检索结果-内蒙古大学图书馆

国外医学（分子生物学分册） 2000年第2期22卷 109-111页

作者：刘海丽中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

糖基磷脂酰肌醇锚蛋白及阵发性睡眠性血红蛋白尿症是近年来的研究热点之一。本文总结了近年来发现的GPI-锚合成过程中的基因——PIG-A、PIG-H、PIG-C、PIG-B、PIG-L、PIG-F,并着重介绍了GPI-Pr和PIG-A基因与PNH发病的关系及有关PNH的最... 详细信息

糖基磷脂酰肌醇锚蛋白及阵发性睡眠性血红蛋白尿症是近年来的研究热点之一。本文总结了近年来发现的GPI-锚合成过程中的基因——PIG-A、PIG-H、PIG-C、PIG-B、PIG-L、PIG-F,并着重介绍了GPI-Pr和PIG-A基因与PNH发病的关系及有关PNH的最新研究进展。

关键词： GPI-锚 GPI-Pr PNH 血红蛋白系统

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化学趋化因子受体在HIV感染中的作用及其在AIDS治疗中的应用价值

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生命科学 2000年第2期12卷 76-79页

作者：洪梅北京100005 中国医学科学院基础医学研究所!中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

化学趋化因子受体作为协同受体，为人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１）进入细胞所必需。其中ＣＸＣＲ４被亲Ｔ细胞的病毒株利用，而ＣＣＲ５被亲巨噬细胞的病毒株利用，它们是大多数病毒株利用的协同受体。协同受体和ＣＤ４一起形成复合受体... 详细信息

化学趋化因子受体作为协同受体，为人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－１）进入细胞所必需。其中ＣＸＣＲ４被亲Ｔ细胞的病毒株利用，而ＣＣＲ５被亲巨噬细胞的病毒株利用，它们是大多数病毒株利用的协同受体。协同受体和ＣＤ４一起形成复合受体，ｇｐ１２０与之结合后发生构象改变，使ｇｐ４１暴露出来；引起膜的融合。ＨＩＶ协同受体的发现为治疗艾滋病开辟了新的途径。利用趋化因子拮抗剂、单克隆抗体和天然配体封闭趋化因子受体可阻止ＨＩＶ的感染；化学趋化因子受体可以用作靶向蛋白将杀伤性基因导入ＨＩＶ－１感染的细胞；有ＨＩＶ抗性的ＣＣＲ５等位基因可以通过ｅｘｖｉｖｏ法在体内表达；此外，通过基因操作阻止趋化因子受体的表达；也能抑制ＨＩＶ的感染。

关键词：化学趋化因子 HIV-1 治疗 AIDS

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重组可溶性TRAIL在大肠杆菌中的表达、分离纯化及其诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 184-184页

作者：刘彦信史娟郑德先中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京100005

目的和方法:本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究.结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的... 详细信息

目的和方法:本项研究建立了高效稳定表达可溶型TRAIL(rsTRAIL, TNF-related apoptosis inducting ligand)重组融合蛋白的工程菌,并进行了该重组融合蛋白的表达、分离纯化及诱导肿瘤细胞凋亡活性的研究.结果:重组融合蛋白在大肠杆菌中的表达产量可达到菌体总蛋白的30%左右,亲和层析纯化后,重组融合蛋白的纯度可达95%以上.其表现分子量约为22 kD,等电点为6.29,N-末端的氨基酸顺序与理论值相同.该融合蛋白在浓度为0.1～1 μg/mL时,能显著诱导所试全部7种肿瘤细胞株细胞凋亡,不能诱导正常鼠成纤维细胞细胞凋亡;对贲门癌、乳腺癌、恶性胸腺瘤等原代细胞也具有很强的杀伤作用,但不杀伤正常人外周血淋巴细胞;动物实验研究表明,能显著抑制人肝癌细胞在裸鼠体内生长,而对正常小鼠无任何毒性.结论:该重组融合蛋白能特异性地诱导肿瘤细胞凋亡,具有重要临床应用前景.

