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SB203580对受照小鼠免疫细胞的作用研究

陕西医学杂志 2011年第5期40卷 515-516,528页

作者：李德冠王月英吴红英路璐张恒王小春常建辉翟志斌王彦褚丽萍杜利清樊飞跃孟爱民北京协和医学院中国医学科学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

目的:探讨p38抑制剂SB203580(SB)在免疫细胞辐射损伤中的作用。方法:将C57BL/6小鼠分为对照组、照射组、SB组。对照组接受假照射,对其余两组进行4G y全身照射。SB203580 15m g/kg腹腔注射,照射24h后开始给药,隔日给药共给药5次。SB末次... 详细信息

目的:探讨p38抑制剂SB203580(SB)在免疫细胞辐射损伤中的作用。方法:将C57BL/6小鼠分为对照组、照射组、SB组。对照组接受假照射,对其余两组进行4G y全身照射。SB203580 15m g/kg腹腔注射,照射24h后开始给药,隔日给药共给药5次。SB末次给药24h后处死小鼠,取外周血进行分型CD4、CD8、B220检测,取骨髓测定ROS。结果:SB组与照射组比较,外周血白细胞增加,骨髓ROS水平与照射组比较有所下降(P<0.05)。结论:p38抑制剂能降低受照小鼠骨髓细胞的ROS水平,对4G y照射后的外周血无显著保护作用。

关键词：免疫,细胞/药物作用辐射防护剂/治疗应用动物,实验小鼠

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Rad51蛋白表达对骨肉瘤细胞γ-射线敏感性的影响

Rad51蛋白表达对骨肉瘤细胞γ-射线敏感性的影响

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首届全球华人辐射研究大会

作者：杜利清王彦中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津分子核医学重点实验室天津 300192

目的：利用RNAi抑制Rad51蛋白表达来研究Rad51在骨肉瘤治疗中的作用.方法：western blot和RT-PCR观察Rad51在骨肉瘤细胞中蛋白和RNA水平的变化.采用RNA干扰技术，构建shRNA-Rad51载体.用western blot和RT-PCR方法证实RNA干扰的有效性和... 详细信息

目的：利用RNAi抑制Rad51蛋白表达来研究Rad51在骨肉瘤治疗中的作用.方法：western blot和RT-PCR观察Rad51在骨肉瘤细胞中蛋白和RNA水平的变化.采用RNA干扰技术，构建shRNA-Rad51载体.用western blot和RT-PCR方法证实RNA干扰的有效性和可行性.用MTT和克隆形成实验研究RNAi抑制Rad51表达对γ-射线的敏感性.流式分析法观察RNAi抑制Rad51表达对细胞凋亡的影响.结果：成功构建了shRNA-Rad51载体.RNAi抑制Rad51表达增强骨肉瘤细胞对γ-射线的敏感性.RNAi抑制Rad51表达促进骨肉瘤细胞的凋亡.结论：RNAi抑制Rad51表达在骨肉瘤治疗中有作用，有望成为骨肉瘤治疗的新靶点.

关键词：骨肉瘤 Rad51 RNA干扰辐射敏感性

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白藜芦醇对辐射诱导小鼠毛发脱色的治疗作用研究

白藜芦醇对辐射诱导小鼠毛发脱色的治疗作用研究

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中国活性氧生物学效应学术会议

作者：吴红英王月英常建辉李德冠张恒王小春路璐翟志斌孟爱民中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室

目的研究白藜芦醇对辐照后小鼠毛发脱色的治疗作用。方法利用我所自主培育的IRM-2小鼠建立辐射诱导小鼠毛发脱色模型,制备脱色雄性小鼠16只,6～8周龄,随机分为照射对照组和照射后药物治疗组,每组8只。从照射后4周IRM-2小鼠毛发发生脱色... 详细信息

