检索结果-内蒙古大学图书馆

国际免疫学杂志 2011年第2期34卷 85-90页

作者：卢燕来朱于莉何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系医学分子生物学国家重点实验室100005

γδT细胞属于固有免疫细胞，主要位于皮肤、小肠等黏膜及皮下组织和外周血中。γδT细胞的功能包括抗感染、抗肿瘤、免疫监视、免疫调节和维持免疫耐受等作用。在病毒入侵机体的过程中，γδT细胞表型和功能发生变化，搭建了固有免疫... 详细信息

γδT细胞属于固有免疫细胞，主要位于皮肤、小肠等黏膜及皮下组织和外周血中。γδT细胞的功能包括抗感染、抗肿瘤、免疫监视、免疫调节和维持免疫耐受等作用。在病毒入侵机体的过程中，γδT细胞表型和功能发生变化，搭建了固有免疫细胞及免疫细胞的桥梁，除了起到直接的细胞毒杀伤作用，还作为免疫调节细胞和抗原递呈细胞发挥了抗感染的免疫功能。

关键词： γδT细胞病毒细胞毒免疫调节抗原递呈

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miR-16促进Neuro2a细胞的凋亡

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基础医学与临床 2011年第7期31卷 762-766页

作者：刘畅刘伟王明阴彬袁建刚中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医学院基础学院解剖与组织胚胎学系北京100005

目的检测过表达miR-16对小鼠Neuro2a细胞周期和凋亡的影响,探讨miR-16在肿瘤发病过程中的可能机制。方法构建能够在细胞中过表达miR-16的真核表达载体pcDNA3.1-miR-16,利用Real-time PCR验证了表达载体的过表达效应。应用pcDNA3.1-miR... 详细信息

目的检测过表达miR-16对小鼠Neuro2a细胞周期和凋亡的影响,探讨miR-16在肿瘤发病过程中的可能机制。方法构建能够在细胞中过表达miR-16的真核表达载体pcDNA3.1-miR-16,利用Real-time PCR验证了表达载体的过表达效应。应用pcDNA3.1-miR-16载体转染Neuro2a细胞,利用流式细胞术和TUNEL法检测Neuro2a细胞周期及凋亡改变情况。结果转染过表达pcDNA3.1-miR-16载体后,成熟的miR-16表达与对照组相比明显升高(P<0.05)。在Neuro2a细胞中过表达miR-16后,用流式细胞术检测发现,Neuro2a细胞周期未见明显改变,与对照组相比,凋亡细胞数量有显著增加;进一步通过TUNEL法验证,发现miR-16的过表达能够促进Neuro2a的细胞凋亡。结论过表达miR-16能够显著促进Neuro2a细胞凋亡而对细胞周期并无影响,提示miR-16可能对肿瘤治疗起作用。

关键词： miR-16 Neuro2a细胞细胞周期凋亡肿瘤

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非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白C'末端SBP-3×Flag标记的HCT 116结直肠癌细胞模型的建立

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中国医学科学院学报 2011年第6期33卷 624-628页

作者：黄泽彬张泽延张晓东缪时英王琳芳杜润蕾中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 武汉大学生命科学学院细胞与发育生物学系武汉430072

目的建立非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)C'末端SBP-3×Flag标记的HCT116结直肠癌细胞模型。方法 PCR扩增同源臂,构建TPX2的腺相关病毒打靶载体,包装病毒后打靶HCT116结直肠癌细胞,G418和PCR筛选获得含有新霉素抗性基因的... 详细信息

目的建立非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白(TPX2)C'末端SBP-3×Flag标记的HCT116结直肠癌细胞模型。方法 PCR扩增同源臂,构建TPX2的腺相关病毒打靶载体,包装病毒后打靶HCT116结直肠癌细胞,G418和PCR筛选获得含有新霉素抗性基因的阳性细胞株,最后通过Cre病毒感染去除抗性基因,并用PCR方法筛选获得TPX2C末端SBP和3×Flag内源性双标签的HCT116结直肠癌细胞株。结果筛选获得2个含有新霉素抗性基因的细胞株,随后经Cre病毒感染得到去除新霉素抗性基因的阳性细胞克隆,并经Western blot检测验证了SBP-3×Flag基因的敲入。结论成功建立了TPX2 C'末端SBP-3×Flag标记的HCT116结直肠癌细胞模型。

