检索结果-内蒙古大学图书馆

链霉菌CPCC 200510产生的大黄酚及其类似物的鉴定

中国医药生物技术 2019年第5期14卷 394-399页

作者：黎林丽李婷江冰娅李书芬刘红宇余利岩何红伟李玉环武临专中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫计委抗生素生物工程重点实验室/中国医学科学院药物合成生物学重点实验室

目的链霉菌具有丰富次级代谢产物合成能力,对链霉菌CPCC 200510 产生的色素类次级代谢产物进行研究。方法对该菌株的次级代谢产物进行乙酸乙酯提取、ODS色谱柱分离、半制备 HPLC 分离纯化、NMR 结构解析和生物活性检测。结果得到 6 个... 详细信息

目的链霉菌具有丰富次级代谢产物合成能力,对链霉菌CPCC 200510 产生的色素类次级代谢产物进行研究。方法对该菌株的次级代谢产物进行乙酸乙酯提取、ODS色谱柱分离、半制备 HPLC 分离纯化、NMR 结构解析和生物活性检测。结果得到 6 个黄色化合物,分别为 1,8-二羟基-3-甲基蒽醌(大黄酚,1)、2-乙酰-1,8-二羟基-3-甲基蒽醌(2)、2-乙酰-1,8-二羟基-3-羧甲基蒽醌(3)、1,2,8-三羟基-3-甲基蒽醌(4)、1-(7-乙酰-8-羟基苯并[de]色烯-2-基)-2-丙酮(5)和1-(8-羟基-2-甲基苯并[de]色烯-7-基)乙酮(6),为一组生物合成相关的芳香聚酮类化合物。其中,1 ~ 3 为链霉菌 CPCC 200510 产生的主要组分。生物活性测定表明,1 ~ 3 具有抗肿瘤细胞或抗病毒活性。结论链霉菌 CPCC 200510 有望作为大黄酚类化合物的微生物产生菌。

关键词：大黄酚链霉菌 CPCC 200510 芳香聚酮

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Sansanmycin生物合成基因簇在天蓝色链霉菌中的异源表达

引用

药学学报 2018年第6期53卷 895-902页

作者：范佳会侍媛媛江志波李星星雷璇解云英王丽非洪斌中国医学科学院、北京协和医学院医药生物技术研究所国家卫生健康委员会抗生素生物工程重点实验室北京100050

Sansanmycins(SSs)是一类由Streptomyces ***产生的尿苷肽类抗生素,具有抗结核分枝杆菌和铜绿假单胞菌活性。该类化合物主要是由4',5'-烯胺-3'-脱氧尿苷通过肽键与假四肽肽链中的N-甲基-2,3-二氨基丁酰基(DABA)相连。为了... 详细信息

Sansanmycins(SSs)是一类由Streptomyces ***产生的尿苷肽类抗生素,具有抗结核分枝杆菌和铜绿假单胞菌活性。该类化合物主要是由4',5'-烯胺-3'-脱氧尿苷通过肽键与假四肽肽链中的N-甲基-2,3-二氨基丁酰基(DABA)相连。为了研究相关基因的功能,进一步利用合成生物学的手段获得SSs的新结构衍生物,本实验克隆了完整的SS生物合成基因簇,并将其在天蓝色链霉菌M1146、M1152和M1154中异源表达。借助于HPLC和LC-HRMS/MS等对重组菌株的发酵液进行分析,结果表明三株异源表达菌株均能产生SS-A,而且M1154异源表达菌株的SS-A产量与未退化的野生型菌株相当。同时从M1154异源表达菌株发酵液中发现了一个可能为新结构的SS类似物SS-1154。

关键词：异源表达天蓝色链霉菌 sansanmycin类似物

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HPLC-MS/MS法发现ssaX阻断菌株中两个尿苷肽类新化合物

