检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2018年第3期38卷 308-311页

作者：石变华孙佳增张尚史娟中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究miR-207在大鼠肾脏纤维化(RF)模型中的差异表达,并对其功能进行研究。方法实验组大鼠(UUO)分离并结扎右侧输尿管,假手术组只分离右侧输尿管,不结扎。Real-time PCR定量分析大鼠肾脏纤维化模型肾脏和尿液中miR-207的表达,以及瞬... 详细信息

目的研究miR-207在大鼠肾脏纤维化(RF)模型中的差异表达,并对其功能进行研究。方法实验组大鼠(UUO)分离并结扎右侧输尿管,假手术组只分离右侧输尿管,不结扎。Real-time PCR定量分析大鼠肾脏纤维化模型肾脏和尿液中miR-207的表达,以及瞬时转染miR-207 mimics和inhibitors的大鼠肾小管上皮(NRK-52E)细胞中纤维化相关基因的表达。结果大鼠肾脏纤维化模型尿液和肾脏组织中miR-207表达上调(P<0.05),miR-207能上调大鼠肾小管上皮NRK-52E细胞中纤维化相关基因的表达。结论 miR-207可能在肾脏纤维化中发挥重要的作用,为肾脏纤维化诊断靶点提供新的可能。

关键词：肾脏纤维化 miR-207 NRK-52E

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

九例家族性高胆固醇血症患者的LDLR基因突变检测

引用

中华医学遗传学杂志 2018年第6期35卷 783-786页

作者：孟晓露司锘申育奇汪奇何疆春卢超霞吴炜张抒扬张学中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室麦库西克-张孝骞协和遗传医学中心北京100005 中国人民解放军总医院心血管内科北京100853 中国人民解放军海军总医院心脏中心北京100048 中国医学科学院北京协和医院心内科北京100730

目的检测9例家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)患者的LDLR基因突变情况,为临床诊断与遗传咨询提供依据。方法PCR扩增LDLR基因的全部编码及侧翼序列,对扩增产物进行直接测序。对携带纯合突变以及复合杂合突变的患者... 详细信息

目的检测9例家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)患者的LDLR基因突变情况,为临床诊断与遗传咨询提供依据。方法PCR扩增LDLR基因的全部编码及侧翼序列,对扩增产物进行直接测序。对携带纯合突变以及复合杂合突变的患者,通过父母样本测序或T克隆测序明确突变的双等位基因来源。结果在7例患者中检出了8个LDLR基因突变,分别为c.259T>G、c.513delC、c.530C>T、c.682G>T、c.763C>T、c.1187-10G>A、c.1948delG、c.1730G>A。4例患者携带杂合突变,2例患者携带纯合突变,1例患者携带复合杂合突变,携带双等位基因突变的患者较杂合突变的患者症状更加严重。结论9例FH患者中7例检出LDLR基因突变,同时新突变位点的检出丰富了LDLR基因突变谱。

关键词：家族性高胆固醇血症 LDLR基因基因检测突变

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

利用CRISPR/Cas9构建R778L类型肝豆状核变性疾病小鼠模型

引用

基础医学与临床 2018年第12期38卷 1702-1707页

作者：朱基彦瞿思遥张祝琴刘德培中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院医学分子生物学国家重点实验室生物化学与分子生物学系北京100005

目的利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑系统构建针对人肝豆状核变性R778L突变类型的R780L突变小鼠。方法通过BLAST比对人和小鼠中ATP7B基因和蛋白的序列,证明二者保守性。通过CRISPR/Cas9系统进行小鼠受精卵显微注射,并对小鼠肝豆状核变性... 详细信息

