检索结果-内蒙古大学图书馆

中华医学遗传学杂志 2008年第3期25卷 276-279页

作者：李彦涵黄小琴林克勤陶玉芬易文姚宇峰史磊褚嘉祐中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所遗传室昆明650118

目的研究EB病毒转化外周血B淋巴细胞建成的永生细胞株在传代过程中遗传特性是否发生改变。方法对10株永生细胞株进行30代的长期传代培养，采用染色体显带、微卫星DNA及端粒酶活性检测技术，观察不同传代次数的永生细胞株二倍性、染色体... 详细信息

目的研究EB病毒转化外周血B淋巴细胞建成的永生细胞株在传代过程中遗传特性是否发生改变。方法对10株永生细胞株进行30代的长期传代培养，采用染色体显带、微卫星DNA及端粒酶活性检测技术，观察不同传代次数的永生细胞株二倍性、染色体核型、微卫星DNA及端粒酶活性的改变。结果永生细胞株在30代以内，在染色体二倍性、核型、微卫星DNA方面保持稳定，未检测出端粒酶活性。结论经EB病毒转化的永生细胞株在有限代次内遗传特征是稳定的。

关键词：永生细胞株染色体二倍性微卫星DNA 端粒酶活性遗传稳定性

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宿主NK-DC细胞相互作用与病毒感染

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中华微生物学和免疫学杂志 2020年第6期40卷 477-483页

作者：陈燕丽刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所中国医学科学院病毒疫苗研发系统创新重点实验室昆明650118

自然杀伤细胞(NK)和树突状细胞(DCs)之间的相互作用在调节固有免疫应答的早期阶段以及随后的适应性免疫应答中的作用机制近年来才被阐明。NK细胞与DCs之间的相互作用导致NK细胞活化、DCs成熟或凋亡,并涉及细胞因子与细胞间的直接接触。N... 详细信息

自然杀伤细胞(NK)和树突状细胞(DCs)之间的相互作用在调节固有免疫应答的早期阶段以及随后的适应性免疫应答中的作用机制近年来才被阐明。NK细胞与DCs之间的相互作用导致NK细胞活化、DCs成熟或凋亡,并涉及细胞因子与细胞间的直接接触。NK细胞通过诱导偏向Th1免疫应答的DCs成熟,为DCs提供抗原和杀伤未经适当成熟的iDC,来控制和增强DCs介导的抗病毒免疫应答;DCs通过可溶性和细胞接触性激活剂刺激NK细胞,从而增强其细胞增殖、存活和细胞毒性来调节固有免疫应答的强弱。最近的研究表明,NK细胞和DCs之间的相互作用在几种抗病毒反应中也起着至关重要的作用。因此,本文综述了NK-DC相互作用及其与抗病毒反应的关系,以此为病毒感染疾病中NK-DC相互作用的分子机制研究提供理论基础。

关键词：自然杀伤细胞树突状细胞病毒感染相互作用

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云南傣族、汉族HLA-G基因14bp插入/缺失多态性研究

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遗传 2010年第6期32卷 577-582页

作者：陈金宝史磊姚宇峰史荔于亮林克勤陶玉芬易文黄小琴孙浩褚嘉祐中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所遗传室昆明650118 昆明医学院昆明650031

14bp插入/缺失多态性是指存在于HLA-G基因第8外显子3′非翻译区(3′UTR)的一个插入/缺失多态,因其能影响HLA-GmRNA的稳定性,并进一步影响HLA-G蛋白的翻译而受到广泛关注。文章采用PCR和电泳技术对云南傣族和汉族两个人群进行了HLA-G基因... 详细信息

14bp插入/缺失多态性是指存在于HLA-G基因第8外显子3′非翻译区(3′UTR)的一个插入/缺失多态,因其能影响HLA-GmRNA的稳定性,并进一步影响HLA-G蛋白的翻译而受到广泛关注。文章采用PCR和电泳技术对云南傣族和汉族两个人群进行了HLA-G基因14bp插入/缺失多态性的检测分析,结果显示傣族和汉族人群+14bp等位基因频率分别为31.97%和40.87%,+14bp/+14bp基因型频率分别为8.20%和17.31%,+14bp/-14bp基因型频率分别为47.54%和47.11%。与国内外已报道的其他人群的数据比较表明:云南汉族群体中HLA-G基因14bp插入/缺失的分布与其他群体相似;傣族则有自己独特的基因型和等位基因分布特点,推测其可能受到了遗传漂变的作用,但不排除自然选择作用的影响。

