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中国循环杂志 2015年第S1期 31-31页

作者：崔永春刘晓鹏李凯张宏张冬唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：阐明调控自噬对晚期泡沫细胞凋亡的影响。　　方法：将人THP-1细胞来源的巨噬细胞（THP-M）分别与50μg/ml ox-LDL孵育6 h、12 h和24 h；油红O染色观察细胞内脂质蓄积的变化，酶荧光法试剂盒检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆... 详细信息

目的：阐明调控自噬对晚期泡沫细胞凋亡的影响。
　　方法：将人THP-1细胞来源的巨噬细胞（THP-M）分别与50μg/ml ox-LDL孵育6 h、12 h和24 h；油红O染色观察细胞内脂质蓄积的变化，酶荧光法试剂盒检测细胞内总胆固醇、游离胆固醇和胆固醇酯的含量变化，免疫印迹法检测细胞内LC3II和P62的表达水平；然后分别利用不同浓度自噬激动剂雷帕霉素和抑制剂3-MA预处理THP-M或ATG5特异性siRNA转染的THP-M细胞对自噬进行调节，观察细胞内脂含量的变化。

关键词：调控泡沫细胞凋亡细胞内总胆固醇免疫印迹法脂质蓄积细胞来源内脂雷帕霉素巨噬细胞检测含量变化胆固醇酯表达水平预处理荧光法抑制剂特异性试剂盒

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应用CRISPR-CAS9技术制备miR-155基因敲除小鼠

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中国循环杂志 2015年第S1期 23-23页

作者：崔永春张冬王佩合张宏李凯吴爱丽唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：探讨利用typeⅡbacterial CRISPR/CAS9系统构建miR RNA-155基因敲除小鼠的可行性。　　方法：首先，利用软件设计构建识别靶定靶序列的sgRNA，构建致靶基因切割的CRISPR/Cas9载体质粒；然后体外鉴定sgRNA/Cas9的活性检测；设计构... 详细信息

目的：探讨利用typeⅡbacterial CRISPR/CAS9系统构建miR RNA-155基因敲除小鼠的可行性。
　　方法：首先，利用软件设计构建识别靶定靶序列的sgRNA，构建致靶基因切割的CRISPR/Cas9载体质粒；然后体外鉴定sgRNA/Cas9的活性检测；设计构建基因敲进的打靶载体；体外转录sgRNA/Cas9 mRNA；小鼠受精卵注射sgRNA/Cas9 mRNA和打靶载体；最后miR-155基因敲除F0代C57/BL6小鼠的可遗传性检测，并剪鼠尾提DNA进行鉴定。

关键词：应用技术基因敲除设计构建小鼠受精卵靶载体载体质粒系统构建体外转录利用软件鉴定活性检测遗传性靶序列靶基因注射识别切割方法

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Sirt1激动剂白藜芦醇对NIH3T3成纤维细胞增殖与分化的影响

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中国循环杂志 2015年第S1期 23-23页

作者：张宏刘晓鹏张冬李凯崔永春唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：成纤维细胞增殖与分化是组织发生纤维化的病理基础。已有报道证明sirt1激动剂白藜芦醇可以发挥对抗心脏、肾脏纤维化的作用，但其作用机制并不完全清楚。本实验目的是探讨白藜芦醇对NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞增殖与分化的影响，... 详细信息

目的：成纤维细胞增殖与分化是组织发生纤维化的病理基础。已有报道证明sirt1激动剂白藜芦醇可以发挥对抗心脏、肾脏纤维化的作用，但其作用机制并不完全清楚。本实验目的是探讨白藜芦醇对NIH3T3小鼠胚胎成纤维细胞增殖与分化的影响，发现其潜在作用机制。

关键词：激动剂白藜芦醇小鼠胚胎成纤维细胞增殖与分化作用机制肾脏纤维化组织发生病理基础证明心脏实验对抗

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谷氨酰胺通过抑制氧化应激减轻糖尿病心肌缺血再灌注损伤

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中国循环杂志 2015年第S1期 22-22页

作者：李凯崔永春张宏刘晓鹏张冬唐跃北京市中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外心血管病医院心血管疾病国家重点实验室北京市心血管植入材料临床前评价重点实验室动物实验中心100037

目的：细胞氧化应激增加是糖尿病心肌缺血再灌注损伤的核心环节之一。既往实验已经证实谷氨酰胺具有明显的细胞内抗氧化应激作用。谷氨酰胺是否也能在糖尿病心肌细胞缺血再灌注损伤中发挥抗氧化应激作用尚不可知。

