检索结果-内蒙古大学图书馆

应用CRISPR/Cas13b编辑技术治疗TNNT2R141W转基因小鼠的扩张型心肌病

中国生物化学与分子生物学报 2020年第1期36卷 49-60页

作者：匡歆王玉瑶聂宇李昊陈显达廉虹刘立会李佳成郭睿山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原030000 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室北京100037

应用CRISPR/Cas13b系统对TNNT2R141W转基因扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)小鼠进行探索性治疗,尝试发现治疗扩张型心肌病的一种新方式,为CRISPR/Cas13b系统在体内应用提供实验基础。随机设计11种Cas13b-TNNT2 gRNA并成功构... 详细信息

应用CRISPR/Cas13b系统对TNNT2R141W转基因扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)小鼠进行探索性治疗,尝试发现治疗扩张型心肌病的一种新方式,为CRISPR/Cas13b系统在体内应用提供实验基础。随机设计11种Cas13b-TNNT2 gRNA并成功构建表达质粒,把它和人源TNNT2过表达质粒共同转染到293T细胞中,通过实时定量PCR(Q-PCR)检测人源TNNT2 mRNA的表达水平。结果显示,gRNA2引导Cas13b敲低目标基因的效率最高,达到80%(P<0.0001)。把gRNA2表达质粒包装到慢病毒载体中,转导出生后1 d的DCM小鼠原代心肌细胞。Q-PCR检测结果表明,CRISPR/Cas13b系统对人源TNNT2 mRNA敲低效率达到55%(P<0.01)。把PspCas13b和gRNA2的表达载体分别包装到AAV9病毒载体中,再将200μL约1×1012AAV9病毒颗粒通过尾静脉注射到4月龄DCM小鼠体内,待注射小鼠发育至5月龄时。Q-PCR检测结果显示,AAV9+DCM组TNNT2R141W表达水平较未注射组对照明显下降至40%(P<0.01)。对5月龄野生型(WT)、DCM(未注射病毒组)和AAV9+DCM(基因组编辑工具注射组)三组小鼠的心脏形态、心功能、心肌纤维化和心力衰竭等表型的观察结合显示:DCM小鼠的心血管形态异常,而AAV9+DCM小鼠心血管形态趋于正常。对3组小鼠的心脏进行超声心动图,并对心功能指标进行统计发现,DCM组较WT组小鼠的左心室射血分数(left ventricular percent ejection fraction,LV EF%)、左心室短轴缩短率(left ventricular percent fractional shortening,LV FS%)分别下降50.4%(P<0.0001),55.1%(P<0.0001),而AAV9+DCM组较DCM组小鼠的LV EF%、LV FS%分别上升66.5%(P<0.01),77.0%(P<0.01)。通过Q-PCR和天狼星红染色检测3组小鼠的心肌纤维化程度。结果显示,DCM组较WT组小鼠的Col3a1和Postn两种纤维化基因,分别高表达5.2倍(P<0.001)、4.5倍(P<0.01),而AAV9+DCM组较DCM组小鼠两种基因表达分别下降2.0倍(P<0.05)、1.4倍(NS)。天狼星红染色结果显示,纤维化区域明显下降;通过Q-PCR和蛋白质免疫印迹分别检测3组小鼠的心肌心力衰竭基因Nppb mRNA和Nppa蛋白质的表达水平。结果表明,DCM组较WT组小鼠Nppb mRNA表达上升14.2倍(P<0.01),而AAV9+DCM组较DCM组小鼠Nppb mRNA表达明显下降2.8倍(P<0.05),Nppa蛋白表达趋势与Nppb相同。把gRNA 5和含有R141W突变(gRNA 5T),以及正常的TNNT2 mRNA(gRNA 5V)序列分别组合转染到293T细胞中。通过Q-PCR检测两种序列mRNA的表达水平。结果显示,gRNA 5T序列表达效率为30%(P<0.0001),而并未检测到gRNA 5V mRNA的敲低。本研究通过设计靶向TNNT2R141WmRNA的gRNA,特异性敲低TNNT2R141W转基因小鼠体内突变的mRNA,有效改善了转基因小鼠的心功能,为临床进一步探索扩张型心肌病的治疗奠定了实验室基础。