关键词： HLA-G基因 14bp插入/缺失多态性随机遗传漂变自然选择

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人呼吸道合胞病毒的稳定性

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中国生物制品学杂志 2009年第4期22卷 363-365页

作者：蒋蕊鞠李华龙润乡陈思瑾陈洪波宋霞崔萍芳谢忠平中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所质量检定室昆明650118

目的观察人呼吸道合胞病毒(HRSV)在不同温度保存、冻融和超声波处理的稳定性。方法将HRSVA2株接种于KMB17细胞上适应培养后,收获病毒液,分别置于37、22、4和-20℃条件下保存不同时间,或经冻融和超声波处理后,用微量细胞病变法检测HRSV... 详细信息

目的观察人呼吸道合胞病毒(HRSV)在不同温度保存、冻融和超声波处理的稳定性。方法将HRSVA2株接种于KMB17细胞上适应培养后,收获病毒液,分别置于37、22、4和-20℃条件下保存不同时间,或经冻融和超声波处理后,用微量细胞病变法检测HRSV的感染性滴度,观察其稳定性。结果HRSV在37℃保存,病毒感染性滴度下降很快,第4天时,降至约1.50lgCCID50/ml,5d后降至1.00lgCCID50/ml以下,几乎检测不到;在22℃保存,病毒感染性滴度下降相对缓慢,第14天时比原始滴度降低约3.20lgCCID50/ml;在4℃和-20℃下保存较稳定,分别保存5周和3个月后,病毒感染性滴度下降<0.60lgCCID50/ml。冻融1、2、3次,病毒感染性滴度分别下降1.37、2.55和3.61lgCCID50/ml,冻融4次后,病毒几乎无感染性。超声波处理后,病毒感染性滴度下降很快,处理1次病毒滴度即下降至原始滴度的50%左右,处理2次后,病毒几乎无感染性。结论HRSV不宜在37℃和22℃存放,可短暂保存于4℃,在-20℃可保存较长时间;冻融和超声波处理均对病毒感染性滴度有明显影响。

关键词：人呼吸道合胞病毒稳定性感染性滴度温度冻融超声波处理

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人呼吸道合胞病毒A_2株在不同细胞中的培养及其影响因素

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中国生物制品学杂志 2009年第6期22卷 574-577页

作者：谢忠平李华龙润乡易红昆沈冬李志强崔萍芳蒋蕊鞠中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所质量检定室昆明650118

目的在不同细胞中培养人呼吸道合胞病毒(HRSV),并分析其影响因素,为病毒的大量增殖创造条件。方法将HRSVA2株分别接种至人二倍体KMB17细胞、Vero细胞、人喉癌Hep-2细胞及HeLa细胞进行培养,采用微量细胞病变法检测病毒的感染性滴度,并进... 详细信息

目的在不同细胞中培养人呼吸道合胞病毒(HRSV),并分析其影响因素,为病毒的大量增殖创造条件。方法将HRSVA2株分别接种至人二倍体KMB17细胞、Vero细胞、人喉癌Hep-2细胞及HeLa细胞进行培养,采用微量细胞病变法检测病毒的感染性滴度,并进行间接免疫荧光试验及合胞体观察。检测吸附时间、维持液pH值和培养温度对病毒增殖的影响。结果4种细胞中,Vero细胞对HRSV最敏感,病变早、病毒感染性滴度可达6.83lgCCID50/ml;KMB17细胞相对敏感性不高,但仍能良好增殖,病毒感染性滴度达6.13lgCCID50/ml;Hep-2细胞及HeLa细胞介于Vero细胞和KMB17细胞之间,病毒感染性滴度也达到6.83lgCCID50/ml。间接免疫荧光试验显示病毒在细胞浆内增殖。吸附时间对HRSV的增殖无明显影响;维持液的pH值对HRSV的增殖及病变特点均有一定的影响,在pH7.0～7.2时可快速引起细胞产生病变,并能达到最高感染性滴度;HRSV在37℃及32℃下培养均能良好地增殖。结论HRSVA2株在KMB17、Vero、Hep-2及HeLa细胞内均可增殖,但敏感性有一定差异,且对培养条件有一定的要求。

