检索结果-内蒙古大学图书馆

中华皮肤科杂志 2016年第2期49卷 140-143页

作者：李莉陈旭顾恒中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

紫外线（UV）是一种可以导致皮炎、光老化和癌变的重要的环境因子，UV诱导表皮角质形成细胞炎症因子的生成是上述疾病发生的重要分子事件。UV诱导角质形成细胞炎症涉及多种受体、细胞内信号传导相关调控分子和核转录因子的参与，主要包... 详细信息

紫外线（UV）是一种可以导致皮炎、光老化和癌变的重要的环境因子，UV诱导表皮角质形成细胞炎症因子的生成是上述疾病发生的重要分子事件。UV诱导角质形成细胞炎症涉及多种受体、细胞内信号传导相关调控分子和核转录因子的参与，主要包括表皮生长因子受体、芳香烃受体、过氧化物酶体增生物激活受体、蛋白激酶C家族、蛋白激酶B、丝裂原活化蛋白激酶家族、核转录因子κB和转录因子激活蛋白等，构成了复杂的炎症信号传导网络。

关键词：紫外线角蛋白细胞炎症信号传导蛋白激酶类

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不同剂量长波紫外线照射对HaCaT细胞增殖活力和自噬体表达瞬时影响的研究

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临床皮肤科杂志 2016年第2期45卷 83-86页

作者：苑春雨李莉陈崑陈旭鞠梅黄丹顾恒中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所、江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏南京210042

目的:观察人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞接受不同剂量长波紫外线(UVA)照射后细胞增殖活力和自噬体表达水平的变化,并初步评估增殖活力损伤程度和自噬体表达水平之间的相关性。方法:将HaCaT细胞分为6组,分别为10 J/cm^2UVA对照组、10 ... 详细信息

目的:观察人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞接受不同剂量长波紫外线(UVA)照射后细胞增殖活力和自噬体表达水平的变化,并初步评估增殖活力损伤程度和自噬体表达水平之间的相关性。方法:将HaCaT细胞分为6组,分别为10 J/cm^2UVA对照组、10 J/cm^2 UVA照射组、25 J/cm^2 UVA对照组、25 J/cm^2 UVA照射组、50 J/cm^2 UVA对照组及50 J/cm^2 UVA照射组。照射结束后即刻进行噻唑蓝(MTT)实验或单丹(磺)酰戊二胺(MDC)染色,全波长酶标仪下读取各孔A值,倒置荧光显微镜下随机选取视野,计数每视野下自噬体表达阴性细胞和阳性细胞数目。结果:经不同剂量UVA照射后,HaCaT细胞的增殖活力(A值)下降,呈剂量相关性。其中10、25及50 J/cm^2 UVA照射组(A值分别为1.179±0.007、0.791±0.015、0.522±0.046)两两之间以及与各自对照组(1.370±0.007、1.254±0.012、1.177±0.009)间差异均有统计学意义(P均<0.01);10、25及50 J/cm^2 UVA照射后,HaCa T细胞MDC染色结果示自噬体表达阳性的细胞比率增加,且呈剂量相关性。50 J/cm^2 UVA照射组自噬体表达阳性率较其对照组显著上升(χ~2=11,P<0.01)。结论:10~50 J/cm^2 UVA照射后,HaCaT细胞瞬时增殖活力降低及自噬体表达增加,且呈剂量依赖性。

关键词：角质形成细胞自噬体长波紫外线增殖活力

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T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3对黑素瘤TRP-2180-188肽疫苗刺激小鼠淋巴细胞的影响

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中华皮肤科杂志 2016年第2期49卷 82-87页

作者：吕雅琳周晓伟胡彬吴琼曾学思刘毅孙建方中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所病理科南京210042 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室

目的探讨体外T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（TIM-3）对与小鼠黑素瘤B16F10细胞共培养的酪氨酸相关蛋白-2（TRP-2180-188）抗原肽刺激小鼠淋巴细胞的影响。方法构建TIM-3重组质粒pFUSE—TIM-3-mlgG2Aae1—Fc2，分别转染重组质粒及空质粒p... 详细信息