目的研究白藜芦醇对辐照后小鼠毛发脱色的治疗作用。方法利用我所自主培育的IRM-2小鼠建立辐射诱导小鼠毛发脱色模型,制备脱色雄性小鼠16只,6～8周龄,随机分为照射对照组和照射后药物治疗组,每组8只。从照射后4周IRM-2小鼠毛发发生脱色时开始,连续经口给予白藜芦醇15天,照射对照组口服生理盐水,观察期为30天。观察两组间小鼠毛发脱色发生的阳性率及脱色分值的变化,进行骨髓细胞集落形成能力及皮肤病理检测。结果给药第4天,照射对照组、白藜芦醇组发生毛发脱色的阳性率分别为100%和50%;脱色分值按组合计,分别为8分和4分。停药后14天(即辐照后8周),两组脱色阳性率分别为100%和62.5%;脱色分值分别为25分和10分。脱色部位皮肤病理检测结果,高倍镜下计数单个视野毛囊个数,白藜芦醇组为52.2±7.5个,照射对照组为32.4±6.3个,用药组明显高于照射对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠骨髓细胞集落形成率(CFU-GM)的结果显示,正常组、照射组和白藜芦醇组的集落形成率分别为137.7±20.08、105.2±10.65和121.0±8.72。白藜芦醇组显著高于照射组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇对辐照后小鼠毛发脱色发生的抑制率接近40%,且治疗组小鼠毛发脱色发生时间延迟,脱色面积小,表明口服白藜芦醇对辐射诱导小鼠毛发脱色具有明显的抑制作用;脱色部位皮肤组织增生,毛囊密集和CFU-GM实验结果表明,抗氧化剂白藜芦醇对辐射损伤后的小鼠皮肤组织和骨髓造血功能也具有一定的保护作用。

关键词：白藜芦醇电离辐射毛发脱色治疗作用

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γ射线诱导小鼠胚胎成纤维细胞衰老模型的建立及其应用

γ射线诱导小鼠胚胎成纤维细胞衰老模型的建立及其应用

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首届全球华人辐射研究大会

作者：路璐王月英王小春李德冠张恒吴红英翟智斌常建辉孟爱民中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

p16基因作为细胞衰老的分子检测指标,其升高与细胞衰老诱导有关.本研究利用辐射诱导建立小鼠胚胎成纤维细胞衰老模型,并在此基础上用RNA干扰敲降衰老细胞p16表达,观察p16mRNA的表达水平,为细胞衰老相关研究奠定基础.将培养至第3代的小... 详细信息

p16基因作为细胞衰老的分子检测指标,其升高与细胞衰老诱导有关.本研究利用辐射诱导建立小鼠胚胎成纤维细胞衰老模型,并在此基础上用RNA干扰敲降衰老细胞p16表达,观察p16mRNA的表达水平,为细胞衰老相关研究奠定基础.将培养至第3代的小鼠胚胎成纤维细胞分为对照组、照射组和p 16RNAi组.对照组接受假照射,对其余两组进行10.0Gy 137Cs γ射线照射,照射后p16RNAi组进行转染,转染24小时后,收集细胞,运用实时定量PCR检测细胞内p16 mRNA的表达水平.实验结果显示：与对照组比较,照射组细胞p16 mRNA相对表达水平明显升高(p＜0.01);与照射组比较,p16RNAi组细胞p16 mRNA相对表达水平明显降低(p＜0.05).结果表明通过电离辐射可以诱导小鼠胚胎成纤维细胞衰老;敲降p16表达可显著抑制小鼠胚胎成纤维细胞的衰老.

关键词：小鼠胚胎成纤维细胞衰老 p16

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间充质干细胞移植治疗肠辐射损伤模型鼠的实验研究

间充质干细胞移植治疗肠辐射损伤模型鼠的实验研究

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首届全球华人辐射研究大会

作者：王彦刘强杜利清王宏曹嘉陈凤华邓昭玲赵鹏樊飞跃中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津 300191

目的应用人脐带间充质干细胞移植肠道辐射损伤小鼠,观察其移植效率及治疗效果,为间充质干细胞治疗人急性肠型放射病提供理论依据。方法体外分离培养人脐血间充质干细胞、对肠道放射损伤模型鼠移植CM-DiI荧光标记后的人间充质干细胞,... 详细信息

目的应用人脐带间充质干细胞移植肠道辐射损伤小鼠,观察其移植效率及治疗效果,为间充质干细胞治疗人急性肠型放射病提供理论依据。方法体外分离培养人脐血间充质干细胞、对肠道放射损伤模型鼠移植CM-DiI荧光标记后的人间充质干细胞,利用人β2-微球蛋白PCR技术检测受体内的供体细胞的组织定位,DAI评分和体重变化评价小鼠一般生活状态,组化染色观察肠道粘膜的病理变化,激光共聚焦显微镜观察供体细胞在模型鼠肠道粘膜的定位。结果移植MSC 5周后模型鼠的一般状况和肠道病理学表现明显改善,组织PCR结果显示MSC除定向辐射损伤部位小肠,在骨髓、肝脏、肺脏、脾脏也有一定的浓集。结论脐带间充质干细胞移植可以明显改善模型鼠的肠道病变,有望用于人急性肠型放射病的治疗。

