检索结果-内蒙古大学图书馆

中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第10期24卷 I0002-I0004页

作者：刘洋曹雪涛中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所免疫系&医学分子生物学国家重点实验室&免疫治疗中心北京100005 第二军医大学免疫学研究所&医学免疫学国家重点实验室上海200433

作者首先介绍了肿瘤转移前微环境的分子与细胞组成及其调控机制。原位肿瘤在转移前能够在特定器官组织部位诱导形成有利于肿瘤细胞转移的微环境，该肿瘤转移前微环境的形成需要肿瘤分泌因子、抑制性免疫细胞的动员募集以及该组织部位基... 详细信息

作者首先介绍了肿瘤转移前微环境的分子与细胞组成及其调控机制。原位肿瘤在转移前能够在特定器官组织部位诱导形成有利于肿瘤细胞转移的微环境，该肿瘤转移前微环境的形成需要肿瘤分泌因子、抑制性免疫细胞的动员募集以及该组织部位基质组分炎性极化等三个主要因素的相互作用。此外，局部缺氧与细胞外基质重塑也会促进肿瘤转移前微环境的形成（图1）。

关键词：肿瘤转移微环境细胞外基质重塑肿瘤细胞转移组织部位细胞组成诱导形成原位肿瘤

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IFN-γ促进红系终末分化

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基础医学与临床 2017年第7期37卷 963-969页

作者：崔申申解学敏王南宇吕湘中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探索IFN-γ对体外红系终末分化的调节作用。方法用real-time PCR法检测IFN-γR1/R2在血红素(hemin)诱导K562细胞红系分化过程中的表达变化。以IFN-γ处理hemin诱导的K562细胞和人脐血CD34+细胞来源的红系细胞,用real-time PCR检测... 详细信息

目的探索IFN-γ对体外红系终末分化的调节作用。方法用real-time PCR法检测IFN-γR1/R2在血红素(hemin)诱导K562细胞红系分化过程中的表达变化。以IFN-γ处理hemin诱导的K562细胞和人脐血CD34+细胞来源的红系细胞,用real-time PCR检测红系分化标志物CD235a和CD71表达。用联苯胺染色展现IFN-γ处理的K562细胞中血红蛋白含量,通过Western blot和real-time PCR检测红系相关转录因子GATA1和NFE2的表达。结果 Hemin诱导下分化的K562细胞中IFN-γR1/R2 mRNA先减少后增高,IFN-γ促进K562及造血干祖细胞红系分化晚期CD71及CD235a的表达,增加联苯胺阳性染色率。IFN-γ对红系分化的促进作用具有时间依赖性。机制研究表明IFN-γ可促进红系关键转录因子NFE2的表达。结论 IFN-γ促进K562细胞及人脐血造血干祖细胞的红系终末分化。

关键词： IFN-γ 红系分化

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添加细胞因子优化人外周血γδ T细胞的体外扩增培养体系

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基础医学与临床 2017年第6期37卷 752-757页

作者：王淑莉陈慧陆必超张建民何维中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的从添加细胞因子角度,优化用于肿瘤过继免疫治疗的γδ T细胞体外扩增培养方案。方法在固相化抗TCRγδ抗体加IL-2扩增人外周血γδ T细胞的体系基础上,添加其他的γ链受体家族细胞因子,包括IL-7、IL-15或IL-21,单独或联合使用、长... 详细信息