关键词：非洲爪蟾驱动蛋白样蛋白2靶蛋白基因敲入同源重组 HCT116 结直肠癌

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MicroRNA-29b重组慢病毒表达载体的构建及其抑制胃癌细胞系的迁移和增殖

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基础医学与临床 2011年第6期31卷 609-614页

作者：蒋崇亮汪晓艳龚佳男王芳余佳冯涛重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心生物化学与分子生物学教研室重庆400016 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体,并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共... 详细信息

目的构建has-miR-29b重组慢病毒的表达载体,并观察其对胃癌细胞系迁移和增殖能力的影响。方法将PCR扩增的miR-29b前体序列和pMIR载体经双酶切后连接产生pMIR-miR-29b慢病毒表达载体。pMIR-miR-29b、Packaging Plasmid(s)和pVSV-G质粒共转染包装细胞系293TN,包装产生慢病毒。使用收获的慢病毒颗粒感染胃癌细胞系HGC-27,72 h后利用real-time PCR检测miR-29b在HGC-27内的表达水平,Western blot检测其靶基因MCL-1的表达。划痕实验和细胞增殖实验分别观察在HGC-27细胞中过表达miR-29b后细胞迁移能力及增殖能力的变化。结果成功构建了miR-29b重组慢病毒的表达载体,感染胃癌细胞HGC-27后,能够成功过表达miR-29b。在HGC-27细胞中过表达miR-29b,其靶基因MCL-1的表达明显被抑制,并且Lenti-29b组与对照组Untreat组和Lenti-vector组相比,Lenti-29b组的迁移能力显著降低(P<0.01);Lenti-29b组与Lenti-vector组相比,Lenti-29b组在48、72及96 h 3个时间点的增殖能力均显著下降(P<0.01)。结论成功获得过表达miR-29b的重组慢病毒颗粒,miR-29b能够抑制其靶基因MCL-1的表达,并对HGC-27细胞的迁移和增殖有明显的抑制作用。

关键词： miR-29b 胃癌细胞慢病毒细胞迁移细胞增殖

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MicroRNA-144调控红系分化

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基础医学与临床 2011年第6期31卷 642-646页

作者：汪晓艳蒋崇亮朱勇王芳余佳冯涛重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究microRNA-144(miR-144)通过调节视网膜母细胞瘤蛋白(RB)对红系分化的影响。方法用氯化高铁血红素(hemin)诱导人慢性髓系白血病细胞系K562可实现在体外模拟红系分化过程,使用Real-time PCR检测miR-144表达;利用体外合成的寡核苷... 详细信息

目的研究microRNA-144(miR-144)通过调节视网膜母细胞瘤蛋白(RB)对红系分化的影响。方法用氯化高铁血红素(hemin)诱导人慢性髓系白血病细胞系K562可实现在体外模拟红系分化过程,使用Real-time PCR检测miR-144表达;利用体外合成的寡核苷酸(mimic-144)转染K562细胞,检测过量表达miR-144对红系分化的影响;结合生物信息学分析、双荧光素酶报告系统和Western blot寻找并确定miR-144的靶基因。结果 miR-144在hemin诱导的K562红系分化过程中表达显著升高(P<0.05),在K562细胞中过表达miR-144可以促进血红蛋白(γ-globin)和红细胞表面标志CD235a的表达和积累;RB为miR-144的靶基因之一;在K562红系分化中,RB呈先略升后降的趋势,以0 h为参照,12 h RB/GAPDH灰度值最低为:0.092±0.007(P<0.05)。结论 miR-144通过负调控RB的表达促进hemin诱导的K562红系分化。

关键词： microRNA-144 红系分化视网膜母细胞瘤蛋白

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胰岛素-胰岛素样生长因子代谢轴在胎儿生长发育中的作用

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中国糖尿病杂志 2011年第3期19卷 204-206页

