检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2021年第6期46卷 661-665,672页

作者：杨佳杨丽娟刘伟鹏朱小永赵凌锋周紫云李传印严志凌中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118 昆明市延安医院妇产科云南昆明650051 昆明医科大学第三附属医院妇科云南昆明650118 曲靖市疾病预防控制中心办公室云南曲靖655000

目的探讨云南地区宫颈癌(CC)和宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者宫颈手术组织人乳头瘤病毒(HPV)感染情况。方法选取云南地区CC患者703例、CIN患者263例,采集所有患者术后宫颈病变组织50~100 mg,采用导流杂交基因芯片技术(HybriMax)对2组患... 详细信息

目的探讨云南地区宫颈癌(CC)和宫颈上皮内瘤样病变(CIN)患者宫颈手术组织人乳头瘤病毒(HPV)感染情况。方法选取云南地区CC患者703例、CIN患者263例,采集所有患者术后宫颈病变组织50~100 mg,采用导流杂交基因芯片技术(HybriMax)对2组患者宫颈病变组织进行HPV检测,分析HPV感染及亚型分布情况。结果CC组和CIN组患者HPV检出率均超过95%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者中检出率最高的HPV亚型均为HPV16,CC组和CIN组患者中检出率第二的HPV亚型分别为HPV18和HPV58,CC组患者的HPV16和HPV18的检出率明显高于CIN组(P<0.001),CIN组中HPV52、HPV56和HPV58的检出率均明显高于CC组(P<0.001);CC组患者单一感染率明显高于CIN组(P<0.001),2组患者单一感染中检出率最高的HPV型别均为HPV16、且CC组患者HPV16检出率明显高于CIN组(P<0.001),CIN患者三重及以上感染率高于CC患者(P<0.001)。结论HPV感染是诱导CC发生的主要因素,其中HPV16感染是云南地区CC患者中最常见的HPV型别,其次为HPV18。

关键词：宫颈肿瘤宫颈上皮内瘤样病变人乳头瘤病毒感染情况亚型云南

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蒲公英有机萃取物的抗甲型H1N1流感病毒作用

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中国现代应用药学 2015年第12期32卷 1423-1427页

作者：王晓丹夏晓玲赵玉娇王新华张荣平孙强明北京协和医学院/中国医学科学院医学生物学研究所、云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 昆明医科大学昆明650500 广州医科大学附属第一医院广州医科大学呼吸疾病国家重点实验室广州510230

目的通过检测蒲公英不同的萃取物体外抗甲型H1N1流感病毒作用,探讨其在甲型H1N1流感治疗上的应用。方法首先用乙醇萃取而得到蒲公英的乙醇萃取物,然后依次采用乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、水萃取蒲公英的乙醇萃取物,得到不同溶剂的萃取物... 详细信息

目的通过检测蒲公英不同的萃取物体外抗甲型H1N1流感病毒作用,探讨其在甲型H1N1流感治疗上的应用。方法首先用乙醇萃取而得到蒲公英的乙醇萃取物,然后依次采用乙酸乙酯、正丁醇、石油醚、水萃取蒲公英的乙醇萃取物,得到不同溶剂的萃取物;选用狗肾传代MDCK细胞作为病毒的宿主对病毒进行培养和扩增;通过血凝效价和Real time RT-PCR实验,间接或直接检测蒲公英不同萃取物对病毒的中和作用和增殖抑制作用。结果 4种不同溶剂的蒲公英萃取物作用病毒后,只有石油醚、乙酸乙酯组的血凝效价数值出现了一定程度的下降,其中乙酸乙酯萃取物组的值下降了2-4倍;而石油醚萃取物在96 h时,中和实验组和增殖抑制组的血凝效价值分别下降了256倍和128倍。Real time RT-PCR检测表明,石油醚和乙酸乙酯萃取物明显抑制病毒的扩增量。作用96 h时,无论是中和实验还是增殖抑制实验,石油醚萃取物的作用都是最显著的,病毒扩增率较阳性对照分别减少了92.4%和95.6%。结论蒲公英乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物在体外有明显的抗甲型H1N1流感病毒的作用。

关键词：蒲公英甲型流感病毒狗肾传代细胞抗病毒作用萃取物

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腓骨肌萎缩症2A型一晚发家系临床表现及遗传学分析

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海南医学院学报 2021年第8期27卷 626-629页

作者：李文武黄立凡张小超李志宏黄小琴孙浩云南省楚雄彝族自治州人民医院神经内一科云南楚雄675000 中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所遗传室云南昆明650118 昆明医科大学药学院云南省天然药物药理重点实验室云南昆明650500

