检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2008年第6期30卷 690-695页

作者：陈凤郭雅彬刘士廉郑德先刘彦信中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所北京肿瘤分子生物学实验室北京100142

目的构建以人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体。方法采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-),筛选稳... 详细信息

目的构建以人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体死亡受体5(DR5)为抗原的鼠/人重组嵌合抗体。方法采用基因工程技术,扩增和克隆抗DR5嵌合抗体的轻、重链表达载体,共转染二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞(CHO-dhfr-),筛选稳定分泌表达抗DR5嵌合抗体的细胞株。采用ELISA和Western bloting法鉴定抗体的人源性和抗体-抗原结合活性,四唑盐/吩嗪硫酸甲酯比色法检测抗体的生物学活性。结果获得了稳定表达和分泌抗人DR5的嵌合抗体(anti-DR5mV-hH)的重组细胞;与人DR5蛋白具有高的特异性结合活性;能使体外培养的人髓性白血病Jurkat细胞和人结肠癌HCT116细胞的存活率分别下降到73.15%和77.30%。结论抗DR5嵌合抗体anti-DR5mV-hH具有抗肿瘤活性,为发展人源化抗体药物的研究奠定了基础。

关键词：抗死亡受体5嵌合抗体中国仓鼠卵巢细胞人IgG轻链人IgG重链

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小鼠脾脏来源的调节性表型γδT细胞的存在和体外诱导

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中国免疫学杂志 2008年第6期24卷 488-491页

作者：杨静琳康宁汤龙陈兴明刘庆丰崔莲仙胡云章何维北京协和医学院医学生物研究院中国医学科学院医学生物研究所疫苗室昆明650118 北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所免疫学系医学分子生物学国家重点实验室北京101005 北京协和医院耳鼻喉科北京101005

目的:研究初始γδT细胞是否存在具有调节细胞表型的亚群,同时是否能够像CD4+CD25-T细胞一样可以在体外诱导产生具有调节表型的γδT细胞。方法:采用流式分选或磁珠分选的方法分离纯化脾淋巴细胞中γδT细胞,通过反转录聚合酶链反应(RT-... 详细信息

目的:研究初始γδT细胞是否存在具有调节细胞表型的亚群,同时是否能够像CD4+CD25-T细胞一样可以在体外诱导产生具有调节表型的γδT细胞。方法:采用流式分选或磁珠分选的方法分离纯化脾淋巴细胞中γδT细胞,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时定量PCR(Real-time PCR)和免疫荧光染色分析初始的γδT细胞以及TGFβ-(5ng/ml)诱导后的γδT细胞中Foxp3及部分调节性T细胞表面分子和细胞因子的表达情况。结果:与CD4+CD25+T细胞相比,初始的γδT细胞Foxp3表达量很低;活化的γδT细胞经过TGFβ-诱导后Foxp3表达量明显增加,同时与免疫调节相关的表面分子如GITR、CTLA-4和细胞因子TGFβ-、IL-10的表达量也相应增加,IFNγ-的表达有所降低。结论:初始的γδT细胞低表达Foxp3,在体外可经TGFβ-诱导产生具有调节性T细胞表型的亚群。

关键词： γδT细胞调节性T细胞 Foxp3 免疫调节

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血管紧张肽转化酶2与肾素-血管紧张肽系统的研究进展

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生命的化学 2008年第5期28卷 625-628页

作者：魏斌张艳丽武警北京市总队第三医院北京100039 医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院北京100005

肾素-血管紧张肽系统(RAS)在维持血压稳态、水盐平衡,及局部组织器官的正常功能等方面具有重要的作用。局部RAS的失衡将导致这些器官的疾病。血管紧张肽转化酶2(ACE2)是ACE的同源物,作为RAS的重要负调节因子,平衡血管紧张肽Ⅱ的产生,维... 详细信息

肾素-血管紧张肽系统(RAS)在维持血压稳态、水盐平衡,及局部组织器官的正常功能等方面具有重要的作用。局部RAS的失衡将导致这些器官的疾病。血管紧张肽转化酶2(ACE2)是ACE的同源物,作为RAS的重要负调节因子,平衡血管紧张肽Ⅱ的产生,维持循环系统和局部组织中RAS的稳态。本文综述了在心血管、肺、肾、肝等器官的多种急、慢性疾病患者或动物模型中,RAS与ACE2所发挥的重要作用。

关键词：血管紧张肽转化酶2 血管紧张肽Ⅱ 肾素-血管紧张肽系统局部组织RAS

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颗粒酶B抑制剂的研究进展

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国际免疫学杂志 2008年第3期31卷 197-200页

作者：李一叶卢圣栋(审校) 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院分子生物学国家重点实验室北京100005

颗粒酶B是细胞毒淋巴细胞发挥免疫杀伤作用的重要效应因子，不仅在靶细胞内快速诱导凋亡及其它细胞毒作用，还具有重要的胞外生物学功能。颗粒酶B在机体内的自稳调节主要通过与丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员相互作用而实现。这种内源抑... 详细信息