目的从添加细胞因子角度,优化用于肿瘤过继免疫治疗的γδ T细胞体外扩增培养方案。方法在固相化抗TCRγδ抗体加IL-2扩增人外周血γδ T细胞的体系基础上,添加其他的γ链受体家族细胞因子,包括IL-7、IL-15或IL-21,单独或联合使用、长期使用或短时添加,通过流式细胞术检测γδ T细胞纯度、细胞增殖及细胞毒活性相关分子的表达,计算γδ T细胞扩增效率;乳酸脱氢酶法检测γδ T细胞对人Burkitt's淋巴瘤细胞系Daudi的细胞毒活性。结果单独使用IL-7或IL-21不能有效扩增γδ T细胞,但单独使用IL-15可以使γδ T细胞纯度、扩增效率及细胞毒活性均达到与单独使用IL-2相当的水平;IL-2与IL-15联合使用,可促进γδ T细胞表达CD69,从而显著提高其扩增效率(P<0.05);而IL-2与IL-21联合使用,可通过促进γδ T细胞颗粒酶A的表达,增强其对Daudi细胞的细胞毒活性(P<0.001);IL-2、IL-15和IL-21联合使用可以显著提高γδ T细胞的细胞毒活性,但是会影响其扩增效率;而仅在效应前短时间添加IL-21,同样可以有效增强γδ T细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性(P<0.05)。结论在用固相化TCRγδ抗体加IL-2体外扩增培养γδ T细胞体系中,使用IL-15,而在回输效应前短时间添加IL-21,显著提高γδ T细胞扩增效率及对肿瘤细胞的细胞毒活性,此为目前最优化的γδ T细胞体外扩增培养方案。

关键词： γδ T细胞体外扩增白细胞介素-15 白细胞介素-21

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9例家族性高胆固醇血症患者LDLR基因突变检测并一个新突变报道

9例家族性高胆固醇血症患者LDLR基因突变检测并一个新突变报道

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第六届北京市罕见病学术大会暨2018京津冀罕见病学术大会

作者：孟晓露司锘申育奇汪奇何疆春卢超霞吴炜张抒扬张学中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室麦库西克-张孝骞协和遗传医学中心中国人民解放军总医院心血管内科中国人民解放军海军总医院心脏中心中国医学科学院北京协和医院心内科

目的：检测9例家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)患者LDLR基因突变情况,为该病的临床诊断与遗传咨询提供依据。方法：收集患者及父母外周血样本提取基因组DNA,针对LDLR基因设计特异性引物,采用聚合酶链式反应(PCR)... 详细信息

目的：检测9例家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)患者LDLR基因突变情况,为该病的临床诊断与遗传咨询提供依据。方法：收集患者及父母外周血样本提取基因组DNA,针对LDLR基因设计特异性引物,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增LDLR基因的全部编码及侧翼序列,对扩增产物进行直接测序。

关键词：家族性高胆固醇血症 LDLR基因基因检测突变

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基于癌基因组图谱挖掘胃癌预后相关基因

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基础医学与临床 2017年第7期37卷 1042-1046页

作者：张潇怡王晓月中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的利用癌基因组图谱数据库中的大量胃癌基因组数据,在高频突变或肿瘤组织高表达的基因中挖掘与临床分化和预后相关的基因。方法从癌基因组图谱数据集中下载胃癌基因组的突变数据,基因表达数据以及病例样本的临床信息资料。筛选并统计... 详细信息

目的利用癌基因组图谱数据库中的大量胃癌基因组数据,在高频突变或肿瘤组织高表达的基因中挖掘与临床分化和预后相关的基因。方法从癌基因组图谱数据集中下载胃癌基因组的突变数据,基因表达数据以及病例样本的临床信息资料。筛选并统计出现有害突变频率较高的基因,并比较这些基因在不同分化程度病例中的突变次数。同时利用DESeq2对基因表达数据进行差异表达分析,对于在肿瘤组织中高表达的基因做生存分析,使用Log-rank检验并做FDR校正,筛选出mRNA表达量与胃癌预后相关联的基因。结果突变分析得到PIK3CA和APC的有害突变频率在不同分化程度的胃癌存在差异(Fisher's exact test:P<0.05)。差异表达分析得到2 040个在肿瘤组织中上调的基因,2 357个在肿瘤组织中下调的基因。生存分析得到8个对胃癌预后有影响的基因,1个为保护因素,7个危险因素。结论本研究通过挖掘癌基因组图谱中的胃癌数据集,得到了ANGPT2、MMP10和WISP3等与胃癌分化及预后相关的基因,为接下来的研究提供了线索和依据,也为临床治疗提示了新的预后指标。