目的利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑系统构建针对人肝豆状核变性R778L突变类型的R780L突变小鼠。方法通过BLAST比对人和小鼠中ATP7B基因和蛋白的序列,证明二者保守性。通过CRISPR/Cas9系统进行小鼠受精卵显微注射,并对小鼠肝豆状核变性症状进行病理和生理学检测。结果人和小鼠中ATP7B基因和蛋白的序列高度保守。通过CRISPR/Cas9技术成功获得纯合的R780L突变小鼠,该小鼠存在明显的肝脏铜离子淤积以及血清ALT、AST的升高且未发现有可检测出的脱靶效应。结论成功利用CRISPR/Cas9介导的基因敲入系统构建了针对人肝豆状核变性R778L类型的R780L突变小鼠模型。

关键词：肝豆状核变性 CRISPR/Cas9 点突变R778L 小鼠模型

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

衰老的基础研究现状与干预策略

引用

蚌埠医学院学报 2018年第10期43卷 1261-1265页

作者：陈厚早刘德培中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100730

我国已进入老龄化社会,老年伴随着疾病增加严重威胁人们的健康,但是目前对于衰老的认识还处于初步阶段。衰老过程中,机体系统层面的紊乱与细胞和分子层面的失真互为因果,使得衰老的机制具有明显的复杂性。本文从系统、细胞和分子三个角... 详细信息

我国已进入老龄化社会,老年伴随着疾病增加严重威胁人们的健康,但是目前对于衰老的认识还处于初步阶段。衰老过程中,机体系统层面的紊乱与细胞和分子层面的失真互为因果,使得衰老的机制具有明显的复杂性。本文从系统、细胞和分子三个角度阐述衰老的基础研究的现状,进一步阐述衰老导致疾病过程中的内在联系以及提出潜在干预策略。因此,倡导通过健康的生活方式来控制衰老相关疾病的发生发展,探索从"分病而治"向"异病同防/治"的战略转变。

关键词：衰老系统生物学细胞生物学分子生物学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于转录组学分析预测潜在的γ-和β-珠蛋白基因表达调控因子

引用

基础医学与临床 2018年第11期38卷 1522-1525页

作者：王南宇杨科崔申申张祝琴刘德培中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的预测潜在的γ-和β-珠蛋白表达调控因子,为珠蛋白基因表达调控研究提供新的思路。方法从GEO数据库中下载γ-和β-珠蛋白基因差异表达相关的两组RNA-seq数据,利用分化各时期共同存在的不同组织来源细胞间的差异表达基因及其预测出的... 详细信息

目的预测潜在的γ-和β-珠蛋白表达调控因子,为珠蛋白基因表达调控研究提供新的思路。方法从GEO数据库中下载γ-和β-珠蛋白基因差异表达相关的两组RNA-seq数据,利用分化各时期共同存在的不同组织来源细胞间的差异表达基因及其预测出的上游调控因子,通过STRING数据库、Centiscape软件进行潜在调控因子的预测。结果除预测到BCL11A、NF-E2、YY1和GATA1等已知的γ-和β-珠蛋白基因表达调控因子外,从两组数据共同预测出14个潜在调控因子。结论分析预测出的包括MAPK1、TNF和IFNG等潜在的调控因子可能调控γ-和β-珠蛋白基因表达,需要近一步的分子生物学实验证实。

关键词：转录组学 γ-珠蛋白 β-珠蛋白调控因子

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Mydgf在心肌再生过程中的作用及机制研究

Mydgf在心肌再生过程中的作用及机制研究

引用

中国生物化学与分子生物学会2019年全国学术会议暨学会成立四十周年

作者：李燕冯杰聂宇王玉瑶山西医科大学生物化学与分子生物学教研室中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室

心肌再生是目前治疗心力衰竭并提高预后的有效途径之一。新生小鼠具有强大的心肌再生能力,为研究哺乳动物心肌再生提供理想模型。已有研究表明,巨噬细胞在新生小鼠心肌再生过程中发挥重要作用。Myeloid-derived growth factor(Mydgf)为... 详细信息