目的:分析晚发型常染色体显性遗传腓骨肌萎缩症(Charcot–Marie–Tooth,CMT)2A型征象病例的临床和遗传学特点。方法:采用家族谱系调查结合临床及基因检测进行整合分析。结果:先证者双侧臀部、双侧大腿肌群萎缩,双小腿后侧肌群明显萎缩,... 详细信息

目的:分析晚发型常染色体显性遗传腓骨肌萎缩症(Charcot–Marie–Tooth,CMT)2A型征象病例的临床和遗传学特点。方法:采用家族谱系调查结合临床及基因检测进行整合分析。结果:先证者双侧臀部、双侧大腿肌群萎缩,双小腿后侧肌群明显萎缩,血清肌酸激酶值272 U/L,肌电图显示正中神经传导速度正常,双下肢神经源性损害(轴索为主)。基因检测发现MFN2基因外显子9的序列变异NM_014874:c.839G> A(p.R280H)杂合突变。先证者父亲存在外周神经-肌肉受累症状,母亲无临床症状。父亲携带相同杂合突变,母亲并未携带该突变。结论:家族谱系调查结合临床及基因检测是诊断晚发型CMT2A的可靠方法,有助于明确诊断不同类型的神经肌肉疾病。

关键词：腓骨肌萎缩症2A型 MFN2基因 NM_014874:c.839G>A(p.R280H)

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利用CRISPR/CAS9技术介导LoxP序列靶向引入小鼠SM22α基因

利用CRISPR/CAS9技术介导LoxP序列靶向引入小鼠SM22α基因

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：刘超董伟李冰谢英苏利波张力韩梅河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所河北省实验动物重点实验室河北医科大学实验动物学部北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所河北医科大学生物化学与分子生物学教研室河北省医学生物技术重点实验室

目的平滑肌22α(SM22α)是平滑肌细胞(VSMC)骨架相关蛋白,参与VSMC骨架重构,与动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病与关.本研究旨在在SM22α基因内部引入LoxP序列,制备基于Cre/LoxP系统的SM22α条件性基因敲除小鼠,研究其在VSMC骨架... 详细信息

目的平滑肌22α(SM22α)是平滑肌细胞(VSMC)骨架相关蛋白,参与VSMC骨架重构,与动脉粥样硬化、高血压等血管重塑性疾病与关.本研究旨在在SM22α基因内部引入LoxP序列,制备基于Cre/LoxP系统的SM22α条件性基因敲除小鼠,研究其在VSMC骨架重构中的作用机制.方法利用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠SM22α基因.在外显子1～2和3～4的非编码区各设计sgRNA位点并将其定向克隆至pUC57-sgRNA.设计包含外显子2、3及2个LoxP序列且两侧各带有700bp同源臂的环状供体载体.Cas9的mRNA使用mMESSAGE mMACHINE(R) T7Ultra Kit进行体外转录,sgRNA使用线性化的spUC57-sgRNA重组质粒作为模板用MEGAshortscriptTM Kit体外转录合成.将制备好Cas9 mRNA、sgRNA和供体质粒进行混合,其浓度分别为Cas9 mRNA 25 ng/μl,sgRNA 10 ng/μl,供体质粒4 ng/μl.水平显微注射法将其导入170枚C57BL/6×B6D2F1受精卵原核.将注射后存活的约140枚受精卵移植入5只当日见栓的假孕KM雌鼠输卵管中,得到17只子代小鼠,经PCR和测序筛选目标小鼠.结果有一只小鼠等位基因的特定位点插入了LoxP序列,三只小鼠删除了SM22α基因的第2第3外显子.结论借助CRISPR/Cas9技术得到了SM22α基因内部引入LoxP序列的小鼠和SM22α基因敲除小鼠,为研究SM22α在VSMC中的作用机制提供了重要实验条件.

关键词： SM22α VSMC骨架重构 CRISPR/CAS9

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药对白术-陈皮及其单味药中挥发油的分析比较

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广州化工 2019年第12期47卷 107-110页

作者：杨丽芳李慧林航羽云南白药集团医药电子商务有限公司云南昆明650500 中国医学科学院&北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明医科大学第一附属医院药剂科云南昆明650000

采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)结合演进特征投影法(HELP)分析比较药对白术-陈皮及其单味药的挥发油成分。利用质谱库结合保留时间进行定性分析,总体积积分法进行定量分析。结果表明:白术与陈皮配伍后,新生成了19种化合物,约占药对... 详细信息

