检索结果-内蒙古大学图书馆

中华整形外科杂志 2023年第9期39卷 1003-1009页

作者：尹艳爽李秀杨志岗马世泽曹焱肖苒中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心、中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京100144 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院病理科北京100144

目的构建间质细胞双尾C(Bicc1)基因条件性敲除小鼠模型,并对其表型进行分析。方法将CRISPR Cas9方法构建的Bicc1f/+小鼠子代与Pdgfra启动子驱动的Cre小鼠进行杂交,获得子代小鼠,饲养1~2周后提取其脚趾及鼠尾组织基因组DNA,经PCR扩增及... 详细信息

目的构建间质细胞双尾C(Bicc1)基因条件性敲除小鼠模型,并对其表型进行分析。方法将CRISPR Cas9方法构建的Bicc1f/+小鼠子代与Pdgfra启动子驱动的Cre小鼠进行杂交,获得子代小鼠,饲养1~2周后提取其脚趾及鼠尾组织基因组DNA,经PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳后,在DNA水平检测小鼠基因型;选取经鉴定后生长至3周龄的Bicc1基因条件性敲除小鼠(实验组)、野生型小鼠(对照组)各3只进行后续实验:通过腹腔注射他莫昔芬进行诱导敲除Bicc1基因,于1周后取小鼠肾脏、骨骼肌、皮肤及脂肪组织,一部分组织通过实时定量PCR(RT-qPCR)鉴定其中的Bicc1 mRNA表达水平;另一部分组织以10%多聚甲醛固定,随后进行HE染色和Masson染色,在光镜下观察分析。应用SPSS 28.0软件对数据进行分析,组间比较采用t检验,P<0.05表示差异有统计学意义。结果通过繁育获得间质细胞Bicc1基因条件性敲除小鼠,基因型为Bicc1^(f/f)Cre+/-,野生型小鼠基因型为Bicc1^(f/f)Cre^(-/-);RT-qPCR检测结果显示,实验组小鼠肾脏、骨骼肌、皮肤、脂肪组织中Bicc1 mRNA表达水平均显著低于对照组(P均<0.01);HE染色和Masson染色显示,与对照组相比,实验组小鼠肾小球萎缩,肾小囊形状不规则,部分肾小囊消失;骨骼肌纤维排列疏松散乱,肌纤维堆积不致密;皮肤及脂肪组织未见明显差别。结论成功建立了间质细胞Bicc1基因条件性敲除小鼠模型,可以为研究Bicc1基因在组织器官间质细胞中的作用提供动物模型;3周龄小鼠间质细胞中敲除Bicc1后1周,其肾脏和骨骼肌发生病理性改变。

关键词：小鼠,基因敲除间质细胞双尾C基因条件性基因敲除他莫昔芬

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单细胞测序数据分析瘢痕疙瘩和局限性硬皮病组织中周细胞的差异

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中华整形外科杂志 2023年第6期39卷 602-609页

作者：孔宇祥李志帅傅歆严笠肖苒中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心北京100144 中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京100144

目的:探讨瘢痕疙瘩和局限性硬皮病组织中周细胞的异质性及其演化轨迹差异,为研究2种皮肤纤维化疾病的致病机制和治疗靶点提供新的线索。方法:选取GEO和GSA-Human数据库中的3例局限性硬皮病、4例瘢痕疙瘩及其对应的邻近正常皮肤样本细胞... 详细信息

