检索结果-内蒙古大学图书馆

医疗卫生装备 2015年第3期36卷 5-8页

作者：梁昊岳杨晚竹程雪莲王金宏中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室天津300020

目的 :探讨流式细胞术中不同分析软件在小鼠造血干细胞分析中的特点和差异。方法 :使用小鼠骨髓细胞悬液作为实验材料,在BD Aria III和BD Influx流式细胞仪上检测小鼠造血干细胞,分别应用FACSDiva、FACSSortware软件对检测数据进行分析... 详细信息

目的 :探讨流式细胞术中不同分析软件在小鼠造血干细胞分析中的特点和差异。方法 :使用小鼠骨髓细胞悬液作为实验材料,在BD Aria III和BD Influx流式细胞仪上检测小鼠造血干细胞,分别应用FACSDiva、FACSSortware软件对检测数据进行分析,并比较分析结果。结果:FACSDiva和FACSSortware软件在参数调节、补偿调节、圈门、数据保存和分选设置方面存在细微差异,均可以实现多色流式分析和高速流式分选。结论:FACSDiva和FACSSortware软件分析同一样本所得结果有较高的一致性,均是使用流式细胞仪不可或缺的工具。

关键词：流式细胞术造血干细胞 FACSDiva软件 FACSSortware软件

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MPL在白血病干细胞中的表达及在维持白血病干细胞干性中的作用研究

MPL在白血病干细胞中的表达及在维持白血病干细胞干性中的作用研究

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第十五届全国实验血液学学术会议

作者：李欢于沛邢海燕田征唐克晶王敏王建祥饶青中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的成骨细胞作为微环境中的重要成员，其分泌的THPO与造血干细胞上的MPL相互作用调节造血干细胞静息及自我更新，在白血病微环境中，二者的表达及作用尚未阐明。本研究通过证明MPL在白血病干细胞的表达以及MPL+/-的不同亚群白血病细... 详细信息

目的成骨细胞作为微环境中的重要成员，其分泌的THPO与造血干细胞上的MPL相互作用调节造血干细胞静息及自我更新，在白血病微环境中，二者的表达及作用尚未阐明。本研究通过证明MPL在白血病干细胞的表达以及MPL+/-的不同亚群白血病细胞的干性特征，最终阐明THPO-MPL介导的成骨细胞龛在维持白血病干细胞静息、自我更新、抵抗化疗等干性中的作用。

关键词：白血病干细胞微环境静息 MPL

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沉默SIRT2基因抑制AML耐药HL60A细胞株的增殖

沉默SIRT2基因抑制AML耐药HL60A细胞株的增殖

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：许华王齐李元叶李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:探讨靶向干扰SIRT2 基因表达对急性粒细胞白血病(AML)多药耐药细胞株HL60A 细胞增殖的影响.方法:针对SIRT2 基因构建shRNA 真核表达载体,制备慢病毒并感染HL60A 细胞.沉默SIRT2 基因之后,改良MTT 法检测对HL60A 细胞活力的影响;甲...

目的:探讨靶向干扰SIRT2 基因表达对急性粒细胞白血病(AML)多药耐药细胞株HL60A 细胞增殖的影响.方法:针对SIRT2 基因构建shRNA 真核表达载体,制备慢病毒并感染HL60A 细胞.沉默SIRT2 基因之后,改良MTT 法检测对HL60A 细胞活力的影响;甲基纤维素集落形成实验观察对HL60A 细胞集落形成能力的影响;采用流式细胞术检测分析对HL60A 细胞的细胞周期的影响.结果:干扰组SIRT2 基因的表达量被有效抑制;干扰SIRT2 基因表达量后,HL60A 细胞的细胞活力明显下降,集落形成数量减少及集落的形状减小,细胞被明显阻滞于G1/S 期.结论:shRNA 靶向干扰SIRT2 基因的表达可有效抑制急性粒细胞白血病耐药细胞系HL60A 细胞的增殖.

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抗人CD19嵌合抗原受体r细胞的构建及其抗白血病功能研究

抗人CD19嵌合抗原受体r细胞的构建及其抗白血病功能研究

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第十五届全国实验血液学学术会议

作者：安娜陶中飞邢海燕饶青王敏王建祥中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的利用本实验室的抗人CD19单链抗体构建一种新的抗人CD19嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)慢病毒表达载体,并对该CD19-CAR修饰的T细胞进行体内外功能研究.方法利用分子克隆技术,将CD19-CAR克隆到慢病毒表达载体中,构...

