检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医药生物技术 2017年第3期12卷 201-206页

作者：任金凤蒙建州赵跃王菊仙中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所有机合成室北京100050

目的设计合成新型酰腙席夫碱类化合物,并评价其体外抗结核分枝杆菌活性。方法以羟基苯甲醛为起始原料,经酰肼化、脱水缩合反应制备目标化合物,其结构均经MS和~1H-NMR分析确证。采用平皿二倍稀释法测定目标化合物体外抗结核杆菌标准株(H3... 详细信息

目的设计合成新型酰腙席夫碱类化合物,并评价其体外抗结核分枝杆菌活性。方法以羟基苯甲醛为起始原料,经酰肼化、脱水缩合反应制备目标化合物,其结构均经MS和~1H-NMR分析确证。采用平皿二倍稀释法测定目标化合物体外抗结核杆菌标准株(H37Rv)的最小抑菌浓度(MIC)。结果合成20个新型酰腙席夫碱类化合物,部分化合物具有一定的抗结核活性,其中化合物b1~b5具有较好的体外抗结核分枝杆菌活性,化合物b2、b3和b5体外抗结核分枝杆菌活性(MIC<0.125μg/ml)是先导化合物IMB-HC109(MIC=0.25μg/ml)的2倍以上。结论目标化合物结构中A部分含有2-吡啶羰基或4-吡啶羰基片段,B部分含有3-苯甲醚或4-苯甲醚片段,C部分含有吡啶基片段有利于提高该类化合物体外抗结核活性,其中化合物b2、b3和b5的体内抗结核分枝杆菌活性值得进一步研究。

关键词：化学技术,合成抗结核药酰腙席夫碱

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含有芳杂环片段的喹诺酮类化合物的设计、合成与体外抗病毒活性

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中国医药生物技术 2017年第2期12卷 117-122页

作者：李宵宁殷金秋柴芸李玉环高荣梅刘明亮中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所有机化学室北京100050

目的设计合成一系列含有芳杂环片段的喹诺酮类化合物,并评价其体外抗人类巨细胞病毒(HCMV)和抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)活性。方法 N-芳杂环基哌嗪与喹诺酮母核化合物通过亲核取代反应制备目标物,其结构经~1H-NMR、^(13)C-NMR、MS和HRMS... 详细信息

目的设计合成一系列含有芳杂环片段的喹诺酮类化合物,并评价其体外抗人类巨细胞病毒(HCMV)和抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)活性。方法 N-芳杂环基哌嗪与喹诺酮母核化合物通过亲核取代反应制备目标物,其结构经~1H-NMR、^(13)C-NMR、MS和HRMS确证。CPE法测定所有目标物对细胞的TC_(50)及对HCMV和HSV-1的IC_(50)值。结果合成了22个喹诺酮类化合物(包括先导物WC5)。部分目标物对HCMV和(或)HSV-1有抑制作用,其中化合物19对HSV-1的IC_(50)为(2.18±0.30)μg/ml,略弱于WC5的(1.68±0.25)μg/ml。结论丰富了喹诺酮类化合物抗病毒构效关系,并为下一步设计合成活性喹诺酮类化合物奠定基础。

关键词：喹诺酮类化学技术,合成抗病毒药疱疹病毒1型,人巨细胞病毒

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抗丙型肝炎病毒药物

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中国医药生物技术 2017年第1期12卷 54-62页

作者：仲兆金李卓荣中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所有机化学室北京100050

丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）是肝脏疾病的主要病因,全球范围约有1.85亿人感染,连同隐匿性感染可能再增加20%~30%[1]。持久性HCV感染与肝纤维化和肝硬化、肝功能衰竭或肝癌的发展有关,并且是肝移植最常见的适应证。

关键词：丙型肝炎病毒病毒药物 HCV感染肝功能衰竭肝脏疾病肝纤维化肝硬化持久性

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氨基取代苄腈类化合物设计合成和HCV抑制活性

氨基取代苄腈类化合物设计合成和HCV抑制活性

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第十三届全国抗生素学术会议

作者：姜心贝蒋智陈金花李健蕊扈金萍王宝莲史兴鹏李卓荣彭宗根李艳萍中国医学科学院/北京协和医学院医药生物技术研究所中国医学科学院/北京协和医学院药物研究所

为了寻找新颖作用机制的HCV抑制剂,我们利用表型筛选细胞模型对自建化合物库进行筛选获得了一个新结构HCV抑制剂1。1是一个取代苄腈类未经文献报道的中间体化合物,体外对HCV具有中等抑制活性,ECso在微摩尔水平（186μM）,虽然选择性指... 详细信息