关键词：扩张型心肌病 CRISPR/Cas13b RNA编辑技术 TNNT2R141W基因突变

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分化拮抗非编码RNA-201对单核-巨噬细胞功能的调控研究

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中国循环杂志 2020年第7期35卷 677-684页

作者：周海清刘洋陈宇李荣霞杨淑均张伟丽安徽理工大学医学院安徽省淮南市232000 北京协和医学院中国医学科学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室厦门大学附属心血管病医院

目的:探究分化拮抗非编码RNA-201(differentiation antagonizing non-protein coding RNA,DANCR-201)在单核-巨噬细胞炎症反应中的调控作用。方法:纳入中国医学科学院阜外医院疑为冠心病接受冠状动脉CT检查的患者25例,年龄≥45岁。根据... 详细信息

目的:探究分化拮抗非编码RNA-201(differentiation antagonizing non-protein coding RNA,DANCR-201)在单核-巨噬细胞炎症反应中的调控作用。方法:纳入中国医学科学院阜外医院疑为冠心病接受冠状动脉CT检查的患者25例,年龄≥45岁。根据冠状动脉CT血管造影图像,研究对象分为3组,包括无斑块健康对照组(n=10)、完全钙化斑块组(n=10)和易损斑块组(n=5)。采用全转录组测序技术分析外周血全血中表达差异的长链非编码RNA分子。培养人单核细胞白血病细胞系(THP)-1细胞,用于建立M1和M2型巨噬细胞极化模型,采用慢病毒感染和Smart Silencer转染技术分别过表达和敲低DANCR-201,检测炎症因子、脂质代谢与血管钙化相关基因的表达水平,采用油红O染色法检测巨噬细胞脂质吞噬能力,采用胆固醇流出实验检测巨噬细胞胆固醇逆转运能力。结果:DANCR-201在易损斑块组患者外周血的表达水平显著升高。在单核细胞系中过表达DANCR-201,可促进单核趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)高表达(P<0.01);反之,敲低DANCR-201时,可使MCP-1和TNF-α的表达水平显著下降(P<0.01)。在M1和M2型巨噬细胞中,DANCR-201显著抑制Runt相关转录因子2(Runx 2)表达水平(P<0.01),并促进骨保护素(OPG)高表达(P<0.05);反之,敲低DANCR-201时,M1和M2型巨噬细胞中的Runx 2表达水平升高,而OPG表达水平下降(P<0.01)。DANCR-201对巨噬细胞脂质吞噬和胆固醇逆转运能力无显著影响。结论:DANCR-201促进M1和M2型巨噬细胞的炎症反应,其在动脉粥样硬化斑块形成中的作用机制仍需深入研究。

关键词：长链非编码RNA 分化拮抗非编码RNA-201 巨噬细胞炎症动脉粥样硬化

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骨髓源性生长因子缺失导致小鼠心肌梗死后纤维化加剧

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四川大学学报（医学版） 2024年第4期55卷 886-892页

作者：韩国玲郝琰琰李若朴刘维静刘俊聂宇白丽娜王玉瑶山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 北京协和医学院中国医学科学院阜外医院国家心血管病中心心血管疾病国家重点实验室北京100037