颗粒酶B是细胞毒淋巴细胞发挥免疫杀伤作用的重要效应因子，不仅在靶细胞内快速诱导凋亡及其它细胞毒作用，还具有重要的胞外生物学功能。颗粒酶B在机体内的自稳调节主要通过与丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族成员相互作用而实现。这种内源抑制剂是细胞毒淋巴细胞及某些抗原递呈细胞保持其免疫内稳态的重要调控者，在临床上还能缓解与颗粒酶B死亡路径相关的自身免疫性疾病及移植排斥反应。多种肿瘤细胞已被发现有颗粒酶B抑制剂的表达，可能与其逃避促凋亡作用有关。为抵制抗感染效应，各种病毒亦进化产生了不同作用机制的颗粒酶B抑制剂。研究各种天然及人工合成的颗粒酶B抑制剂有助于在对抗人类自身免疫性疾病及癌症方面提供基于选择性调控的新型治疗方法，在抗病毒药物研制方面也具有潜在的临床应用价值。

关键词：颗粒酶B 丝氨酸蛋白酶抑制剂淋巴细胞生物学

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内皮抑素和血管生成抑素融合基因的裂解病毒对C6胶质瘤的实验研究

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中华神经外科杂志 2008年第1期24卷 69-72页

作者：王建交杨立庄刘福生金贵善柴奇彭小忠(点评) 北京市神经外科研究所首都医科大学附属北京天坛医院100050 哈尔滨医科大学附属第二医院神经外科中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨重组单纯疱疹病毒介导的内皮抑素和血管生成抑素（Endo-Angio）融合基因对C6胶质瘤的疗效。方法构建含有Endo-Angio融合基因的重组单纯疱疹病毒，四唑蓝比色法（MTT法）体外观察其C6细胞的裂解作用；Western-blot观察Endo—Angi... 详细信息

目的探讨重组单纯疱疹病毒介导的内皮抑素和血管生成抑素（Endo-Angio）融合基因对C6胶质瘤的疗效。方法构建含有Endo-Angio融合基因的重组单纯疱疹病毒，四唑蓝比色法（MTT法）体外观察其C6细胞的裂解作用；Western-blot观察Endo—Angio融合蛋白的表达。建立大鼠C6模型，当肿瘤体积≥2mm^3时，治疗组瘤腔内注射10^7pfu（10μl）病毒，对照组注射等剂量生理盐水。MRI动态观察肿瘤体积变化，组织病理行微血管计数，并记录荷瘤鼠生存时间。结果体外实验示：当感染率（MOI）=1000时，99％的C6细胞死亡；头部MRI发现治疗组胶质瘤生长减慢；荷瘤鼠存活期：对照组（20．3±0．45）d，治疗组（38．3±0．96）d，中位生存期延长（P〈0．01）；HE染色见瘤细胞分散，体积较小，无出血坏死；病理染色示：治疗组和对照组新生血管均值分别为（5．3±1．7）／HP和（15．6±2．8）／HP（P〈0．01）。结论重组单纯疱疹病毒介导的Endo-Angio融合基因不仅通过抑制肿瘤的新生血管生成，而且通过裂解肿瘤细胞双重作用治疗颅内胶质瘤。

关键词：内皮抑素血管生成抑素血管生成 C6胶质瘤病毒-基因治疗

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人Ndfip1和Nedd4的原核表达,纯化和抗体制备

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生命科学研究 2008年第1期12卷 40-44页

作者：黄守均张勇菅记涌朱大海中国医学科学院基础医学研究所/北京协和医学院基础医学院生化与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室中国北京100005

为了进一步从蛋白水平上检测Ndfip1(Nedd4 family interacting protein 1)和Nedd4(Neuronal precursor cell-expressed developmentally down-regulated 4)在肢带型肌营养不良(Limb-girdle muscular dystrophy,LGMD)患者的肌肉组织中的表达及功能,以正常人的脑和肾脏组织的总RNA为模板,RT-PCR扩增Ndfip1和Nedd4部分编码序列,构建原核表达重组质粒pET28b-hNdfip1和pET28b-hNedd4,转化大肠杆菌BL21后,加IPTG诱导蛋白表达,Ni-NTA层析柱纯化蛋白,免疫BALB/c小鼠制备抗体.Westernblot检测显示抗体能识别人和小鼠的Ndfip1和Nedd4,小鼠各组织中Ndfip1的蛋白表达谱与文献报道的Ndfip1 mRNA表达谱不一致,暗示Ndfip1具有转录和翻译水平的调控.