为了寻找新颖作用机制的HCV抑制剂,我们利用表型筛选细胞模型对自建化合物库进行筛选获得了一个新结构HCV抑制剂1。1是一个取代苄腈类未经文献报道的中间体化合物,体外对HCV具有中等抑制活性,ECso在微摩尔水平（186μM）,虽然选择性指数较低（SI=10）,但其在HCV复制子细胞模型上没有显示出抑制活性,说明化合物1可能具有与现有药物不同的作用机制。本研究对化合物1进行了结构优化和构效关系研究,合成了20个取代苄腈类新化合物,通过体外抗病毒活性测定,找到了两个活性(EC=0.85和0.33μM)和选择性指数（SI=181和118）均有明显提高的化合物（15和18）,并进一步确认了这类化合物的抗病毒活性并非源于对HCV复制环节的抑制。为了考察这类药物的口服吸收性质,我们初步考察了化合物15在大鼠体内的生物利用度。结果显示化合物15的口服Cmax低,生物利用度仅为3.8%,说明这类化合物口服吸收差。利用CHEMDRAW计算该化合物的clogP为4.56,推测口服吸收困难可能是因为亲脂性过强,导致透膜吸收降低。同时甲苯片段也是容易代谢基团,可能是生物利用度低的另一个原因。目前我们开始对这类化合物进行第二轮优化,已经得到显著提高抗病毒活性的结构信息,正设计引入明显改善理化性质的基团和片段,后续研究还将通过化学生物学手段对抗病毒机制做深入研究和阐述,并发表详细数据。

关键词： HCV 细胞模型口服吸收生物利用度化合物抑制活性

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基因组分析指导的海洋链霉菌IMB3-202活性物质的发现

基因组分析指导的海洋链霉菌IMB3-202活性物质的发现

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第十三届全国抗生素学术会议

作者：王冕郝晓萌胡媛媛谭亿王以光甘茂罗肖春玲中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所

当前,耐药细菌的快速传播,尤其是产KPC碳青酶烯酶和新德里金属-β-内酰胺酶(NMD)的多重耐药阴性菌的出现,使得临床上作为阴性菌"最后防线"的碳青霉烯类抗菌药物失去原有效力而对人类健康构成了严重的威胁。为应对细菌耐药问题... 详细信息

