检索结果-内蒙古大学图书馆

脓毒症与中性粒细胞的移行异常

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中国细胞生物学学报 2018年第8期40卷 1408-1414页

作者：张存玲刘飞许元富中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

脓毒症是危重病人死亡的主要原因,近年来发病率仍在上升。脓毒症的病理机制是免疫系统功能失调。中性粒细胞是机体重要的免疫细胞,许多研究表明,在脓毒症时中性粒细胞的功能异常会影响患者预后。该文将探讨脓毒症时中性粒细胞的移行异常。

关键词：脓毒症中性粒细胞滚动黏附迁移募集

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中国细胞生物学学报 2018年第9期40卷 1479-1485页

作者：赵慧娟王文天李园魏晓晶杨洋牛琳段永娟胡晓中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

该文旨在研究与遗传性红细胞增多症相关的低氧诱导因子HIF2α基因点突变对人造血干祖细胞红系分化的影响。通过构建人HIF2α基因编码区、携带疾病相关的两个点突变体(M535V和G537R)以及文献中报道的HIF2α基因阳性对照突变(P531A)慢病... 详细信息

该文旨在研究与遗传性红细胞增多症相关的低氧诱导因子HIF2α基因点突变对人造血干祖细胞红系分化的影响。通过构建人HIF2α基因编码区、携带疾病相关的两个点突变体(M535V和G537R)以及文献中报道的HIF2α基因阳性对照突变(P531A)慢病毒表达载体,分别包装病毒并感染人脐血来源的CD34+造血干祖细胞,并进行常氧及5%低氧条件下的红系定向诱导分化培养。利用FACS流式分析比较红系分化进程特征分子CD71和CD235a的表达变化,结合荧光定量PCR检测HIF2α调控的红系分化相关的靶基因表达水平。结果显示,构建的HIF2α及突变体的慢病毒载体经病毒包装后感染K562细胞可在RNA和蛋白水平实现过表达;与对照组相比,感染表达HIF2α基因或其突变体病毒后的脐血CD34+HSPC在常氧及5%O_2条件下诱导红系分化培养的细胞CD71和CD235a的表达动态均无明显改变,但HIF调控的红系分化相关基因EPOR和VEGFA的表达水平有一定升高。综上,在体外红系分化培养体系中,慢病毒介导的HIF2α及突变体的过表达不直接影响造血干祖细胞的红系分化进程,提示疾病相关的HIF2α基因突变造成的红系分化异常增多的细胞内外调控机制需要更进一步的深入研究。

关键词：遗传性红系增多症 HIF2α基因及突变体低氧应答通路体外红系分化 EPO/EPOR

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成体稳态造血的维持——造血干细胞还是造血祖细胞?

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中国实验血液学杂志 2018年第3期26卷 637-641页

作者：张珊珊董芳程涛 Hideo Ema 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院干细胞医学中心天津300020 北京协和医学院干细胞与再生医学系天津300020

造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)一直被认为处于造血级联的顶端,通过维持自身的自我更新并逐级向下分化成熟,为机体源源不断地提供各种成熟的血细胞。基于HSC移植后分化成熟的变化规律为主要技术方法的研究表明,HSC维持着整个... 详细信息

造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)一直被认为处于造血级联的顶端,通过维持自身的自我更新并逐级向下分化成熟,为机体源源不断地提供各种成熟的血细胞。基于HSC移植后分化成熟的变化规律为主要技术方法的研究表明,HSC维持着整个造血系统的稳定,并且在分化发育过程中存在多种不同的模型。然而,从根本上来讲这些研究结果反映的是HSC应对外界压力的应激反应,与正常稳态情况下HSC对于整个造血系统的维持作用并不相同。而最新的一系列利用不同的实验模型对造血祖细胞(hematopoietic progenitor cell,HPC)在造血稳态维持中的作用进行了研究,发现HPC才是造血稳态维持的"主力军"。本文将对目前存在争议的关于HSC和HPC在稳态造血系统维持中作用的最新研究进展作一评述。

关键词：造血干细胞造血祖细胞稳态造血

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血小板计数检测在成人慢性原发免疫性血小板减少症利妥昔单抗疗效预测中的价值

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中华血液学杂志 2018年第7期39卷 573-578页