目的探讨体外T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3（TIM-3）对与小鼠黑素瘤B16F10细胞共培养的酪氨酸相关蛋白-2（TRP-2180-188）抗原肽刺激小鼠淋巴细胞的影响。方法构建TIM-3重组质粒pFUSE—TIM-3-mlgG2Aae1—Fc2，分别转染重组质粒及空质粒pFUSE—mIgG2Aae1—Fc2至人上皮293T细胞，继续培养48h，制备含TIM-3、免疫球蛋白（Ig—tail）的上清液。TRP-2180-188肽疫苗免疫C57BL／6小鼠，分离小鼠脾淋巴细胞，用TRP-2180-188抗原肽和白细胞介素（IL）-2刺激培养5d，以未刺激细胞作为对照组。构建B16F10细胞与上述TRP-2180-188抗原肽刺激淋巴细胞共培养体系，分为空白对照组（加293T细胞培养48h上清液）、TIM-3组（加含TIM-3上清液）、阴性对照组（加含Ig-tail上清液）。CCK-8法检测细胞增殖情况，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测共培养体系中干扰素（IFN）-γ和肿瘤坏死因子（TNF）-α浓度，流式细胞仪检测共培养体系中CD8^＋淋巴细胞。结果酶切和测序鉴定证实目的基因正确插入真核表达载体中，检测到转染重组质粒pFUSE—TIM-3-mIgG2Aae1-Fc2的293T细胞上清液中有TIM-3表达，转染空质粒pFUSE-mIgG2Aae1-Fc2的293T细胞上清液中有Ig-tail的表达。CCK-8法检测显示24h时空白对照组、阴性对照组、TIM-3组淋巴细胞增殖活力分别为（100．00±10．42）％、（108．70±9．90）％、（78．06±6．37）％，48h时分别为（100．00±6．24）％、（168．00±2．98）％、（42．93±5．93）％；24h、48h时TIM-3组淋巴细胞活力低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。TIM-3组48h相比24h淋巴细胞增殖倍数低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。24h时，空白对照组、阴性对照组、TIM-3组IFN-γ浓度分别为（216．44±7．85）、（223．67±7．79）、（192．96±5．05）ng／L，48h时分别为（230．06±4．23）、（167．24±3．33）、（54．95±0．57）ng／L。24h、48h时，TIM-3组IFN-γ浓度低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。24h、48h时，TIM-3组TNF-α浓度低于空白对照组和阴性对照组（均P〈0．05）。24h时空白对照组、阴性对照组、TIM-3组CD8^＋淋巴细胞中位数分别为0．421％、2．22％、3．30％，48h时分别为0．577％、0．691％、4．06％。24h、48h时TIM-3组CD8^＋T淋巴细胞中位数高于空白对照组和阴性对对照组。结论TIM-3在体外能够抑制B16F10细胞与TRP-2180-188抗原肽刺激淋巴细胞共培养体系中淋巴细胞增殖和分泌IFN-γ、TNF-α，提高CD8＆^＋T淋巴细胞。

关键词：黑色素瘤实验性疫苗亚单位 T淋巴细胞细胞毒性干扰素γ T细胞免疫球蛋白粘蛋白-3

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Gateway技术构建人RhoD慢病毒表达载体及转染人黑素瘤A375细胞株

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中国皮肤性病学杂志 2016年第10期30卷 998-1002页

作者：温斯健倪娜娜周晓伟吴琼王小坡宋昊张韡孙建方中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所病理科江苏南京210042 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病性病分子生物学重点实验室江苏南京210042

目的构建人RhoD基因的慢病毒载体并进行慢病毒包装和鉴定，转染人黑素瘤细胞A375，使其过表达RhoD蛋白，为后续研究RhoD在黑素瘤中的作用奠定基础。方法Gateway技术构建携带增强型绿色荧光蛋白EGFP的RhoD慢病毒载体，经PCR及基因测序鉴... 详细信息

