检索结果-内蒙古大学图书馆

SARS-CoV Spike蛋白来源多肽及其单克隆抗体在SARS-CoV感染过程中的作用

中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 21-25,100页

作者：贾春实王启迪朱华刘颖马春梅张连峰秦川北京协和医学院中国医学科学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京协和医学院中国医学科学院药物研究

目的探讨SARS-CoV Spike蛋白来源的B细胞表位多肽及其产生的单克隆抗体在SARS-CoV感染Vero-E6细胞系及h-ACE2ICR转基因小鼠过程中的作用,为SARS-CoV疫苗的筛选奠定初步工作基础。方法将Vero-E6细胞接种于96孔板上,首先应用两种B细胞表... 详细信息

目的探讨SARS-CoV Spike蛋白来源的B细胞表位多肽及其产生的单克隆抗体在SARS-CoV感染Vero-E6细胞系及h-ACE2ICR转基因小鼠过程中的作用,为SARS-CoV疫苗的筛选奠定初步工作基础。方法将Vero-E6细胞接种于96孔板上,首先应用两种B细胞表位多肽制备而成的单克隆抗体S471-5034A-10及S604-62511B1进行中和实验,随后在相同的实验中加入相关(S471-503,S604-625)或无关多肽干扰抗体的中和作用,当病毒对照空中70%细胞出现细胞病变时,对活细胞进行中性红染色并计算中和指数以分析抗体的中和水平。应用鉴定有中和保护作用的抗体来源的多肽进行h-ACE2ICR转基因小鼠病毒感染后的治疗实验,进一步确定多肽在SARS-CoV体内感染过程中的保护性作用。结果两种B细胞表位多肽来源的单克隆抗体均可以在一定程度上中和SARS-CoV对Vero-E6细胞的感染,而且这种中和作用可以被加入的其来源多肽所阻滞,这种阻滞作用的强弱与加入多肽的剂量具有相关性。多肽小鼠体内感染治疗实验表明随着体内注射多肽剂量的增加,受感染小鼠肺组织表现出的急性间质性肺炎程度随之减轻,肺组织内检...

关键词： SARS-CoV 多肽疫苗单克隆抗体中和作用转基因动物

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七种常见宠物二级抗体的制备和HRP标记

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 93-94页

作者：林树柱刘先菊杨帆秦川张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

目的制备兔抗7种中国家庭中常见宠物的二级抗体,并进行辣根过氧化酶标记,为宠物血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A 或protein G亲和层析的方法进一步纯化宠物的IgG,免疫大耳白兔制备... 详细信息

目的制备兔抗7种中国家庭中常见宠物的二级抗体,并进行辣根过氧化酶标记,为宠物血清学检测系统的建立提供工具。方法利用饱和硫酸铵沉淀法粗纯抗体后,再利用protein A 或protein G亲和层析的方法进一步纯化宠物的IgG,免疫大耳白兔制备抗血清,利用免疫双扩散来检测抗血清的效价,并用Protein A亲和层析的方法来纯化兔抗宠物的二级抗体,采用简易过碘酸钠法对纯化的兔抗宠物的二级抗体进行HRP标记,通过ELISA方法测定标记抗体的效价,并利用Western blotting考察标记抗体的特异性。结果纯化了狗、家猫、豚鼠、金仓鼠、松鼠、花鼠和龙猫7种宠物的血清IgG,免疫双扩散法测定兔抗这7种宠物的抗血清效价均达到1:32,并对纯化的兔抗7种宠物的二级抗体进行了HRP标记,ELISA测定标记抗体的效价达到1:(2000～15000)左右,Western blots显示标记抗体具有很好的特异性。结论成功制备了HRP标记的兔抗7种中国家庭中常见宠物的二级抗体,为宠物血清学检测体系的建立提供了工具。

关键词：宠物 IgG 兔辣根过氧化酶

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PET/CT影像技术在神经退行性疾病动物模型研究中的应用

