检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖学报 2019年第2期50卷 201-210页

作者：卞晓翠刘玉琴杨振丽冯海凉中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病理学系细胞资源中心北京100005

目的为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性。方法收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱... 详细信息

目的为国内建立的人肿瘤细胞系进行身份认证,确认这些细胞系使用的可靠性。方法收集、整理国内实验室建立的人肿瘤来源细胞系,提取细胞的基因组DNA,PCR扩增其中的多个短串联重复序列(STRs)位点后进行毛细管电泳,分析获得细胞的STR图谱作为细胞系的DNA指纹,然后与原始组织或国际数据库中已有细胞的STR谱进行比对,通过匹配度的高低判断该细胞是否被其他细胞交叉污染。对怀疑He La细胞污染的肿瘤细胞,检测其基因组中是否有人乳头瘤病毒18型(HPV-18)病毒插入片段。对怀疑T细胞白血病细胞污染的,则检测T细胞的各种特性(表面标志),根据表面标志表达情况判断是否为错误细胞。结果本研究共收集了37种国内建立的肿瘤细胞系46个样品。本中心建立的6株细胞系均STR正确。其他单位建立的细胞系中有8株系正确,有23(62. 2%)株系认定为错误细胞,人宫颈癌细胞He La是主要污染源;另外发现有些国内自建的细胞系被人结直肠癌细胞HCT-8、宫颈鳞癌细胞Si Ha、T细胞白血病细胞CCRF-CEM及大鼠细胞污染。结论国内建立的肿瘤细胞很高比例地发生了细胞间的交叉污染,科研人员在实验前一定要首先进行细胞身份认定,或者从国家实验细胞资源共享服务平台选择细胞。另外,建立细胞系时保留原始组织用于后续细胞系的身份认证。

关键词：短串联重复序列分型交叉污染特性鉴定聚合酶链反应肿瘤细胞细胞培养人

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炎症小体NLRP3信号通路调控机制及其小分子靶点抑制剂的研究进展

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现代药物与临床 2020年第11期35卷 2283-2287页

作者：穆瑞旭勾文峰魏会强侯文彬李祎亮朱蕾中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津300192 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所北京100730

炎症反应是机体常见的生理、病理活动,炎症小体在该反应中发挥重要调控作用。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)是炎症小体中关键的调控蛋白之一。研究发现激活NLRP3的刺激因子及其相关分子调控信... 详细信息

炎症反应是机体常见的生理、病理活动,炎症小体在该反应中发挥重要调控作用。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)是炎症小体中关键的调控蛋白之一。研究发现激活NLRP3的刺激因子及其相关分子调控信号通路与多种疾病的发生、发展密切相关,并越来越受到广泛关注,是临床药物研究开发的前沿热点方向。总结NLRP3炎症小体的生物结构、调控功能、信号通路和作用机制等研究进展,并梳理与其相关靶点抑制剂的研究结果,对开展炎症相关疾病的新靶标药物发现及其临床应用研究具有重要的参考价值。

关键词：核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 信号通路调控机制抑制剂

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人乳头瘤病毒(HPV)31型中和单克隆抗体的制备及性质鉴定

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现代生物医学进展 2020年第6期20卷 1001-1005页

作者：夏百成刘洪洋郝亚茹张婷马铭饶许雪梅中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005

目的:构建获得HPV31构象依赖的中和单抗。方法:采用昆虫细胞表达的HPV31 L1VLP(virus-like particle,VLP)免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,收集杂交瘤细胞培养上清,首先采用HPV31 VLP-ELISA及HPV31假病毒中和实验筛选分泌... 详细信息