当前,耐药细菌的快速传播,尤其是产KPC碳青酶烯酶和新德里金属-β-内酰胺酶(NMD)的多重耐药阴性菌的出现,使得临床上作为阴性菌"最后防线"的碳青霉烯类抗菌药物失去原有效力而对人类健康构成了严重的威胁。为应对细菌耐药问题,研发新型的抗耐药菌药物成为当务之急。放线菌是抗生素药物的重要来源。2000年以来,从海洋放线菌中发现的一系列高效、新颖的先导化合物,使海洋放线菌引起了广泛的关注。与此同时,基因组测序技术的迅速,使得微生物基因组大规模测序得以开展。根据Integrated Microbial Genomes在线数据库的数据,目前,已经公开的微生物基因组完成图达到6762个。对天蓝色链霉菌等模式放线菌基因组分析发现,其可能合成的产物比预计的要丰富的多,一种放线菌存在多达30-50种次级代谢生物合成基因]。此外,随着对天然产物生物合成机制的深入理解,从基因水平预测微生物产物结构成为可能。因此,基于基因组序列分析,挖掘并发现微生物中新的活性天然产物成为近年的研究热点。在从海洋放线菌筛选新抗生素的过程中,我们对黄海分离的放线菌发酵产物进行活性筛选,其中50株显示出铜绿假单胞菌抗菌活性,其中5株菌的发酵产物显示抗多重耐药摩氏摩根菌活性。为了解菌株的次级代谢潜能,我们对其中一株活性菌株—海洋链霉菌Streptomyces *** 3-202进行了基因组测序。利用AntiSMASH对基因组进行分析,发现20个潜在的次级代谢生物合成基因簇,其产物有铁载体、非核糖体肽(NPRS)、萜、氨基糖苷、聚酮(PKS)、吲哚等结构类型。其中,基因簇Cluster 8与星孢菌素(staurosporine)、蝴蝶霉素(rebeccamycin)、cladoniamide等吲哚类抗生素的生物合成基因显示出较高的同源性。因此,推测该菌株可能产生吲哚类抗生素。为促进该基因表达,我们设计了含有3%海盐和不含海盐两类共14种发酵培养基,通过LC-MS分析,发现部分发酵产物中显示有星孢菌素类成分。通过大量发酵和系统的分离纯化,从中分离得到4个化合物。利用UV、NMR、MS等波谱学方法鉴定这些化合物的结构分别为,星孢菌素(1)及其衍生物antibiotic RK286C(2)、holyrineA(3)和antibiotic K 252c(4)。体活性实验表明,星孢菌素对铜绿假单胞菌显示出一定的抗菌活性,MIC值为64-128μg·mL,同时也对金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌和白色念球菌具有较弱的抗菌活性,MIC值为128-256μg·mL之间。利用MTT法测定化合物以人体外抗肿瘤细胞的活性,化合物1对骨肉瘤U2OS、宫颈癌Hela细胞、结直肠癌HCT116和乳腺癌MCF-7、肺癌H1460、肺腺癌细胞A549等肿瘤细胞显示出很强的抑制活性(IC50:0.63uM,0.0008uM,0.012uM,0.338uM,0.066uM,0.019uM),化合物2-4对宫颈癌Hela细胞、结直肠癌HCT116和乳腺癌MCF-7等肿瘤细胞显示出很强的抑制活性,对宫颈癌Hela细胞(IC50:0.00075uM,0.09uM,2.11uM),结直肠癌HCT116(IC50:0.012uM,0.033uM,5.085uM),乳腺癌MCF-7(IC50:0.333uM,1.187uM,8.59uM)。

关键词：海洋放线菌基因组挖掘星孢菌素耐药菌细胞毒

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海南亚龙湾红树林放线菌的分离及抗阴性革兰氏菌活性物质的研究

海南亚龙湾红树林放线菌的分离及抗阴性革兰氏菌活性物质的研究

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第十三届全国抗生素学术会议

作者：胡媛媛李娇郝晓萌王冕段艳波甘茂罗中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所

近十年来,革兰氏阴性（G-）菌耐药状况日益严重,尤以耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（肺炎克雷伯、大肠埃希菌杆菌等）和非发酵细菌（鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌等）耐药问题最为突出。然而,随着细菌耐药日益严重,具有全新结构骨架和作用机... 详细信息

近十年来,革兰氏阴性（G-）菌耐药状况日益严重,尤以耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（肺炎克雷伯、大肠埃希菌杆菌等）和非发酵细菌（鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌等）耐药问题最为突出。然而,随着细菌耐药日益严重,具有全新结构骨架和作用机制的新型抗菌药物研发严重匮乏。放线菌是抗生素的最重要的生物来源。现今发现的2万多种微生物来源的天然抗生素化合物,约40%是由放线菌产生。因此,研发新型有效的抗阴性菌药物成为刻不容缓的全球性课题。红树林分布于热带和亚热带海陆潮间带,拥有独特而高生产力的湿地生态系统,作为一种从陆地向海洋过度的森林生态系统蕴藏着巨大的生物多样性。从红树林放线菌分离的化合物具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等生物活性。因此,红树林是筛选和发现放线菌新物种和生物活性次级代谢产物的宝贵资源。本文旨在勘探海南红树林地区的沉积物中放线菌多样性,为发现放线菌新物种和新抗生素奠定基础,并对具有抗阴性革兰氏菌的放线菌进行筛选。本研究选取3份来自红树林海岸沉积物的样品采用3种预处理方法,11种分离培养基进行分离;通过PCR扩增,并比对16S rRNA基因序列及抗菌活性测定进行初步鉴别;经液体发酵,发酵产物离心后,上清经XAD7HP大孔树脂色谱手段获得提取物,通过琼脂纸片扩散法对样品进行抗菌活性筛选,并运用HPLC、LC-MS等方法对其代谢产物进行分析。经表观形态特征排重,从3份海洋沉积物种共分离菌株103株（包括35株细菌,68株放线菌）,分布于15科19属,其中链霉菌属为优势菌属,菌株IMB16-140的16S rRNA基因序列与最近有效菌株Saccharopolyspora gloriosae（EU005371）的相似率为97.74%。发酵103株菌,发酵提取物活性结果表明,对至少一种检定菌显示活性的共68株,总阳性率为66%;对至少一种革兰氏阴性检定菌有活性的有37株,包括5株对肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）ATCC700603有活性,10株对铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）ATCC 27853有活性,16株对"超级耐药菌"摩氏摩根抗性菌（Morganella morganii）KL-225有活性;对至少一种阳性菌有活性的共有31株,包括15株对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌（MRSA）R6101有活性。利用PCR扩增对18株菌株进行FADH依赖型卤化酶、dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶（dTGD）、L-色氨酸聚合酶（StaD）等生物合成基因进行筛选,获得含FADH依赖型卤化酶、dTDP-葡萄糖-4,6-脱水酶（dTGD）、L-色氨酸聚合酶（StaD）等生物合成基因的潜在菌株分别6、9、1株。对菌株IMB16-191进行基因组测序,通过antiSMASH 4.0对次级代谢生物基因进行分析,提示这些菌株产生的次级代谢产物结构类型可能有萜烯、Ⅰ型聚酮合酶（T1pks）、Ⅱ型聚酮合酶（T2pks）、非核糖体肽（NRPS）、羊毛硫肽类（Lantipeptide）等。从中可以看出红树林沉积物中存在较为丰富的放线菌资源,且有从中发现放线菌新物种及新抗生素的潜力。

