株较为接近,印度株(KU978770)与谱系1c接近;将获取的WNV E蛋白序列进行系统进化分析,发现WNV中国株(JX442278,JX42280-JX442282)在亲缘关系上与谱系1a株最为接近。氨基酸序列和核酸序列分析表明,不同株型的E蛋白与谱系2相比,表现为碱基和氨基酸的突变率高,与谱系1a相比,印度株(GQ851605、JX041632、GQ851604和KU978770)的第154和第156位氨基酸分别由天冬酰胺突变为天冬氨酸和丝氨酸(N154D,N154S),丝氨酸突变为脯氨酸和丙氨酸(S156P,S156A),而中国株(AY490240)、巴基斯坦株(JX070655)和以色列株(HM051416)的第156位氨基酸分别由丝氨酸突变为脯氨酸、苯丙氨酸和脯氨酸(S156P、S156F、S156P)。结论通过谱系分析、系统进化树构建、包膜蛋白E氨基酸序列及编码核苷酸序列的比较分析发现,有些位点的改变可能与病毒的毒力、致病性、神经侵袭力、流行等有关,为研究亚洲区不同国家不同株型间WNV的生物学和流行致病性差异提供了参考。

关键词：西尼罗河病毒亚洲包膜蛋白E 系统进化

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DTaP-sIPV联合疫苗中SabinIPV 免疫原性研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2011年第3期25卷 197-200页

作者：马艳秦敏胡慧琼姬光冯玲高娜顾洁谢炳锋何继红孙明波中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大疾病传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 成都生物制品研究所

目的探讨吸附无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）的制备工艺,并比较不同配比的DTaP-sIPV中Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（SabinIPV）三针基础免疫大鼠的中和抗体效价,为确定联合疫苗的最佳制备工艺及抗原剂量配比提供... 详细信息

目的探讨吸附无细胞百白破-Sabin株脊髓灰质炎联合疫苗（DTaP-sIPV）的制备工艺,并比较不同配比的DTaP-sIPV中Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗（SabinIPV）三针基础免疫大鼠的中和抗体效价,为确定联合疫苗的最佳制备工艺及抗原剂量配比提供参考.方法用不同配比的SabinIPV,制备两批DTaP-sIPV,进行各项指标的检定及稳定性试验,并联合单独的Sabin IPV和GSK制备的DTaP-wIPV对56只Wistar大鼠进行3针免疫,每针间隔1个月,每次免疫后30 d采血并分离血清,采用微量中和试验测定血清中抗脊髓灰质炎病毒3个型别的中和抗体效价.结果两批DTaPsIPV的各项检定指标均符合〈中国药典〉三部（2005版）要求,且稳定性良好.大鼠经3针基础免疫后,其Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体的几何平均滴度均显著上升,3针免疫后抗体阳转率已经达到100%.结论经此制备的DTaP-sIPV安全、稳定、有效,且DTaP-sIPV中的SabinIPV在大鼠中有良好的免疫效果,经3针免疫可产生高水平的中和抗体.

关键词：脊髓灰质炎病毒疫苗,灭活抗体,病毒

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云南地区HLA-G基因3’非翻译区三个位点多态性与系统性红斑狼疮的关联研究

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中华医学遗传学杂志 2014年第2期31卷 228-232页

作者：陈婷婷林俊晋松马莎于亮黄铠黄小琴褚嘉祐杨昭庆中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传室昆明650118 云南省第一人民医院风湿免疫科

目的探讨云南地区人群系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）与HLA-G基因3qE翻译区（3’untranslated region，3’UTR）3个位点（＋296014bp插入／缺失、＋3035C／T和＋3142C／G）多态性的关联性。方法应用DNA序列测序... 详细信息

目的探讨云南地区人群系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）与HLA-G基因3qE翻译区（3’untranslated region，3’UTR）3个位点（＋296014bp插入／缺失、＋3035C／T和＋3142C／G）多态性的关联性。方法应用DNA序列测序法对云南地区206例SLE患者及212名健康对照者的HLA-G基因上述3个多态性位点进行基因分型。结果HLA-G3’UTR区14bp插入／缺失和＋3142c／G等位基因和基因型频率在SLE组和对照组间的差异均无统计学意义（P〉0．05），＋3035T等位基因在SLE组的频率显著高于对照组，差异有统计学意义（P=0．002，OR=1．604，95％CI：1．186～2．169）。在显性遗传模式下，SLE组中（CT＋TT）的OR值为2．004（95％CI：1．345～2．987，P=0．0006）。结论HLA—G14bp插入／缺失和＋3142c／G多态性与云南地区人群SLE易感性无显著相关性，而＋3035C／T多态性与云南地区系统性红斑狼疮易感性相关，＋3035T等位基因可能是云南地区SLE发生的危险因素。

关键词： HLA—G基因系统性红斑狼疮关联分析多态性

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EMILIN1基因多态性与蒙古族原发性高血压相关性研究

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中华医学遗传学杂志 2011年第2期28卷 160-164页

作者：米冬青王步云孙浩黄小琴陈晓晨宗迪于亮史磊杨昭庆史荔褚嘉祐中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所遗传室昆明650118 内蒙古科技大学包头医学院生物化学与分子生物学教研室