关键词：人呼吸道合胞病毒 A2株细胞培养影响因素

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人呼吸道合胞病毒裂解条件的初步探索

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中国生物制品学杂志 2009年第5期22卷 501-504页

作者：陈思瑾谢忠平李华龙润乡蒋蕊鞠崔萍芳中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所质量检定室昆明650118

目的对人呼吸道合胞病毒(HRSV)的裂解条件进行初步探索,为研制HRSV裂解纯化疫苗奠定基础。方法用不同的裂解剂,以不同浓度和温度对HRSV裂解不同时间,以HRSV的F及G蛋白为目标蛋白,对得到的蛋白进行还原蛋白电泳分析及Western blot鉴定,... 详细信息

目的对人呼吸道合胞病毒(HRSV)的裂解条件进行初步探索,为研制HRSV裂解纯化疫苗奠定基础。方法用不同的裂解剂,以不同浓度和温度对HRSV裂解不同时间,以HRSV的F及G蛋白为目标蛋白,对得到的蛋白进行还原蛋白电泳分析及Western blot鉴定,电镜观察验证裂解效果。结果1%浓度的TritonX-100在4℃作用90min,对HRSV的裂解效果优于其他裂解剂。电镜观察可见病毒样品呈云絮状裂解;Western blot分析表明,特异性条带为HRSV的F蛋白。结论已初步筛选出HRSV的裂解条件,其对HRSV的裂解效果较好。

关键词：人呼吸道合胞病毒裂解条件亚单位疫苗

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中国3个不同地域藏族群体线粒体ATP6、ATP8和Cyt b基因的比较：探查自然选择在基因组的印记

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遗传 2009年第2期31卷 147-152页

作者：顾明亮汪业军史磊张永彪褚嘉祐中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传学研究室昆明650118 香港中文大学生物系中国香港

线粒体基因组(Mitochondrial DNA,mtDNA)具有区别于核基因组的诸多特性(例如缺乏重组等),在人类进化历史的研究领域具有巨大的应用价值。文章通过对3个不同地域藏族群体线粒体基因组的ATP6、ATP8和Cytb基因约2kb区域的测序研究发现:随... 详细信息

线粒体基因组(Mitochondrial DNA,mtDNA)具有区别于核基因组的诸多特性(例如缺乏重组等),在人类进化历史的研究领域具有巨大的应用价值。文章通过对3个不同地域藏族群体线粒体基因组的ATP6、ATP8和Cytb基因约2kb区域的测序研究发现:随着海拔的增加,3个基因的全序列、ATP6和ATP8基因逐渐偏离中性模式,但未呈现显著性差异;随着海拔的降低,Cytb基因受到纯化选择的作用逐渐增大;ATP6基因可能存在适应性选择,并且随着海拔的增高呈现出适应性选择增强的趋势;选择的主要因素应该是该群体所处的特殊的地理环境,即不同的地理环境具有直接的选择作用。

关键词：藏族群体线粒体基因 ATP6 ATP8 Cyt b 自然选择

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丙型肝炎病毒3种标志物的稳定性

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中国生物制品学杂志 2009年第5期22卷 468-469,473页

作者：龙润乡李华崔萍芳宋霞易红昆谢忠平中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所诊断试剂室昆明650118

目的观察丙型肝炎病毒3种标志物的稳定性。方法用HCV-Ab、RT-PCR及HCV-Ag检测试剂分别检测血清样品中的HCV-Ab、HCV-RNA和HCV-Ag,比较3种标志物在不同温度、不同时间下保存及冻融后的稳定性。结果在2036份血清样品中,共检出HCV-Ab阳性样... 详细信息

目的观察丙型肝炎病毒3种标志物的稳定性。方法用HCV-Ab、RT-PCR及HCV-Ag检测试剂分别检测血清样品中的HCV-Ab、HCV-RNA和HCV-Ag,比较3种标志物在不同温度、不同时间下保存及冻融后的稳定性。结果在2036份血清样品中,共检出HCV-Ab阳性样品85份、HCV-Ag阳性样品51份,HCV-RNA阳性样品12份;HCV-Ab4℃保存14d、-20℃保存3年及冻融5次稳定性良好,阳性率均为100%;HCV-RNA随保存时间的延长,阳性检出率逐步下降,-20℃保存3年后下降至33.33%,冻融后下降至83.33%;HCV-Ag-20℃保存3年后,阳性率下降至68.63%,4℃保存14d和冻融对其无影响。结论3种标志物中,HCV-Ab的稳定性最好,其次是HCV-Ag,HCV-RNA最不稳定。