作者：王诗轩聂彦博鞠满凯孙婷李慧媛张冬雷张磊杨仁池中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)、实验血液学国家重点实验室天津300020 南昌大学第一附属医院血液科 330006 天津协和华美医学诊断技术有限公司

目的探讨血小板计数水平在成人慢性原发免疫性血小板减少症（ITP）患者利妥昔单抗疗效预测中的价值。方法回顾性分析2011年1月1日至2014年12月31日期间接受利妥昔单抗治疗（100mg每周1次，连用4次）慢性ITP患者的临床资料，计算利妥昔... 详细信息

目的探讨血小板计数水平在成人慢性原发免疫性血小板减少症（ITP）患者利妥昔单抗疗效预测中的价值。方法回顾性分析2011年1月1日至2014年12月31日期间接受利妥昔单抗治疗（100mg每周1次，连用4次）慢性ITP患者的临床资料，计算利妥昔单抗治疗后不同随访时间截点血小板计数预测疗效的敏感性、特异性和阳性预测值、阴性预测值，并通过ROC曲线下面积得出最佳截断点。结果103例患者纳入研究，男46例，女57例，中位年龄30（18-67）岁。首剂利妥昔单抗后第1、5、7天，成功组（治疗后PLT≥50×10^9／L且未接受其他药物治疗）与无效组（治疗后PLT〈50×10^9／L）中位血小板计数差异均无统计学意义（P〉0．05）；利妥昔单抗治疗后第14天，成功组中位血小板计数高于无效组[41（8-384）×10^9／L对23（0-106）×10^9／L，P=0．003]；在随后的各随访截点，成功组中位血小板计数进一步回升并维持于正常水平，无效组中位血小板计数均低于正常水平。以ROC曲线获得的预测治疗反应的优化界限值血小板计数50×10^9／L为基础，首剂妥昔单抗治疗后第14、30、60天血小板计数能够组成一个预后评估体系。结论利妥昔单抗治疗后第14、30、60天血小板计数能够组成一个疗效预测评估体系，有助于随访和制定治疗计划。

关键词：血小板减少利妥昔单抗血小板计数

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急性B淋巴细胞白血病REH细胞对雷帕霉素敏感性与mTOR通路激活的关系

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中华实用诊断与治疗杂志 2019年第12期33卷 1145-1149页

作者：吴文齐刘超陈晓燕段永娟郑佳睿张英驰竺晓凡中国医学科学院北京协和医学院血液病医院中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家血液病临床医学研究中心儿童血液病诊疗中心天津300020 天津医科大学基础医学院天津300070

目的探讨在急性B淋巴细胞白血病细胞系REH中敲除抑制哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)活性的基因nprl2后,细胞对雷帕霉素的敏感性。方法构建靶向nprl2基因的CRISPR-Cas9载体,并包装为病毒CRISPR-Cas9-nprl... 详细信息

目的探讨在急性B淋巴细胞白血病细胞系REH中敲除抑制哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)活性的基因nprl2后,细胞对雷帕霉素的敏感性。方法构建靶向nprl2基因的CRISPR-Cas9载体,并包装为病毒CRISPR-Cas9-nprl2-sg1、CRISPR-Cas9-nprl2-sg2、CRISPR-Cas9-nprl2-sg3感染REH细胞(分别为REH-nprl2-sg1、REH-nprl2-sg2和REH-nprl2-sg3细胞),感染72 h后采用1 mg/L的嘌呤霉素处理72 h,提取细胞DNA进行PCR,进行一代测序,测序结果为杂峰的是感染成功细胞(REH-nprl2-sg1)(敲除组)。REH细胞感染不含sgRNA的CRISPR-Cas9质粒空载体为对照组。采用实时定量PCR检测2组细胞nprl2 mRNA表达水平,采用CCK8法检测2组细胞培养第1~7天细胞活性,计算细胞增殖倍数;2组分别加入0.1、1、10、100、1000、10000 nmol/L雷帕霉素,培养72 h后检测细胞活性,比较雷帕霉素对2组细胞的半数抑制浓度。结果敲除组细胞nprl2 mRNA相对表达量(0.0123±0.0027)低于对照组(0.8330±0.0708)(P<0.05);敲除组第5~7天细胞增殖倍数(15.134±0.312、20.589±0.436、37.595±0.917)高于对照组(13.690±0.106、17.920±0.291、18.817±0.217)(P<0.05),第1~4天与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);1、10、100、1000、10000 nmol/L雷帕霉素处理后,敲除组细胞活性(0.806±0.001、0.478±0.013、0.323±0.002、0.274±0.008、0.279±0.003)较对照组(1.000±0.011、0.711±0.045、0.538±0.034、0.432±0.019、0.403±0.025)明显降低(P<0.05),敲除组雷帕霉素对细胞半数抑制浓度(0.48 nmol/L)小于对照组(2.07 nmol/L)。结论敲除nprl2后的REH细胞对雷帕霉素的敏感性明显提高,在伴有mTOR通路突变的急性B淋巴细胞白血病患者中联合使用雷帕霉素可能有较好治疗效果。