关键词：癌症基因组图谱体细胞突变表达量预后

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FTO在胃癌组织中的表达降低及其对细胞系MGC-803功能的影响

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基础医学与临床 2017年第7期37卷 907-911页

作者：皮静楠张杰王学鹏熊家超余佳中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京10005

目的探讨RNA甲基化相关蛋白FTO在胃癌中的表达变化情况,及其对胃癌细胞功能的影响。方法用realtime PCR检测54例胃癌组织及对应癌旁组织中FTO的表达;用质粒(p CMV6-FTO)实现FTO在胃癌细胞系MGC-803中的过表达;通过增殖实验、划痕试验和T... 详细信息

目的探讨RNA甲基化相关蛋白FTO在胃癌中的表达变化情况,及其对胃癌细胞功能的影响。方法用realtime PCR检测54例胃癌组织及对应癌旁组织中FTO的表达;用质粒(p CMV6-FTO)实现FTO在胃癌细胞系MGC-803中的过表达;通过增殖实验、划痕试验和Transwell实验,检测FTO对MGC-803细胞功能的影响。结果 FTO mRNA在胃癌组织的表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05),且其表达与胃癌样本的临床分期密切相关(P<0.05);在MGC-803细胞系中过表达FTO,可抑制胃癌细胞增殖(P<0.05)、抑制细胞迁移(P<0.05)和侵袭(P<0.05)。结论 FTO在胃癌组织中低表达,并且抑制胃癌细胞系的增殖、迁移和侵袭,可能与胃癌发生发展密切相关。

关键词：胃癌 MGC-803 FTO

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miR-449b介导5-氟尿嘧啶/顺铂抑制肝癌细胞的迁移

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基础医学与临床 2017年第6期37卷 792-796页

作者：侯彭姣邓艳春梁娜刘长征中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂对miR-449b在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞迁移能力的分子机制。方法收集肝癌患者的组织样本,提取总RNA,用real-time PCR法检测肝癌组织样本中miR-449b的表达;5-氟尿嘧啶和顺铂处理肝癌细胞,检... 详细信息

目的研究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂对miR-449b在肝癌细胞中表达的影响及其抑制肝癌细胞迁移能力的分子机制。方法收集肝癌患者的组织样本,提取总RNA,用real-time PCR法检测肝癌组织样本中miR-449b的表达;5-氟尿嘧啶和顺铂处理肝癌细胞,检测miR-449b的表达;在肝癌细胞中过表达miR-449b或用5-氟尿嘧啶和顺铂分别处理肝癌细胞,利用细胞划痕实验检测肝癌细胞的迁移能力变化;设计拯救实验,探究化疗药5-氟尿嘧啶和顺铂通过诱导miR-449b表达,参与肝癌细胞迁移能力调控;软件预测结合Western blot实验,鉴定miR-449b的功能靶基因。结果 miR-449b在肝癌患者组织中表达下调(P<0.001);5-氟尿嘧啶和顺铂诱导肝癌细胞内源性miR-449b的表达上调(P<0.001);过表达miR-449b可以抑制肝癌细胞的迁移(P<0.001);敲低miR-449b的表达可以抑制5-氟尿嘧啶和顺铂对肝癌细胞迁移能力的抑制作用(P<0.05);catenin-δ是miR-449b的直接靶基因。结论5-氟尿嘧啶和顺铂通过诱导miR-449b的表达抑制肝癌细胞的迁移。

关键词： miR-449b 5-氟尿嘧啶顺铂肝细胞癌

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一种利用吖啶橙染色快速鉴定重力密度梯度沉降法中生精细胞类型的方法

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基础医学与临床 2017年第5期37卷 591-595页

