检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2015年第12期35卷 1601-1605页

作者：王晓娟朱斌常永生中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 首都医科大学附属北京世纪坛医院普通外科北京大学第九临床医学院北京100038

目的确定小鼠肝脏SDF2L1基因在不同生理和病理条件下的表达情况,并构建SDF2L表达质粒,为进一步研究SDF2L1基因的功能奠定基础。方法 Real-time PCR确定SDF2L1基因在糖尿病条件下(db/db和ob/ob小鼠分别为糖尿病和肥胖模型小鼠)或不同营... 详细信息

目的确定小鼠肝脏SDF2L1基因在不同生理和病理条件下的表达情况,并构建SDF2L表达质粒,为进一步研究SDF2L1基因的功能奠定基础。方法 Real-time PCR确定SDF2L1基因在糖尿病条件下(db/db和ob/ob小鼠分别为糖尿病和肥胖模型小鼠)或不同营养状态的表达情况;设计并合成SDF2L1基因的PCR引物,以野生型C57BL/6J小鼠肝脏c DNA为模板,扩增SDF2L1编码区,PCR产物测序正确后连接到pc DNA4/myc-His表达载体,鉴定插入片段序列正确后,将构建的质粒转染293A细胞,Western blot检测SDF2L1的表达。结果糖尿病条件下或饥饿状态下小鼠肝脏中SDF2L1基因表达明显下调(P<0.01);纯化质粒的相对分子质量为5.8 kb,酶切鉴定结果符合目的条带(666 bp)大小,插入的寡核苷酸序列与野生型SDF2L1基因序列完全相符,表达的融合蛋白大小为26ku。结论 SDF2L1基因可能参与机体糖脂代谢;成功构建SDF2L表达质粒。

关键词：质粒 SDF2L1 基因表达

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结核病患者外周血γδT细胞的亚群分布与功能特点

结核病患者外周血γδT细胞的亚群分布与功能特点

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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会

作者：李玉霞陈慧张建民何维中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院医学分子生物学国家重点实验室 100005

目的：γδT细胞在结核杆菌感染的最早期活化，在机体对抗结核杆菌感染的免疫应答中发挥重要作用。本研究通过对比分析健康人和TB患者外周血γδT细胞的比例、亚群分布特点及分泌细胞因子的功能，为深入阐明γδT细胞抗结核杆菌感染的... 详细信息

目的：γδT细胞在结核杆菌感染的最早期活化，在机体对抗结核杆菌感染的免疫应答中发挥重要作用。本研究通过对比分析健康人和TB患者外周血γδT细胞的比例、亚群分布特点及分泌细胞因子的功能，为深入阐明γδT细胞抗结核杆菌感染的作用机制提供理论基础。

关键词：结核病 γδT细胞 Vδ亚群细胞因子

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根治白血病智能药物的基因设计(摘要)

根治白血病智能药物的基因设计(摘要)

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中国生物工程学会第六次全国会员代表大会暨第九届学术年会

作者：肖卫纯陈伟京李涛路金芝卢圣栋国家医学分子生物学重点实验室基础医学研究所/基础学院中国医学科学院/北京协和医学院

恶性肿瘤干细胞、包括白血病干细胞,是恶性肿瘤(包括白血病)无法根治的根本原因。处于G0期,一般的化疗与放疗不能杀灭肿瘤干细胞,一般的靶向药物也不能杀灭肿瘤干细胞。因此,要根治白血病,既要杀灭一般白血病细胞、又要杀灭白血病干细胞... 详细信息

恶性肿瘤干细胞、包括白血病干细胞,是恶性肿瘤(包括白血病)无法根治的根本原因。处于G0期,一般的化疗与放疗不能杀灭肿瘤干细胞,一般的靶向药物也不能杀灭肿瘤干细胞。因此,要根治白血病,既要杀灭一般白血病细胞、又要杀灭白血病干细胞,同时不伤及正常细胞。

关键词：复合药物白血病细胞株智能药物非病毒载体基因设计

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长链非编码RNA SNHG5通过结合MTA2抑制胃癌生长

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1842-1842页

作者：史娟中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的:研究长链非编码RNA SNHG5在胃癌中的表达、功能及机制。方法:实时荧光定量PCR检测SNHG5在胃癌和癌旁组织中的表达差异;在人胃癌细胞中研究过表达或敲低SNHG5对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;建立裸鼠皮下及转移瘤模型,研究SNHG5... 详细信息

目的:研究长链非编码RNA SNHG5在胃癌中的表达、功能及机制。方法:实时荧光定量PCR检测SNHG5在胃癌和癌旁组织中的表达差异;在人胃癌细胞中研究过表达或敲低SNHG5对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;建立裸鼠皮下及转移瘤模型,研究SNHG5在体内对肿瘤发生发展及转移的影响;利用RNA-pulldown联合质谱的策略寻找SNHG5的相互结合蛋白,