目的:探讨瘢痕疙瘩和局限性硬皮病组织中周细胞的异质性及其演化轨迹差异,为研究2种皮肤纤维化疾病的致病机制和治疗靶点提供新的线索。方法:选取GEO和GSA-Human数据库中的3例局限性硬皮病、4例瘢痕疙瘩及其对应的邻近正常皮肤样本细胞的单细胞转录组测序数据,绘制数据的表达矩阵。采用R语言的Seurat 4.3.0包进行处理后分群绘制t-SNE可视化图谱。采用Monocle 2.24.0包对其中的周细胞进行拟时序轨迹分析。结果:瘢痕疙瘩和局限性硬皮病皮肤组织无监督聚类为19个不同的细胞群体,其中周细胞为C7、C11群,高表达PDGFRB和RGS5基因,占总细胞数的7.53%。周细胞进一步可分为8个亚群,拟时序分析发现基因表达变化主要有细胞命运1(fate 1)和细胞命运2(fate 2)2个分支轨迹,依照时序周细胞可分为5个状态(S1~S5);其中S4占前分支的绝大部分,代表最初状态的周细胞;S5构成细胞命运1分支的大部分,代表分化较早期状态的周细胞;S1、S2、S3构成命运2分支的大部分,其中S3代表分化中期状态的周细胞,而S1、S2则代表分化晚期状态的周细胞。在正常皮肤中,各分化状态的周细胞均匀分布,而瘢痕疙瘩周细胞主要分布于前支(S4)、分支1(S5)及分支2中的前一部分(S3),分别代表初始、早期及分化中期的细胞状态,分支基因表达动态分析显示其高表达SOX4、COL4A1、COL6A3、AHR、CXCL3和IL1R1等基因;而局限性硬皮病的周细胞主要分布于分支2的中后部分(S1、S2),代表分化末期的细胞,高表达ACTA2和MYH11等基因。结论:瘢痕疙瘩和局限性硬皮病中周细胞具有异质性以及不同的演化轨迹;瘢痕疙瘩周细胞更具有干细胞样特性,通过高表达与细胞干性、上皮-间质转换、侵袭性和免疫微环境调控相关的基因,对其侵袭性和复发的病理特性发挥重要作用;而局限性硬皮病中周细胞可能主要转分化为肌成纤维细胞,导致其纤维化病理表型。

关键词：瘢痕疙瘩局限性硬皮病周细胞单细胞RNA测序拟时序分析

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瘢痕疙瘩诊断生物标志物及治疗靶点研究进展

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中华医学杂志 2023年第3期103卷 219-223页

作者：孔宇祥李志帅肖苒刘元波严笠中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京100144 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院瘢痕与创面治疗二科北京100144

瘢痕疙瘩是皮肤创伤病理性愈合的结果,具有侵袭性且复发率高。由于瘢痕疙瘩形成的病理机制尚未阐明,缺乏特异的诊断标志物及安全、精准和有效的分子治疗靶点,本文从疾病预测和临床诊断两个方面总结瘢痕疙瘩的诊断及预测标志物,重点阐述... 详细信息

瘢痕疙瘩是皮肤创伤病理性愈合的结果,具有侵袭性且复发率高。由于瘢痕疙瘩形成的病理机制尚未阐明,缺乏特异的诊断标志物及安全、精准和有效的分子治疗靶点,本文从疾病预测和临床诊断两个方面总结瘢痕疙瘩的诊断及预测标志物,重点阐述参与瘢痕疙瘩纤维化和炎症调控相关的信号通路,对通路中潜在的治疗靶点及其药物进行综述,并提出新的研究策略和方向。

关键词：瘢痕疙瘩标志物治疗靶点信号通路成纤维细胞

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两种消化液传代培养的人脂肪干细胞生物学特性比较研究

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组织工程与重建外科 2023年第2期19卷 111-114页

作者：绽国琴曹蕊严笠司锘肖苒中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京市100144

目的比较两种消化试剂传代对人脂肪干细胞生物学特性的影响,探寻可替代胰蛋白酶的细胞消化试剂。方法采用类胰蛋白酶(TrypLE Express)与胰蛋白酶(Trypsin)两种细胞消化试剂,对原代提取的人脂肪干细胞生物学特性及成脂分化能力进行比较... 详细信息