目的研究心梗后骨髓源性生长因子(myeloid-derived growth factor, Mydgf)的缺失对心肌成纤维细胞活化的作用。方法取成年野生型(wild type, WT)小鼠与Mydgf敲除(myeloid-derived growth factor knockout, Mydgf-KO)小鼠,检验这两组小鼠的心功能指标左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)和左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening, LVFS)(n=10),实时定量PCR(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)(n=3)检测肌成纤维细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、骨膜蛋白(postn)、Ⅷ型胶原(typeⅧcollagen, col8al)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, ctgf)的mRNA表达水平,Western blot(n=3)检测肌α-SMA的蛋白表达水平;对WT与Mydgf-KO小鼠造心肌梗死(myocardial infarction, MI)模型,检测小鼠术后LVEF和LVFS(n=10),取出心脏后进行Masson染色测定梗死面积(n=10)。分别在MI后第7天、第14天收集Mydgf-KO及WT小鼠的心脏,验证肌成纤维细胞标志物(n=3)的表达情况。结果相较于WT小鼠,Mydgf-KO成年小鼠LVEF、LVFS无明显变化(P均>0.05),但α-SMA和postn的mRNA水平上调,α-SMA蛋白表达水平增加(P均<0.05);MI后,与WT小鼠相比,Mydgf-KO小鼠LVEF、LVFS下降,且梗死面积增大(P均<0.05);进一步发现,Mydgf-KO小鼠α-SMA、col8al、postn和ctgf的mRNA水平升高,同时α-SMA蛋白表达水平上调且α-SMA阳性的成纤维细胞增加(P均<0.05)。结论 Mydgf缺失促使心脏成纤维细胞转变为肌成纤维细胞,同时也加剧心梗后的纤维化。

关键词：骨髓源性生长因子心肌纤维化心肌梗死肌成纤维细胞

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二尖瓣关闭不全患者的运动病理生理学特征的临床研究报告

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中国应用生理学杂志 2021年第2期37卷 154-161页

作者：穆希娅孙兴国台文琦王继楠周晴晴张艳芳宋雅石超徐凡徐丹丹孙淑艳内蒙古科技大学包头医学院研究生院包头014000 国家心血管病中心中国医学科学院阜外医院北京协和医学院心血管疾病国家重点实验室心血管疾病国家临床医学研究中心北京协和医学院心血管疾病国家重点实验室心血管疾病国家临床医学研究中心北京100037 内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院包头014010 重庆医科大学附属康复医院重庆400050 湖北省中医院武汉430061

目的:通过心肺运动试验(CPET)进行二尖瓣关闭不全的运动病理生理学特征的相关研究。方法:自2016年以来签署知情同意后,严格质控下完成规范化CPET极限运动的中重度二尖瓣关闭不全患者26例,取同期正常人11例为对照组。将CPET核心指标按照... 详细信息

目的:通过心肺运动试验(CPET)进行二尖瓣关闭不全的运动病理生理学特征的相关研究。方法:自2016年以来签署知情同意后,严格质控下完成规范化CPET极限运动的中重度二尖瓣关闭不全患者26例,取同期正常人11例为对照组。将CPET核心指标按照标准方法分析计算,并与正常人比较,进行组间统计学独立样本t检验。同时将患者是否存在心衰和波浪式呼吸(OB)分别分为两个亚组;其中无心衰11例,心衰15例;非OB 8例,OB18例,并分别对各亚组间比较其异同。结果:正常人峰值摄氧量(85.60±9.06)%pred及无氧阈(87.59±15.38)%pred等CPET核心指标均为正常范围。二尖瓣关闭不全患者CPET的峰值摄氧量为(48.15±12.11)%pred、峰值氧脉搏(66.57±12.20)%pred、无氧阈(56.75±11.50)%pred、摄氧通气效率峰值平台(OUEP)(88.24±16.42)%pred、二氧化碳排出通气效率最低值(125.89±27.05)%pred和二氧化碳排出通气斜率(128.31±31.68)%pred,其中仅摄氧通气效率峰值平台属于正常偏低,其余指标均为显著异常;且与对照组均存在显著差异(P<0.01)。无心力衰竭组与心力衰竭组组间比较均无差异(P>0.05),但所有指标均与对照组有显著差异(P<0.05);非OB组与OB组组间比较均无差异(P>0.05),但均与对照组有显著差异(P<0.05)。结论:二尖瓣关闭不全病人除摄氧通气有效性正常偏低外,所有心肺运动核心指标均显著异常。且有无心衰和OB均未影响其心肺运动功能状态。