目的构建人RhoD基因的慢病毒载体并进行慢病毒包装和鉴定，转染人黑素瘤细胞A375，使其过表达RhoD蛋白，为后续研究RhoD在黑素瘤中的作用奠定基础。方法Gateway技术构建携带增强型绿色荧光蛋白EGFP的RhoD慢病毒载体，经PCR及基因测序鉴定后，与辅助质粒pLV／helper-SL3，pLV／helper—SIA及pLV／helper—SL5混合采用脂质体法制备DNA-Lipofectamine2000复合物，并共同转染293FT细胞进行慢病毒包装，产生相应慢病毒颗粒，通过定量PCR方法测定病毒滴度。包装好的慢病毒转染人黑素瘤A375细胞，荧光显微镜下观察荧光表达情况，流式细胞仪检测转染效率；实验分为A375（未处理对照组）、A375-EGFP（不含目的基因的空病毒对照组）和A375-RhoD（含RhoD基因的病毒组）三组，采用实时荧光定量PCR（QPCR）及免疫印记法（western blotting，WB）验证耽扣在A375-RhoD组细胞中的过表达。结果通过PCR、基因测序证实，慢病毒表达载体pLV[Exp]-EGFP／Neo—CMV〉hRhoD构建成功。与辅助质粒共转染293FT细胞包装出具高效感染力的慢病毒，经测定病毒滴度为（5．13±2）×10^8TU／mL。转染A375细胞后可见明显的绿色荧光表达，流式检测转染效率大于80％;A375-RhoD组RhoDmRNA及蛋白水平均较A375-EGFP组和A375组细胞中明显增高。结论成功构建RhoD慢病毒表达载体，包装出具高效感染力的慢病毒颗粒并成功转染人黑素瘤A375细胞，为进一步研究RhoD在黑素瘤中的作用提供实验基础。

关键词： RhoD基因慢病毒载体 Gateway技术过表达 A375

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Nicastrin基因突变的反常性痤疮患者皮损Notch—HES信号通路的表达

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中华皮肤科杂志 2016年第6期49卷 415-419页

作者：李诚让何艳艳张晓峰徐浩翔王宝玺福建医科大学附属协和医院皮肤科福州350001 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室皮肤科中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院皮肤科

目的检测nicastrin基因突变的反常性痤疮患者皮损标本中，nicastrin及其下游Notch—HES信号通路蛋白的表达。方法免疫组化法检测nicastrin及Notch—HES信号通路分子在4例nicastrin基因突变的患者皮损石蜡标本的表达，并用6例正常皮肤组... 详细信息

目的检测nicastrin基因突变的反常性痤疮患者皮损标本中，nicastrin及其下游Notch—HES信号通路蛋白的表达。方法免疫组化法检测nicastrin及Notch—HES信号通路分子在4例nicastrin基因突变的患者皮损石蜡标本的表达，并用6例正常皮肤组织作对照，同时采用Spearman相关分析，分析nicastrin与Notch—HES信号通路分子表达的相关性。结果Nicastrin蛋白广泛表达于表皮全层、皮肤附属器，如，毛囊皮脂腺单位、大汗腺及小汗腺。在携带nicastrin基因突变的患者皮损中，表皮及毛囊漏斗部nicastrin表达较正常对照明显减少；同时，Notch—HES信号通路分子表达亦较正常对照明显减少。Nicastrin蛋白与Notchl、Notch3以及HES一1的表达呈明显正相关（r分别为0．831、0．748、0．807，P值分别〈0．01，〈0．05、〈0．01），而与Notch2、HES一5的表达之间的相关性，差异无统计学意义（r分别为0．597和0．591，均P〉0．05）。结论Nicastrin基因突变患者的皮损中nicastrin低表达，且与多种Notch—HES信号通路分子表达呈正相关，提示nicastrin表达减少可能通过影响下游Notch—HES信号通路的表达参与反常性痤疮的发病。

关键词：基因突变信号传导反常性痤疮 Nicastrin基因 Notch—HES信号通路

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西罗莫司和饥饿处理对人A431细胞自噬水平的影响

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中华皮肤科杂志 2016年第11期49卷 776-780页

作者：张云杨晓雯徐倩倩施辛陈旭李莉徐松黄丹鞠梅陈崑顾恒苏州大学附属第二医院皮肤科 215004 中国医学科学院、北京协和医学院、皮肤病研究所、江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室、理疗科