目的:构建获得HPV31构象依赖的中和单抗。方法:采用昆虫细胞表达的HPV31 L1VLP(virus-like particle,VLP)免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,收集杂交瘤细胞培养上清,首先采用HPV31 VLP-ELISA及HPV31假病毒中和实验筛选分泌HPV31中和单抗的杂交瘤细胞株,然后纯化单克隆抗体,分别采用假病毒中和实验及ELISA实验对纯化后单克隆抗体进行鉴定,包括抗体的亚型及其结合表位的构象特征、针对HPV31的中和IC50及针对HPV16、HPV18、HPV33、HPV45、HPV52、HPV58、HPV6、HPV11的交叉中和活性。结果:筛选获得9株HPV31构象依赖中和单抗,其中3株HPV31特异性中和单抗中有2株的IC50<10 ng/mL,分别是XM31-13(0.36,Ig G1)及XM31-23(7.10,Ig G1),6株交叉中和单抗中亦有2株的IC50<10ng/mL,分别是XM31-19(7.14,Ig G1)、XM31-20(6.91,Ig G1)。结论:获得的9株HPV31构象依赖的中和单抗,特别是其中4株单抗IC50值<10 ng/mL的4株单抗,可用于含HPV31L1VLP多价疫苗的质控疫苗的研究。

关键词：人乳头瘤病毒31型 L1病毒样颗粒单克隆抗体中和活性

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Twinkle突变导致Perrault综合征的研究进展

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生命科学 2020年第2期32卷 139-142页

作者：田国帅董文吉汪伟张业北京协和医学院/中国医学科学院基础医学研究所生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室

Twinkle基因编码蛋白TWINKLE可进入线粒体内参与复制体的组成,维持线粒体DNA数目的稳定。Perrault综合征作为一种罕见的常染色体隐性遗传病,可由Twinkle突变导致,目前该疾病暂无全面的诊断方法和有效的治疗手段。现简要概述了Twinkle突... 详细信息

Twinkle基因编码蛋白TWINKLE可进入线粒体内参与复制体的组成,维持线粒体DNA数目的稳定。Perrault综合征作为一种罕见的常染色体隐性遗传病,可由Twinkle突变导致,目前该疾病暂无全面的诊断方法和有效的治疗手段。现简要概述了Twinkle突变导致Perrault综合征的研究进展。

关键词： Twinkle Perrault综合征线粒体DNA

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18岁及以下甲状腺乳头状癌患者治疗后远处转移的预测分析

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2020年第7期55卷 664-670页

作者：王兴张烨赵明毛晓春谭卓赏金标王晓雷王可敬中国科学院大学附属肿瘤医院(浙江省肿瘤医院)头颈外科中国科学院肿瘤与基础医学研究所杭州310022 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院头颈外科100021 浙江省人民医院头颈甲状腺外科杭州310014

目的探讨18岁及以下甲状腺乳头状癌患者初次治疗后远处转移的特点及治疗方案。方法回顾性分析2001年1月1日至2014年12月31日初次就诊于中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院和浙江省肿瘤医院2所医疗机构诊断为甲状腺乳头状癌的180例儿... 详细信息

目的探讨18岁及以下甲状腺乳头状癌患者初次治疗后远处转移的特点及治疗方案。方法回顾性分析2001年1月1日至2014年12月31日初次就诊于中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院和浙江省肿瘤医院2所医疗机构诊断为甲状腺乳头状癌的180例儿童及青少年患者,其中男54例,女126例;年龄6~18岁,收集临床病例资料并随访,随访期远处转移率计算采用Kaplan-Meier法,单因素分析比较采用Log-Rank检验。多因素分析比较建立Cox回归模型。结果 24例(13.3%)患者治疗后出现远处转移,Log-Rank检验表明患者年龄≤15岁(χ^2=11.803,P=0.001)、肿瘤直径>20 mm(χ^2=5.776,P=0.016)、肿瘤多灶(χ^2=11.205,P=0.001)、癌灶双侧分布(χ^2=19.804,P=0.001)、甲状腺被膜侵犯(χ^2=10.808,P=0.001)、双侧颈淋巴结转移(χ^2=6.278,P=0.012)是初次治疗后远处转移的危险因素。Cox回归模型结果显示,患者年龄≤15岁(HR=4.08,95%CI为1.504~11.111,P=0.006)、肿瘤双侧分布(HR=4.77,95%CI为1.903~11.966,P=0.001)是治疗后远处转移的独立危险因素。局部区域复发与远处转移的危险因素相似,但未见局部区域复发对远处转移的预测意义(χ^2=0.695,P=0.404)。双侧多灶癌患者中甲状腺全切组远处转移率低于非甲状腺全切组,差异有统计学意义(χ^2=5.891,P=0.015)。结论年龄、肿瘤直径、肿瘤多灶、癌灶双侧分布、甲状腺被膜侵犯、双侧颈淋巴结转移是儿童和青少年甲状腺乳头状癌患者治疗后远处转移的危险因素。对于≤18岁的双侧多灶甲状腺乳头状癌患者推荐施行甲状腺全切术。