关键词：谷氨酰胺氧化应激糖尿病心肌缺血再灌注损伤应激作用心肌细胞抗氧化核心环节细胞内实验

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心脏手术相关急性肾损伤早期生物标志物的研究进展

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中国分子心脏病学杂志 2023年第5期23卷 5699-5706页

作者：林祥蓉秦竹韵宋磊邢大一申宇王欣岳广新杨新卫山西医科大学第一临床医学院山西医科大学第一医院心胸外科太原市030001 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室北京市100037 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院动物实验中心心血管植入材料临床前研究评价北京市重点实验室北京市100037

急性肾损伤(AKI)是心脏手术后常见且后果严重的并发症之一,与围手术期死亡率增加、重症监护病房停留时间较长和住院时间延长及治疗费用增加密切相关,早期诊断及早期预防AKI可以显著减少这些不良后果。依靠血清肌酐水平和尿量变化来诊断... 详细信息

急性肾损伤(AKI)是心脏手术后常见且后果严重的并发症之一,与围手术期死亡率增加、重症监护病房停留时间较长和住院时间延长及治疗费用增加密切相关,早期诊断及早期预防AKI可以显著减少这些不良后果。依靠血清肌酐水平和尿量变化来诊断心脏手术相关急性肾损伤(CSA-AKI)的诊断标准由于存在一定的延迟,不能满足早期诊断的临床需要。因此寻找更加精准和特异的CSA-AKI早期生物标志物成为近年来的研究热点。本文就CSA-AKI早期生物标志物的研究进展予以综述。

关键词：心脏手术急性肾损伤生物标志物

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8日龄小鼠急性心肌梗死模型制备与模型标准化评估

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中国分子心脏病学杂志 2023年第2期23卷 5310-5317页

作者：布威麦热姆·热杰普王莽原向晨莹郝琰琰聂宇廉虹霍强新疆医科大学第一附属医院心脏外科乌鲁木齐市830054 中国医学科学院、北京协和医学院、阜外医院、国家心血管病中心、心血管疾病国家重点实验室北京市100037 山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原市030000 中国医学科学院、北京协和医学院、国家心血管病中心、阜外医院、动物实验中心、心血管植入材料临床前研究评价北京市重点实验室北京市100037

目的构建8日龄小鼠急性心肌梗死(AMI)模型及模型标准化评估。方法取40只8日龄CD1小鼠,30只在体视显微镜下结扎心脏冠状动脉左前降支(LAD),建立AMI模型(AMI组),10只仅开胸不结扎冠状动脉(假手术组)。LAD结扎后1、3 d分别用TTC染色、TTC-... 详细信息

目的构建8日龄小鼠急性心肌梗死(AMI)模型及模型标准化评估。方法取40只8日龄CD1小鼠,30只在体视显微镜下结扎心脏冠状动脉左前降支(LAD),建立AMI模型(AMI组),10只仅开胸不结扎冠状动脉(假手术组)。LAD结扎后1、3 d分别用TTC染色、TTC-伊文思蓝双染色法评估心肌缺血;LAD结扎后7、14、21 d通过心脏超声评估心脏结构和功能;结扎后4、7、14、21 d观察纤维瘢痕形成情况,Masson染色测量梗死纤维化面积。结果TTC染色和TTC-伊文思蓝双染色结果显示结扎线以下呈苍白色,说明成功造成心肌缺血。心脏超声结果显示:LAD结扎后7、14、21 d AMI组较假手术组左心室功能明显变差,左心室内径明显扩大,左室射血分数(LVEF)绝对值分别降低(37.64±4.30)%、(50.98±4.98)%和(46.49±5.49)%,左室短轴缩短率(LVFS)绝对值分别降低(31.06±2.99)%、(35.59±3.54)%和(30.40±4.07)%,左室舒张期内径(LVIDd)绝对值分别增加(0.69±0.30)mm、(1.25±0.47)mm和(1.35±0.41)mm,左室收缩期内径(LVIDs)绝对值分别增加(1.03±0.24)mm、(1.95±0.44)mm和(1.85±0.32)mm。Masson染色结果显示梗死区心肌组织逐渐被纤维瘢痕组织替代,结扎后4、7、14、21 d心脏纤维化面积分别达到(60.94±7.14)%、(67.85±11.4)%、(69.88±11.40)%和(75.79±7.67)%。结论本研究详细描述了8日龄小鼠AMI模型建立过程,通过不同方法评估了术后不同时间点心脏梗死面积﹑心脏结构﹑功能以及纤维化程度;为建立稳定可靠的8日龄小鼠AMI模型以及手术评估提供了参考数据。

关键词：小鼠急性心肌梗死显微操作超声心动图

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