关键词：瓣膜病二尖瓣关闭不全心肺运动试验病理生理

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2018心血管磁共振研究进展盘点

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放射学实践 2020年第1期35卷 104-107页

作者：庄白燕(综述) 赵世华(审校) 陆敏杰(审校) 北京协和医学院中国医学科学院阜外医院磁共振影像科国家心血管病中心心血管疾病国家重点实验室中国医学科学院心血管影像重点实验室(培育)北京100037

心血管磁共振(CMR)是一种多方位、多平面、多参数成像技术,具有良好的软组织分辨力及对比度分辨率,结合丰富的序列及不断涌现的新技术,其在心血管疾病的诊断及鉴别诊断、预后及危险分层中的价值越来越高。本文对2018年心血管磁共振的进... 详细信息

心血管磁共振(CMR)是一种多方位、多平面、多参数成像技术,具有良好的软组织分辨力及对比度分辨率,结合丰富的序列及不断涌现的新技术,其在心血管疾病的诊断及鉴别诊断、预后及危险分层中的价值越来越高。本文对2018年心血管磁共振的进展做一回顾,重点阐述基于新技术的磁共振在心血管疾病中的临床应用进展。

关键词：心血管磁共振钆对比剂延迟强化 T1-mapping 细胞外容积 DWI 扩散张量成像 4D Flow 人工智能

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2020年中国皮肤病药物临床试验分析

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中华皮肤科杂志 2021年第11期54卷 1001-1004页

作者：朱蓓蓓李婧黄慧瑶李宁刘利军张丽华宦静倪琪侯伟刘毅杨雪源中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院机构办公室南京210042 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院、北京协和医学院肿瘤医院药物临床试验研究中心北京100021 中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院临床试验研究中心天津300020 国家心血管病中心国家心血管疾病临床医学研究中心中国医学科学院、北京协和医学院阜外医院心血管疾病国家重点实验室北京100037

目的了解2020年中国皮肤病药物临床试验开展及上市情况。方法从中国国家药品监督管理局药物临床试验登记与信息公示平台登记数据库和国产及进口药品数据查询系统,收集2020年皮肤病药物注册临床试验信息,包括试验数量、分期和受试药物主... 详细信息

目的了解2020年中国皮肤病药物临床试验开展及上市情况。方法从中国国家药品监督管理局药物临床试验登记与信息公示平台登记数据库和国产及进口药品数据查询系统,收集2020年皮肤病药物注册临床试验信息,包括试验数量、分期和受试药物主要适应证、类型等信息以及上市皮肤病药物情况。结果2020年共有157项皮肤病药物注册临床试验在中国药物临床试验登记与信息公示平台登记,占同期全部药物临床试验(2548项)的6.16%。其中,中国制药企业发起127项(80.9%),国际多中心试验25项(15.9%)。生物等效性临床试验在国制药企业发起的临床试验中占比最高(55.9%,71/127)。国内制药企业发起的国际多中心临床试验占比低于国际制药企业[1.9%(3/157)比14.0%(22/157),P<0.001],Ⅰ期临床试验和生物等效性试验占比[24.4%(31/127)和55.9%(71/127)]高于国际制药企业[10.0%(3/30)和0,均P<0.001]。共涉及90种试验药物,银屑病、特应性皮炎、皮肤黑素瘤是常见适应证,创新药占53.3%(48/90);国内制药企业创新药比例低于国际制药企业[43.2%(32/74)比16/16,P<0.001]。2020年,共有22家制药企业研发的28种皮肤病治疗药物在中国获准上市,其中21种来自国内制药企业。结论国内制药企业开展的药物临床试验多集中于仿制药,需进一步提高创新能力。

关键词：临床试验皮肤疾病药用制剂中国治疗等效

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升主动脉瘤中血小板源性生长因子-DD的表达增加与主动脉壁重塑

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临床心血管病杂志 2016年第2期32卷 178-182页

作者：蒙延海王蒙张燕搏田川裴华伟刘鹏红郭晓博常谦中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室ICU 北京100037 德州市人民医院耳鼻喉科北京阜外医院心血管疾病国家重点实验室心血管外科