关键词： Ndfip1 Nedd4 肢带型肌营养不良抗体

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雄激素受体和免疫系统

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国际免疫学杂志 2008年第3期31卷 168-171页

作者：康宁何维(审校) 北京协合医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究所免疫学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医学院基础学院中国医学科学院基础医学研究

雄激素可以介导大量的生理反应，其作用是通过雄激素受体实现的。雄激素受体分为细胞内受体和膜受体。细胞内受体属于核受体家族，有3个结构域，分别是转录激活结构域、DNA结合结构域和配体结合结构域。膜受体是近年来新发现的一种雄激... 详细信息

雄激素可以介导大量的生理反应，其作用是通过雄激素受体实现的。雄激素受体分为细胞内受体和膜受体。细胞内受体属于核受体家族，有3个结构域，分别是转录激活结构域、DNA结合结构域和配体结合结构域。膜受体是近年来新发现的一种雄激素受体，可能与G蛋白有关，引发细胞内Ca^2＋水平的升高，并产牛下游的一系列反应。近年来的研究显示，雄激素和雄激素受体与免疫系统有密切的关系，对其发育和反应性有重要影响。

关键词：雄激素雄激素受体免疫系统

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利用GAL4和萤光素酶确定锌指蛋白HZF1的激活结构域

利用GAL4和萤光素酶确定锌指蛋白HZF1的激活结构域

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第九届全国酶学学术讨论会暨邹承鲁诞辰85周年纪念会

作者：邓敏捷彭瀚张俊武中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室

大量研究已证明锌指蛋白在细胞分化和发育过程中扮演着重要角色。先前我们课题组从人骨髓 cDNA 文库中筛选到一个新的锌指蛋白基因 HZF1,并已证明其在红系和巨核系分化中具有重要作用(Leukemia,20:1109-1116,2006)。为了鉴定 HZF1

关键词：锌指蛋白 HZF1 萤光素酶转录激活

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人工耳蜗植入者线粒体12SrRNA基因突变的分析

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中国医药生物技术 2008年第3期3卷 169-172页

作者：陈东野陈晓巍田永胜左瑾曹克利方福德中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院耳鼻喉科 100730 基础医学研究所/医学分子生物学国家重点实验室

目的研究接受人工耳蜗植入的耳聋患者中,线粒体12SrRNA基因突变的类型和发生概率。方法选取100例接受人工耳蜗植入的非综合征性耳聋患者(语前聋96例,语后聋4例;氨基糖苷类药物使用史者16例),取外周血提取基因组DNA,以PCR方法扩增线粒体1... 详细信息

目的研究接受人工耳蜗植入的耳聋患者中,线粒体12SrRNA基因突变的类型和发生概率。方法选取100例接受人工耳蜗植入的非综合征性耳聋患者(语前聋96例,语后聋4例;氨基糖苷类药物使用史者16例),取外周血提取基因组DNA,以PCR方法扩增线粒体12SrRNA基因,扩增产物纯化后直接测序分析突变。结果100例患者中有2例检测到线粒体12SrRNA基因1555A>G纯合突变,1例检测到delT961Cn杂合突变,致病基因突变总检出率为3%。结论在所研究的人工耳蜗植入群体中,线粒体12SrRNA基因突变不是主要的致聋病因。

关键词：突变线粒体基因 rRNA 听觉丧失耳蜗植入术

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睾丸表达新基因HSD-28的克隆及其编码蛋白质的研究

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医学研究杂志 2008年第12期37卷 28-31,F0003页

作者：张宁王勇陈迎春吴宁缪时英王琳芳中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室/北京协和医学院(清华大学医学部)基础学院北京100005

目的研究从人初级精母细胞特异EST文库中克隆的新基因HSD-28及编码蛋白质在精子发生过程中的表达及可能发挥的功能。方法利用根据本实验室构建的人初级精母细胞特异EST文库,通过电子克隆方法,从网络数据库资源获取基因HSD-28。纯化原核... 详细信息

目的研究从人初级精母细胞特异EST文库中克隆的新基因HSD-28及编码蛋白质在精子发生过程中的表达及可能发挥的功能。方法利用根据本实验室构建的人初级精母细胞特异EST文库,通过电子克隆方法,从网络数据库资源获取基因HSD-28。纯化原核表达系统表达的HSD-28蛋白,以此免疫新西兰白兔制备针对HSD-28的特异性多克隆抗体。采用免疫组化的方法研究HSD-28在人睾丸组织中的表达定位。最后,利用酵母双杂交系统筛选与HSD-28相互作用的蛋白质。结果克隆得到了的HSD-28基因,提交GenBank获得登陆号为AY251533,全长为641个碱基,其中开放阅读框为504碱基,编码一个由168个氨基酸构成的蛋白质,命名为HSD-28蛋白。将构建的pET-30a-HSD-28重组质粒转化到BL21(DE3)宿主菌,表达并纯化了HSD-28蛋白,大小约为28kDa。免疫组织化学结果显示,HSD-28蛋白特异的定位于人精原细胞和早期初级精母细胞。筛选得到与HSD-28相互作用的两个阳性克隆45#和106#。结论从人睾丸cDNA文库中成功克隆得到HSD-28基因,其编码蛋白质表达定位于人精原细胞和初级精母细胞中,可能参与精子发生过程中减数分裂的调节。

关键词： HSD-28 精原细胞初级精母细胞减数分裂

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