目的比较两种消化试剂传代对人脂肪干细胞生物学特性的影响,探寻可替代胰蛋白酶的细胞消化试剂。方法采用类胰蛋白酶(TrypLE Express)与胰蛋白酶(Trypsin)两种细胞消化试剂,对原代提取的人脂肪干细胞生物学特性及成脂分化能力进行比较。结果第三代脂肪干细胞在TrypLE^(TM) Express与Trypsin试剂消化条件下活细胞百分比无显著性差异(P>0.05)。流式细胞仪检测结果表明,CD90、CD73、CD105等细胞表面抗原标志物呈现阳性表达,CD11b、CD34、CD19、CD45、HLA-DR等呈现阴性表达,两组消化试剂作用下阳性细胞的百分比无显著性差异(P>0.05)。成脂诱导细胞脂滴染色结果用Imagepro plus进行半定量分析,两组消化试剂作用下成脂分化率无显著性差异(P>0.05),接种第1~7天细胞增殖能力无明显差异(P>0.05)。结论两种消化试剂作用对人脂肪干细胞生物学特性的影响无显著性差异,TrypLE Express可完全代替Trypsin用于脂肪干细胞体外传代培养。

关键词：脂肪干细胞类胰蛋白酶胰蛋白酶细胞培养

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重组Ⅰ型胶原蛋白水凝胶促进光老化损伤修复的研究

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中华医学美学美容杂志 2024年第2期30卷 163-172页

作者：黄长瑾雷桓唐晓军中国医学科学院、北京协和医学院、整形外科医院颅颌面外科北京100144 西北大学化工学院、陕西省可降解生物医学材料重点实验室、陕西省生物材料与发酵工程技术研究中心、西北大学生物医药研究院西安710069

目的探讨构建自交联重组胶原蛋白水凝胶的可行性及其对紫外线诱导的光老化模型修复作用。方法2023年3—12月,于西北大学陕西省可降解生物医学材料重点实验室,使用不同浓度的重组胶原蛋白通过自交联制备重组胶原蛋白水凝胶,表征了水凝胶... 详细信息

目的探讨构建自交联重组胶原蛋白水凝胶的可行性及其对紫外线诱导的光老化模型修复作用。方法2023年3—12月,于西北大学陕西省可降解生物医学材料重点实验室,使用不同浓度的重组胶原蛋白通过自交联制备重组胶原蛋白水凝胶,表征了水凝胶材料的物理机械性能,用MTT法、溶血试验检测水凝胶生物相容性;建立人皮肤成纤维细胞光老化模型,通过RT-qPCR检测炎症因子及ECM生成、降解相关基因表达量探究水凝胶分子水平改善光老化效果。建立紫外照射小鼠光老化模型,通过大体观察以评估水凝胶改善光老化效果,通过HE染色观察水凝胶的组织兼容性和降解性,通过RT-qPCR及免疫荧光染色探讨水凝胶作用机制。结果4 mg/ml、20 mg/ml和40 mg/ml的GEL-Ⅰ水凝胶均表现出良好的物理机械性能。生物相容性研究显示不同浓度的水凝胶细胞存活率>100%,具有促细胞增殖作用,且与重组Ⅰ型胶原蛋白的浓度呈正相关;3组水凝胶溶血率均<5%。qPCR显示HSF光老化模型中,与模型组相比,3个浓度的水凝胶组细胞中Bcl-2和TGF-β1显著升高(P<0.05),Caspase-3和Caspase-9显著下调(P<0.05),细胞凋亡程度显著降低。MMP-9基因水平下调(P<0.05),Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和Vimentin基因显著上调(P<0.05)。光老化小鼠模型中,与模型组相比,水凝胶组的小鼠皮肤形成的皱纹更少。HE染色显示胶原蛋白纤维表达量丰富且紧密、角质层更加光滑;与模型组相比,GEL-Ⅰ能更好地降低活性氧含量,提高SOD活性,降低MDA表达(P<0.05),且呈浓度依赖性趋势,40 mg/ml组与对照组相比活性氧、SOD水平差异有统计学意义(P<0.05);天狼猩红染色显示水凝胶组组织中胶原蛋白含量显著增加(P<0.05),40 mg/ml组与对照组相比胶原含量显著增加(P<0.05);免疫荧光染色显示肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、基质金属蛋白酶-9含量呈显著下降(P<0.05),且呈浓度依赖性。结论重组Ⅰ型胶原水凝胶可改善氧化应激和炎症微环境,降低皮肤组织活性氧,下调促HSF凋亡细胞因子和基质金属肽酶9,促进皮肤光老化细胞的功能恢复,提升细胞外基质成分表达,可有效改善光损伤皮肤。

