目的心房颤动(简称房颤)常见而高危,其发病机制未完全阐明。心房力学环境改变常见于易发房颤的多种基础疾病,其中压应力是心房应力的重要构成。建立心房肌细胞压应力超负荷模型,为研究心房机械-电反馈过程和房颤力学机制奠定方法学基础。方法选择出生0~3 d的SPF级SD大鼠乳鼠30只,体质量5~10 g,雌雄不限。设计压应力刺激装置;提取、消化、分离、纯化SD大鼠乳鼠心房肌细胞并体外培养;在培养环境中通过375 r/min(低压应力组,n=4)和735 r/min(高压应力组,n=4)的恒速离心对心房肌细胞施加不同强度的持续压应力刺激48 h,对照组细胞不施加压应力刺激(n=4);通过细胞骨架染色计算细胞面积,3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁)(内盐)(MTS)法检测细胞活性,分析由压应力超负荷导致的细胞形态和活性变化。结果成功分离、培养SD大鼠乳鼠心房肌细胞并通过鉴定;接种48 h后细胞贴壁良好,密度70%~80%,呈长梭形、三角形或不规则多边形,可见细胞搏动,心肌细胞纯度达90%~95%。设计的压应力装置在确保湿度、氧和二氧化碳浓度的培养箱环境中对细胞施加压应力刺激。MTS法检测到低压应力组细胞活性高于对照组和高压应力组(OD值0.57±0.03 vs 0.50±0.02、0.50±0.01。P<0.05)。高压应力组细胞活性与对照组差异无统计学意义(OD值0.50±0.01 vs 0.50±0.02。P=0.69)。细胞骨架染色以对照组细胞平均面积为基准,对照组、低压应力组、高压应力组细胞的相对面积依次增大(1.00±0.23 vs 1.20±0.16 vs 1.59±0.20。P<0.05)。离心仓与培养箱的温度差随离心过程逐渐升高,并于6 h后趋于恒定,与培养箱最高温差≤2℃,通过实时调控培养箱温度,可稳定维持离心仓温度于37.0℃~37.5℃。结论实验构建的离体心房肌细胞压应力超负荷模型具有良好的安全性、实验效率和可重复性,通过离心向培养环境中的离体心房肌细胞施加定量、定时压应力刺激后,心房肌细胞可存活,细胞形态和活性随压应力强度变化。该模型可为进一步探索压应力相关的心房机械-电反馈机制提供方法学基础。
目的 本研究旨在探讨耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(Carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,CR-PA)感染老年住院患者的耐药情况,并研究其导致病死的相关因素。同时,确定Acute Physiology and Chronic Health EvaluationⅡ(APACH...
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目的 本研究旨在探讨耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌(Carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa,CR-PA)感染老年住院患者的耐药情况,并研究其导致病死的相关因素。同时,确定Acute Physiology and Chronic Health EvaluationⅡ(APACHEⅡ)在预测老年CR-PA感染患者死亡中的作用。方法 收集某院2018~2020年老年CR-PA感染患者的临床资料数据,根据感染后28 d内的不同预后情况进行分组,其中存活组的患者数为110例,死亡组为36例。比较老年CR-PA感染患者的耐药情况,并进行统计分析确定影响老年CR-PA感染患者病死率的危险因素。结果 该院146例年龄≥60岁的住院患者发生CR-PA感染,以呼吸道标本检出率最高(126/146)。CR-PA对多粘菌素敏感率高达98.7%,对妥布霉素和庆大霉素的耐药率均为20%以下,对喹诺酮类药物次之,对其他常见抗菌药物的耐药率均>40%。根据Logistic多因素分析,入院后使用碳青霉烯类抗生素以及APACHEⅡ评分高是影响老年住院患者感染CR-PA预后的独立危险因素。APACHEⅡ评分在预测老年CR-PA感染患者死亡结果的ROC曲线下面积(AUC)为0.888(95%CI 0.832~0.944,P<0.001),临界值为22.5分,敏感度和特异度分别为83.3%和71.8%。结论 老年住院患者感染CR-PA后,使用β-内酰胺类药物治疗都表现出较高的耐药率,若患者入院后使用碳青霉烯类以及高APACHEⅡ评分要警惕预后不良,APACHEⅡ评分对老年CR-PA感染患者的死亡具有预测诊断价值。
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