引用

中国医药生物技术 2018年第1期13卷 5-12页

作者：江志波侍媛媛任卫聪范佳会雷璇李星星王丽非解云英洪斌中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所/卫计委抗生素生物工程重点实验室北京100050

目的对ssaX基因阻断菌株次级代谢产物中的sansanmycin类似物进行研究,发现新化合物。方法对Streptomyces ***野生菌株及ssa X基因阻断株的发酵液分别进行固相萃取,收集60%甲醇水洗脱液进行HPLC-MS/MS分析。通过与文献报道的已知化合物... 详细信息

目的对ssaX基因阻断菌株次级代谢产物中的sansanmycin类似物进行研究,发现新化合物。方法对Streptomyces ***野生菌株及ssa X基因阻断株的发酵液分别进行固相萃取,收集60%甲醇水洗脱液进行HPLC-MS/MS分析。通过与文献报道的已知化合物数据相比较的方法,分析其中sansanmycin类化合物结构并利用MS/MS对其结构进行确证。结果从ssa X基因阻断株的发酵液中发现了8个sansanmycin类化合物,其中SS-MX-7和SS-MX-8为新结构化合物。SS-MX-7化学结构中假四肽肽链上的第一位和第四位氨基酸残基均为酪氨酸取代,而SS-MX-8的这两个位置均为苯丙氨酸。结论 ssa X基因阻断株产生的两个新sansanmycin类似物,进一步丰富了尿苷肽类化合物的结构多样性,同时也为利用HPLC-MS/MS方法在其他重组菌株中发现尿苷肽类新化合物奠定了基础。

关键词：尿苷肽类化合物 Streptomyces sp.SS Sansanmycins HPLC-MS/MS

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

双靶向配体化力达霉素DTLL的制备优化和稳定性研究

引用

中国医药生物技术 2018年第3期13卷 193-200页

作者：叶程曹睿宋文凭李良李毅赵春燕李亮邵荣光中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所肿瘤室/卫生部抗生素生物工程重点实验室北京100050

目的通过对具有高效抗肿瘤活性的类抗体偶联药物—--双靶向配体化力达霉素(DTLL)制备过程的优化,获得纯度高和活性强的DTLL产品;探讨影响DTLL稳定性的主要因素,为临床申报和工业化生产提供依据。方法分别对DTLL前体(DTLP)蛋白表达载体... 详细信息

目的通过对具有高效抗肿瘤活性的类抗体偶联药物—--双靶向配体化力达霉素(DTLL)制备过程的优化,获得纯度高和活性强的DTLL产品;探讨影响DTLL稳定性的主要因素,为临床申报和工业化生产提供依据。方法分别对DTLL前体(DTLP)蛋白表达载体、宿主菌株、表达温度、诱导剂终浓度、菌体密度和诱导时间进行优化。以高压破碎法提取可溶性目的蛋白,采用Ni+亲和与分子筛层析两步纯化,得到高纯度DTLP,再与力达霉素发色团组装获得DTLL。采用HPLC、MTS、ELISA法进行稳定性试验,分别监测DTLL冻干样品的蛋白纯度、发色团含量、细胞毒和亲和力活性的变化。结果经过发酵提取工艺优化,每升发酵液所得DTLP蛋白约为22 mg,是优化前每升9 mg的2.4倍,其蛋白纯度达到99.7%;DTLL组装效率达到68%;稳定性试验结果显示,DTLL冻干样品对光照敏感,在–80℃低温避光环境下可稳定保存。结论成功优化了双靶向配体化力达霉素DTLL的制备工艺,提升了产品纯度和产率,为其后续生产和临床申报提供了实验基础,也为其他抗体偶联药物的制备提供了较成熟完善的技术平台。

关键词：重组融合蛋白质类蛋白质稳定性制备工艺配体化力达霉素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

盐酸石蒜碱通过Akt/Smad通路抑制肝星状细胞增殖与活化

引用

中国医药生物技术 2018年第4期13卷 300-304页

作者：张镱萱葛茂旭张娜牛伟晓鲍云洋赵午莉刘虹邵荣光何红伟中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所国家卫生健康委员会抗生素生物工程重点实验室北京100050