关键词：光皮肤衰老皮肤光老化修复重组Ⅰ型胶原氧化应激细胞外基质

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乙状窦后骨桥植入在耳后皮肤扩张法耳廓再造术后患者中的临床应用

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2023年第10期58卷 980-985页

作者：王丹妮王冰清任冉陈沛维刘宇洁章庆国赵守琴首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科、北京市耳鼻咽喉科研究所、教育部耳鼻咽喉头颈科学重点实验室(首都医科大学) 北京100730 中国医学科学院、北京协和医学院、整形外科医院耳再造二中心北京100144

目的探讨主动选择乙状窦后骨桥植入在先天性外中耳畸形患者皮肤扩张法耳廓再造术后的安全性和可靠性。方法回顾性分析2019年9月至2023年1月在首都医科大学附属北京同仁医院行骨桥植入的43例(43耳)先天性外中耳畸形外耳道骨性闭锁或狭窄... 详细信息

目的探讨主动选择乙状窦后骨桥植入在先天性外中耳畸形患者皮肤扩张法耳廓再造术后的安全性和可靠性。方法回顾性分析2019年9月至2023年1月在首都医科大学附属北京同仁医院行骨桥植入的43例(43耳)先天性外中耳畸形外耳道骨性闭锁或狭窄患者的临床资料。其中男性30例,女性13例;接受骨桥植入术时年龄9~36岁,中位数年龄10岁。所有患者均采用耳后皮瓣扩张法耳廓再造手术,其中扩张单皮瓣法36例,扩张双皮瓣法7例。于第三期术中或三期耳廓再造术后行乙状窦后骨桥植入手术。通过比较骨桥植入前后患者纯音听阈和言语识别率的变化,评估其听力改善效果。术后定期随访观察听力效果及并发症发生情况。应用SPSS 14.0软件进行数据统计分析。结果43例患者术后均一期愈合。术后平均骨导听阈为(8.2±6.6)dBHL,与术前[(8.1±5.7)dBHL]相比差异无统计学意义(P=0.95)。术后开机助听听阈较未助听条件下听阈明显下降[(32.8±4.6)dBHL比(60.5±5.5)dBHL],差异有统计学意义(P<0.001)。骨桥助听后,患者安静环境下单音节词、双音节词及短句的言语识别率分别提高至72%、84%和98%,与非助听相比差异有统计学意义(P值均<0.001);助听后噪声环境下单音节词、双音节词及短句的言语识别率分别提高至70%、80%和92%,与非助听相比差异有统计学意义(P值均<0.001)。术后随访4~47个月(中位数24个月),患者助听效果稳定,耳廓外形较好。1例患者在术后6个月时出现植入体线圈周围血肿,经穿刺引流及加压包扎后血肿消退,无复发。结论对于耳后皮瓣扩张法耳廓再造术后的患者,主动选择乙状窦后骨桥植入,既可减少手术瘢痕,达到外形美观的效果,又能获得术后稳定的助听效果,手术安全可靠。

关键词：先天性外中耳畸形听觉植入骨导助听器外科,整形

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非编码RNA对毛囊调控作用的研究进展

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医学综述 2022年第16期28卷 3132-3139页

作者：刘瑛肖苒中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院研究中心北京100144 中国医学科学院体表组织器官再造研究重点实验室北京100144

随着二代测序技术的进步和生物信息学的发展,非编码RNA(ncRNA)已不再被认为是“转录杂音”,而是以RNA的形式在转录水平、转录后水平以及表观遗传学水平等水平调控基因表达。目前,有关ncRNA在免疫系统疾病、恶性肿瘤中的研究已较为广泛,... 详细信息

