检索结果-内蒙古大学图书馆

中华皮肤科杂志 2016年第11期49卷 776-780页

作者：张云杨晓雯徐倩倩施辛陈旭李莉徐松黄丹鞠梅陈崑顾恒苏州大学附属第二医院皮肤科 215004 中国医学科学院、北京协和医学院、皮肤病研究所、江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室、理疗科

目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫... 详细信息

目的：探讨经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿处理对人皮肤鳞状细胞癌细胞系A431自噬水平的影响。方法分别将A431细胞和人宫颈癌细胞系HeLa分为对照组（单纯DMEM培养基处理）、二甲基亚砜（DMSO）组、20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、平衡盐溶液（EBSS）组。作用4 h后，Western印迹检测A431细胞和HeLa细胞自噬微管相关蛋白轻链3A/3B（LC3A/B）、重组人γ-氨基丁酸受体相关蛋白（GABARAP）的表达水平。吖啶橙染色分析细胞自噬体表达水平。结果 Western印迹检测显示，对照组与DMSO组A431细胞中LC3A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值差异无统计学意义（P〉0.05）；20 nmol/L西罗莫司组、80 nmol/L西罗莫司组、EBSS组LC3 A/B-Ⅱ与LC3 A/B-Ⅰ比值较对照组均明显升高，差异均有统计学意义（P〈0.05）。HeLa细胞Western印迹检测结果与A431细胞类似。双变量相关性分析显示，HeLa细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达呈正相关（r=0.869，95%CI：0.807~0.999，P=0.051），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.742，95%CI：-0.982~0.406，P=0.042）；A431细胞中LC3A/B-Ⅰ与GABARAP表达亦呈正相关（r=0.837，95%CI：-0.173~0.989，P=0.037），LC3A/B-Ⅱ与GABARAP表达呈负相关（r=-0.684，95%CI：-0.977~0.500，P=0.047）。吖啶橙染色显示，A431细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（23.750%±0.260%）与EBSS组（32.450%±0.488%）同样高于对照组（15.987%±0.242%，均P 〈0.05）；HeLa细胞自噬阳性细胞比例在西罗莫司组（33.307%±0.715%）和EBSS组（66.097%±1.141%）高于对照组（14.117%±0.295%，均P〈0.05）。结论经典自噬诱导剂西罗莫司和饥饿能够上调A431细胞的自噬水平，GABARAP蛋白可能与LC3A/B高度相关。

关键词：自噬细胞系肿瘤 HeLa细胞西罗莫司饥饿 A431细胞 GABARAP

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miR-21、miR-494对黑素瘤A375细胞凋亡和细胞周期的影响

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中华皮肤科杂志 2013年第10期46卷 719-722页

作者：王焱王震英孙建方陈浩周武庆方方张国成中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 山东大学附属省立医院皮肤科

目的探讨miR-21抑制物和miR-494模拟物转染A375细胞的最佳有效转染浓度及其对黑素瘤A375细胞增殖的影响。方法取6个浓度梯度的miR-21抑制物和miR-494模拟物转染A375细胞，实时荧光定量PCR法检测相应的miRNA。继而用Cy5标记的miRNA模拟... 详细信息

目的探讨miR-21抑制物和miR-494模拟物转染A375细胞的最佳有效转染浓度及其对黑素瘤A375细胞增殖的影响。方法取6个浓度梯度的miR-21抑制物和miR-494模拟物转染A375细胞，实时荧光定量PCR法检测相应的miRNA。继而用Cy5标记的miRNA模拟物阴性对照转染A375细胞，荧光显微镜下观察转染效率。用流式细胞仪检测转染后细胞增殖的变化。结果从A375细胞中成功提出miRNA。定量PCR结果显示，当转染物miR-21抑制物浓度为120nmol／L时，转染细胞内有miR-21模拟物最大程度的下调表达，2^-△△Cr值为0．80（0．65～0．92），低于对照组；当miR-494模拟物浓度为250nmol／L时，转染细胞内有miR-494模拟物最大程度的上调，2^-△△Cr值为126．82（111．52～144．22），明显高于对照组；miR-21抑制物转染组与miR-494模拟物转染组G。期细胞比率分别为（61．61±3．25）％、（61．05±3．17）％，高于对照组（P〈0．05）；增殖指数分别为（38．39±3．25）％、（38．95±3．17）％，低于对照组（P〈0．05）；细胞凋亡率分别为（27．74±1．39）％、（34．30±2．35）％，高于对照组（P〈0．01），细胞转染效率达90％以上。结论miR-21抑制物和miR-494模拟物促使肿瘤细胞的G，期阻滞和促进凋亡作用，miR-21可增强A375细胞增殖，有原癌基因样功能；miR-494可抑制A375细胞增殖，有抑癌基因样作用。