目的探索并验证盐酸石蒜碱(LH)抗肝纤维化活性,并初步阐明其机制,为LH研发成为抗肝纤维化药物提供理论支持。方法利用I型胶原α1(COL1A1)启动子-荧光素酶报告系统筛选LH抗肝纤维化活性,利用SRB方法检测LH对人肝星状细胞LX2增殖的影响。... 详细信息

目的探索并验证盐酸石蒜碱(LH)抗肝纤维化活性,并初步阐明其机制,为LH研发成为抗肝纤维化药物提供理论支持。方法利用I型胶原α1(COL1A1)启动子-荧光素酶报告系统筛选LH抗肝纤维化活性,利用SRB方法检测LH对人肝星状细胞LX2增殖的影响。通过TGF-β1诱导LX2细胞活化建立体外肝纤维化模型,运用q RT-PCR和Western blot方法检测不同浓度LH对肝纤维化标志基因转录水平以及蛋白表达水平的抑制作用。Western blot方法检测肝纤维化相关信号通路的蛋白表达变化。结果 LH可剂量依赖性地抑制COL1A1基因启动子活性,提示其可能有抗肝纤维化活性。LH显著抑制肝星状细胞LX2的增殖,其对LX2细胞的IC_(50)值为(9.79±1.02)μmol/L;LH可以抑制活化的LX2细胞肝纤维化相关基因的mRNA和蛋白的水平;LH可以抑制Akt/Smad信号通路的活性。结论 LH可能通过Akt/Smad信号通路抑制肝星状细胞增殖与活化,从而发挥抗肝纤维化的作用。

关键词：肝硬化盐酸石蒜碱 Akt/Smad信号通路

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

波拉霉素发酵工艺的优化

引用

中国医药生物技术 2018年第2期13卷 163-168页

作者：孙正阳吕广新孟浩毅赵晨杨兆勇陈静华北理工大学基础医学院唐山063210 国家粮食局科学研究院北京100037 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所国家卫生和计划生育委员会抗生素生物工程重点实验室北京100050

目的对吸水链霉菌LP93的发酵培养基及发酵条件进行优化,获得波拉霉素最优发酵条件,为其工业化生产的小型中试发酵工艺提供依据。方法以枯草芽孢杆菌为检定菌株进行波拉霉素发酵液活性测定,以抑菌圈直径为提示指标,通过摇瓶试验确定最优... 详细信息

目的对吸水链霉菌LP93的发酵培养基及发酵条件进行优化,获得波拉霉素最优发酵条件,为其工业化生产的小型中试发酵工艺提供依据。方法以枯草芽孢杆菌为检定菌株进行波拉霉素发酵液活性测定,以抑菌圈直径为提示指标,通过摇瓶试验确定最优发酵工艺。结果波拉霉素发酵最佳的氮源为黄豆饼粉3.0%+(NH4)2SO4 0.5%、最佳碳源为葡萄糖3.5%、发酵72 h时补加1%葡萄糖和0.5%黄豆饼粉、最终发酵96 h,且豆油和泡敌添加量为0.5%和0.05%时,对波拉霉素发酵无影响。结论为波拉霉素中试发酵条件的确定提供了依据。

关键词：发酵工艺优化波拉霉素

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用异源正调控基因acyB2构建埃莎霉素Ⅰ高产菌株

引用

中国生物工程杂志 2017年第3期37卷 65-72页

作者：戴剑漉卢智黎林灵王以光赫卫清中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所国家卫计委抗生素生物工程重点实验室北京100050 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030

必特螺旋霉素(bitespiramycin,BT)是以异戊酰螺旋霉素(简称为埃莎霉素)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ为主要成分的多组分抗生素。通过阻断3-O-酰基转移酶基因(sspA),获得了只产埃莎霉素Ⅰ的WSJ-2菌株,但其发酵产物中含有大量螺旋霉素,而埃莎霉素Ⅰ含量较... 详细信息