随着二代测序技术的进步和生物信息学的发展,非编码RNA(ncRNA)已不再被认为是“转录杂音”,而是以RNA的形式在转录水平、转录后水平以及表观遗传学水平等水平调控基因表达。目前,有关ncRNA在免疫系统疾病、恶性肿瘤中的研究已较为广泛,但对于其在毛囊中的作用尚不清楚。许多信号通路和分子参与毛囊的形态发生和再生,如Wnt/β联蛋白、音猬因子和骨形态发生蛋白等。非编码RNA,尤其是微RNA、长链ncRNA和环状RNA,通过调控这些信号通路,在毛囊发育、分化和毛发周期中具有重要作用。未来,应深入探索毛囊相关ncRNA的作用及调控机制。

关键词：毛囊发育非编码RNA 微RNA 长链非编码RNA 环状RNA

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骨科机器人辅助下使用新型嵌合套筒移植自体血管化腓骨治疗股骨头坏死的疗效分析

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骨科临床与研究杂志 2024年第2期9卷 78-85页

作者：童德迪王晶晶王英杰朱珊荣艳波陈山林首都医科大学附属北京积水潭医院手外科 100035 首都医科大学附属北京地坛医院骨科 100015 疑难重症及罕见病国家重点实验室中国医学科学院、北京协和医学院、北京协和医院骨科100730 中国医学科学院整形外科医院瘢痕和创面治疗中心北京100144

目的探究在骨科机器人辅助下,使用新型嵌合套筒移植自体血管化腓骨治疗股骨头坏死的疗效。方法于2022年5月至2023年12月收集首都医科大学附属北京积水潭医院手外科收治的股骨头坏死患者8例(8髋),平均年龄34.8岁(27~54岁),平均体质量指数... 详细信息

目的探究在骨科机器人辅助下,使用新型嵌合套筒移植自体血管化腓骨治疗股骨头坏死的疗效。方法于2022年5月至2023年12月收集首都医科大学附属北京积水潭医院手外科收治的股骨头坏死患者8例(8髋),平均年龄34.8岁(27~54岁),平均体质量指数(BMI)26.5(20.2~30.0)。FicatⅡ期6例(6髋),FicatⅢ期2例(2髋)。术中使用骨科机器人辅助确定植入腓骨方向和长度,辅助植入导针,并配合新型嵌合套筒制备个性化骨隧道用以植入血管化腓骨,术后定期随访髋关节X线和Harris评分。结果8例患者显露旋股外侧动静脉降支、切取血管化腓骨、股骨头髓芯减压及使用新型嵌合套筒移植血管化腓骨过程顺利。经骨科机器人工作站计算后,最终平均入点误差为1.2 mm(1.2~1.3 mm),平均靶点误差为1.9 mm(1.8~2.1 mm)。术后影像学提示腓骨远端位于股骨头负重区域中央,腓骨远端距离关节面平均7.4 mm(7.0~8.0 mm),植入腓骨血运良好。所有患者术后恢复良好。术后平均随访7.5个月,有效率100%,早期临床效果令人满意。结论骨科机器人辅助下使用新型嵌合套筒可以更加精准、稳固地植入血管化腓骨,并通过个性化的骨隧道确保腓骨血运良好,早期临床效果良好。

关键词：股骨头坏死机器人手术新型嵌合套筒吻合血管的游离腓骨移植

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丹参酮Ⅱ_(A)-丹酚酸B共载脂质体制备、表征及对人成纤维细胞生物学特性的影响

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中草药 2022年第9期53卷 2633-2641页

作者：刘锐萍詹燕珊许小琪罗玺王纠韩兵时军广东药科大学中药学院广东广州510006 汕头市科技馆广东汕头515000 广东省药物新剂型重点实验室广东广州510006 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院北京100144 广东省局部精准递药制剂工程技术研究中心广东广州510006