关键词：肿瘤细胞凋亡分离纯化 TRAIL 大肠杆菌大肠埃希氏菌埃希氏杆菌属

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T淋巴细胞生与死的决定

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中国病理生理杂志 2000年第10期16卷 184-184页

作者：郑德先刘彦信中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室!北京100005

目的:T淋巴细胞抗原受体复合物(TCD/CD3)介导的信号传递途径决定其生存与死亡,而TCR的刺激信号是通过CD3各亚基胞内区免疫酪氨酸受体激活基序(ITAM)传递的.国内外和本实验室的一系列研究发现CD3ε-ITAM中的两个酪氨酸(Y170,Y181)对T淋... 详细信息

目的:T淋巴细胞抗原受体复合物(TCD/CD3)介导的信号传递途径决定其生存与死亡,而TCR的刺激信号是通过CD3各亚基胞内区免疫酪氨酸受体激活基序(ITAM)传递的.国内外和本实验室的一系列研究发现CD3ε-ITAM中的两个酪氨酸(Y170,Y181)对T淋巴细胞的生存与死亡起不同的调节作用,其中任何一个或两个酪氨酸同时突变为苯丙氨酸均可影响T淋巴细胞激活,并阻断T细胞死亡的信号传递.T细胞接受抗CD3抗体刺激后,CD3ε-ITAM的Y170可募集Lck、3-磷酸肌醇激酶的P85α亚基和Shc,而Y181可募集ZAP70与其结合,从而介导不同的信号极联,决定细胞生(激活)或死(凋亡)的不同命运.方法和结果:在CD3ε介导的细胞凋亡过程中,凋亡基因Fas及其配体FasL的表达增加.进一步的研究发现,核转录因子Nur77在细胞激活时表达上调,在细胞接受持续刺激并出现凋亡时,Nur77的表达进一步增加.为阐明Fas、FasL和Nur77三者表达的相关性,建立了稳定表达Nur77的T细胞株,构建了Fas及FasL启动子驱动的荧光素酶报告基因表达载体并转染该细胞株,研究Nur77过量表达对Fas及FasL转录的影响,结果表明Nur77可以上调Fas的表达,但对FasL的表达没有影响.Nur77上调Fas的表达,从而增加了Fas+细胞和细胞凋亡.结论:Nur77具有决定细胞'生'(细胞激活)或'死'(细胞凋亡)的关键作用.

关键词：细胞凋亡信号传递

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RRM RNA结合蛋白的结构与功能

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生物化学与生物物理进展 1999年第4期26卷 305-307页

作者：杜光伟周严袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白是一类含一个或数个ＲＲＭ结构域及附属结构域的ＲＮＡ结合蛋白，参与ＲＮＡ前体的剪接、ＲＮＡ的细胞定位、ＲＮＡ的稳定性等多种转录后调控过程．在ＲＲＭ基序中含有许多保守... 详细信息

ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白是一类含一个或数个ＲＲＭ结构域及附属结构域的ＲＮＡ结合蛋白，参与ＲＮＡ前体的剪接、ＲＮＡ的细胞定位、ＲＮＡ的稳定性等多种转录后调控过程．在ＲＲＭ基序中含有许多保守的氨基酸以保证对ＲＮＡ的结合活性，但是这一家族的不同蛋白质却能特异地结合各种不同的ＲＮＡ分子．ＲＲＭＲＮＡ

关键词：转录后调控 RNA结合蛋白 RRM基序

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人LDB1 cDNA的分离与克隆

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科学通报 1999年第7期44卷 755-760页

作者：周严杜光伟汪俊华陈建和袁建刚强伯勤医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

根据与鼠LIM结构域结合蛋白Ldb1有较高一致性的人ESTAA45 2 734设计筛库引物 ,在人胎脑cDNA文库中筛出一长度为 2 398bp的cDNA克隆 .其开放读码框编码 34 7个氨基酸 ,与鼠Ldb1、爪蟾XLdb1及果蝇Chip蛋白高度同源 ,含LIM相互作用结构域... 详细信息

根据与鼠LIM结构域结合蛋白Ldb1有较高一致性的人ESTAA45 2 734设计筛库引物 ,在人胎脑cDNA文库中筛出一长度为 2 398bp的cDNA克隆 .其开放读码框编码 34 7个氨基酸 ,与鼠Ldb1、爪蟾XLdb1及果蝇Chip蛋白高度同源 ,含LIM相互作用结构域及核定位信号 .该基因命名为LDB1 (LIMDomainBindingprotein 1 ) ,GenBank接受号为AF0 5 2 ***杂交示LDB1基因在心、脑、肺中表达较高 ,其蛋白产物LDB1作为LIM结构域结合蛋白可能与发育相关 .