关键词：甲状腺肿瘤儿童青少年外科手术远处转移复发

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多措并举开展“组织学”网络教学

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高校医学教学研究（电子版） 2020年第6期10卷 15-19页

作者：仇文颖钱晓菁徐园园陈咏梅中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院北京100005

目的为应对新冠肺炎疫情中学生不能到校的特殊情况,尝试多措并举开展“组织学”网络教学。方法通过Moodle平台有序地组织课程,安排理论及实验课,实现课程回放与考核等教学环节。通过Zoom直播进行理论授课,利用虚拟切片网站完成“问题引... 详细信息

目的为应对新冠肺炎疫情中学生不能到校的特殊情况,尝试多措并举开展“组织学”网络教学。方法通过Moodle平台有序地组织课程,安排理论及实验课,实现课程回放与考核等教学环节。通过Zoom直播进行理论授课,利用虚拟切片网站完成“问题引导下的小组互助学习”,利用微信群进行补充答疑,通过测试成绩和问卷反馈评价教学效果。结果3次小测验和1次阶段测试显示,学生的最终正确率都在94%以上,这表示学生已基本掌握了教学内容。学生对组织学理论课与实验课的满意度分别为98.75%和96.25%,理论课互动和网络软件问题尚需改进。结论网络教学基本可以满足教学要求,还有少量内容需到校后进一步加强。

关键词：组织学网络教学课程平台虚拟切片

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干扰素-α1b增强人γδT细胞对Daudi细胞系的细胞毒活性及相关机制

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基础医学与临床 2020年第5期40卷 609-614页

作者：党光蕾张祥晋张建民陈慧何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的探讨干扰素-α1b(IFN-α1b)对人γδT细胞体外杀伤肿瘤细胞的促进作用及其相关机制。方法用IFN-α1b预处理的Daudi细胞作为靶细胞;用IFN-α1b预处理的γδT细胞作为效应细胞;LDH法检测γδT细胞对Daudi细胞的细胞毒活性;ELISA检测... 详细信息

目的探讨干扰素-α1b(IFN-α1b)对人γδT细胞体外杀伤肿瘤细胞的促进作用及其相关机制。方法用IFN-α1b预处理的Daudi细胞作为靶细胞;用IFN-α1b预处理的γδT细胞作为效应细胞;LDH法检测γδT细胞对Daudi细胞的细胞毒活性;ELISA检测效靶细胞混合上清中γδT细胞分泌的颗粒酶B和γ干扰素水平;流式细胞计量技术检测IFN-α1b预处理Daudi细胞表面Fas受体和应激蛋白配体ULBP3/ULBP4的表达,以及γδT细胞表面活化分子CD69和CD25的变化。结果IFN-α1b分别预处理Daudi细胞和γδT细胞都能显著增强γδT细胞对Daudi细胞的细胞毒活性(P<0.0001);IFN-α1b预处理的γδT细胞分泌颗粒酶B和γ干扰素的能力显著提高(P<0.05);IFN-α1b能上调Daudi细胞表面Fas受体和应激配体ULBP4的表达水平,而应激配体ULBP3的表达没有变化;IFN-α1b还能上调γδT细胞表面CD69的表达水平,而CD25的表达没有变化。结论IFN-α1b能通过不同的途径促进人γδT细胞对肿瘤细胞系Daudi细胞的体外细胞毒活性,两者的联用能增强γδT细胞的肿瘤治疗疗效。