目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫... 详细信息

目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、平衡盐溶液（EBSS）组。作用4 h后，Western印迹检测A431细胞和HeLa细胞自噬微管相关蛋白轻链3A/3B（LC3A/B）、重组人γ-氨基丁酸受体相关蛋白（GABARAP）的表达水平。吖啶橙染色分析细胞自噬体表达水平。结果 Western印迹检测显示，对照组与DMSO组A431细胞中LC3A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值差异无统计学意义（P〉0.05）；20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、EBSS组LC3 A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值较对照组均明显升高，差异均有统计学意义（P〈0.05）。HeLa细胞Western印迹检测结果与A431细胞类似。双变量相关性分析显示，HeLa细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达呈正相关（r=0.869，95%CI：0.807~0.999，P=0.051），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.742，95%CI：-0.982~0.406，P=0.042）；A431细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达亦呈正相关（r=0.837，95%CI：-0.173~0.989，P=0.037），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.684，95%CI：-0.977~0.500，P=0.047）。吖啶橙染色显示，A431细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（23.750%±0.260%）与EBSS组（32.450%±0.488%）同样高于对照组（15.987%±0.242%，均P 〈0.05）；HeLa细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（33.307%±0.715%）和EBSS组（66.097%±1.141%）高于对照组（14.117%±0.295%，均P〈0.05）。结论经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿能够上调A431细胞的自噬水平，GABARAP蛋白可能与LC3A/B高度相关。

关键词：自噬细胞系肿瘤 HeLa细胞西罗莫司饥饿 A431细胞 GABARAP

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β受体阻滞剂治疗婴儿血管瘤的研究进展

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中国皮肤性病学杂志 2016年第11期30卷 1172-1174页

作者：苑春雨陈崑北京协和医学院中国医学科学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏南京210042

婴儿血管瘤是婴儿期最常见的良性肿瘤,临床多见。尽管大多数具有自限性的良性病程,但部分仍有导致严重功能障碍及毁容的风险,需要积极治疗。治疗方法多种多样,传统的治疗方法如糖皮质激素、干扰素、长春新碱、手术、激光等副作用大,并... 详细信息

婴儿血管瘤是婴儿期最常见的良性肿瘤,临床多见。尽管大多数具有自限性的良性病程,但部分仍有导致严重功能障碍及毁容的风险,需要积极治疗。治疗方法多种多样,传统的治疗方法如糖皮质激素、干扰素、长春新碱、手术、激光等副作用大,并非对所有血管瘤都有效。目前β受体阻滞剂以其安全高效的优点成为一线首选药物。

关键词：婴儿血管瘤分类流行病学自然病程 β受体阻滞剂

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梅毒免疫和梅毒螺旋体的研究进展

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国际皮肤性病学杂志 2016年第6期42卷 490-493页

作者：刘宏业韩燕尹跃平中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所参比实验室南京210042

梅毒螺旋体有着独特的基因和蛋白结构,对其基因分型有利于梅毒分子流行病学的研究.梅毒螺旋体缺乏脂多糖与外膜蛋白,但可表达多种脂蛋白,这些脂蛋白同梅毒螺旋体的组织黏附及播散有关,同时可诱导机体发生免疫应答.机体对于梅毒螺旋体的... 详细信息

梅毒螺旋体有着独特的基因和蛋白结构,对其基因分型有利于梅毒分子流行病学的研究.梅毒螺旋体缺乏脂多糖与外膜蛋白,但可表达多种脂蛋白,这些脂蛋白同梅毒螺旋体的组织黏附及播散有关,同时可诱导机体发生免疫应答.机体对于梅毒螺旋体的免疫应答过程十分复杂,固有免疫、体液免疫及细胞免疫均在梅毒螺旋体的感染过程中参与了应答过程.Th1型细胞免疫在梅毒的发生发展过程中起重要作用,梅毒患者在局部及系统免疫方面都存在细胞免疫的异常.