必特螺旋霉素(bitespiramycin,BT)是以异戊酰螺旋霉素(简称为埃莎霉素)Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ为主要成分的多组分抗生素。通过阻断3-O-酰基转移酶基因(sspA),获得了只产埃莎霉素Ⅰ的WSJ-2菌株,但其发酵产物中含有大量螺旋霉素,而埃莎霉素Ⅰ含量较低。为提高4″-异戊酰基转移酶基因(ist)在WSJ-2中的表达水平,从而提高埃莎霉素Ⅰ的产量,首先构建了含有ist基因和其正调控基因acyB2连锁片段的重组质粒pSET152-ia,然后将其导入到埃莎霉素Ⅰ产生菌WSJ-2中,通过具有阿普拉霉素(apramycin)抗性标记的链霉菌整合型载体pSET152整合到WSJ-2的染色体上,获得新的埃莎霉素Ⅰ产生菌WSJ-IA。在不同发酵时间定量检测ist的表达水平,WSJ-IA中ist的表达量要明显高于WSJ-2。WSJ-IA高产菌株的发酵单位从(280±20)μg/ml提高至(1160±108)μg/ml,较原始菌株WSJ-2提高了314%,而且在WSJ-IA发酵产物中埃莎霉素Ⅰ与螺旋霉素Ⅰ含量的比值是WSJ-2的2.4倍左右,说明在引入acyB2基因的同时提高了菌株的发酵单位和埃莎霉素Ⅰ的产量。

关键词：埃莎霉素Ⅰ 4″-异戊酰基转移酶基因(ist) 正调控基因acyB2

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

济南游动放线菌CPCC 200056产生的3-去甲创新霉素发现与鉴定

引用

药学学报 2016年第1期51卷 105-109页

作者：左利杰赵薇江志波江冰娅李书芬刘红宇余利岩洪斌胡辛欣游雪甫武临专中国医学科学院、北京协和医学院医药生物技术研究所卫计委抗生素生物工程重点实验室北京100050

创新霉素是我国科学家于20世纪70年代从游动放线菌中发现的一个具有含氮、含硫杂环新骨架的抗生素,曾作为抗菌药物进行了应用开发等研究。本研究采用ISP2固体培养基对创新霉素产生菌——济南游动放线菌CPCC 200056进行了发酵培养、乙酸... 详细信息

创新霉素是我国科学家于20世纪70年代从游动放线菌中发现的一个具有含氮、含硫杂环新骨架的抗生素,曾作为抗菌药物进行了应用开发等研究。本研究采用ISP2固体培养基对创新霉素产生菌——济南游动放线菌CPCC 200056进行了发酵培养、乙酸乙酯萃取、TLC和LC-MS分析,发现了第一个天然的创新霉素类似物组分。经分离纯化和NMR解析,确定该类似物为3-去甲创新霉素(3-demethylchuangxinmycin),为新天然产物。与创新霉素相比,3-去甲创新霉素的抗菌活性比创新霉素显著降低。3-去甲创新霉素的发现不仅丰富了对创新霉素构效关系的认识,而且为研究创新霉素生物合成机制提供了线索。

关键词： 3-去甲创新霉素创新霉素济南游动放线菌CPCC 200056

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

海洋来源的D-海因酶产生菌的分离及酶催化通道模拟分析

引用

农业生物技术学报 2016年第5期24卷 729-737页

作者：李亚东汪康游樊帅杨兆勇田喜凤许乐幸金媛媛华北理工大学基础医学院中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所/卫生部抗生素生物工程重点实验室浙江医药高等专科学校

为获取全新来源并具有潜在高性能的海因酶,本研究通过对海洋沉积物进行以D-对羟基苯海因作为唯一氮源的选择培养基对潜在菌株进行初步筛选,然后通过双层琼脂法和微孔快速筛选法对初筛菌株进行复筛,并结合分子生物学筛选方法进行终筛,最... 详细信息