目的利用本实验室的抗人CD19单链抗体构建一种新的抗人CD19嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)慢病毒表达载体,并对该CD19-CAR修饰的T细胞进行体内外功能研究.方法利用分子克隆技术,将CD19-CAR克隆到慢病毒表达载体中,构成抗人CD19-CAR表达质粒.包装病毒,感染人CD3阳性的T细胞,利用流式细胞术鉴定T细胞表面CAR蛋白的表达.在体外将CAR-T细胞与CD19阳性的白血病细胞系Nalm-6靶细胞共培养,通过流式细胞术检测靶细胞残留、ELISA检测共培养上清中细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α以及CytoTox 96(R)非放射性细胞毒性法检测杀伤活性.并应用Nalm-6细胞系构建NOD/SCID小鼠的急性淋巴细胞白血病模型,尾静脉输注CAR-T细胞进行治疗,观察疗效.

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急性粒细胞白血病MSC体外诱导骨髓单个核细胞药物耐受性

急性粒细胞白血病MSC体外诱导骨髓单个核细胞药物耐受性

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:研究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)对骨髓单个核细胞增殖及耐药性的影响.方法:分离AML 患者及对照MSC 与骨髓单个核细胞共培养,阿糖胞苷药物处理,检测骨髓单个核细胞的增殖活性;流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡...

目的:研究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)对骨髓单个核细胞增殖及耐药性的影响.方法:分离AML 患者及对照MSC 与骨髓单个核细胞共培养,阿糖胞苷药物处理,检测骨髓单个核细胞的增殖活性;流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡;超速离心提取MSC 的外泌体(exosome),电镜及Western blot 检测外泌体;还将外泌体与患者骨髓单个核细胞共培养,检测其对骨髓单个核细的增殖和凋亡的影响.结果:与AML 患者的MSC 及其外泌体共培养的骨髓单个核细胞,被药物诱导凋亡细胞的数量减少,细胞存活率增高.结论:AML 来源MSC 对正常骨髓单个核细胞和病人的骨髓单个核细胞有一定的药物耐受性诱导作用,外泌体可能作为载体在此过程中运输某些信号传递分子.

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沉默Sam68基因抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖

沉默Sam68基因抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：王齐王迟鹃李元叶许华李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:探讨Sam68 对急性淋巴细胞白血病Jurkat 细胞增殖的影响.方法:针对Sam68 mRNA 的第531～552 靶位点,构建pLKO-Tet-On 载体,制备慢病毒并感染、筛选Jurkat 细胞,诱导干扰载体表达;采用real-time PCR 和Western blot 技术验证干扰效...

目的:探讨Sam68 对急性淋巴细胞白血病Jurkat 细胞增殖的影响.方法:针对Sam68 mRNA 的第531～552 靶位点,构建pLKO-Tet-On 载体,制备慢病毒并感染、筛选Jurkat 细胞,诱导干扰载体表达;采用real-time PCR 和Western blot 技术验证干扰效率;用体外细胞集落形成实验观察干扰Sam68 基因表达后对细胞集落形成能力的影响;用流式细胞术检测分析Jurkat 细胞细胞周期的变化.结果:Sam68 基因表达下调能抑制了细胞的增殖和集落形成能力,导致S 期细胞比例显著增加,G2 期细胞比例显著降低,G1 期细胞比例无明显差异.结论:shRNA 靶向干扰Sam68 基因的表达能有效抑制急性淋巴细胞白血病细胞系Jurkat 细胞的增殖.

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沉默CIAPIN1基因对K562细胞增殖能力的影响

沉默CIAPIN1基因对K562细胞增殖能力的影响

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：王齐王建李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:探讨靶向干扰CIAPIN1 基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562 细胞增殖能力的影响.方法:针对CIAPIN1基因构建shRNA 真核表达载体并稳定转染K562 细胞系.Real-time PCR 及Western blotting 技术鉴定干扰效率;CIAP-IN1 基因沉...