关键词：梅毒苍白密螺旋体免疫抗原 Th1细胞

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广西性病门诊患者泌尿生殖道沙眼衣原体株高分辨多位点测序分型研究

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中华皮肤科杂志 2016年第10期49卷 692-696页

作者：韩燕尹跃平朱邦勇刘宏业钟铭英中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所性病参比实验室中国疾病预防控制中心性病控制中心南京210042 广西壮族自治区皮肤病防治研究所中心实验室

目的：了解广西性病门诊患者中泌尿生殖道沙眼衣原体型别分布，同时对随访患者沙眼衣原体的感染情况进行分析。方法在广西壮族自治区皮肤病防治所收集泌尿生殖道沙眼衣原体感染患者，采集男性尿道和女性宫颈拭子标本，并对初筛阳性患者... 详细信息

目的：了解广西性病门诊患者中泌尿生殖道沙眼衣原体型别分布，同时对随访患者沙眼衣原体的感染情况进行分析。方法在广西壮族自治区皮肤病防治所收集泌尿生殖道沙眼衣原体感染患者，采集男性尿道和女性宫颈拭子标本，并对初筛阳性患者在治疗完成后进行随访和标本采集，同时采集患者基本信息和临床信息。应用QIAxtractor全自动核酸纯化仪提取DNA，巢式PCR扩增沙眼衣原体主要外膜蛋白基因（ompA）和MLST（高分辨多位点测序分型）所需的CT046（hctB）、CT058、CT144、CT172和CT682（pbpB）5个基因。对PCR产物进行序列测定，经序列比对和MLST型别分析获得菌株的ompA基因分型和型别，并用BioNumerics7软件对广西和意大利沙眼衣原体株绘制最小生成树。结果在44份来自初诊患者和6份来自随访患者的沙眼衣原体阳性样本中，42份成功进行沙眼衣原体ompA和MLST分型。共发现7种ompA基因型和15种hr-MLST分型的ST型别，其中有3种ST型别为首次报道。广西地区沙眼衣原体基因型别较意大利地区具有特征性。6例随访患者经分型方法鉴定3例为再次的新发感染，3例因未能成功进行基因分型而未能确诊。结论广西性病门诊患者感染的沙眼衣原体具有独特的型别，在随访中出现泌尿生殖道沙眼衣原体再感染病例。

关键词：沙眼衣原体多位点测序分型随访研究聚类分析

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CD69＋T细胞在银屑病皮损中的表达及其临床意义

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国际皮肤性病学杂志 2016年第3期42卷 137-140页

作者：郝志敏向志栾超杨永红胡煜陈浩陈敏王宝玺中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室皮肤科南京210042 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院中心实验室南京210042 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院病理科南京210042

目的探讨银屑病患者皮肤CD69＋T细胞的表达及其与疾病活动性的关系.方法免疫组化检测31例银屑病患者皮损和非皮损中CD69＋T细胞在皮肤中的表达,与6例健康人进行对照.结果 CD69＋T细胞主要分布于皮肤真皮.31例银屑病患者皮损和非皮损... 详细信息

目的探讨银屑病患者皮肤CD69＋T细胞的表达及其与疾病活动性的关系.方法免疫组化检测31例银屑病患者皮损和非皮损中CD69＋T细胞在皮肤中的表达,与6例健康人进行对照.结果 CD69＋T细胞主要分布于皮肤真皮.31例银屑病患者皮损和非皮损的真皮中,CD69＋T细胞分别为（35.16±12.67）％和（8.70±3.29）％,皮损明显高于非皮损（t=12.5,P＜0.01）.6例健康人对照皮肤中CD69＋T细胞（8.71±2.55）％,明显低于银屑病皮损（t=5.03,P＜ 0.01）,与非皮损相比,差异无统计学意义（t=0.05,P＞ 0.05）.20例急性期与1 1例稳定期银屑病患者皮损中CD69＋T细胞分别为（40.89±10.31）％和（24.46±9.49）％,急性期明显高于稳定期（t=0.36,P＜ 0.01）.结论银屑病患者皮损中CD69＋T细胞表达增高,与疾病的活动性有关.

关键词：银屑病 CD69阳性T淋巴细胞肿瘤坏死因子α 免疫组织化学

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