检索结果-内蒙古大学图书馆

医学研究杂志 2024年第7期53卷 163-168页

作者：陆茗旸董鹏张建民陈慧何维 T细胞与免疫治疗重点实验室、医学生物学重点实验室、中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院 100005 常州西太湖细胞治疗前沿技术研究院 213000 细胞生态海河实验室天津300020 北京佳德和细胞治疗技术有限公司 101111

细胞治疗是利用患者自体(或同种异体)的细胞,对组织、器官进行修复的治疗方法。然而因为细胞是一个成分复杂、精细调控的活的有机整体,要将其用作药物面临着很大的挑战。因此细胞治疗虽有百年历史,但直到2017年第一个嵌合抗原受体T细胞(... 详细信息

细胞治疗是利用患者自体(或同种异体)的细胞,对组织、器官进行修复的治疗方法。然而因为细胞是一个成分复杂、精细调控的活的有机整体,要将其用作药物面临着很大的挑战。因此细胞治疗虽有百年历史,但直到2017年第一个嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法获批上市,才标志着现代医学进入细胞治疗时代。细胞治疗主要包括干细胞治疗和免疫细胞治疗。干细胞应用广泛,不同来源的干细胞产品为多种神经系统、免疫系统相关复杂难治的疾病的治疗提供了有效途径。随着CAR-T细胞疗法在肿瘤免疫治疗中的成功,多种免疫细胞治疗技术得到了迅猛发展,成为恶性肿瘤治疗领域的研究热点,并逐渐扩大到其他的疾病治疗领域。近年来我国在细胞治疗领域研发水平取得了长足的发展,然而这些细胞治疗技术仍面临着诸多挑战。与传统分子药物比较,细胞治疗是一种高技术型的创新性疾病治疗方案,本文对整个细胞治疗技术的分类、发展历程和最新的研究进展及挑战进行综述,希望能为整个行业的快速发展提供助力。

关键词：细胞治疗干细胞免疫细胞

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壮族人群ERAP基因多态性与脊灰疫苗序贯免疫诱导的抗体应答的相关性分析

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昆明医科大学学报 2023年第7期44卷 22-28页

作者：师雨晗李菁刘舒媛赵婷杨净思史荔梁疆莉中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所/云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118 云南农业大学农学与生物技术学院云南昆明650201

目的分析内质网氨肽酶(endoplasmic reticulum aminopeptidases,ERAP)基因多态性与脊髓灰质炎疫苗序贯免疫诱导的中和抗体应答的相关性。方法选取243名来自广西壮族自治区并完成2剂灭活脊髓灰质炎疫苗和1剂二价口服脊髓灰质炎减毒疫... 详细信息

目的分析内质网氨肽酶(endoplasmic reticulum aminopeptidases,ERAP)基因多态性与脊髓灰质炎疫苗序贯免疫诱导的中和抗体应答的相关性。方法选取243名来自广西壮族自治区并完成2剂灭活脊髓灰质炎疫苗和1剂二价口服脊髓灰质炎减毒疫苗接种的壮族受试者,检测免前和基础免疫28 d血清中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎中和抗体水平,采用TaqMan探针基因分型法对单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)进行分型。共选择8个SNP位点,6个ERAP1基因(rs27037、rs27044、rs30187、rs26618、rs26653、rs3734016)和2个ERAP2基因(rs2549782、rs2248374),计算各SNPs的等位基因和基因型频率,分析各SNPs与各型抗体应答的相关性。结果在Ⅰ型脊髓灰质炎抗体应答中,携带rs2549782-G和rs2248374-A等位基因个体抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)低于携带rs2549782-T和rs2248374-G等位基因个体[均为(11.590±1.979) vs (11.950±1.895),P=0.031];rs2549782基因型GT和rs2248374基因型AG诱导的中和抗体低于rs2549782基因型TT和rs2248374基因型GG[均为(11.741±0.141) vs (12.378±0.157),P=0.045]。结论 ERAP2基因多态性可能影响脊髓灰质炎疫苗诱导的抗体水平。

关键词：内质网氨肽酶单核苷酸多态性脊髓灰质炎疫苗抗体几何平均滴度

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多聚胞嘧啶结合蛋白PCBP1在轮状病毒复制中的作用研究

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中国病毒病杂志 2022年第1期12卷 15-20页

作者：纳璐唐娅娅周艳鲁辰星刘军营肖琳李鸿钧中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650018