为获取全新来源并具有潜在高性能的海因酶,本研究通过对海洋沉积物进行以D-对羟基苯海因作为唯一氮源的选择培养基对潜在菌株进行初步筛选,然后通过双层琼脂法和微孔快速筛选法对初筛菌株进行复筛,并结合分子生物学筛选方法进行终筛,最终得到桔橙小单胞菌（Micromonospora aurantiaca,Gen Bank登录号:FJ547135.1）、金色链霉菌（Streptomyces aureofaciens,Gen Bank登录号:AB326923.1）、桑氏链霉菌（Streptomyces sampsonii,Gen Bank登录号:GU238264.1）和链霉菌7-145（Streptomyces sp.7-145,Gen Bank登录号:JQ782979.2）4株产D-海因酶的阳性链霉菌。用兼并引物扩增4株阳性菌中的D-海因酶表达序列,转化大肠杆菌（Escherichia coli）,并构建表达相应D-海因酶的工程菌株*** S1、*** S14、*** S29和*** S145,提纯4种D-海因酶,并测定酶的酶活和动力学参数。结果显示,链霉菌7-145菌株中表达的海因酶活性最高,比活力为9.7 U/mg,催化速度常数Kcat=3.2×10-6/s,Km=9.5 mmol/L。最后利用Swiss-model软件对其进行在线同源模建和Caver Analyst软件对链霉菌7-145菌株来源的海因酶的催化通道进行结构模拟分析。模拟分析结果显示,本研究中D-海因酶的主要催化通道Tunnel;长度为9.1?,瓶颈氨基酸残基为59位的组氨酸、181位的组氨酸和313位的谷氨酸,瓶颈半径为2.18?;潜在的催化通道Tunnel;长度为13.6?,瓶颈氨基酸为62位的苏氨酸、93位的天冬酰胺和107位的色氨酸,瓶颈半径为1.52?。如果对Tunnel;通道中的62位的苏氨酸、93位的天冬酰胺和107位的色氨酸进行定点突变,有望开发出一种性能更优的D-海因酶。本研究提供了一种全新的海因酶阳性菌筛选体系,通过计算机模拟手段能够更直观了解海因酶的催化机制,为进一步获得性能更优的海因酶奠定基础。

关键词： D-海因酶 D-对羟基苯甘氨酸 D-对羟基苯海因海洋链霉菌 Caver Analyst

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

应用CAS液体检测法高效筛选铁色素工程菌

引用

中国抗生素杂志 2016年第6期41卷 429-434页

作者：汪康游刘娟娟孙婉王以光武英杨兆勇华北理工大学公共卫生学院唐山063000 中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所卫生部抗生素生物工程重点实验室北京100050

目的基于CAS琼脂检测法重新建立快速高效的检测铁色素的方法,并尝试应用在铁色素工程菌株筛选中。方法以albomycin产生菌株作为对照菌株,去除CAS琼脂平板法中的琼脂,构建CAS液体检测法,通过观察溶液变色情况进行初步筛选得到结果,运用H... 详细信息

目的基于CAS琼脂检测法重新建立快速高效的检测铁色素的方法,并尝试应用在铁色素工程菌株筛选中。方法以albomycin产生菌株作为对照菌株,去除CAS琼脂平板法中的琼脂,构建CAS液体检测法,通过观察溶液变色情况进行初步筛选得到结果,运用HPLC方法加以验证。结果应用CAS液体检测法对铁色素工程菌进行检测,初步确定构建的工程菌株中存在铁色素含量高于野生型的菌株。结论 CAS液体检测法可以快速高效检测铁色素工程菌产生的铁色素,为筛选产铁色素工程菌株提供有效、方便、快捷的方法。

关键词：铁色素 CAS液体检测法

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：