采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)结合演进特征投影法(HELP)分析比较药对白术-陈皮及其单味药的挥发油成分。利用质谱库结合保留时间进行定性分析,总体积积分法进行定量分析。结果表明:白术与陈皮配伍后,新生成了19种化合物,约占药对挥发性化合物总数(81种)的23%。两种单味药配伍前后,所含挥发油成分存在明显差异,值得深入分析研究。

关键词：药对挥发油成分气相色谱-质谱联用技术演进特征投影法

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ERAP1基因多态性与非小细胞肺癌遗传易感性的关联研究

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中华临床医师杂志（电子版） 2013年第22期7卷 41-43页

作者：曹丹凤马千里周竞贤钱旭李盈甫俞建昆姚宇峰史荔中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室昆明650118 昆明医科大学第三附属医院胸外科昆明市延安医院心血管外科昆明医科大学第一附属医院干疗科

目的探讨内质网氨肽酶1(endoplasmic reticulum aminopeptidase 1,ERAP1)基因多态性与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的相关性。方法入选NSCLC患者224例,健康体检人群207例。采用Taq Man探针基因分型方法对ERAP1基因SNP rs26653和rs26618两个位点进行基因分型,并构建单倍型,评估上述两个SNPs及单倍型与NSCLC的相关性。结果病例组和对照组ERAP1基因rs26618和rs26653基因型和等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。病例组和对照组rs26618/rs26653单倍型CG、TC的单倍型频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ERAP1基因与NSCLC的发生有关,rs26618/rs26653-CG单倍型可能增加NSCLC的患病风险,rs26618/rs26653-TC单倍型对NSCLC可能具有保护性作用。

关键词：癌,非小细胞肺内质网氨肽酶类多态性,单核苷酸单倍性

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一个罕见葡萄糖转运体1缺陷综合征家系的遗传学分析

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中国优生与遗传杂志 2022年第12期30卷 2236-2240页

作者：袁军鸿段丽芬刘晓梅叶磊林克勤刘红仙孙浩杨昭庆昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传学研究室云南昆明650118 昆明市儿童医院神经内科云南昆明650034 昆明市儿童医院感染科云南昆明650034 昆明市儿童医院神经外科云南昆明650034

目的对一个罕见葡萄糖转运体1缺陷综合征(GLUT1-DS)家系的致病基因变异位点进行检测并对其进行遗传学分析。方法使用高通量全外显子组及PCR-Sanger检测家系成员的相关可疑突变位点,用I-TASSER生物信息学软件对含突变的蛋白质进行生物信... 详细信息

目的对一个罕见葡萄糖转运体1缺陷综合征(GLUT1-DS)家系的致病基因变异位点进行检测并对其进行遗传学分析。方法使用高通量全外显子组及PCR-Sanger检测家系成员的相关可疑突变位点,用I-TASSER生物信息学软件对含突变的蛋白质进行生物信息学分析,并采用PCR及毛细管电泳检测该核心家系成员中突变位点的嵌合比例。结果先证者在2月龄时发生首次抽搐,且具有容貌异常、脑脊液葡萄糖含量较低和脑电图异常等临床特征。先证者及其母亲在SLC2A1基因(NM_006516)检出杂合性无义突变c.988C>T(p.R330X),其母亲突变为新生突变(DNMs),但未产生明显的临床表型;蛋白结构生物信息分析表明p.R330X无义突变所产生的截短蛋白使SLC2A1基因编码的GLUT1蛋白丧失部分功能;嵌合体分析显示先证者及其母亲的嵌合率相近。结论该例GLUT1-DS患者的致病突变基因为SLC2A1基因c.988C>T无义突变,先证者母亲临床表型外显不全的原因可能是因为存在嵌合突变以外的分子病理机制。

关键词： GLUT1-DS SLC2A1基因突变表型异质性嵌合体

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1例罕见ATR-X综合征的基因突变分析

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中风与神经疾病杂志 2021年第6期38卷 536-538页

作者：袁军鸿段丽芬刘晓梅张云茜刘红仙孙浩褚嘉祐杨昭庆昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传学研究室云南昆明650118 昆明市儿童医院神经内科云南昆明650034 昆明市儿童医院感染科云南昆明650034 云南大学附属医院神经内科云南昆明650031