目的初步研究多聚胞嘧啶结合蛋白[poly (C)-binding protein, PCBP]1在轮状病毒复制过程中的作用和调控机制。方法构建携带有PCBP1基因的真核表达质粒pcDNA3.1-PCBP1,合成针对PCBP1的siRNA。通过转染pcDNA3.1-PCBP1和筛选出能够下调PCBP... 详细信息

目的初步研究多聚胞嘧啶结合蛋白[poly (C)-binding protein, PCBP]1在轮状病毒复制过程中的作用和调控机制。方法构建携带有PCBP1基因的真核表达质粒pcDNA3.1-PCBP1,合成针对PCBP1的siRNA。通过转染pcDNA3.1-PCBP1和筛选出能够下调PCBP1基因的siRNA后,在MA104细胞中分别上调和下调PCBP1的表达,通过免疫荧光分析PCBP1对轮状病毒复制的作用。结果成功构建pcDNA3.1-PCBP真核表达质粒并且能在MA104细胞中过表达,通过免疫荧光发现上调PCBP1的表达水平后能够促进轮状病毒蛋白的表达,下调PCBP1后,病毒的复制减弱。结论初步证明PCBP1可促进轮状病毒复制,其具体的作用机制还有待进一步研究。

关键词：多聚胞嘧啶结合蛋白(PCBP1) 轮状病毒真核表达质粒 siRNA 病毒复制

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腺苷酸环化酶毒素的生物特性及其在百日咳疫苗中的潜在应用

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中国生物制品学杂志 2021年第12期34卷 1516-1519页

作者：张学(综述) 江文文(审校) 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

腺苷酸环化酶毒素(adenylate cyclase toxin,ACT)是百日咳杆菌分泌的重要毒力因子之一,可通过削弱吞噬细胞、中性粒细胞和T细胞等免疫细胞的杀菌能力来协助百日咳杆菌逃避宿主免疫系统的攻击。虽然ACT是一种具有腺苷酸环化酶活性和溶血... 详细信息

腺苷酸环化酶毒素(adenylate cyclase toxin,ACT)是百日咳杆菌分泌的重要毒力因子之一,可通过削弱吞噬细胞、中性粒细胞和T细胞等免疫细胞的杀菌能力来协助百日咳杆菌逃避宿主免疫系统的攻击。虽然ACT是一种具有腺苷酸环化酶活性和溶血素活性的毒性蛋白,但可通过基因技术方法去除其毒力因素,成为无细胞百日咳(acel-l ular pertussis,aP)疫苗的一种潜在保护性抗原和佐剂。本文就ACT的生物特性及其在aP疫苗中的潜在应用作一综述。

关键词：腺苷酸环化酶毒素生物特性百日咳疫苗免疫原性佐剂

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IL-6对小鼠呼吸系统趋化因子表达谱及免疫细胞组成的影响

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免疫学杂志 2020年第8期36卷 670-675,682页

作者：杨谨溪范琪琪李楠郑惠文李恒杨泽宁陈燕丽候东佩郭磊刘龙丁中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所呼吸道病毒研究室昆明650118

目的探究IL-6对呼吸系统趋化因子表达谱及免疫细胞组成的影响。方法通过real-time PCR对IL-6敲除小鼠的上呼吸道鼻黏膜和下呼吸道肺组织中56种趋化因子及受体的表达谱进行芯片分析,利用流式细胞术对上下呼吸道中免疫细胞组成进行分析;... 详细信息

目的探究IL-6对呼吸系统趋化因子表达谱及免疫细胞组成的影响。方法通过real-time PCR对IL-6敲除小鼠的上呼吸道鼻黏膜和下呼吸道肺组织中56种趋化因子及受体的表达谱进行芯片分析,利用流式细胞术对上下呼吸道中免疫细胞组成进行分析;再使用IL-6蛋白对野生型小鼠进行滴鼻处理,检测鼻黏膜和肺组织内趋化因子表达谱和免疫细胞组成的改变。结果IL-6敲除后小鼠肺组织CXCL5表达显著降低,鼻黏膜中T细胞占比升高,肺组织中肺泡巨噬细胞和CD4^+T细胞占比均降低;IL-6滴鼻后鼻黏膜中CCL3、CXCL2和CXCL3的表达显著升高,肺组织中总白细胞占比显著减少,除中性粒细胞占比增加外,其它免疫细胞均有减少。结论降低或升高IL-6水平均可导致呼吸系统内多种趋化因子表达以及免疫细胞组成发生改变,提示IL-6可调节呼吸系统免疫,尤其是中性粒细胞的免疫反应。