关键词：急性淋巴细胞白血病 CRISPR-Cas9 npr 12 mTOR

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新发和完全缓解的重型再生障碍性贫血间microRNA差异表达谱（英文）

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中国实验血液学杂志 2018年第1期26卷 213-218页

作者：邵英起董红宇葛美丽张峰施均李星鑫黄金波黄振东张静聂能郑以州中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 首都医科大学教学医院北京石景山医院北京100043 中国科学院北京基因组研究所北京100101

检测miRNA在新发与完全缓解SAA患者中的表达差异及预测其靶基因。方法:用miRNA芯片方法检测初发和完全缓解(CR)SAA患者骨髓单个核细胞中miRNA表达谱。结果:完全缓解SAA患者与初发SAA患者相比,上调miRNA为35个,下调miRNA为37个。此外,通... 详细信息

检测miRNA在新发与完全缓解SAA患者中的表达差异及预测其靶基因。方法:用miRNA芯片方法检测初发和完全缓解(CR)SAA患者骨髓单个核细胞中miRNA表达谱。结果:完全缓解SAA患者与初发SAA患者相比,上调miRNA为35个,下调miRNA为37个。此外,通过预测差异表达的miRNA靶点发现,其靶点与T细胞受体信号通路和细胞黏附分子相关。结论:某些miRNA可能与SAA患者发病机制相关。

关键词：重型再生障碍性贫血微小RNA 免疫抑制治疗

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中国骨髓增生性肿瘤患者生活质量及其影响因素分析

中国骨髓增生性肿瘤患者生活质量及其影响因素分析

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中国病理生理学会第十八届全国实验血液学学术会议

作者：宝梅石大雨石红霞刘晓力段明辉庄俊玲杜新秦玲惠吴函梁蓉王梅芳陈烨李冬云杨威唐古生张伟华匡霞苏伟韩艳秋陈丽梅许霁虹刘卓刚黄健赵春亭佟红艳胡建达陈春燕陈协群肖志坚江倩北京大学人民医院北京大学血液病研究所国家血液系统疾病临床医学研究中心南方医科大学南方医院血液科中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院血液内科深圳市第二人民医院河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院首都医科大学宣武医院血液科空军军医大学西京医院血液科山西医科大学第二医院血液科首都医科大学附属北京安贞医院血液科北京中医药大学东直门医院中国医科大学附属盛京医院血液科海军军医大学第一附属医院(上海长海医院)血液科中国人民解放军血液病研究所山西医科大学第一医院血液科开封市中心医院血液科北京中医药大学东方医院内蒙古医科大学附属医院血液内科西安交通大学第一附属医院血液内科齐齐哈尔市第一医院血液科浙江大学医学院附属第四医院血液内科青岛大学附属医院血液科浙江大学医学院附属第一医院血液科福建医科大学附属协和医院血液内科山东大学齐鲁医院血液科西北大学医学院中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心

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不同体外诱导分化来源巨噬细胞表型分子分析及极化功能比较

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国际输血及血液学杂志 2018年第2期41卷 121-132页

作者：元力潘旭边国慧李玉佳陈利民马峰中国医学科学院北京协和医学院输血研究所成都610052 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨人多能干细胞（hPSC）、人脐血CD34＋造血干/祖细胞与人白血病细胞系THP-1这3种来源巨噬细胞表型分子及其不同极化状态下炎症细胞因子mRNA相对表达水平，确定这3种来源巨噬细胞的功能。方法选择上述3种来源巨噬细胞，包括hPSC与... 详细信息