心肌再生是目前治疗心力衰竭并提高预后的有效途径之一。新生小鼠具有强大的心肌再生能力,为研究哺乳动物心肌再生提供理想模型。已有研究表明,巨噬细胞在新生小鼠心肌再生过程中发挥重要作用。Myeloid-derived growth factor(Mydgf)为骨髓来源的单核巨噬细胞产生的旁分泌蛋白。然而,巨噬细胞是否通过分泌Mydgf参与调控心脏再生尚无报道。首先,我们检测了C57BL/6小鼠出生后不同时间点巨噬细胞中Mydgf的表达,结果发现,随着小鼠年龄增长Mydgf表达下降,表明Mydgf可能与心肌细胞增殖能力丢失相关。随后我们对新生1天小鼠进行心尖切除手术(AR),结果发现,与对照组相比,AR后显著激活巨噬细胞中Mydgf的表达,表明Mydgf可能参与新生小鼠心肌再生过程。接着我们引进Mydgf-KO小鼠,并在出生后1天进行AR,术后7天检测心肌细胞增殖情况,结果发现Mydgf-KO鼠心肌细胞增殖能力(pH3+、Ki67+的心肌细胞)显著下降;术后21天心动超声显示心功能显著降低,并取心脏进行MASSON染色显示心尖不能再生;此外,我们还构建成年小鼠心肌梗死手术(MI),给予Mydgf重组蛋白处理,术后21天通过心动超声和MASSON染色检测心功能及心肌纤维化情况,结果表明Mydgf处理可显著减小成年MI后的心肌纤维化程度,并改善心功能,说明Mydgf可以调控心肌再生及损伤修复。体外分离新生小鼠原代心肌细胞给予Mydgf处理16小时,免疫荧光染色显示心肌细胞增殖能力显著增强;将细胞RNA送去RNA-seq,对RNA-seq结果分析得出共有1005个差异基因表达,其中有707个基因表达上调,298个基因表达下调。对上调基因进行KEGG分析,显著富集于Cell cycle及PI3K-Akt信号通路。Western blot结果显示Cyclin D1、CDK2、CDK6、p-Akt蛋白水平明显上调。综上结果,我们发现,新生小鼠心肌损伤后,巨噬细胞通过分泌Mydgf,激活心肌细胞中PI3K-Akt信号通路促进心肌细胞增殖,进而调控新生小鼠心肌再生。

关键词：心肌再生心尖切除 Mydgf 心肌细胞增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

CRISPR/Cas9基因编辑系统研究进展

引用

基础医学与临床 2018年第4期38卷 543-547页

作者：程成舒鹏程彭小忠中国医学科学院北京协和医学院北京100005 中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院医学灵长类研究中心神经科学中心北京100005

CRISPR/Cas9基因编辑系统被广泛应用于生物学及医学各领域。该系统可在RNA的引导下对特定DNA位点进行靶向编辑。脱靶效应和编辑效率是该系统面临的两大问题。目前已有诸多研究从减少脱靶效应和提高编辑效率的方面对该系统进行优化,将有... 详细信息

CRISPR/Cas9基因编辑系统被广泛应用于生物学及医学各领域。该系统可在RNA的引导下对特定DNA位点进行靶向编辑。脱靶效应和编辑效率是该系统面临的两大问题。目前已有诸多研究从减少脱靶效应和提高编辑效率的方面对该系统进行优化,将有助于其安全性的提升及应用范围的拓展。

关键词： CRISPR/Cas9 基因编辑脱靶效应编辑效率

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Zika病毒NS3具有依赖于ATP水解的dsDNA解链活性

引用

基础医学与临床 2018年第5期38卷 674-678页

作者：徐杉王蕾杰石磊中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究Zika病毒NS3蛋白是否具有依赖于ATP水解的ds DNA解链活性。方法构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21菌株中表达带有His标签的Zika NS3蛋白,并用Ni琼脂糖珠进行纯化;利用ATPase检测试剂盒对NS3的ATP水解活性进行检测;利用荧光共振... 详细信息