关键词：白细胞介素-6 趋化因子趋化因子受体呼吸系统中性粒细胞

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单纯疱疹病毒2型衣壳支架蛋白ICP35原核表达载体的构建及其表达特性分析

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微生物与感染 2022年第1期17卷 9-17页

作者：王建斌李雪琦王丽春吴化叶程继帅牟唐维李琦涵中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

本研究旨在构建单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus type 2,HSV-2)衣壳支架蛋白ICP35的原核表达载体,并分析其在HSV-2增殖中的表达特性。以HSV-2基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增HSV-2 ICP35的编码基因UL26.5,并克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行诱导表达,将纯化的重组ICP35免疫家兔后获得抗体,采用免疫荧光检测ICP35在HSV-2增殖中的表达特性。结果显示,HSV-2 UL26.5基因的PCR产物大小约为1065 bp,原核表达重组蛋白的相对分子质量约为6.3×10^(4),免疫家兔的血清抗体可特异性识别HSV-2 ICP35。免疫荧光检测结果显示,HSV-2 ICP35可在感染后8 h出现于细胞核周围,12 h表达量进一步增加并向细胞核内聚集,16 h后在细胞核、细胞质内均可检测到聚集成斑点状的衣壳支架蛋白。结果表明,HSV-2 ICP35原核表达载体的成功构建及对其在HSV-2增殖中表达特性的分析,将为研究UL26.5基因的功能、蛋白相互作用、病毒与宿主的相互作用及筛选药物靶标等奠定基础。

关键词：单纯疱疹病毒2型衣壳支架蛋白ICP35 UL26.5 原核表达载体表达特性

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抗肠道病毒71型血清与病毒间的中和量效反应关系

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国际生物制品学杂志 2023年第4期46卷 181-185页

作者：李亚东解裕萍徐敏郎磊赵勇杜宋婷贺凌煜宋杰常亚军中国医学科学院&amp 北京协和医学院医学生物学研究所，昆明　650118 国家药品监督管理局疫苗及生物制品质量控制与评价重点实验室，成都　611731

目的:探讨抗肠道病毒71型(enterovirus 71，EV71)中和血清效价与EV71滴度之间的中和试验量效反应关系。方法:将EV71收获液进行系列梯度稀释后，加入不同动物来源的不同效价的血清进行中和试验，观察细胞病变情况，找到能够完全中和不同... 详细信息

目的:探讨抗肠道病毒71型(enterovirus 71，EV71)中和血清效价与EV71滴度之间的中和试验量效反应关系。方法:将EV71收获液进行系列梯度稀释后，加入不同动物来源的不同效价的血清进行中和试验，观察细胞病变情况，找到能够完全中和不同滴度病毒所需的最低血清效价。结果:随着病毒滴度的增加，需要完全中和病毒所对应的血清效价也相应增加，但血清效价增加的趋势较病毒增加的趋势慢，当病毒滴度增加约120 000倍时，所需的血清效价增加约1 000倍。不同来源的血清对EV71的中和能力相当。结论:初步确立了EV71中和血清与EV71滴度间的中和量效关系。

关键词：肠道病毒71型血清，中和量效关系

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微量动态显色法定量检测EV71灭活疫苗内毒素含量的可行性

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国际生物制品学杂志 2023年第5期46卷 268-272页

作者：常亚军赵王丽葛绕玲乔燕杨宝嘉段男易力宋杰中国医学科学院&amp 北京协和医学院医学生物学研究所，昆明　650118 国家药品监督管理局疫苗及生物制品质量控制与评价重点实验室，成都　611731

目的:研究微量鲎试剂动态显色法定量检测肠道病毒71型灭活疫苗(inactivated enterovirus 71 vaccine, iEV71)内毒素含量的可行性。方法:使用微量鲎试剂动态显色法，进行标准曲线可靠性验证、干扰试验及3批成品测定，同时与凝胶法检测结... 详细信息

目的:研究微量鲎试剂动态显色法定量检测肠道病毒71型灭活疫苗(inactivated enterovirus 71 vaccine, iEV71)内毒素含量的可行性。方法:使用微量鲎试剂动态显色法，进行标准曲线可靠性验证、干扰试验及3批成品测定，同时与凝胶法检测结果比对。结果:标准曲线可靠性验证线性范围为0.005 0~5.000 0内毒素单位(endotoxin unit，EU)/ml，标准曲线决定系数为0.999，线性良好;干扰试验结果显示，供试品稀释10倍加入0.5 EU/ml标准内毒素测定回收率，回收率为94.4%，满足回收率50%~200%的要求，说明该稀释倍数下供试品对反应无干扰。另外，3批成品检测结果均符合标准限要求，且与凝胶法检测结果一致。结论:微量鲎试剂动态显色法可用于iEV71成品内毒素含量的定量检测。