关键词：干细胞细胞移植肠损伤辐射

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重组人Hexastatin融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及其纯化

重组人Hexastatin融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及其纯化

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中国核学会2011年年会

作者：贺欣温镭宋娜玲王德芝赵启仁中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所，天津市分子核医学重点实验室，天津 300192

目的：构建人Hexastatin蛋白原核表达载体，大量表达并纯化Hexastatin蛋白，为其在体内外的活性研究奠定基础。方法：提取人食管癌EC9706细胞总RNA，通过RT-PCR方法扩增人Hexastatin基因，导入pMD18-T载体测序，然后克隆至pMAL-c4x表... 详细信息

目的：构建人Hexastatin蛋白原核表达载体，大量表达并纯化Hexastatin蛋白，为其在体内外的活性研究奠定基础。方法：提取人食管癌EC9706细胞总RNA，通过RT-PCR方法扩增人Hexastatin基因，导入pMD18-T载体测序，然后克隆至pMAL-c4x表达载体，IPTG诱导表达，并利用Amylose亲和树脂纯化融合蛋白，产物进行Westernblot鉴定。结果：经PCR扩增成功获得了687bp的人Hexastatin基因，测序正确。重组人Hexastatin基因在BL21菌体中获得高效可溶性表达，表达的可溶性蛋白占总蛋白量的24．8％，纯化后的MBP-Hexastatin融合蛋白纯度可达90％， Westernblot证实表达蛋白为目的蛋白。结论：人Hexastatin基因克隆、表达及纯化的成功，为进一步开发其作为放射受体显像剂的研究奠定基础，同时也为肿瘤的生物治疗提供了新的方法。

关键词： Hexastatin prokaryotic expression purification

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重组人Hexastatin融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及其纯化

重组人Hexastatin融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及其纯化

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第八届中国核学会“三核”论坛

作者：贺欣温镭宋娜玲王德芝赵启仁中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津300192

目的：构建人Hexastatin蛋白原核表达栽体,大量表达并纯化Hexastatin蛋白,为其在体内外的活性研究奠定基础.方法：提取人食管癌EC9706细胞总RNA,通过RT-PCR方法扩增人Hexastatin基因,导入pMD18-T载体测序,然后克隆至pMAL-c4x表达载体,I... 详细信息

目的：构建人Hexastatin蛋白原核表达栽体,大量表达并纯化Hexastatin蛋白,为其在体内外的活性研究奠定基础.方法：提取人食管癌EC9706细胞总RNA,通过RT-PCR方法扩增人Hexastatin基因,导入pMD18-T载体测序,然后克隆至pMAL-c4x表达载体,IPTG诱导表达,并利用Amylose亲和树脂纯化融合蛋白,产物进行Westernblot鉴定.结果：经PCR扩增成功获得了687bp的人Hexastatin基因,测序正确.重组人Hexastatin基因在BL21菌体中获得高效可溶性表达,表达的可溶性蛋白占总蛋白量的24.8％,纯化后的MBP-Hexastatin融合蛋白纯度可达90％,Westernblot证实表达蛋白为目的蛋白.结论：人Hexastatin基因克隆、表达及纯化的成功,为进一步开发其作为放射受体显像剂的研究奠定基础,同时也为肿瘤的生物治疗提供了新的方法.

