检索结果-内蒙古大学图书馆

病毒学报 2018年第3期34卷 430-435页

作者：殷瀚张磊亮中国医学科学院北京协和医学院病原生物研究所卫生部病原系统生物学重点实验室

基肯孔雅病毒（The chikungunya virus,CHIKV）是近年来重新暴发的甲病毒,主要由埃及伊蚊叮咬传播,可引起基肯孔雅热。由于对该病毒的研究尚不完全,目前缺少针对性的预防和治疗方法。CHIKV具有全球暴发的可能性,是公众健康的潜在威胁。... 详细信息

基肯孔雅病毒（The chikungunya virus,CHIKV）是近年来重新暴发的甲病毒,主要由埃及伊蚊叮咬传播,可引起基肯孔雅热。由于对该病毒的研究尚不完全,目前缺少针对性的预防和治疗方法。CHIKV具有全球暴发的可能性,是公众健康的潜在威胁。近期的研究已经发现许多CHIKV的宿主因子和限制性因子,本文通过总结这些因子,为今后进一步研究CHIKV与宿主细胞的相互作用以及探索其致病机制提供思路。

关键词：基肯孔雅病毒(CHIKV) 宿主因子宿主限制性因子

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猪呼吸道上皮细胞体外分化模型的建立及其应用研究

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病毒学报 2015年第4期31卷 348-356页

作者：张少丹刘红梅刘忠李武平中国医学科学院北京协和医学院输血研究所输血传染病中心成都610052 中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所卫生部病原系统生物学重点实验室北京100176

猪是许多呼吸道病毒感染的天然宿主,其与人类在肺生理学、呼吸道形态学和呼吸道细胞类型以及受体分布都有相似之处。为了解呼吸道病毒感染机制和筛选呼吸系统疾病药物,选择以猪肺组织为原料采用无血清气液界面培养法构建一种猪呼吸道上... 详细信息

猪是许多呼吸道病毒感染的天然宿主,其与人类在肺生理学、呼吸道形态学和呼吸道细胞类型以及受体分布都有相似之处。为了解呼吸道病毒感染机制和筛选呼吸系统疾病药物,选择以猪肺组织为原料采用无血清气液界面培养法构建一种猪呼吸道上皮细胞(Porcine airway epithelial cell,PAEC)体外分化模型,然后通过扫描电子显微镜、电生理和免疫组织化学等方法鉴定该模型。采用三质粒共转染法构建重组腺相关病毒rAAV6-GFP(rAAV6-green fluorescent protein,rAAV6-GFP),通过顶端表面感染PAEC模型,探讨AAV6在PAEC模型中基因治疗领域的应用。结果显示分化成熟的PAEC模型为多层上皮结构,顶端表面含有纤毛细胞、黏液分泌细胞和基底细胞。rAAV6-GFP能通过顶端表面感染PAEC,有效地介导外源基因的长期表达。本文建立的猪呼吸道上皮细胞体外分化模型为呼吸道病原体感染和呼吸系统疾病药物筛选和基因疗法等研究奠定了良好的基础。

关键词：猪呼吸道上皮细胞气液界面培养腺相关病毒

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呼吸道上皮细胞模型的研究进展

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病毒学报 2015年第3期31卷 307-312页

作者：张少丹李武平中国医学科学院北京协和医学院输血研究所输血传染病中心成都610052 中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所卫生部病原系统生物学重点实验室北京100176

呼吸道病毒严重威胁人类的健康。呼吸道上皮细胞是机体防御呼吸道病毒和细菌等外来病原体的第一道防线,因此建立呼吸道上皮细胞体外分化模型,为研究呼吸系统疾病发病机理、筛选有效的治疗药物奠定基础。本文主要介绍人呼吸道上皮细胞原... 详细信息

呼吸道病毒严重威胁人类的健康。呼吸道上皮细胞是机体防御呼吸道病毒和细菌等外来病原体的第一道防线,因此建立呼吸道上皮细胞体外分化模型,为研究呼吸系统疾病发病机理、筛选有效的治疗药物奠定基础。本文主要介绍人呼吸道上皮细胞原代培养技术的研究进展及其在呼吸道病毒和呼吸系统疾病方面的应用。

关键词：呼吸道上皮细胞气液界面培养呼吸道病毒

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淋病奈瑟菌耐药机制研究进展

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中国科学：生命科学 2021年第4期51卷 412-420页

作者：张路路李雅梅彭俊平中国医学科学院&北京协和医学院病原生物学研究所国家卫生健康委病原系统生物学重点实验室北京100176

淋病是由淋病奈瑟菌(淋球菌)感染引起的一种性传播疾病,其流行和蔓延已成为全球公共卫生事业巨大的负担.抗菌药物治疗是目前淋病防治的主要方式,但随着抗菌药物在临床上的广泛应用,淋球菌的耐药性问题日益严重.深入探究淋球菌的耐药机制... 详细信息

淋病是由淋病奈瑟菌(淋球菌)感染引起的一种性传播疾病,其流行和蔓延已成为全球公共卫生事业巨大的负担.抗菌药物治疗是目前淋病防治的主要方式,但随着抗菌药物在临床上的广泛应用,淋球菌的耐药性问题日益严重.深入探究淋球菌的耐药机制,对完善其耐药监测体系和调整临床用药方案均有重要意义.本文在回顾近几年淋球菌耐药机制相关研究的基础上,就临床上几种常见抗菌药物耐药机制的最新研究进展进行了综述,旨在为我国淋病防治策略的制定提供依据.