目的探讨人多能干细胞（hPSC）、人脐血CD34＋造血干/祖细胞与人白血病细胞系THP-1这3种来源巨噬细胞表型分子及其不同极化状态下炎症细胞因子mRNA相对表达水平，确定这3种来源巨噬细胞的功能。方法选择上述3种来源巨噬细胞，包括hPSC与AGM-S3基质细胞共培养来源巨噬细胞、人脐血CD34＋造血干/祖细胞来源巨噬细胞、THP-1来源巨噬细胞为研究对象。对其研究内容包括：①形态观察，并且进行麦格-姬姆萨（MGG）复合染色分析，判断巨噬细胞是否成功获得。②采用流式细胞术对其表型分子进行检测。③在脂多糖、白细胞介素（IL）-4刺激下，通过荧光定量PCR方法检测不同刺激物作用下其各种炎症细胞因子mRNA的相对表达水平，确定3种来源巨噬细胞的极化功能。采用独立样本t检验比较3种来源巨噬细胞不同刺激物作用下各种炎症细胞因子mRNA的相对表达水平。结果①根据细胞形态学观察及MGG复合染色结果，3种来源巨噬细胞均成功获得。②流式细胞术检测结果显示，3种来源巨噬细胞均表达髓系相关表型分子CD45、人类白细胞抗原（HLA）-Ⅱ、CD36与CD11b。另外，THP-1来源巨噬细胞仅表达巨噬细胞相关分子CD64与CD11c，而hPSC与AGM-S3基质细胞共培养来源巨噬细胞与人脐血CD34＋造血干/祖细胞来源巨噬细胞，均高表达巨噬细胞相关表型分子CD14、CD64、CD11c、CD68、CD86、CD206。③荧光定量PCR结果显示，hPSC与AGM-S3共培养来源巨噬细胞在脂多糖刺激3 h时，炎症细胞因子IL-1β、-6、-12β与肿瘤坏死因子（TNF）-α mRNA的相对表达水平达到峰值，分别为（14.69±0.24）、（305.50±67.26）、（10.91±1.48）、（128.31±9.90），均分别高于IL-4刺激3 h时的（0.75±0.14）、（2.66±0.27）、（0.54±0.04）、（0.89±0.08），并且差异均有统计学意义（t＝85.630、7.798、12.128、22.295，P＝0.000、0.001、0.000、0.000）。人脐血CD34＋造血干/祖细胞来源巨噬细胞在脂多糖刺激9 h时，IL-1β、-6 mRNA的相对表达水平达到峰值，分别为（16.80±0.56）、（481.50±26.81），均分别高于IL-4刺激9 h时的（0.02±0.00）、（0.51±0.23），并且差异均有统计学意义（t＝52.133、31.080，P＝0.000、0.000）；IL-12β与TNF-α mRNA相对表达水平在刺激3 h时达到峰值，分别为（56.48±3.78）、（11.12±0.76），均分别高于IL-4刺激3 h时的（3.53±0.46）、（0.33±0.18），并且差异均有统计学意义（t＝24.090、24.010，P＝0.000、0.000）；THP-1来源巨噬细胞在脂多糖刺激3 h时，TNF-α mRNA的相对表达水平达到峰值，为（21 388.05±2 464.90），高于IL-4刺激3 h时的（143.89±5.30），并且差异有统计学意义（t＝14.930，P＝0.000）；IL-1β、-6、-12β mRNA的相对表达水平在刺激9 h时达到峰值，分别为（4.33±0.01）、（14.53±3.79）、（525.56±34.65），均分别高于IL-4刺激9 h时的（0.48±0.08）、（0.01±0.00）、（1.03±0.26），并且差异均有统计学意义（t＝82.710、6.640、26.220，P＝0.000、0.003、0.000）。3种来源巨噬细胞在脂多糖刺激下，均可以形成M1型巨噬细胞。IL-4刺激9 h时，THP-1来源巨噬细胞IL-10 mRNA的相对表达水平为（262.79±20.18），显著高于脂多糖刺激的（1.71±0.02），并且差异有统计学意义（t＝22.410，P＝0.000）。于IL-4刺激下，仅THP-1来源巨噬细胞可以被有效极化形成M2型巨噬细胞，而其他2种来源巨噬细胞，均不能被有效极化形成M2型巨噬细胞。结论3种不同来源巨噬细胞具有显著表型分子表达差异，hPSC与AGM-S3共培养来源巨噬细胞与人脐血CD34＋造血干/祖细胞来源巨噬细胞，可以表达更多的巨噬细胞相关表型分子；而THP-1来源巨噬细胞缺失部分巨噬细胞相关表型分子表达，不能完全模拟体内巨噬细胞表型分子表达情况。hPSC与AGM-S3共培养来源巨噬细胞与人脐血CD34＋造血干/祖细胞来源巨噬细胞在较短刺激下，即可以分化成M1型巨噬细胞，但是无明显M2型极化。THP-1可在不同刺激下极化成M1与M2型巨噬细胞，但是所需刺激时间较长。