ATR-X综合征也称X连锁的α地中海贫血智力障碍综合征(Alpha-thalassemia X-linked intellectual disability,ATR-X;OMIM:301040),是由X染色体上的ATRX基因突变引起的罕见遗传病[1]。ATR-X综合征的致病基因位于Xq21.1,编码了2492个氨基酸,所编码的蛋白质是染色质重塑因子SNF2(SWI/SNF)家族成员,在体外具有一定的染色质重塑活性[2]。ATRX基因包含约300 kb的基因组DNA,由35个外显子组成[3,4]。ATR-X综合征的临床表现多为面部畸形、严重智力低下、轻度(或无)α-地中海贫血、生殖器不同程度的异常、骨骼异常和自闭症行为[5]。该综合征具有较广的基因突变谱和临床表型谱,但基因型与临床表型的对应关系尚不清楚。本研究通过全外显子组测序对一个核心家系中临床表现为智力低下、异常面容伴阵发性抽搐的患者进行致病基因突变筛查,发现了ATRX基因上一个单碱基致病基因突变,现报道如下。

关键词： ATR-X综合征基因突变 ATRX基因全外显子组测序表型

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云南省两市区脊髓灰质炎灭活疫苗接种情况调查

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贵州医科大学学报 2019年第3期44卷 297-301页

作者：蒋曦朱文兵王静詹会莲李慧宋杰董少忠中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 昆明市五华区疾病预防控制中心云南昆明650118 丽江市疾病预防控制中心云南丽江674100

目的:分析云南省昆明市五华区及丽江市脊髓灰质炎疫苗(PV)接种情况及脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)在每个剂次中所占的比率及普及情况。方法:从两地疾病预防控制中心儿童免疫规划信息管理系统中收集2016年5月～2017年7月儿童PV接种数据,应用... 详细信息

目的:分析云南省昆明市五华区及丽江市脊髓灰质炎疫苗(PV)接种情况及脊髓灰质炎灭活疫苗(IPV)在每个剂次中所占的比率及普及情况。方法:从两地疾病预防控制中心儿童免疫规划信息管理系统中收集2016年5月～2017年7月儿童PV接种数据,应用描述性流行病学方法进行分析。结果:2016年5月～2017年7月,五华区共接种PV 65 349剂,每一剂接种率均为99%以上,第1、2、3及4次剂IPV所占比率分别为86. 02%、33. 62%、26. 30%及20. 33%;丽江市共接种脊髓灰质炎疫苗21 962剂,每一剂次接种率均为99%以上,第1、2、3及4次剂IPV所占比率分别为39. 75%、7. 55%、8. 20%及0. 07%,使用IPV种类多为Sabin-IPV、Salk-IPV、DTa P-IPV/Hib,DTa P-IPV/Hib所占比率最高(62. 63%,χ~2=9 597. 6,P <0. 001);丽江市IPV相对单一,95%为免费Sabin-IPV,五华区IPV接种率明显高于丽江市(χ~2=22 614. 9,P <0. 001)。结论:昆明市五华区IPV接种率明显高于丽江市。

关键词：脊髓灰质炎疫苗脊髓灰质炎灭活疫苗接种云南

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诺如病毒VP1蛋白在马克斯克鲁维酵母中的表达及纯化

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中国病毒病杂志 2022年第1期12卷 35-41页

作者：袁军鸿王晓辉吴萍萍冯昌增周峻岗褚嘉祐吕红杨昭庆昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传学研究室云南昆明650118 国家药品监督管理局疫苗及生物制品质量控制与评价重点实验室四川成都610097 复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心上海200438 复旦大学遗传工程国家重点实验室上海200438

目的使用马克斯克鲁维酵母表达系统对GII.17型诺如病毒病毒样颗粒(VLPs)进行表达并对该蛋白纯化方式进行初步探讨。方法对诺如病毒VP1序列进行密码子优化,使用双酶切构建重组质粒,通过醋酸锂转化法筛选获得重组阳性克隆KM-NOV-GII.17... 详细信息

目的使用马克斯克鲁维酵母表达系统对GII.17型诺如病毒病毒样颗粒(VLPs)进行表达并对该蛋白纯化方式进行初步探讨。方法对诺如病毒VP1序列进行密码子优化,使用双酶切构建重组质粒,通过醋酸锂转化法筛选获得重组阳性克隆KM-NOV-GII.17。摇瓶培养72 h后对菌体进行破碎,使用层析柱对目的蛋白进行纯化,并通过电镜观察颗粒形态。结果成功筛选出高表达量KM-NOV-GII.17,通过Q柱及分子筛串联纯化的方式获得了纯度较高的病毒样颗粒,产量约为0.26 g/L,电镜观察结果显示该VP1序列可自组装为大小均一的病毒样颗粒并且与天然病毒颗粒形态相似。结论本研究证实了GII.17型诺如病毒VP1蛋白可通过马克斯克鲁维酵母表达系统获得产量高、均一性好的病毒样颗粒,这为诺如病毒基因重组疫苗的研发提供了新的蛋白表达系统。

关键词：诺如病毒病毒样颗粒马克斯克鲁维酵母表达纯化

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