关键词：丙型肝炎病毒标志物 HCV—Ab HCV—RNA HCV—Ag 稳定性

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甲乙肝联合疫苗中不同配比对小鼠Th1/Th2型细胞因子变化的影响

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免疫学杂志 2008年第5期24卷 541-544,548页

作者：熊秋霞谢忠平于亮史荔孙明褚嘉祐中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传室昆明650118

目的通过注射甲乙肝联合疫苗和单价甲肝、乙肝疫苗来观察小鼠在免疫过程中细胞因子的变化情况,衡量应答的性质,探讨两种抗原对小鼠细胞因子变化的不同作用以及乙肝抗原对甲肝抗原的作用。方法选用150只Balb/c小鼠随机分成注射联苗640Eu/... 详细信息

目的通过注射甲乙肝联合疫苗和单价甲肝、乙肝疫苗来观察小鼠在免疫过程中细胞因子的变化情况,衡量应答的性质,探讨两种抗原对小鼠细胞因子变化的不同作用以及乙肝抗原对甲肝抗原的作用。方法选用150只Balb/c小鼠随机分成注射联苗640Eu/mL:10μg/mL组、640Eu/mL:20μg/mL组、单价甲肝抗原640Eu/mL组、单价乙肝抗原10μg/mL组、单价乙肝抗原20μg/mL组和佐剂AL(OH)3对照组,每组25只。于第4周加强免疫1次,分别在初次免疫注射后第1、2、3、4周及加强免疫后第2周,眼眶采血,分离血清,每组各5只小鼠,上流式细胞仪检测小鼠血清5种细胞因子(TNF、IFN-γ、IL-5、IL-4、IL-2)含量。结果疫苗诱导产生的Th1/Th2型细胞因子均随时间的变化而变化,5种细胞因子均约在第3周达最大值,其中小鼠产生最多的是TNF;加强免疫后,640Eu/mL:20μg/mL联苗组刺激小鼠产生细胞因子水平高于640Eu/mL:10μg/mL联苗组。结论甲乙肝联合疫苗能刺激机体产生特异性细胞免疫应答,甲乙肝联合疫苗能诱导机体产生与单价相同或略强的Th1/Th2型细胞因子。

关键词：甲乙肝联合疫苗甲肝疫苗乙肝疫苗细胞因子免疫原性流式细胞术

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丙型肝炎病毒分片段抗体检测及优势抗原表位分析

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中国生物制品学杂志 2010年第5期23卷 479-481页

作者：谢忠平杨蓉龙润乡李华白惠株廖云蒋蕊鞠王燕洪超中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所诊断试剂室昆明650118

目的检测丙型肝炎病毒(HCV)分片段抗体,并分析HCV优势抗原表位,为HCV抗原、抗体检测及疫苗研究提供依据。方法收集经ELISA法检测抗HCV阳性血清样品90份,使用总抗体检测试剂及抗HCV分片段试剂进行检测,并用荧光定量PCR对抗体弱阳性及阴... 详细信息

目的检测丙型肝炎病毒(HCV)分片段抗体,并分析HCV优势抗原表位,为HCV抗原、抗体检测及疫苗研究提供依据。方法收集经ELISA法检测抗HCV阳性血清样品90份,使用总抗体检测试剂及抗HCV分片段试剂进行检测,并用荧光定量PCR对抗体弱阳性及阴性样品进行复核,分析不同片段出现的阳性率,从而分析HCV的优势抗原表位。结果 90份抗HCV阳性的样品经总抗体检测试剂检测,其中阳性78份(86.67%);90份抗HCV阳性的样品中,分片段试剂检测1个片段以上阳性样品59份(65.56%);其中C、NS3、NS4及NS5片段抗体阳性分别为56份(94.92%)、57份(96.61%)、42份(71.19%)及47份(79.66%),NS3及C片段抗体是HCV的优势抗体。结论 HCV-C及NS3表位是HCV的优势抗原表位;HCV分片段抗体与总抗体检测试剂之间阳性检出率存在一定差异。

关键词：丙型肝炎病毒分片段抗体优势抗原表位

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