关键词：淋病淋病奈瑟菌抗菌药物耐药机制

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严重急性呼吸综合征冠状病毒2单克隆抗体的制备

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中华实验和临床病毒学杂志 2020年第3期34卷 236-240页

作者：王迎迎吴超肖霞王聪慧王营王赓肖艳郭丽任丽丽王健伟北京协和医学院中国医学科学院病原生物学研究所100730 北京协和医学院中国医学科学院病原生物学研究所国家卫生健康委病原系统生物学重点实验室100730 中国医学科学院呼吸道疾病病原组研究重点实验室北京100730

目的制备针对严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的单克隆抗体,用于抗原诊断。方法收集分泌抗SARS-CoV单克隆抗体的杂交瘤细胞上清液,并用Western blot和间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测单... 详细信息

目的制备针对严重急性呼吸系统综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)的单克隆抗体,用于抗原诊断。方法收集分泌抗SARS-CoV单克隆抗体的杂交瘤细胞上清液,并用Western blot和间接酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测单克隆抗体与SARS-CoV-2 N蛋白之间的反应。通过免疫荧光,检测单克隆抗体与Vero细胞培养物中SARS-CoV-2的反应性。结果从杂交瘤细胞中获得了两种单克隆抗体,分别称为A1和A2。它们都可以与SARS-CoV-2 N蛋白发生反应,而A2也可以识别SARS-CoV N蛋白。这些单克隆抗体可用于ELISA和免疫荧光实验。结论获得了2种针对SARS-CoV-2 N蛋白的单克隆抗体,为发展SARS-CoV-2抗原检测方法提供了基础。

关键词：严重急性呼吸综合征冠状病毒2 核衣壳蛋白单克隆抗体酶联免疫吸附试验免疫荧光

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应激颗粒与病毒的相互制约

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遗传 2019年第6期41卷 494-508页

作者：黄羽胡斯奇郭斐中国医学科学院/北京协和医学院病原生物学研究所国家卫生健康委员会病原系统生物学重点实验室

哺乳动物细胞受到热休克、氧化应激、营养缺乏或者病毒感染等环境压力时,能够迅速启动细胞的压力应答机制,终止细胞内的蛋白翻译,形成应激颗粒(stress granules,SGs)。SGs作为胞浆中翻译起始复合物的聚集产物,在细胞的基因表达和稳态中... 详细信息

哺乳动物细胞受到热休克、氧化应激、营养缺乏或者病毒感染等环境压力时,能够迅速启动细胞的压力应答机制,终止细胞内的蛋白翻译,形成应激颗粒(stress granules,SGs)。SGs作为胞浆中翻译起始复合物的聚集产物,在细胞的基因表达和稳态中发挥着重要的作用,与细胞凋亡以及核功能具有密切联系。尤其是当病毒感染细胞时,SGs的形成可以使细胞内病毒蛋白翻译水平大大降低,从而抑制入侵病毒的复制。然而,病毒在长期进化过程中也衍生出了对抗细胞压力应答的相应机制,如与SGs关键组分相互作用,甚至切割等方式。本文对SGs的组成及诱发机制,特别是多种病毒诱导eIF2α磷酸化促成SGs组装的机制,以及病毒进化过程中形成的应对措施等方面进行了综述,旨在进一步阐释病毒感染与应激颗粒形成之间的相互影响和调控,为人们深入理解人体先天性免疫防御提供参考。

关键词：应激颗粒翻译阻滞病毒先天性免疫

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高效重组痘苗病毒天坛株载体系统的建立

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病毒学报 2019年第2期35卷 175-182页

作者：张迪许丰雯熊梓辰郭斐中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所国家卫生健康委员会病原系统生物学重点实验室北京100176

以痘苗病毒为载体的溶瘤病毒作为癌症治疗的新方向效果显著。同时,痘苗病毒还可以作为疫苗载体抵抗HIV、H5N1等病毒感染。因技术限制,重组痘苗病毒主要通过同源重组的方法获得,但此方法获得重组病毒的效率较低。随着CRISPR(Clustered re... 详细信息