作者：茅李莉肖新华刘英朱席琳孙晓方张茜李文慧于淼张化冰北京协和医学院、中国医学科学院、北京协和医院内分泌科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院、医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨胰岛素-胰岛素样生长因子(IGF)代谢轴在胎儿宫内生长发育中的作用。方法连续收集266名单胎足月新生儿基本资料,采用放免法检测脐血胰岛素和IGF水平。结果 (1)脐血胰岛素水平与出生体重、BMI、身长和胎盘重量均呈正相关(P<0.... 详细信息

目的探讨胰岛素-胰岛素样生长因子(IGF)代谢轴在胎儿宫内生长发育中的作用。方法连续收集266名单胎足月新生儿基本资料,采用放免法检测脐血胰岛素和IGF水平。结果 (1)脐血胰岛素水平与出生体重、BMI、身长和胎盘重量均呈正相关(P<0.01)。(2)脐血IGF水平与出生体重、BMI、身长和胎盘重量均呈正相关(P<0.01)。(3)脐血胰岛素水平和IGF水平呈显著正相关(P<0.01)。结论脐血胰岛素、IGF水平可作为评价胎儿宫内生长发育情况的参考指标。

关键词：脐血胰岛素胰岛素样生长因子宫内生长发育

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PcG相关蛋白RYBP

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生命的化学 2011年第6期31卷 827-831页

作者：田硕陈等陈虹黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所清华大学医学部北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

30多年前在果蝇体内鉴定到了PcG(Polycomb group)蛋白复合体,它是通过染色质修饰调控靶基因转录的表达抑制因子,通过抑制同源异形基因(homeotic gene,Hox)的表达调控机体发育。其相关蛋白质RYBP(Ring1 and YY1 binding protein)分布于... 详细信息

30多年前在果蝇体内鉴定到了PcG(Polycomb group)蛋白复合体,它是通过染色质修饰调控靶基因转录的表达抑制因子,通过抑制同源异形基因(homeotic gene,Hox)的表达调控机体发育。其相关蛋白质RYBP(Ring1 and YY1 binding protein)分布于细胞质和细胞核,参与调节基因转录、个体发育、细胞凋亡以及人类恶性肿瘤的发生等生物学过程。本文就RYBP的特性、作用机制及生物学功能进行综述。

关键词： PcG蛋白复合体 RYBP 转录抑制细胞凋亡

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噬菌体表面展示文库筛选人干细胞因子模拟肽

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中国医学科学院学报 2011年第4期33卷 351-356页

作者：苏林孔燕刘长征杨克恭陈松森中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京大学临床肿瘤学院北京肿瘤医院北京市肿瘤防治研究所肾癌和黑色素瘤内科北京100036

目的用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,... 详细信息

目的用噬菌体表面展示文库筛选具有人干细胞因子(hSCF)生物学活性的模拟肽。方法采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)从噬菌体环七肽库和十二肽库筛选与重组hSCF受体(rc-kit/Ig1-3)有较高亲和力的噬菌体克隆,提取噬菌体单链DNA进行序列测定,根据序列测定结果合成阳性小肽,四甲基偶氮噻唑盐(MTT)法检测合成小肽刺激UT-7细胞增殖的活性。结果经3轮筛选获得11个来源于环七肽库和8个来源于十二肽库与rc-kit/Ig1-3结合活性较高的噬菌体克隆,DNA测序结果显示环七肽库筛选到1个共有序列DPSPHTH,十二肽库没有筛选到共有序列。序列比对分析显示,这些小肽与hSCF没有同源序列。MTT法测定结果表明,合成的4个小肽均能促进UT-7细胞增殖,其中CE16和LE20刺激效果明显。结论获得4个具有较高hSCF生物学活性的模拟肽。

关键词：噬菌体表面展示文库人干细胞因子模拟肽筛选酶联免疫吸附测定法

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黄连素降糖调脂机制的研究

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中国实验动物学报 2011年第1期19卷 29-33,93页

作者：张茜肖新华王彤朱席琳李文慧刘英袁涛孙晓方孙琦向红丁王姮中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院内分泌科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室北京100730

目的旨在研究黄连素对KKAy小鼠体重、血糖、血脂、胰岛素等相关代谢指标的影响,且应用基因芯片探讨黄连素降血糖、调血脂的机制。方法选用KKAy小鼠16只,随机分为黄连素组(给予每日250 mg/kg的黄连素粉末悬浊液)和对照组(给予等体积生理... 详细信息