关键词： IFN-α1b γδT细胞 Daudi细胞细胞毒活性

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胃肠道间质瘤细胞系建立及其对C-KIT下游抑制剂敏感性研究

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中华肿瘤防治杂志 2019年第11期26卷 764-770,777页

作者：周芳颖冯海凉卞晓翠康维明于健春宗静张丹刘玉琴中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所病理学系北京100005 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所细胞资源中心北京100005 北京协和医院普外科北京100730

目的随着胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors, GIST)诊出率不断升高,靶向抑制剂相关研究亟待开展,但国内可利用的GIST模型十分有限。本研究旨在建立人GIST细胞模型,探讨靶向抑制剂作用。方法利用手术切除的人GIST腹膜转移灶... 详细信息

目的随着胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors, GIST)诊出率不断升高,靶向抑制剂相关研究亟待开展,但国内可利用的GIST模型十分有限。本研究旨在建立人GIST细胞模型,探讨靶向抑制剂作用。方法利用手术切除的人GIST腹膜转移灶组织1例进行体外原代培养,连续传代培养>20代进行鉴定,绘制增殖周期生长曲线。免疫细胞化学检测CD117和DOG-1表达,进行染色体核型分析,PCR法检测C-KIT基因与PDGFRA基因突变,CCK8法观察C-KIT 2种通路抑制剂效果,皮下接种BABL/c-nu裸鼠检测致瘤性,PCR法进行种属鉴定及支原体检测,短串联重复序列(short tandem repeats, STR)检测鉴定细胞身份。结果可在体外连续传代的人胃肠道间质瘤细胞命名为PUMC-GIST-1,连续传代后细胞可见分枝,呈神经细胞样生长,传代后于第5天到达平台期;CD117和DOG-1表达均阳性;不同代数细胞染色体核型有变化,在38~48条;细胞C-KIT基因11号外显子5'端突变热点区有突变V559D,PDGFRA基因12号外显子CCG-CCA突变。单独用药结果显示,不同浓度GDC-0941处理48 h后,PUMC-GIST-1 (F=8.96,P<0.001)和GIST-430细胞(F=3.19,P=0.03)增殖能力均下降,差异有统计学意义;不同浓度AZD-6244处理48h后,PUMC-GIST-1细胞增殖能力整体呈现上升趋势,差异有统计学意义,F=9.78,P<0.001;GIST-430细胞增殖能力整体呈现下降趋势,差异有统计学意义,F=6.61,P<0.001。联合用药结果显示,PUMC-GIST-1增殖能力减弱,阴性对照组和5μmol/L AZD+5μmol/L GDC组吸光度(A)值分别为0.41±0.01和0.37±0.03,差异有统计学意义,F=3.30,P=0.007;GIST-430增殖能力减弱,阴性对照组和5μmol/L AZD+5μmol/L GDC组吸光度(A)值分别为2.12±0.11和0.13±0.01,差异有统计学意义,F=158.61,P<0. 001。PUMC-GIST-1较GIST-430对联合用药低敏感。当AZD与GDC浓度分别为5μmol/L时二者具有协同抑制作用,金正均Q值检验PUMC-GIST-1与GIST-430的q值分别为3.08与3.91,均>1.15。裸鼠体内接种不成瘤;PUMC-GIST-1种属鉴定为人源性,STR结果与原代一致,无支原体污染。结论建立了C-KIT突变的PUMC-GIST-1细胞系,该细胞系对C-KIT靶向药低敏感,为胃肠肿瘤研究提供了新型细胞系。

关键词：胃肠道间质瘤 C-KIT 药物低敏感细胞系 PDGFRA

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gp73在小鼠肝纤维化肝组织中的表达及机制

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基础医学与临床 2020年第6期40卷 771-776页

作者：马玲玉甄一宁罗云萍段昭君中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院免疫学系北京100005