以痘苗病毒为载体的溶瘤病毒作为癌症治疗的新方向效果显著。同时,痘苗病毒还可以作为疫苗载体抵抗HIV、H5N1等病毒感染。因技术限制,重组痘苗病毒主要通过同源重组的方法获得,但此方法获得重组病毒的效率较低。随着CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromic repeat)-Cas9技术成功应用于多种动物、组织和细胞的基因编辑中,本研究拟利用CRISPR-Cas9技术建立高效重组痘苗载体系统。本研究首先构建了三个靶向痘苗病毒天坛株TK区的gRNA-Cas9的质粒以及重组质粒pJ2R-EGFP,通过瞬时转染gRNA-Cas9或建立gRNA-Cas9稳定细胞系后,导入重组质粒pJ2R-EGFP并感染VTT,获得表达EGFP的重组病毒。此高效重组痘苗病毒载体系统的重组效率比传统的同源重组方法大大提高。因此,本研究建立的高效痘苗病毒载体重组系统,为其在疫苗载体构建、肿瘤免疫治疗等方面提供参考价值。

关键词：痘苗病毒 CRISPR-Cas9 高效重组系统溶瘤病毒疫苗载体

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CRISPR/Cas核酸检测技术的研究进展

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中国科学：生命科学 2023年第8期53卷 1101-1119页

作者：赵子渊彭俊平中国医学科学院/北京协和医学院病原生物学研究所国家卫生健康委病原系统生物学重点实验室北京100176 中国医学科学院呼吸道疾病病原组研究重点实验室北京100176

CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)技术作为强大的基因编辑及基因调控工具,在生命科学研究、生物技术产业、基因治疗等领域得到了广泛的发展与应用.近些年来,基于Cas蛋白(CRISPRassociated protein)特异性及非特异性的核酸切割活性,CRISPR技术在核酸检测领域展现了其简单快速、高效特异的特点,以及在即时检测(point-of-care testing,POCT)领域的应用潜能,可满足临床早期治疗及床旁监护所需的快速诊断需求.根据Cas酶的不同活性(顺式切割活性和反式切割活性),本文将基于Cas酶的核酸检测技术分为两大类,分别为CRISPR/Cas9系统和CRISPR/Cas12,Cas13,Cas14系统,并阐述了它们各自的工作原理.此外,本文还详细综述了CRISPR/Cas系统与多信号传感器的联合应用,总结了CRISPR/Cas核酸检测技术所存在的缺陷及面临的挑战,并对其未来的发展进行了展望.

关键词： CRISPR技术 Cas蛋白核酸检测即时检测

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MALDI-TOF MS技术在传染病诊断中的应用进展

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中国科学：生命科学 2022年第12期52卷 1858-1867页

作者：王立琴张驰李晓东彭俊平中国医学科学院&北京协和医学院病原生物学研究所国家卫生健康委病原系统生物学重点实验室北京100176 中国医学科学院呼吸道疾病病原组研究重点实验室北京100176 岛津企业管理(中国)有限公司北京100020

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作为新兴的检测手段已被广泛应用于临床微生物实验室.相比传统基于表型的检测方法,如形态学、血清学... 详细信息

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作为新兴的检测手段已被广泛应用于临床微生物实验室.相比传统基于表型的检测方法,如形态学、血清学及生化检测,MALDI-TOF MS可在短时间内对待测微生物进行物种鉴定及耐药表型分析,简化了操作流程.多项研究表明,MALDI-TOF MS在病原生物学领域具备较大的应用潜能,通过分析分子或离子的质荷比以识别或量化待测物,适用于多种类别分子的检测.依据检测靶标的不同,本文将从蛋白质与核酸两方面系统综述该技术在传染病诊断中的应用进展.

关键词： MALDI-TOF MS 菌种鉴定耐药性检测病原体检测与分型

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两亲性脂肽纳米混悬液冻干粉的制备及其表征

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过程工程学报 2021年第4期21卷 463-470页

作者：张梦秋靳惠娟巩方玲张佑红韦祎何玉先马光辉武汉工程大学环境生态与生物工程学院湖北武汉430205 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室北京100190 中国医学科学院北京协和医学院病原生物学研究所卫生部病原体系统生物学教育部重点实验室北京100190

为解决抗艾滋药物两亲性脂肽LP-98溶解度低的问题,采用高压均质技术制备LP-98纳米混悬液冻干粉,并对其进行理化性质表征及药代动力学研究。最优制备工艺为:稳定剂为SDS,浓度为0.80wt%,高压均质压力为150 MPa,高压均质次数为5次。制备得... 详细信息

为解决抗艾滋药物两亲性脂肽LP-98溶解度低的问题,采用高压均质技术制备LP-98纳米混悬液冻干粉,并对其进行理化性质表征及药代动力学研究。最优制备工艺为:稳定剂为SDS,浓度为0.80wt%,高压均质压力为150 MPa,高压均质次数为5次。制备得到的LP-98纳米混悬液冻干粉复溶后平均粒径为261.5±1.1 nm,Zeta电位为-31.5±0.2 m V。圆二色光谱仪与单周期病毒感染实验结果显示LP-98的结构与生物活性均未改变。药代动力学结果表明,LP-98纳米混悬液冻干粉生物利用度为原料药的98.1%。LP-98在水中溶解度由184μg/m L提升至1733μg/m L,与原料药相比提高了8倍,解决了注射时药物难混悬的问题。

关键词：两亲性脂肽纳米混悬液高压均质法溶解度药代动力学

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