作者：赵晴韩睿钦王琳芳宋伟中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的建立一种重力梯度沉降法分离粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞的快速精确的镜检方法。方法利用重力密度梯度沉降法分离,将收集到的每管细胞分别放入96孔板中,每孔加入一定浓度的吖啶橙染液,于荧光显微镜下观察。结果通过分析对应... 详细信息

目的建立一种重力梯度沉降法分离粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞的快速精确的镜检方法。方法利用重力密度梯度沉降法分离,将收集到的每管细胞分别放入96孔板中,每孔加入一定浓度的吖啶橙染液,于荧光显微镜下观察。结果通过分析对应荧光通道下3种生精细胞的细胞核/细胞质染色结果,可快速精确的分辨出粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞。结论建立了一种在重力密度梯度沉降法分离生精细胞过程中快速镜检检测粗线期精母细胞,圆形及长形精子细胞的方法。

关键词：重力密度梯度沉降法粗线期精母细胞圆形精子细胞长形精子细胞吖啶橙染色

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CRIF1参与高糖诱导的rRNA基因转录

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医学研究杂志 2017年第11期46卷 20-23,27页

作者：贾会会阎海霞程谟斌张业中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室 100005

目的探索CRIF1在高糖诱导下对rRNA基因转录中的作用。方法在HEK293T细胞中,转染CRIF1表达载体或空载对照,培养48h后收取细胞提取总RNA,通过RT-q PCR检测pre-rRNA的mRNA水平;用含0、1、4.5g/L糖浓度的培养基培养HEK293T细胞12h后,收集全... 详细信息

目的探索CRIF1在高糖诱导下对rRNA基因转录中的作用。方法在HEK293T细胞中,转染CRIF1表达载体或空载对照,培养48h后收取细胞提取总RNA,通过RT-q PCR检测pre-rRNA的mRNA水平;用含0、1、4.5g/L糖浓度的培养基培养HEK293T细胞12h后,收集全细胞提取物,进行Western blot法检测CRIF1蛋白的表达水平;在HEK293T细胞中转染sh CRIF1干扰质粒或空载对照,36h后换用含0、1、4.5g/L糖浓度的培养基继续培养细胞12h后,收取细胞提取总RNA,通过RTq PCR检测pre-rRNA的水平。结果 CRIF1可促进pre-rRNA的表达;随着糖浓度的升高,CRIF1的表达量逐渐增加;敲低CRIF1可抑制糖浓度依赖的pre-rRNA的表达。结论 CRIF1可提高高糖诱导下pre-rRNA的表达水平,从而参与高糖诱导的rRNA基因的转录调控。

关键词： CRIF1 pre-rRNA 葡萄糖诱导

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肿瘤来源外泌体通过激活肺上皮细胞TLR3促进肺转移前微环境形成

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中国肿瘤生物治疗杂志 2017年第2期24卷 I0001-I0003页

作者：刘艳芳顾炎韩岩梅张迁蒋正平张相黄波许小青郑建明曹雪涛第二军医大学免疫学研究所医学免疫学国家重点实验室上海200433 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所免疫学教研室医学分子生物学国家重点实验室北京100005 第二军医大学长海医院病理科上海200433

肿瘤转移是肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤转移前微环境是指原发灶肿瘤能通过肿瘤来源物质动员和募集骨髓来源细胞到转移靶器官，与靶器官中基质细胞的协同作用，创造利于肿瘤细胞定居的“土壤”。多种骨髓来源细胞（如中性粒细胞等）被... 详细信息

肿瘤转移是肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤转移前微环境是指原发灶肿瘤能通过肿瘤来源物质动员和募集骨髓来源细胞到转移靶器官，与靶器官中基质细胞的协同作用，创造利于肿瘤细胞定居的“土壤”。多种骨髓来源细胞（如中性粒细胞等）被证实参与了转移前微环境的形成。

关键词：肿瘤患者微环境肺转移肺上皮细胞外泌体激活肿瘤转移来源细胞

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