关键词：红树林放线菌多样性生物活性基因挖掘抗革兰氏阴性菌

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以莽草酸激酶为靶点的新型抗结核先导化合物的发现

以莽草酸激酶为靶点的新型抗结核先导化合物的发现

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第十三届全国抗生素学术会议

作者：王霞朱宁屿姜威司书毅北京协和医学院&中国医学科学院医药生物技术研究所

结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的一种严重危害人类健康的传染性疾病,自古以来就是人类的主要致死性疾病之一。上世纪四十年代以来随着链霉素、异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氟喹诺酮等抗结核药... 详细信息

结核病是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)引起的一种严重危害人类健康的传染性疾病,自古以来就是人类的主要致死性疾病之一。上世纪四十年代以来随着链霉素、异烟肼、利福平、吡嗪酰胺、乙胺丁醇、氟喹诺酮等抗结核药物的发现以及联合治疗方案的推广优化,使得结核的发病率和死亡率曾一度大幅下降。但近年来随着艾滋病的广泛传播和结核分枝杆菌耐药性的不断加剧,以及吸毒,贫困及人口流动等因素的影响,全球范围内结核病的疫情骤然恶化。然而,近几十年来仅有强生公司的新型结核分枝杆菌ATP合酶抑制剂Sirturo(bedaquiline,贝达喹啉)和日本大冢公司的Deltyba(delamanid,地依麦迪)两种抗结核药物被批准上市,但目前已有耐药菌株出现和引起副作用的报道。因此发现新的高效低毒的抗结核药物刻不容缓。通过查阅文献,我们发现莽草酸途径(shikimate pathway)是细菌、真菌、藻类和高等植物合成芳香族氨基酸、叶酸、泛醌、分枝菌酸、萘醌等必需物质的一条重要代谢途径。据文献报道该途径如果被阻断,结核分枝杆菌生长则被完全抑制。莽草酸途径只存在于细菌、真菌、藻类和植物中,而人体须从外界环境摄取必需芳香族氨基酸,体内不存在该途径。因此以此途径中的关键酶作为抗结核靶点,选择性较高,可能对人体无害。在本文中,我们以结核分枝杆菌莽草酸途经中的莽草酸激酶(SK)作为靶点,建立了一种莽草酸激酶抑制剂的筛选模型。我们首先以耻垢分枝杆菌mc155作为检定菌,对本室保存的的12万个化合物进行细胞水平的抗菌活性评价,得到300个阳性化合物样品的结构。随后从结核分枝杆菌基因组中扩增出aroK基因(RV2539c),利用构建的原核表达系统pET30a-SK在大肠杆菌中成功表达了莽草酸激酶蛋白。采用Promega公司的荧光试剂盒法建立了酶水平的SK抑制剂高通量筛选模型,利用该模型对以上筛选到的300个化合物进行复筛,得到3个对SK蛋白有抑制作用的阳性化合物。体外酶水平实验表明,化合物WX-316、WX-317、和WX-318对结核分枝杆菌SK表现出抑制作用,IC值分别为4.489μg/ml、34.52μg/ml、2.646μg/ml。MTT实验表明,化合物WX-316、WX-317、和WX-318对哺乳动物细胞的毒性很低。SPR实验表明化合物WX-318与SK蛋白具有较好的亲和力。这三个化合物对莽草酸激酶的抑制作用均为首次报道,为发现新型抗结核分枝杆菌药物奠定了基础。