关键词：细菌内毒素微量动态显色法肠道病毒71型灭活疫苗定量检测

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1例AP2M1基因突变致智力发育障碍伴癫痫发作的遗传特征与临床表型分析

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中国优生与遗传杂志 2023年第6期31卷 1241-1245页

作者：王丽段丽芬边成王梓豪张艺褚嘉祐杨昭庆昆明医科大学云南昆明650500 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所医学遗传学研究室云南昆明650118 昆明市儿童医院癫痫中心云南昆明650034

目的分析1例智力发育障碍伴癫痫发作患者的临床表型与遗传学特征,明确患者的临床病因。方法收集患者相关临床资料,采用全外显子组测序对患者及其家系成员进行基因变异筛查,结合既往研究的4例具有相同突变患者的文献报道,分析该基因突变... 详细信息

目的分析1例智力发育障碍伴癫痫发作患者的临床表型与遗传学特征,明确患者的临床病因。方法收集患者相关临床资料,采用全外显子组测序对患者及其家系成员进行基因变异筛查,结合既往研究的4例具有相同突变患者的文献报道,分析该基因突变所致的临床表型及遗传特征。结果患儿,女性,4岁10月龄,运动发育迟缓,智力落后伴有癫痫发作情况。患儿脑电图显示弥漫性棘慢波,慢波显著增多。基因检测结果显示患儿AP2M1基因发生c.508C>T(***170Trp)新发杂合突变。患者父母、哥哥及舅舅基因型为野生型,舅舅有癫痫病史,其他人未见明显临床症状。对国内外相同突变患者的综合分析显示,该基因突变具有不同程度的智力发育障碍、癫痫发作及共济失调等共有表型。结论AP2M1c.508C>T(***170Trp)基因突变为本例患儿的致病原因。本研究表明中国人中存在该基因突变,进一步丰富了智力发育障碍伴癫痫发作疾病的临床表型谱特征,为该病的临床诊治和遗传咨询提供了更多参考数据。

关键词：智力发育障碍癫痫 AP2M1基因基因突变临床表型

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2018年云南省手足口病与疱疹性咽峡炎柯萨奇病毒A6型全基因组比较分析

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中国生物制品学杂志 2023年第9期36卷 1072-1079页

作者：唐姣连张晓琳张志磊南巍巍薛丽蒋海燕张桢孙强明蒋鸿超昆明市儿童医院(昆明医科大学附属儿童医院) 云南昆明650228 大理大学临床医学院云南大理671000 昆明市儿童医院儿科研究所/云南省儿童重大疾病重点实验室云南昆明650228 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室云南昆明650118

目的分析2018年云南省17株引起手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)与疱疹性咽峡炎(herpangina,HA)的柯萨奇病毒A6型(Coxsackievirus A6,CVA6)全基因组特征,了解不同致病CVA6之间的基因差异。方法随机抽取昆明市儿童医院2018年... 详细信息

目的分析2018年云南省17株引起手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)与疱疹性咽峡炎(herpangina,HA)的柯萨奇病毒A6型(Coxsackievirus A6,CVA6)全基因组特征,了解不同致病CVA6之间的基因差异。方法随机抽取昆明市儿童医院2018年临床诊断为HFMD与HA的1909份粪便样本,使用肠道病毒A组通用引物进行检测并筛选CVA6阳性样本。用CVA6全基因组引物进行序列扩增,经BioEdit软件拼接后获得CVA6全基因序列,应用BioEdit、MEGA 7.0、Simplot、Heml 1.0及Phyre2等软件分析CVA6全基因组特征。结果筛选出CVA6阳性样本929份,获得CVA6全基因序列17株(其中9株临床诊断为HFMD,8株临床诊断为HA);17株CVA6在全基因系统进化树上均处于Ⅳ型分支;HA、HFMD代表株未发生明显重组,但在非结构蛋白3D区发生变异;HFMD、HA代表株在VP1的S597T、Q705L和Q663L位点存在差异,在线预测分析发现其VP1二级结构与CVA6原型株一致,未发生改变。结论引起HFMD与HA的17株CVA6之间具有较高的基因组同源性,同时也存在核苷酸及氨基酸差异,这种变化可能对CVA6的复制及适应性产生影响。

关键词：柯萨奇病毒A组6型手足口病疱疹性咽峡炎进化分析重组分析

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