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 66-69页

作者：高凯张连峰中国医学科学院北京协和医学院实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

PET和CT影像技术是肿瘤、痴呆症、心脑血管病等的重要临床诊断技术,近年发展的小动物PET/CT成为对人类疾病动物模型,尤其是小动物模型进行比较医学研究的最新工具,能够活体无创的、动态的、定量的从分子水平观察动物的生理生化变化,进... 详细信息

PET和CT影像技术是肿瘤、痴呆症、心脑血管病等的重要临床诊断技术,近年发展的小动物PET/CT成为对人类疾病动物模型,尤其是小动物模型进行比较医学研究的最新工具,能够活体无创的、动态的、定量的从分子水平观察动物的生理生化变化,进行代谢显像、受体显像、基因表达显像等。已经广泛应用于对神经退行性疾病的研究中.本文介绍了近年来一些小动物PET/CT在退行性疾病的研究中的最新应用。

关键词：模型,动物正电子发射计算机断层扫描/计算机X射线断层扫描神经退行性疾病

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心包液的活性物质研究进展

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中国比较医学杂志 2009年第1期19卷 67-71页

作者：张丽王书美张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

心脏及出入心的大血管由内、外两层心包膜所包裹,心包液是位于心包腔内的少量液体,含有1.7%～3.5%的蛋白质,总的蛋白含量低于血浆。近年来研究发现许多心脏病患者的心包液中存在心房利钠素(ANP)、脑钠素(BNP)、内皮素(ET)及金属蛋白酶... 详细信息

心脏及出入心的大血管由内、外两层心包膜所包裹,心包液是位于心包腔内的少量液体,含有1.7%～3.5%的蛋白质,总的蛋白含量低于血浆。近年来研究发现许多心脏病患者的心包液中存在心房利钠素(ANP)、脑钠素(BNP)、内皮素(ET)及金属蛋白酶等活性物质,浓度显著高于血清,而且其水平变化和心功能密切相关。本文就心包液的组成成分及其中的活性物质和心脏疾病及心功能的关系进行了综述。

关键词：心包液心脏病活性物质

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动脉粥样硬化基因工程小鼠模型

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中国比较医学杂志 2009年第9期19卷 54-58页

作者：赵海苹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

建立可靠的动脉粥样硬化动物模型对于探明其病因、发病机制及防治药物的开发均具有重要的意义。本文介绍了载脂蛋白、脂质代谢有关的受体、脂质代谢有关的酶和转运蛋白等十几种动脉粥样硬化相关基因的基因工程小鼠模型的特点及应用。

关键词：动脉粥样硬化基因工程小鼠模型

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代谢病相关的遗传工程小鼠模型

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中国比较医学杂志 2009年第6期19卷 70-73页

作者：吕丹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

糖尿病及肥胖症等代谢性疾病已成为影响人类健康的主要疾病,属于多基因所致的代谢综合征,遗传模式复杂多样,至今仍所知甚少。理想的实验动物模型是我们深入了解代谢病病因、遗传及环境因素的必要工具,并且可以用来研究验证新的治疗药物... 详细信息

糖尿病及肥胖症等代谢性疾病已成为影响人类健康的主要疾病,属于多基因所致的代谢综合征,遗传模式复杂多样,至今仍所知甚少。理想的实验动物模型是我们深入了解代谢病病因、遗传及环境因素的必要工具,并且可以用来研究验证新的治疗药物。近年来,已经获得了大量的遗传工程动物模型,包括转基因、基因敲除模型等遗传工程动物,对于代谢性疾病的研究意义重大。本文主要介绍近年来应用较多的糖尿病及肥胖相关的遗传工程小鼠模型遗传特征及应用。

关键词：代谢病小鼠模型遗传工程

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心肌α-MHC启动子驱动的人KIAA0174基因转基因小鼠的建立

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中国卫生检验杂志 2009年第12期19卷 2752-2754页

作者：宋铭晶陈炜施海霞梁虹潘思丹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的:建立心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠,研究该基因在心肌表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能。方法:RT-PCR法克隆人KIAA0174基因,把该基因插入心肌α肌球蛋白重链启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立... 详细信息