关键词：胃癌胃肿瘤 RNA SNHG5 MTA2 非编码长链

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抗凝剂引起的蛋白变化可以在尿中更敏感地监测

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中国科学：生命科学 2014年第7期44卷 1125-1132,1195-1196页

作者：李梦林赵敏迪高友鹤中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础医学院病理生理系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

生物标志物是指与生理或者病理生理过程相联系的可监测的变化,最常用于检测生物标志物的体液是血液.但血液有严格的稳态调节,理论上不允许较大的变化在血液中持续存在.尿液则没有稳态的调节,并且尿液的一部分是血液滤过物,因此它在一定... 详细信息

生物标志物是指与生理或者病理生理过程相联系的可监测的变化,最常用于检测生物标志物的体液是血液.但血液有严格的稳态调节,理论上不允许较大的变化在血液中持续存在.尿液则没有稳态的调节,并且尿液的一部分是血液滤过物,因此它在一定程度上可以反映血液或者整个机体的状态.本实验通过抗凝剂肝素或阿加曲班改变雌性SD大鼠的凝血状态,用蛋白质组学的方法检测给药前后血液和尿液中蛋白的改变.在同样的鉴定策略及分析条件下,尿液中发现更多的变化蛋白.在阿加曲班干预组中,检测到尿液中变化的蛋白有62个,血液中变化的蛋白仅有1个.在肝素干预组中,尿液中变化的蛋白有27个,血液中变化的蛋白仅有3个.Western blot显示,转铁蛋白(transferrin)和血红素结合蛋白(hemopexin)在血液和尿液中的变化趋势与质谱结果一致.本实验提示尿液是更敏感的蛋白生物标志物的来源.

关键词：生物标志物蛋白质组学尿液血液

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microRNAs调控大脑皮层层次决定

microRNAs调控大脑皮层层次决定

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第十一次全国基因功能与表观遗传调控学术研讨会

作者：舒鹏程吴超阮祥斌阴彬袁建刚强伯勤彭小忠钟伟民中国医学科学院/北京协和医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室神经科学研究中心 Department of Molecular Cellularand Developmental BiologyYale University

大脑皮层层次形成受到十分精确的时空表达调控,是通过神经干细胞精细的增殖与分化来实现的。以小鼠大脑皮层层次形成为例,神经干细胞从E10.5天到E16.5天,基本上每天生成不同类型的神经元,由里到外依次生成大脑皮层1/6/5/4/3/2各层不同... 详细信息

大脑皮层层次形成受到十分精确的时空表达调控,是通过神经干细胞精细的增殖与分化来实现的。以小鼠大脑皮层层次形成为例,神经干细胞从E10.5天到E16.5天,基本上每天生成不同类型的神经元,由里到外依次生成大脑皮层1/6/5/4/3/2各层不同类型的神经元(insideoutside pattern),最后实现大脑功能的有序性。其中:是什么时间上的调控机制来控制前体

关键词： miRNAs microRNAs 大脑皮层

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串联亲和纯化技术筛选Bat3的相互作用蛋白质

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中国医学科学院学报 2014年第1期36卷 1-4页

作者：吴为李琴山宋伟缪时英王琳芳中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的寻找与Bat3结合的蛋白质。方法采用串联亲和纯化技术,在Bat3编码序列羧基端融合Strep2和FLAG 2个分子标签,以此为诱饵筛选与其特异结合的蛋白质,最后进行质谱鉴定。结果筛选到1种蛋白质分子,命名为Ubl4A,免疫共沉淀结果显示Ubl4A可... 详细信息

目的寻找与Bat3结合的蛋白质。方法采用串联亲和纯化技术,在Bat3编码序列羧基端融合Strep2和FLAG 2个分子标签,以此为诱饵筛选与其特异结合的蛋白质,最后进行质谱鉴定。结果筛选到1种蛋白质分子,命名为Ubl4A,免疫共沉淀结果显示Ubl4A可与Bat3相互结合。结论成功建立了串联亲和纯化技术平台,分离出可与Bat3相互作用的蛋白质Ubl4A。

关键词： Bat3 凋亡串联亲和纯化

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2014蛋白质组学专刊序言

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生物工程学报 2014年第7期30卷 1001-1003页

作者：方福德高友鹤中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

蛋白质组学研究是后基因组学时代最重要的功能基因组学研究之一,与医学生物学、化学、物理学、信息学以及现代技术等关系十分密切。为了检阅近年来国内外蛋白质组学某些重要研究进展,探索其可能的应用范围,讨论其存在的问题,展望其发展... 详细信息