关键词： Hexastatin 原核表达纯化

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E838对辐射所致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂防护作用的实验研究

E838对辐射所致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂防护作用的实验研究

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首届全球华人辐射研究大会

作者：王月英李德冠吴红英刘强王小春张恒路璐杜利清孟爱民中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市分子核医学重点实验室天津 300192

目的：探讨E838对辐射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂及辐射损伤小鼠的防护作用.方法：动物照射前给予E838,观察其存活率和动物平均存活时间;用中性单细胞凝胶电泳技术,检测1 Gyγ射线辐照后小鼠淋巴细胞DNA双链断裂,并与同类药物进行比较... 详细信息

目的：探讨E838对辐射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂及辐射损伤小鼠的防护作用.方法：动物照射前给予E838,观察其存活率和动物平均存活时间;用中性单细胞凝胶电泳技术,检测1 Gyγ射线辐照后小鼠淋巴细胞DNA双链断裂,并与同类药物进行比较,用CASP软件分析彗星图像,SPSS12.0进行数据的统计学分析.结果：E838预防用药能够明显提高损伤动物的30d存活率,E838低、中、高剂量组存活率分别比对照组提高55％、85％、75％,平均生存天数与对照组比较,差异有显著性(p＜0.001),保护指数分别为1.99、2.56、2.46.E838与炔雌醇比较,中、高剂量组的动物平均生存天数明显延长,差异有显著性(p＜0.001). E838能明显减轻淋巴细胞DNA双链断裂损伤,E838低、中、高组,彗星尾部(TDNA％)11.68、6.24、9.05、彗星尾长(TL) 18.53、10.09、16.02、彗星尾矩(TM) 2.13、0.64、1.21和Olive尾矩(OTM) 2.52、0.99、1.59残余损伤逐渐减少,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.001).E838与炔雌醇、尼尔雌醇比较差异有显著性(P＜0.05).结论：E838对辐射损伤具有明显的保护作用.

关键词： E838 辐射损伤 DNA双链断裂辐射防护

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人朊蛋白Glu200残基突变的分子动力学研究

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天津医科大学学报 2011年第2期17卷 154-157页

作者：周慧刘梦源杨冰程先超王润玲天津医科大学药学院天津300070 北京协和医学院中国医学科学院放射医学研究所天津分子核医学重点实验室天津300192

目的:探索Glu 200残基突变对人朊蛋白二级结构的影响。方法:从RCSB数据库下载人野生型和E200K突变型朊蛋白NMR结构,利用Desmond 9.0分子动力学软件包进行10ns分子动力学模拟。结果:E200K会使人朊蛋白α2和α3螺旋骨架氢键稳定程度下降,... 详细信息

目的:探索Glu 200残基突变对人朊蛋白二级结构的影响。方法:从RCSB数据库下载人野生型和E200K突变型朊蛋白NMR结构,利用Desmond 9.0分子动力学软件包进行10ns分子动力学模拟。结果:E200K会使人朊蛋白α2和α3螺旋骨架氢键稳定程度下降,从而使上述两螺旋发生解旋现象。结论:人朊蛋白E200K突变会使朊蛋白本身二级结构稳定性下降,可能导致传染性海绵状脑病的发生。

关键词：朊蛋白突变分子动力学二级结构

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OPG/RANKL/RANK系统在成骨细胞和破骨细胞相互调节中的作用

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中国骨质疏松杂志 2011年第11期17卷 1010-1013页

作者：仲蕾蕾杨冰黄晓斌孙元明北京协和医学院&中国医学科学院&清华大学医学部放射医学研究所天津分子核医学重点实验室天津300308 中国科学院天津工业生物技术研究所天津300308

骨组织平衡由行使骨形成和骨吸收的成骨细胞(osteoblast,OB)和破骨细胞(osteoclast,OC)共同维持。在骨重建中两种细胞之间相互调节,一方面,OB、前体细胞、基质细胞调节OC的数量和活性;另一方面,OC反过来也可以调节OB的功能,从而形成一... 详细信息

骨组织平衡由行使骨形成和骨吸收的成骨细胞(osteoblast,OB)和破骨细胞(osteoclast,OC)共同维持。在骨重建中两种细胞之间相互调节,一方面,OB、前体细胞、基质细胞调节OC的数量和活性;另一方面,OC反过来也可以调节OB的功能,从而形成一个反馈通路。OB和OC之间的相互调节有助于骨重建过程中骨吸收和骨形成的偶联。近年来,OB对OC骨吸收的调节已有较多研究,尤其是,OPG/RANKL/RANK信号系统的发现对于理解OB对OC骨吸收的调节是一个巨大的飞跃。但OC对OB的调节研究相对较少。本综述讨论了OB和OC之间的相互调节作用,综述了RANKL/RANK/OPG系统在骨形成和骨重建中的作用。

关键词： OB OC OPG/RANKL/RANK系统

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