关键词：巨噬细胞人多能干细胞人胚胎干细胞脐血抗原表面细胞因子

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胶原支架促进人类多能干细胞向红细胞的诱导分化

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中国输血杂志 2018年第4期31卷 326-331,F0001页

作者：王敏潘旭毛斌赖默温滕嘉雯陈谊金周琼秀马峰中国医学科学院北京协和医学院输血研究所四川成都610052 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的建立人胚胎干细胞（hESCs）来源的造血干/组细胞向红细胞分化的体外3D培养方法。方法hESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾区（AGM-S3）基质细胞共培养14 d后获得CD34^＋CD45^＋造血干/祖细胞,对获得的CD34^＋CD45^＋细胞扩增5 d后,以相同... 详细信息

目的建立人胚胎干细胞（hESCs）来源的造血干/组细胞向红细胞分化的体外3D培养方法。方法hESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾区（AGM-S3）基质细胞共培养14 d后获得CD34^＋CD45^＋造血干/祖细胞,对获得的CD34^＋CD45^＋细胞扩增5 d后,以相同初始接种数量分别接种于胶原水凝胶、透明质酸水凝胶、Ⅰ型胶原蛋白构建的三维（3D）支架材料（简称胶原支架）中,在体外模拟骨髓微环境,做红细胞定向分化,以普通液体悬浮培养（简称液体培养）为对照,通过MGG染色、流式细胞术、免疫染色、qRT-PCR等手段分别对收获的细胞做形态学、红系特异性表面标志表达情况、红系细胞成熟程度以及红系细胞发育过程中相关基因的表达情况分析。结果红系定向分化14 d后,胶原支架中收获的总细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.50、1.19、1.33倍,GPA^＋CD71^＋细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.55、1.25及1.48倍;GPA^＋CD36^＋细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.65、1.07、1.36倍。结论利用Ⅰ型胶原蛋白构建的3D支架材料可模拟骨髓微环境,促进红细胞分化。

关键词：人胚胎干细胞(hESCs) 红细胞胶原支架三维(3D)培养

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细胞衰老与肿瘤发生、发展的关系

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医学研究杂志 2018年第6期47卷 11-13页

作者：李艺辉饶青中国医学科学院/北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

衰老是生物界普遍存在的现象,衰老进程的发生往往会伴随着一系列退行性疾病的出现;而另一方面特别是在脊椎动物中,衰老也会促进一些增生性疾病的发生,这其中最为致命的就是肿瘤。衰老所引起的退行性和增生性疾病都经历了细胞衰老这一细... 详细信息

衰老是生物界普遍存在的现象,衰老进程的发生往往会伴随着一系列退行性疾病的出现;而另一方面特别是在脊椎动物中,衰老也会促进一些增生性疾病的发生,这其中最为致命的就是肿瘤。衰老所引起的退行性和增生性疾病都经历了细胞衰老这一细胞应激反应,衰老反应在以往被认为是一种有效的肿瘤抑制机制。然而,近几年的研究认为衰老反应有可能通过促进慢性炎症的发生进而促进肿瘤的发生、发展。本文主要就细胞衰老与肿瘤发生、发展的关系做一综述。

关键词：细胞衰老肿瘤衰老反应 SASP

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