目的研究Zika病毒NS3蛋白是否具有依赖于ATP水解的ds DNA解链活性。方法构建原核表达载体,在大肠杆菌BL21菌株中表达带有His标签的Zika NS3蛋白,并用Ni琼脂糖珠进行纯化;利用ATPase检测试剂盒对NS3的ATP水解活性进行检测;利用荧光共振能量转移(FRET)原理,对NS3的ds DNA解链活性进行实时动力学检测;利用定点突变方法将NS3蛋白的第198位甘氨酸(G)突变为丙氨酸(A),得到G198A突变体,检测其是否影响NS3解旋酶活性。结果 Zika NS3蛋白在体外可以水解ATP,酶解最大反应速率为2.76μmol/(L·min),Km值为0.11 mmol/L;Zika NS3蛋白在体外可以解链ds DNA;G198A突变体与野生型相比,ATP水解速率和ds DNA的解链速率均明显减弱。结论 Zika NS3蛋白在体外具有ATP水解活性以及ds DNA解链活性,且第198位甘氨酸对于NS3酶活性至关重要。

关键词： Zika病毒 NS3蛋白 ATP dsDNA 解旋酶

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基于微小RNA架构的新型随机短发夹RNA文库构建

引用

中国医学科学院学报 2017年第4期39卷 518-524页

作者：郭倩朱宁卜萌萌郭思超闫雪静陈倩陈梅红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建高效发夹状随机短发夹RNA(shRNA)文库。方法构建由polⅡ启动子(CMV)驱动的增强绿色荧光蛋白(EGFP)下游连接shRNA的表达载体,转染细胞后收取蛋白,用Western blot和荧光素酶报告基因系统检测该载体表达的shRNA对靶基因表达的抑制... 详细信息

目的构建高效发夹状随机短发夹RNA(shRNA)文库。方法构建由polⅡ启动子(CMV)驱动的增强绿色荧光蛋白(EGFP)下游连接shRNA的表达载体,转染细胞后收取蛋白,用Western blot和荧光素酶报告基因系统检测该载体表达的shRNA对靶基因表达的抑制效率。在由CMV启动的EGFP下游连接shRNA的表达载体基础上,构建EGFP下游连接基于微小RNA(miRNA)架构的shRNA表达载体,转染细胞后收取RNA,用实时定量荧光PCR法检测该载体表达的shRNA对靶基因表达的抑制效果。基于EGFP下游连接基于miRNA架构的shRNA表达载体实时定量荧光PCR的检测结果,构建基于miRNA架构的大容量随机shRNA文库。结果由polⅡ启动子(CMV)驱动发夹状shRNA转录时,shRNA要位于一个大的转录本之后才能被有效转录。基于miRNA架构环境可提高shRNA的干扰效率。构建了一个容量为1.8×10~7的基于miRNA架构的大容量随机shRNA文库。结论构建了一个大容量的新型随机shRNA文库。

关键词：微小RNA 短发夹RNA 随机文库

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Mydgf在心肌再生过程中的作用及机制研究

Mydgf在心肌再生过程中的作用及机制研究

引用

中国生物化学与分子生物学会2019年全国学术会议

作者：李燕冯杰聂宇王玉瑶山西医科大学生物化学与分子生物学教研室太原030000 中国医学科学院北京协和医学院国家心血管病中心阜外医院心血管疾病国家重点实验室北京100037

心肌再生是目前治疗心力衰竭并提高预后的有效途径之一.新生小鼠具有强大的心肌再生能力，为研究哺乳动物心肌再生提供理想模型.已有研究表明，巨噬细胞在新生小鼠心肌再生过程中发挥重要作用.Myeloid-derived growth factor(Mydgf)为... 详细信息

心肌再生是目前治疗心力衰竭并提高预后的有效途径之一.新生小鼠具有强大的心肌再生能力，为研究哺乳动物心肌再生提供理想模型.已有研究表明，巨噬细胞在新生小鼠心肌再生过程中发挥重要作用.Myeloid-derived growth factor(Mydgf)为骨髓来源的单核巨噬细胞产生的旁分泌蛋白.

关键词：心肌再生心尖切除 Mydgf 心肌细胞增殖

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：