目的:建立心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠,研究该基因在心肌表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能。方法:RT-PCR法克隆人KIAA0174基因,把该基因插入心肌α肌球蛋白重链启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立心肌高表达人KIAA0174基因转基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平。测定小鼠的心率、收缩压,以及扩张压的平均值。结果:建立了3个心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠系。血压检测结果显示转基因小鼠的收缩压和扩张压均显著高于对照组。结论:成功建立了心肌α肌球蛋白重链启动子驱动的心肌高表达人KIAA0174基因转基因小鼠,为进一步探索KIAA0174基因的功能奠定了基础。

关键词： KIAA0174基因转基因小鼠 α肌球蛋白重链启动子

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布氏田鼠封闭群建立及繁殖特性研究

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中国卫生检验杂志 2009年第12期19卷 2767-2769页

作者：梁虹潘思丹施海霞高珊张建军宋铭晶中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的:本研究通过药物净化与随机交配在实验室内建立清洁级布氏田鼠封闭群。方法:采用最大限度避免近交系统同时结合随机交配系统等方法对布氏田鼠进行了封闭群培育,巴氏染色法观察阴道涂片测定动情周期。结果:连续繁殖6代得到清洁级布... 详细信息

目的:本研究通过药物净化与随机交配在实验室内建立清洁级布氏田鼠封闭群。方法:采用最大限度避免近交系统同时结合随机交配系统等方法对布氏田鼠进行了封闭群培育,巴氏染色法观察阴道涂片测定动情周期。结果:连续繁殖6代得到清洁级布氏田鼠封闭群。布氏田鼠的发情周期为5天,而布氏田鼠的精子形态具有显著的种属特异性。结论:本实验所建立的布氏田鼠封闭群可作为一种中国特有的实验动物。

关键词：布氏田鼠封闭群动情周期精子

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WIF-1心脏特异表达转基因小鼠心脏功能分析

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中国比较医学杂志 2009年第10期19卷 19-22,31页

作者：周文君董伟全雄志张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立心脏特异表达WIF-1转基因小鼠,研究该基因在心脏中表达对小鼠心脏发育,形态和功能维持中的作用。方法RT-PCR法克隆人WIF-1基因,把WIF-1基因插入α-MHC启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立转WIF-1C57BL/6J小鼠。... 详细信息

目的建立心脏特异表达WIF-1转基因小鼠,研究该基因在心脏中表达对小鼠心脏发育,形态和功能维持中的作用。方法RT-PCR法克隆人WIF-1基因,把WIF-1基因插入α-MHC启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立转WIF-1C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因表型,RT-PCR和Westernblot检测基因表达水平,超声检测不同月龄WIF-1转基因小鼠心脏结构及功能变化。结果建立了2个系的心脏特异表达WIF-1转基因小鼠。心脏超声检查证实,WIF-1转基因小鼠与对照小鼠比较,左心室重量减小,舒张期左室内径和容积变小,每搏输出量和心输出量减小。结论WIF-1基因是心脏功能的负调控因子。

关键词： WIF-1 转基因小鼠心脏超声

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广泛表达人载脂蛋白E3转基因小鼠的建立

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中国比较医学杂志 2009年第7期19卷 1-4页

作者：宋铭晶全雄志施海霞潘思丹张连峰中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的建立人载脂蛋白E3(apolipoprotein E3,ApoE3)转基因小鼠,研究该基因在多种组织中表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能。方法RT-PCR法克隆人ApoE3基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立转A... 详细信息

目的建立人载脂蛋白E3(apolipoprotein E3,ApoE3)转基因小鼠,研究该基因在多种组织中表达水平的变化对动物的影响,探索该基因的功能。方法RT-PCR法克隆人ApoE3基因,把该基因插入CMV启动子下游,构建转基因表达载体,通过显微注射法建立转ApoE3基因C57BL/6J小鼠。并利用特异引物PCR法鉴定转基因小鼠的基因型,Western blot检测基因表达水平。通过生化指标分析初步鉴定ApoE3基因的功能。结果建立了2个系的高表达人ApoE3转基因小鼠。结论成功建立了CMV启动子启动的高表达人ApoE3基因转基因小鼠,为进一步探索该基因的功能奠定了基础。

关键词： ApoE3基因转基因小鼠 CMV启动子

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