目的在小鼠肝组织中探讨高尔基体跨膜糖蛋白73(gp73)在肝纤维化进程中的变化及机制。方法腹腔注射CCl4构建C57BL/6J小鼠肝纤维化模型;用ELISA检测小鼠血清中gp73的水平;用免疫组织化学染色检测肝组织内gp73的表达;用密度梯度离心法分离... 详细信息

目的在小鼠肝组织中探讨高尔基体跨膜糖蛋白73(gp73)在肝纤维化进程中的变化及机制。方法腹腔注射CCl4构建C57BL/6J小鼠肝纤维化模型;用ELISA检测小鼠血清中gp73的水平;用免疫组织化学染色检测肝组织内gp73的表达;用密度梯度离心法分离肝星状细胞(HSC)并检测其中gp73的表达;用免疫组织化学染色法检测肝组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)的表达;接下来分别转染IGF2BP3过表达与敲低的质粒,用RT-PCR检测GP73蛋白的编码基因GOLM1的表达变化;流式细胞计量术检测基因敲除鼠肝纤维化模型中HSC内gp73的表达。结果在肝纤维化模型的小鼠血清(P<0.01)、肝组织(P<0.05)及原代HSC(P<0.001)中gp73蛋白表达水平均升高,同时组织中的IGF2BP3蛋白表达也升高(P<0.05)。细胞系中转入IGF2BP3的过表达及敲低质粒后,成功过表达IGF2BP3(P<0.001)和敲低(P<0.01),GOLM1的表达也随之上调(P<0.001)和下调(P<0.01)。随后在IGF2BP3敲除鼠的肝纤维化模型的HSC中检测发现gp73表达降低(P<0.01)。结论在CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型中,由HSC表达的gp73蛋白水平升高,而RNA结合蛋白IGF2BP3是促进其表达的潜在调控因素。

关键词：肝纤维化 gp73 IGF2BP3

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新型冠状病毒SARS-CoV-2:高致病性及其防治

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基础医学与临床 2020年第4期40卷 433-439页

作者：刘力中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院病原学系北京100005

冠状病毒曾被认为是一类在人群中不致病的或仅引起轻微自愈性疾病的病原体。但是,在人类在进入21世纪的前20年中,却经历了2002—2003年的SARS-CoV、2012年的MERS-CoV和2019—2020年的SARS-CoV-2三次冠状病毒的世界范围的流行。其中尤以... 详细信息

冠状病毒曾被认为是一类在人群中不致病的或仅引起轻微自愈性疾病的病原体。但是,在人类在进入21世纪的前20年中,却经历了2002—2003年的SARS-CoV、2012年的MERS-CoV和2019—2020年的SARS-CoV-2三次冠状病毒的世界范围的流行。其中尤以最近这次大流行最为严重。截至2020年3月12日,已造成全球逾12.6万人感染,其中死亡超过4600人。与前两次冠状病毒暴发相似,SARS-CoV-2也是经过跨物种传播由蝙蝠传给人类的,但中间宿主未知。与前两种冠状病毒相同,SARS-CoV-2也属于下呼吸道病原体,易感染有基础性疾病(如糖尿病、高血压等)的年长男性。重症以上患者除表现不同程度的呼吸障碍外,还可伴有消化道症状,甚至发生心脏及肾脏功能改变。病理检测发现,危重症患者肺脏常呈实质性改变,大量黏稠液体充斥气道导致呼吸困难。此外,淋巴细胞减少,C反应蛋白水平升高,大量炎性反应因子分泌导致细胞因子风暴,多脏器衰竭也是病情恶化重要指标。新冠肺炎患者间症状差别较大,需要根据患者的具体情况辨证施治;避免因治疗方法不当加重病情的进展,甚至导致患者死亡。本文将从新冠病毒的结构特点出发,对该病毒的来源、复制周期、致病性、发病特点及临床防治进行初步的回顾性综述。

关键词：第二株SARS-冠状病毒 2019冠状病毒疾病复制致死率发病率

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