目的:观察血小板源性生长因子-DD(PDGF-DD)在退行性变升主动脉瘤(degenerative ascending thoracic aortic aneurysm,DATAA)中的表达,探讨DATAA发病中PDGF-DD参与主动脉壁病理性重塑的机制。方法:升主动脉瘤术中切除标本25例为DATAA组,... 详细信息

目的:观察血小板源性生长因子-DD(PDGF-DD)在退行性变升主动脉瘤(degenerative ascending thoracic aortic aneurysm,DATAA)中的表达,探讨DATAA发病中PDGF-DD参与主动脉壁病理性重塑的机制。方法:升主动脉瘤术中切除标本25例为DATAA组,升主动脉直径正常的行冠状动脉搭桥患者主动脉标本25例为对照组,Masson染色分别检测主动脉壁的胶原含量。免疫组织化学方法检测主动脉壁中PDGF-DD的表达情况。蛋白印迹方法检测所有标本中PDGF-DD的蛋白表达水平。实时PCR的方法检测所有标本中PDGF-DD的mRNA表达水平。结果:病理结果与对照组标本比较显示DATAA组免疫组织化学结果表明PDGF-DD表达明显增加(P<0.01),主要位于中膜及内膜,对照组无明显表达;PDGF-DD的蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.01),PDGF-DD的mRNA表达与蛋白结果一致(P<0.01);Masson染色及胶原半定量结果表明DATAA中胶原纤维明显增生,排列紊乱,面积百分比明显增加(P<0.01),相关性分析结果显示PDGF-DD蛋白表达结果与胶原纤维半定量结果及主动脉瘤径均呈正相关(r=0.68,P<0.01;r=0.75,P<0.01)。结论:PDGF-DD在DATAA主动脉壁中表达明显增强,并与主动脉直径大小密切相关。PDGF-DD可能参与了DATAA中主动脉壁的病理性重塑过程,导致主动脉壁胶原代偿性增加。

关键词：血小板源性生长因子主动脉瘤胸发病机制

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2024年欧洲心脏病学会《外周动脉和主动脉疾病管理指南》解读

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中国胸心血管外科临床杂志 2024年

作者：汤开罗明尧舒畅中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院血管外科心血管疾病国家重点实验室国家心血管病中心华中分中心河南心血管病中心阜外华中心血管病医院血管外科郑州大学华中阜外医院云南省阜外心血管病医院血管外科昆明医科大学附属心血管病医院

近年来，世界范围内外周动脉和主动脉疾病发病率逐年上升，导致整体人群的心血管死亡率和发病率升高。既往，外周动脉和主动脉疾病相较冠状动脉疾病往往容易漏诊以及延误治疗。《2024欧洲心脏病学会外周动脉和主动脉疾病管理指南》首次... 详细信息

近年来，世界范围内外周动脉和主动脉疾病发病率逐年上升，导致整体人群的心血管死亡率和发病率升高。既往，外周动脉和主动脉疾病相较冠状动脉疾病往往容易漏诊以及延误治疗。《2024欧洲心脏病学会外周动脉和主动脉疾病管理指南》首次将外周动脉和主动脉疾病合并在一起，整合并且更新了2017年外周动脉疾病和2014年主动脉疾病指南，旨在为全身动脉疾病管理提供标准化的建议，确保患者可以接受连贯、综合的诊断和治疗，从而改善预后。本文对该指南主要内容进行解读，以期为我国现阶段的外周动脉和主动脉疾病临床诊疗工作提供参考和帮助。

关键词：主动脉疾病外周动脉疾病指南解读

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男性和女性人群C反应蛋白与血压的相关性

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中华高血压杂志 2015年第8期23卷 765-768页

作者：任洁何平王杨彭亚光唐欣然李卫中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京100037 山西医科大学附属山西大医院心内科