关键词：结核分枝杆菌莽草酸激酶抗结核药物药物筛选

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基于PCSK9靶点的小分子下调剂的发现与研究

基于PCSK9靶点的小分子下调剂的发现与研究

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第十三届全国抗生素学术会议

作者：王雪蕾王丽洪斌中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所

我国心血管病患病率及死亡率处于上升阶段,位居各种死亡病因首位。血浆脂蛋白水平的异常是导致心血管疾病的主要危险因素。PCSK9通过介导LDLR降解,调节血浆LDL-C水平,在体内胆固醇代谢中发挥着重要作用。本工作以PCSK9转录水平为靶点,... 详细信息

我国心血管病患病率及死亡率处于上升阶段,位居各种死亡病因首位。血浆脂蛋白水平的异常是导致心血管疾病的主要危险因素。PCSK9通过介导LDLR降解,调节血浆LDL-C水平,在体内胆固醇代谢中发挥着重要作用。本工作以PCSK9转录水平为靶点,构建细胞水平的高通量药物筛选模型,对国家新药（微生物）筛选实验室化合物库进行大规模筛选,从5,200样次化合物中筛选得到活性化合物7031B-H9。该化合物可以浓度依赖性的下调PCSK9的转录活性,其IC为6.87μM。7031B-H9能显著下调HepG2细胞中PCSK9mRNA的水平和蛋白水平;同时,还能增加HepG2细胞LDLR的表达。功能分析结果表明,7031B-H9能够促进HepG2细胞对DiI-LDL的摄取,有望成为新型降脂药物先导化合物或候选物。

关键词： PCSK9 基因表达调控转录水平

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垂柯霉素抗结肠癌作用机理研究

垂柯霉素抗结肠癌作用机理研究

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第十三届全国抗生素学术会议

作者：赵曦齐小强弓建华白利平中国医学科学院-北京协和医学院医药生物技术研究所

结肠癌是人类胃肠道中常见的恶性肿瘤,发病率高,死亡率高,肿瘤相关炎症是肿瘤发生发展过程中重要机制之一,针对促炎细胞因子的受体靶向药物已广泛应用于各种肿瘤治疗。垂柯霉素是本实验室从真菌发酵液中分离得到的一个新结构的白细胞介... 详细信息

结肠癌是人类胃肠道中常见的恶性肿瘤,发病率高,死亡率高,肿瘤相关炎症是肿瘤发生发展过程中重要机制之一,针对促炎细胞因子的受体靶向药物已广泛应用于各种肿瘤治疗。垂柯霉素是本实验室从真菌发酵液中分离得到的一个新结构的白细胞介素6(IL-6)受体拮抗剂,已申请发明专利(200510082974.X);药物渗透性实验结果表明,垂柯霉素为口服吸收良好药物,我们通过口服灌胃给药进行了急性毒性实验,确定其1.2 g/kg时无明显毒性。结肠癌HT29裸鼠移植瘤实验证明,垂柯霉素可以显著抑制结肠肿瘤的生长,抑制率为62.70%;灌胃给药后4.85小时达到最高血药浓度4.2μM;肿瘤组织中IL-6检测结果表明,与对照组及顺铂组相比,垂柯霉素组分别降低30.8%和30.5%。体外抗肿瘤机理研究表明:垂柯霉素在10μM时不具有细胞毒,可以显著抑制结肠癌相关巨噬细胞IL-6和TNFα的转录及分泌,及结肠癌细胞和结肠癌基质细胞中JAK/STAT3和IKK/NF-κB信号通路;由此我们猜测垂柯霉素是否通过作用于NF-κB的磷酸化来抑制JAK/STAT3通路,采用siRNA干扰抑制了NF-κB的磷酸化后,垂柯霉素对NF-κB抑制作用消失,对STAT3磷酸化的抑制作用不变,说明垂柯霉素对JAK/STAT3通路的抑制并不依赖于NF-κB的激活,可能存在多个靶点。以上结果说明,垂柯霉素作为一种新结构IL-6受体拮抗剂,可以通过抑制结肠癌细胞、结肠癌基质细胞中促炎因子IL-6、INFα的分泌,以及JAK/STAT3和IKK/NF-κB信号通路来抑制结肠癌肿瘤的生长,并且可能是作为一个多靶点药物发挥作用。