目的旨在研究黄连素对KKAy小鼠体重、血糖、血脂、胰岛素等相关代谢指标的影响,且应用基因芯片探讨黄连素降血糖、调血脂的机制。方法选用KKAy小鼠16只,随机分为黄连素组(给予每日250 mg/kg的黄连素粉末悬浊液)和对照组(给予等体积生理盐水),均连续灌胃4周。每周末测定小鼠空腹血糖(FBG)和体重。3周末进行口服糖耐量(OGTT)实验。4周末测定小鼠FBG、血脂和空腹胰岛素(FINS)水平。取小鼠骨骼肌组织进行RT-PCR基因芯片实验。结果黄连素组小鼠FBG、OGTT曲线下面积(AUC)、TC、TG、FINS和HOMA-IR值均比对照组显著降低(P<0.05或P<0.01)。基因芯片显示黄连素组GLUT4、MAPK8、MAPK14、PPARα、UCP2上调,PPARγ、PGC、CEBP、resistin、HNF4α下调。结论黄连素不仅能有效降低KKAy小鼠FBG,改善胰岛素敏感性,还能调节脂代谢。黄连素可能是通过AMPK-p38 MAPK-GLUT4通路调节KKAy小鼠血糖。PPARα上调参与黄连素对KKAy小鼠血脂的调节。

关键词：黄连素 KKAy小鼠基因芯片糖尿病脂代谢紊乱糖代谢

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STEAP4基因多态性与维吾尔族人胰岛素抵抗的相关性

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中国医学科学院学报 2011年第3期33卷 299-305页

作者：郭艳英周玲姚晓光严治涛王红梅罗文利沈岩李南方中国医学科学院北京协和医学院基础医学院博士后流动站北京100005 新疆维吾尔自治区人民医院博士后工作站乌鲁木齐830001 新疆维吾尔自治区人民医院高血压科新疆高血压诊断治疗研究中心乌鲁木齐830001 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究前列腺六次跨膜上皮抗原4(STEAP4)基因多态性与维吾尔族人胰岛素抵抗的关系。方法研究对象来自新疆和田地区2127例维吾尔族人肥胖等代谢性疾病的横断面调查研究,胰岛素抵抗病例组669例[胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)≥2.365%],正常... 详细信息

目的研究前列腺六次跨膜上皮抗原4(STEAP4)基因多态性与维吾尔族人胰岛素抵抗的关系。方法研究对象来自新疆和田地区2127例维吾尔族人肥胖等代谢性疾病的横断面调查研究,胰岛素抵抗病例组669例[胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)≥2.365%],正常对照组664例(HOMA-IR≤1.335%)。首先对50例胰岛素抵抗患者(HOMA-IR≥2.3)STEAP4基因的功能区进行测序,根据连锁不平衡(r2>0.8)和最小等位基因频率>5%的原则选择代表性变异在自然人群中行病例对照关联研究。结果 STEAP4基因测序共发现16个变异,其中新发现10个。在关联分析的3个变异中,rs8122(P/Pc=0.004/0.012)和rs1981529(P/Pc=0.015/0.045)与维吾尔族人的胰岛素抵抗表型关联。多元线性回归分析结果显示,rs8122 3种基因型间(GG>GA>AA)的腰围(P/Pc=0.032/0.256)、体重指数(BMI)(P/Pc=0.004/0.032)、HOMA-IR(P/Pc=0.010/0.08)、空腹胰岛素(P/Pc=0.023/0.184)及rs1981529 3种基因型间(AA>AG>GG)的腰围(P/Pc=0.005/0.040)、BMI(P/Pc=0.002/0.016)水平均有逐渐减小趋势。胰岛素抵抗病例组单倍型1(rs8122 G-rs1981529 A-rs34741656 G)的频率明显高于对照组(P=0.021)。结论 STEAP4基因多态性与新疆维吾尔族人的肥胖相关胰岛素抵抗关联。

关键词：遗传流行病学关联研究胰岛素抵抗维吾尔族

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