目的探讨蒙古族人群中EMILIN1基因的3个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点与原发性高血压的关系.方法在内蒙古自治区蒙古族人群中选取201例原发性高血压患者和202名血压正常者进行病例对照研究,应用聚合酶链... 详细信息

目的探讨蒙古族人群中EMILIN1基因的3个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）位点与原发性高血压的关系.方法在内蒙古自治区蒙古族人群中选取201例原发性高血压患者和202名血压正常者进行病例对照研究,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态方法检测rs3754734、rs2011616和rs2304682这3个SNP位点的等位基因和基因型分布,并构建单倍型.结果在这3个SNP位点中,rs2304682位点的基因频率和基因型频率在高血压组和对照组间差异有统计学意义（P＜0.05）,并且在rs3754734和rs2304682这2个SNP位点构建的单倍型中,G-C和G-G单倍型在高血压组和对照组之间差异有统计学意义（P＜0.05）.在舒张压偏高组和舒张压正常组间,rs2304682位点的基因型和等位基因分布差异有统计学意义（P＜0.05）,而在收缩压偏高组和收缩压正常组间,各个SNP的基因型和等位基因分布差异无统计学意义（P＞0.05）.结论在蒙古族人群中,EMILIN1基因rs2304682多态性位点以及rs3754734和rs2304682这2个SNP位点构建的G-G单倍型可能与原发性高血压的易感相关联,rs2304682的多态性与蒙古族原发性高血压的舒张压的高低可能有关联.

关键词：蒙古族原发性高血压 EMILIN1基因遗传多态性

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EV71灭活疫苗(人二倍体细胞)在恒河猴婴猴模型中的免疫保护性分析

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中国科学：生命科学 2011年第6期41卷 439-448页

作者：李龙刘尚允董承红赵红玲王晶晶张莹纳锐雄谢忠平崔萍芳王丽春廖芸唐东红高家红刘龙丁李琦涵中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

肠道病毒71型作为引起儿童群体常见传染性手足口病（HFMD）的主要病原，具有导致少量感染个体出现脑炎等神经系统病变以及相关心肺功能衰竭的病理学特性．因此其预防性疫苗的研发具有重要的公共卫生意义．在前期工作的基础上，一种EV71... 详细信息

肠道病毒71型作为引起儿童群体常见传染性手足口病（HFMD）的主要病原，具有导致少量感染个体出现脑炎等神经系统病变以及相关心肺功能衰竭的病理学特性．因此其预防性疫苗的研发具有重要的公共卫生意义．在前期工作的基础上，一种EV71灭活病毒疫苗（人二倍体细胞）在本研究中基于恒河猴婴猴模型进行了相应的免疫保护性分析．以160EU剂量对2～3月龄婴猴进行0，4周免疫后，动物在第4周接受了剂量为10。～CCID50的病毒经呼吸道的攻击．对病毒攻击后动物在14天内的临床症状、血液生物学、器官病原学分布以及病理学检测的动态观察表明，经疫苗免疫的动物未出现对照动物所具有的特征性临床表现，其血液生物学及病理学检测均无异常．同时，器官病原学分布亦呈阴性．结合动物中和抗体的明确增长及对照动物的综合表现分析，本文的工作证实了该EV71灭活病毒疫苗（人二倍体细胞）在恒河猴婴猴体内的免疫保护性．

关键词：肠道病毒71型 (Enterovirus 71 EV71) 灭活疫苗免疫原性恒河猴婴猴

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单纯疱疹病毒与天然免疫系统的相互作用的研究进展

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病毒学报 2020年第1期36卷 124-129页

作者：牟唐维李琦涵中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)包括1型和2型,属于人类疱疹病毒家族的α亚族,也是人类感染最常见的病原体之一,感染可导致多种疱疹性疾病,包括疱疹性眼炎及可引起失明的疱疹性角膜炎。HSV的致病机制与病毒和宿主天然免疫系统... 详细信息

单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus,HSV)包括1型和2型,属于人类疱疹病毒家族的α亚族,也是人类感染最常见的病原体之一,感染可导致多种疱疹性疾病,包括疱疹性眼炎及可引起失明的疱疹性角膜炎。HSV的致病机制与病毒和宿主天然免疫系统的相互作用密切相关,涉及到病毒逃逸干扰素反应,核转录因子κB(Nuclear factorκB,NF-κB)信号通路以及病毒与免疫细胞相互作用等多个环节。本文就近年来单纯疱疹病毒与天然免疫系统的相互作用的研究进展进行综述。

关键词：单纯疱疹病毒(HSV) 天然免疫核转录因子κB(NF-κB)

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手足口病相关肠道病毒A型单克隆中和抗体综述

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生命科学 2020年第10期32卷 1040-1046页

作者：朱文兵董少忠中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118

手足口病(hand foot mouth disease, HFMD)的致病病原体为肠道病毒A型(enterovirus A, EV-A),主要包括肠道病毒71型(enterovirus A 71, EVA71)和柯萨奇病毒(coxsackievirus, CV)(CVA16、CVA6和CVA10)。已上市的EVA71灭活疫苗对不同型别的EV-A不具有交叉保护效力,广谱中和单克隆抗体有望成为预防或治疗手足口病的广谱药物。现就EV-A单克隆抗体的中和作用机制及中和表位进行综述。

关键词：手足口病肠道病毒A型单克隆抗体

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