目的:探讨靶向干扰CIAPIN1 基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562 细胞增殖能力的影响.方法:针对CIAPIN1基因构建shRNA 真核表达载体并稳定转染K562 细胞系.Real-time PCR 及Western blotting 技术鉴定干扰效率;CIAP-IN1 基因沉默之后,改良MTT 法检测细胞活力的变化;甲基纤维素集落形成实验观察细胞集落形成大小和数量的变化;流式细胞术检测细胞周期的改变;将K562 细胞接种到裸鼠体内皮下,观察细胞在裸鼠体内成瘤能力的变化.结果:CIAPIN1 基因表达下调后,K562 细胞的活力下降;集落形成数量减少和集落减小;G1 期细胞数量增加;小鼠体内成瘤能力明显降低.结论:下调CIAPIN1 基因表达能够抑制K562 细胞在体外及体内的增殖能力.

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NHE1对急性粒细胞白血病MSC生物学功能的影响及机制探究

NHE1对急性粒细胞白血病MSC生物学功能的影响及机制探究

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:探究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)病理生理变化和钠氢交换蛋白(NHE1)的影响及机制.方法:检测AML 来源MSC 中NHE1 的表达量;检测在有无NHE1 抑制剂情况下AML 来源MSC 的成脂成骨分化能力,MTT 检测体外增殖能力,流...

目的:探究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)病理生理变化和钠氢交换蛋白(NHE1)的影响及机制.方法:检测AML 来源MSC 中NHE1 的表达量;检测在有无NHE1 抑制剂情况下AML 来源MSC 的成脂成骨分化能力,MTT 检测体外增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell 检测其迁移能力;Western blot 检测NHE1、JAK、AKT 等相关蛋白的表达.结果:AML 患者MSC 的增殖、迁移及成骨能力减弱,NHE1 表达量增高,抑制NHE1 活性后可以不同程度地恢复这些能力;MSC 细胞S 期明显延长,G2 期明显缩短;p-AKT 和p-JAK 表达量均降低.结论:AML 来源MSC 存在异常,NHE1、JAK 和AKT 不同程度参与AML 患者MSC 生物学异常.

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NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼耐药的影响

NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼耐药的影响

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：李元叶张海瑞王齐许华李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:研究lipocalin 家族成员NGAL 对慢性髓系白血病细胞伊马替尼(imatinib)耐药性的影响及其机制.方法:构建针对NGAL 的慢病毒干扰载体,建立稳定干扰NGAL 的细胞系.MTT 法检测细胞活力.Hoechst 33258 染色和流式细胞术检测imatinib诱...

目的:研究lipocalin 家族成员NGAL 对慢性髓系白血病细胞伊马替尼(imatinib)耐药性的影响及其机制.方法:构建针对NGAL 的慢病毒干扰载体,建立稳定干扰NGAL 的细胞系.MTT 法检测细胞活力.Hoechst 33258 染色和流式细胞术检测imatinib诱导的细胞凋亡.结果:NGAL 的干扰载体成功降低了白血病K562/G01 细胞系中NGAL 的表达.Hoechst 33258 染色和流式细胞术结果表明NGAL 沉默可以增强imatinib 对K562/G01 细胞的杀伤作用.

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间充质干细胞中受Interferon-γ调节的microRNA及其功能预测

间充质干细胞中受Interferon-γ调节的microRNA及其功能预测

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：池颖宋宝全韩之波韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室 300020

目的：由于具有免疫调节功能及组织修复能力,间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)成为临床细胞治疗新的希望.MSCs的免疫调节功能需要经过外界因素刺激才能充分的发挥,Interferon (IFN)-γ即是其中之一.研究表明IFN-γ是通过诱导M...

目的：由于具有免疫调节功能及组织修复能力,间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)成为临床细胞治疗新的希望.MSCs的免疫调节功能需要经过外界因素刺激才能充分的发挥,Interferon (IFN)-γ即是其中之一.研究表明IFN-γ是通过诱导MSCs的因子表达(如：IDO1)调控T细胞应答从而发挥其免疫抑制能力的.除调节MSCs的免疫调节功能外IFN-y还会影响MSCs的多种生物学功能,如抑制MSCs的增殖能力、分化能力;提高MSCs的表面黏附分子表达,促进迁移能力;诱导MSCs的MHCⅠ、Ⅱ类分子表达上调等.而IFN-γ对MSCs的microRNA表达是否有影响;相关microRNA是否参与调控MSCs的功能和特性的研究尚未见报道.本课题期望筛选被IFN-γ调控的microRNA并预测其在MSCs中发挥的功能.

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