关键词： LIM结构域结构蛋白分离克隆 LDB1 cDNA

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人和鼠GRY-RBP cDNA的克隆

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科学通报 1999年第19期44卷 2088-2094页

作者：杜光伟潘美辉周严陈建和姚辉袁建刚强伯勤中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmot... 详细信息

通过筛选人胎儿脑cDNA文库 ,克隆了编码一个新的RNA结合蛋白的人cDNA ,命名为GRY RBP .人GRY RBPcDNA的长度为 2 932bp ,编码一个具 6 2 3个氨基酸 ,分子量为 6 9.6ku的RNA结合蛋白 .GRY RBP蛋白含有 3个RNA识别基序 (RNARecognitionmotifs,RRMs)和一个富含甘氨酸 (G)、精氨酸 (R)、酪氨酸 (Y)的羧基端 .经数据库比较发现该蛋白与许多RRMRNA结合蛋白有较高的相似性 .还以鼠脑cDNA文库为模板 ,利用PCR扩增了鼠GRY RBPcDNA的全编码区和部分非编码区 .Northern杂交发现人GRY RBP在所检测的 8种成人组织中都有表达 ,在心脏。

关键词： cDNA RNA结合蛋白 GRY-RBP 克隆

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幽门螺杆菌空泡毒素基因的单链构象多态性研究

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中华医学杂志 1999年第3期79卷 181-184页

作者：彭惠潘国宗曹世植方福德中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院消化科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所分子生物学国家重点实验室

目的应用ＰＣＲ／ＳＳＣＰ分析幽门螺杆菌（Ｈｐ）的空泡毒素基因（ｖａｃＡ）多态性，借此区分不同来源的Ｈｐ。方法用ｖａｃＡ为模板设计的引物对１５９例各种胃、十二指肠疾病患者胃粘膜行ＰＣＲ扩增，其产物作ＳＳＣＰ分析和Ｓｏｕ... 详细信息

目的应用ＰＣＲ／ＳＳＣＰ分析幽门螺杆菌（Ｈｐ）的空泡毒素基因（ｖａｃＡ）多态性，借此区分不同来源的Ｈｐ。方法用ｖａｃＡ为模板设计的引物对１５９例各种胃、十二指肠疾病患者胃粘膜行ＰＣＲ扩增，其产物作ＳＳＣＰ分析和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交。对３例具不同ＳＳＣＰ带型的十二指肠溃疡（ＤＵ）患者的Ｈｐ进行基因序列分析。结果ｖａｃＡ的两种产物ｖａｃＡ１和ｖａｃＡ２各占７６．５％（１１４／１４９）和２３．５％（３５／１４９），每个胃粘膜仅能扩增出一种产物。８种不同的ＳＳＣＰ带型中以Ｂ型为最多（４５．７％），ＤＵ占８０％。ＤＮＡ测序显示Ｈｐ的ｖａｃＡ信号序列有不同程度的差异。结论不同ＨｐｖａｃＡ基因的变异度较大，利用ＰＣＲＳＳＣＰ可将不同来源的Ｈｐ区分开，从而可用于Ｈｐ流行病学研究和治疗后的追踪观察，鉴别Ｈｐ的感染和重复感染等。

关键词：幽门螺杆菌空泡毒素基因单链构象胃肠疾病

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改进的反向PCR技术克隆转移基因的旁侧序列

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生物化学与生物物理进展 1999年第6期26卷 600-602页

作者：李竹红刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

对传统的反向ＰＣＲ技术作了一些改进：用巢式ＰＣＲ扩增含量极少的靶序列；ＰＣＲ反应体系中加入５％的甲酰胺以减少非特异性扩增．结果表明，改进的反向ＰＣＲ体系是克隆人基因组已知片段旁侧序列的高度灵敏、高度特异的方法．

关键词：反向PCR 旁侧序列转移基因

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一个新的人类硫氧化还原蛋白基因的克隆

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科学通报 1999年第12期44卷 1307-1310页

作者：周彦潘美辉袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读... 详细信息

根据不同发育阶段 ( 1 3,33周 )的人胎脑组织mRNA差异显示分析 (又称DDRT PCR)所得到的具有差异表达的EST的序列 ,设计引物筛选点阵排列的人胎脑cDNA文库 ,得到一个新的全长cDNA克隆 .这个克隆全长 1 2 0 8bp ,包含一个 889bp的开放阅读框 ,一个 1 32bp的 5′非翻译序列和一个 2 0 9bp的 3′非翻译序列以及典型的polyA加尾信号 .其推断的氨基酸序列与人硫氧化还原蛋白同源 ,而且含有硫氧化还原蛋白的保守的活性位点序列 .将它命名为人的类硫氧化还原蛋白基因 (humanthioredoxinlikegene ,hTRXL) .

关键词：差异显示硫氧化还原蛋白胎脑基因克隆

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