蛋白质组学研究是后基因组学时代最重要的功能基因组学研究之一,与医学生物学、化学、物理学、信息学以及现代技术等关系十分密切。为了检阅近年来国内外蛋白质组学某些重要研究进展,探索其可能的应用范围,讨论其存在的问题,展望其发展前景,特组织出版"蛋白质组学专刊"。本期专刊包括综述和研究论文两部分,内容主要涉及不同物种(包括人类、哺乳类动物、原核生物、放线菌等)蛋白质组学研究、蛋白质组学重要方法学与技术研究(包括串联质谱分析、尿蛋白膜保存法、定量蛋白质组学分折、meta分析等)和蛋白质组功能与应用研究(包括蜘蛛毒素蛋白质组、磷酸化蛋白质组、卵母细胞和早期胚胎蛋白质组、肝脏纤维化蛋白质组、分枝杆菌耐药的蛋白质组等)。

关键词：蛋白质组学方法学生物学功能应用

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TXNDC5介导缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制

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中国医学科学院学报 2014年第5期36卷 470-476页

作者：张红飞张洁雯孔丽娟王乐朱宁郭思超邱川闫雪静陈梅红中国医学科学院基础医学研究所北京协和医学院基础学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的研究TXNDC5在缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制过程中的作用。方法在人HeLa细胞中分别过表达TXDNC5或用干扰小RNA(siRNA)抑制TXDNC5的表达后,对其进行正常或缺血清培养,采用Western blot法检测TXDNC5蛋白水平,荧光实时定量PCR检测TXDNC... 详细信息

目的研究TXNDC5在缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制过程中的作用。方法在人HeLa细胞中分别过表达TXDNC5或用干扰小RNA(siRNA)抑制TXDNC5的表达后,对其进行正常或缺血清培养,采用Western blot法检测TXDNC5蛋白水平,荧光实时定量PCR检测TXDNC5 mRNA水平,细胞增殖检测试剂盒(MTS法)检测活细胞数,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果缺血清诱导HeLa细胞增殖抑制时,TXNDC5 mRNA水平下降(P<0.05),蛋白水平显著升高,TXNDC5 mRNA的稳定性不受影响,而放线菌酮则可消除缺血清诱导TXNDC5蛋白水平升高的作用。在HeLa细胞中过表达TXNDC5对细胞增殖速度无影响。抑制TXNDC5的表达能减弱缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制(P<0.05),使S期细胞比例略有增加(P<0.05),但对细胞凋亡没有明显影响。结论 TXNDC5介导了缺血清诱导的HeLa细胞增殖抑制。

关键词： TXNDC5 HeLa细胞缺血清细胞增殖

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稳定表达人血红素加氧酶-1细胞系的建立及其功能鉴定

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中国医学科学院学报 2014年第4期36卷 420-425页

作者：杨根欢吴为李砚川倪冷王占启宋希涛刘昌伟中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血管外科北京100730 中国医学科学院北京协和医学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的构建稳定表达人血红素加氧酶-1(HO-1)的细胞系,探讨内源性过表达HO-1对抗细胞氧化损伤的作用。方法 PCR扩增HO-1基因并将其克隆至改造的慢病毒载体pLentiLox3.7中,构建携带目的基因的重组质粒。用重组质粒转染HEK293T细胞,并用Weste... 详细信息

目的构建稳定表达人血红素加氧酶-1(HO-1)的细胞系,探讨内源性过表达HO-1对抗细胞氧化损伤的作用。方法 PCR扩增HO-1基因并将其克隆至改造的慢病毒载体pLentiLox3.7中,构建携带目的基因的重组质粒。用重组质粒转染HEK293T细胞,并用Western blot检测HO-1的表达。将重组质粒与慢病毒辅助质粒(plp1、plp2、VSVG)共同转染HEK293T细胞,包装有活力的慢病毒。用携带HO-1的慢病毒感染HEK293T细胞,筛选出能稳定表达目的基因的单克隆,并行Western blot检测HO-1的表达。将过氧化氢加入正常的及过表达HO-1的HEK293T细胞和人脐静脉内皮细胞,检测细胞内活性氧的含量。结果成功筛选出能稳定表达HO-1的单克隆细胞系并扩大培养,Western blot检测其HO-1的表达明显升高。加入过氧化氢后,过表达HO-1的HEK293T细胞和人脐静脉内皮细胞内的活性氧明显减少。结论成功构建了能稳定表达人HO-1的细胞系,内源性过表达HO-1能够对抗细胞的氧化损伤。

关键词：血红素加氧酶-1 慢病毒稳定细胞株氧化损伤

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