目的探讨自然人群中男性和女性C反应蛋白（CRP）与血压的关系。方法研究人群源于前瞻性城乡流行病学研究中国队列（PURE-China）中云南、四川省社区成年人3456名。按CRP四分位数将人群分为4组：G1组（CRP〈0.14mg/L）、G2组（CRP 0.14～... 详细信息

目的探讨自然人群中男性和女性C反应蛋白（CRP）与血压的关系。方法研究人群源于前瞻性城乡流行病学研究中国队列（PURE-China）中云南、四川省社区成年人3456名。按CRP四分位数将人群分为4组：G1组（CRP〈0.14mg/L）、G2组（CRP 0.14～〈0.45mg/L）、G3组（CRP 0.45～〈1.42mg/L）、G4组（CRP≥1.42mg/L）。结果收缩压、舒张压均随CRP浓度的升高而升高;与G1组相比,男女G4组收缩压、舒张压水平明显升高[男：（137.0±24.7）/（85.1±14.7）比（128.6±20.6）/（79.7±12.8）mm Hg;女：（133.8±23.3）/（83.0±13.0）比（122.0±19.9）/（76.4±10.5）mm Hg;均P〈0.05]。多因素Logistic回归模型提示,CRP与高血压发病独立相关,女性G4组高血压患病风险是G1组的1.588倍（95%CI1.155～2.181;P=0.004）,男性G4组高血压患病风险是G1组的1.651倍（95%CI1.145～2.381;P=0.007）。结论在男性和女性人群中,CRP均与血压、高血压发病独立相关。

关键词：性别 C反应蛋白血压高血压

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河南省76698例体检人群心肺功能检查结果与分析

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中国应用生理学杂志 2021年第1期37卷 59-64页

作者：张娜孙兴国赵桂华徐金义台文琦谢燕清李秋楠陈嘉楠郑州大学附属人民医院河南省人民医院河南郑州450003 国家心血管病中心中国医学科学院阜外医院北京协和医学院心血管疾病国家重点实验室心血管疾病国家临床医学研究中心北京100037 广州医科大学第一附属医院广东广州510120

目的:肺功能和心电图检查是心肺运动试验(CPET)人体心肺代谢整体功能评估不可或缺的组成部分,本研究对肺通气功能、换气功能和小气道功能异常及其临床相关特征进行分析。方法:采用横断面研究方法对2016年1月至2019年l2月在河南省人民医... 详细信息

目的:肺功能和心电图检查是心肺运动试验(CPET)人体心肺代谢整体功能评估不可或缺的组成部分,本研究对肺通气功能、换气功能和小气道功能异常及其临床相关特征进行分析。方法:采用横断面研究方法对2016年1月至2019年l2月在河南省人民医院就诊76698例体检人员行常规心电图、肺通气和换气功能检查,比较不同性别、年龄组心肺功能异常检出率,进一步分析心肺功能异常严重程度的特点。结果:①在76698例常规心电图异常检出率为71.04%。②肺通气功能异常检出率36.86%,其中男性44.78%(17570/39237),女性28.57%(10703/37461),男性显著高于女性(P<0.01),且各年龄段男性检出率均高于女性(P均<0.01)。③小气道功能异常检出率为56.26%,男性57.73%(22661/39237),女性54.72%(20499/37461),不同性别比较,差异有统计学意义(P<0.01),其中30~39岁组,40-49岁组女性检出率高于男性(P均<0.05),20~29岁组,50~59岁组,60~69岁组,≥70岁组均男性高于女性(P<0.05)。④换气功能异常检出率为28.54%,其中男性30.55%(7433/24327),女性26.50%(5507/20780),二者差异有统计学意义(P<0.05);30~39岁组(P<0.05)、20~29岁组和40~49岁组(P均>0.05),检出率女性高于男性,50~59岁组,60~69岁组,≥70岁组,男性检出率均高于女性(P均<0.05)。结论:河南体检人群心功能、肺通气功能、换气功能及小气道功能异常的检出率较高,男性明显大于女性,年龄≥70岁者高于其他年龄段。

关键词：肺通气功能心电图流行病学研究换气功能小气道功能减低

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