关键词：结肠癌促炎因子受体靶向药物

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印度洋深海沉积物真菌和放线菌多样性及其抗菌活性

印度洋深海沉积物真菌和放线菌多样性及其抗菌活性

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第十三届全国抗生素学术会议

作者：李娇郝晓萌胡媛媛段艳波关艳肖春玲甘茂罗中国医学科学院北京协和医学院医药生物技术研究所

当前,细菌耐药特别是革兰氏阴性菌的耐药性对人类健康构成了严重的威胁。临床上安全有效的治疗多药耐药革兰氏阴性菌感染的药物极度缺乏,全球范围内处于临床研究的抗阴性菌候选药物更是寥寥无几。2017年,世卫组织根据对新型抗生素的迫... 详细信息

当前,细菌耐药特别是革兰氏阴性菌的耐药性对人类健康构成了严重的威胁。临床上安全有效的治疗多药耐药革兰氏阴性菌感染的药物极度缺乏,全球范围内处于临床研究的抗阴性菌候选药物更是寥寥无几。2017年,世卫组织根据对新型抗生素的迫切需求程度将其分为极为重要、十分重要和中等重要三个类别。其中,列为极为重要的包括碳青霉烯耐药的鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和产超广谱β-内酰胺酶（ESBLS）肠杆菌科三种阴性菌的抗感染药物。随着对微生物资源的开发,从陆生微生物中发现新结构抗生素越来越困难。随着微生物资源的探索,海洋环境以其特有的高盐、高压、低温、低营养等独特环境,微生物可能存在特有的代谢途径,而产生具有特殊结构和生理活性的次级代谢产物。对印度洋孟加拉湾8份深海沉积物样品进行了放线菌和真菌的分离。在放线菌的分离过程中采用差速离心法,样品印章法,加热稀释法三种预处理方法,共六种培养基进行放线菌的分离培养。共得到细菌73株,通过PCR扩增16SrRNA基因序列,并在NCBI上进行比对确定其覆盖放线菌门、变形菌门、拟杆菌们、厚壁菌门4门,共9个科,13个属。其中放线菌门包括7个属26株,分别为诺卡氏菌属（Nocardia）,红球菌属（Rhodococcus）,细杆菌属（Microbacterium）罗思氏菌属（Rothia）,糖单孢菌属（Saccharomonospora）,链霉菌属（Streptomyces）,马杜拉放线菌属（Actinomadura）,其中有3株菌为潜在新种。在真菌的分离过程中对8份样品采用印章法和梯度稀释法两种样品处理方法,利用PDA,MEA,Czapek-Dox Medium,GPA,GYMA等5种培养基进行培养。总共分离得到真菌24株,通过PCR扩增18S rRNA基因序列并进行序列比对确定其对分布于5个属,分别为曲霉菌属（Aspergillus）,青霉菌属（Penicillium）,踝节菌属（Talaromyces）,蒜孢属（Rachicladosporium）,念珠菌属（Candida）。其中曲霉属和青霉菌属为优势菌,分别为7株和6株。对真菌进行液体及固体发酵,液体发酵用大孔吸附树脂吸附处理,菌丝体用丙酮萃取,浓缩后用纸片扩散发测定其活性。固体发酵选用大米培养基,发酵30天后,分别用乙酸乙酯及甲醇萃取,产物浓缩,用纸片扩散法测定其抑菌活性。利用铜绿假单胞菌11,大肠埃希菌,铜绿假单胞菌,肺炎克雷伯菌,金黄色葡萄球菌进行抗菌活性筛选得到活性菌株9株,对肺炎克雷伯菌,铜绿假单胞菌等显示出较强活性。

关键词：红树林海洋真菌海洋放线菌活性筛选

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