目的制备丹参酮Ⅱ_(A)(tanshinoneⅡ_(A),TSA)和丹酚酸B(salvianolic acid B,SAB)共载脂质体(TSA-SAB脂质体),并考察其对人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF)增殖的抑制作用。方法薄膜分散-pH梯度法制备出TSASAB脂质体,对其形态、粒径分布、ζ电位、包封率、初步稳定性、体外释药行为和透皮性能等进行表征;CCK-8法、细胞划痕法和Transwell小室法分别考察TSA-SAB脂质体对HSF细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;Western blotting法考察其对基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)和I型胶原(type I collagen,COL-I)蛋白表达水平的影响。结果TSA-SAB脂质体粒径为(189.50±1.57)nm,ζ电位为(-18.73±1.41)m V,粒子分散系数为0.246±0.030,TSA和SAB包封率分别为(87.93±0.97)%和(91.20±0.47)%,稳定性良好,表现出持续缓慢的释药行为和良好的透皮性能,且能抑制HSF细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.01),同时显著增加MMP2的合成,降低COL-I的表达(P<0.01)。结论所制备的TSA-SAB脂质体粒径分布均匀,稳定性良好,包封率高,可延缓释放速率,提高药物的透皮性,对HSF细胞的增殖、迁移和侵袭均有较好的抑制作用,同时能提高MMP2的表达,抑制COL-I的过度生成,表明TSA-SAB脂质体可能对增生性瘢痕有防治作用。

关键词：丹参酮Ⅱ_(A) 丹酚酸B 脂质体人皮肤成纤维细胞增生性瘢痕

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丹参酮ⅡA微针抑制瘢痕增生的作用及机制研究

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中药新药与临床药理 2022年第4期33卷 461-467页

作者：詹燕珊赖建辉郭思旖王纠韩兵时军广东药科大学中药学院广东广州510006 广东省药物新剂型重点实验室广东广州510006 中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院北京100144 广东省局部精准递药制剂工程技术研究中心广东广州510006

目的考察丹参酮ⅡA(TSA)微针对瘢痕增生的抑制作用及机制。方法(1)动物实验:将42只新西兰兔随机分成正常组、模型组、空白微针组、阳性药物组(2.5%积雪草总苷)以及丹参酮ⅡA微针(TSA-MN)低、中、高剂量组[(173.93±3.55)μg、(421.4... 详细信息

目的考察丹参酮ⅡA(TSA)微针对瘢痕增生的抑制作用及机制。方法(1)动物实验:将42只新西兰兔随机分成正常组、模型组、空白微针组、阳性药物组(2.5%积雪草总苷)以及丹参酮ⅡA微针(TSA-MN)低、中、高剂量组[(173.93±3.55)μg、(421.44±6.67)μg、(619.94±12.39)μg]。通过新西兰兔耳腹侧面制备创口使其增生,得到兔耳增生性瘢痕模型,连续观察28 d;模型复制成功后给药干预,每日1次,连续21 d。采用HE染色观察增生性瘢痕组织病理形态变化,并测量瘢痕增生指数(SEI)和成纤维细胞密度;采用ELISA法检测兔血清中转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素2(IL-2)和白细胞介素4(IL-4)水平。(2)细胞实验:采用体外培养人皮肤成纤维细胞,分为空白对照组、空白微针组、丹参酮ⅡA原料药组(4μg·mL^(-1))以及丹参酮ⅡA微针高、中、低剂量组(6、4、2μg·mL^(-1))。采用Western Blot法检测人皮肤成纤维细胞中TGF-β1、Smad7蛋白表达。结果与正常组比较,模型组兔血清中的TGF-β1、IL-2、IL-4水平及兔耳增生性瘢痕组织SEI值均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,丹参酮ⅡA微针中、高剂量组兔血清的IL-2、TGF-β1水平及兔耳增生性瘢痕组织SEI值、成纤维细胞密度均明显降低(P<0.05),丹参酮ⅡA微针高剂量组兔血清的IL-4水平明显降低(P<0.05)。Western Blot实验结果表明,与空白对照组比较,丹参酮ⅡA微针中、高剂量组人皮肤成纤维细胞的TGF-β1蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01),丹参酮ⅡA微针低、中、高剂量组人皮肤成纤维细胞的Smad7蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论丹参酮ⅡA微针有抑制增生性瘢痕的作用,可能与调节TGF-β1/Smad通路及其抗炎作用有关。

关键词：丹参酮ⅡA 微针增生性瘢痕 TGF-β1/Smad通路抗炎作用新西兰兔人皮肤成纤维细胞

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