关键词：黑色素瘤 miRNA-21 miRNA-494 转染细胞周期细胞凋亡

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番茄红素对人皮肤鳞状细胞癌COLO16细胞关键信号受体调控研究

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中华皮肤科杂志 2018年第6期51卷 421-424页

作者：毕素云李莉徐松张孟丽顾恒周之海陈旭天津医科大学总医院皮肤性病科 300070 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室

目的探讨番茄红素对人皮肤鳞状细胞癌细胞系COL016细胞关键信号受体调控的影响。方法COL016细胞分为0（对照组）、5、10、15、20、25μmol／L番茄红素6个处理组，处理24h后进行LDH实验确定对细胞活力的影响。根据LDH分泌量确定细胞死亡... 详细信息

目的探讨番茄红素对人皮肤鳞状细胞癌细胞系COL016细胞关键信号受体调控的影响。方法COL016细胞分为0（对照组）、5、10、15、20、25μmol／L番茄红素6个处理组，处理24h后进行LDH实验确定对细胞活力的影响。根据LDH分泌量确定细胞死亡水平，选取番茄红素对细胞作用的安全浓度信号受体表达量实验，蛋白免疫印迹检测关键信号受体蛋白表达水平。使用SPSS软件进行单因素方差分析，采用Tukey Multiple Comparison和Brown-Forsythe（B）检验方法。结果5、10、15、20、25μmol／L番茄红素处理COL016细胞24h后，25μmol／L组细胞死亡率和对照组比差异有统计学意义（F=13．116，P〈0．05），选取5、10、20μmol／L三个浓度番茄红素处理COL016细胞24h后，表皮生长因子受体蛋白磷酸化水平降低（P〈0．05），糖皮质激素受体蛋白表达水平升高（P〈0．05），而维A酸受体、雄激素受体、孕激素受体蛋白表达水平变化不显著。5、10、20μmol／L番茄红素处理HaCaT、HEK细胞24h后，HaCaT细胞和人原代角质形成细胞中表皮生长因子受体蛋白磷酸化水平和糖皮质激素受体蛋白表达量差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论番茄红素可降低COL016细胞活力，抑制表皮生长因子受体蛋白活化，上调糖皮质激素受体表达，这种效应可能有肿瘤细胞特异性。

关键词：癌,鳞状细胞细胞系肿瘤受体,表皮生长因子受体,糖皮质激素 COL016细胞番茄红素

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人类念珠菌感染的基因易感性

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中国真菌学杂志 2017年第2期12卷 120-123页

作者：阚思玥李筱芳刘维达中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京210042 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

念珠菌是引起严重黏膜感染和系统性感染的重要真菌,但不是所有个体都有感染念珠菌的风险。随着人类基因组计划的完成以及分子遗传技术的发展,人们开始从基因角度研究真菌感染的易感性。研究发现一些原发性免疫缺陷如STAT1、STAT3或CARD... 详细信息

念珠菌是引起严重黏膜感染和系统性感染的重要真菌,但不是所有个体都有感染念珠菌的风险。随着人类基因组计划的完成以及分子遗传技术的发展,人们开始从基因角度研究真菌感染的易感性。研究发现一些原发性免疫缺陷如STAT1、STAT3或CARD9缺陷与严重的念珠菌感染有关;此外,部分与免疫相关的基因多态性与念珠菌感染(如复发性外阴阴道念珠菌病和念珠菌血症等疾病)的易感性相关。念珠菌易感基因的发现可以更好地了解疾病的发病机制,同时为临床诊治念珠菌感染提供新的检测指标和治疗靶标。

关键词：念珠菌感染基因易感性原发性免疫缺陷病基因多态性

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甲真菌病外用药的治疗现状及研究进展

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中国真菌学杂志 2018年第3期13卷 184-187页

作者：宋娜娜周晓伟李筱芳刘维达中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京210042 江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

甲真菌病在人群中广泛存在,初次治愈率低,复发率高,再感染率高。常用治疗方法主要包括局部外用药治疗和系统口服药治疗。口服药因不良反应和药物间的相互作用使其临床应用受限,故近年来治疗研究热点主要集中在外用药。该文综述了外用治... 详细信息

甲真菌病在人群中广泛存在,初次治愈率低,复发率高,再感染率高。常用治疗方法主要包括局部外用药治疗和系统口服药治疗。口服药因不良反应和药物间的相互作用使其临床应用受限,故近年来治疗研究热点主要集中在外用药。该文综述了外用治疗甲真菌病的传统药物(环吡酮胺甲涂剂、阿莫罗芬甲涂剂)、新型药物(艾氟康唑溶液、tavaborole溶液)以及正在研发中的药物(特比萘芬脂质体、卢立康唑溶液、ME1111、他扎罗汀凝胶)的作用机制、体内外疗效等最新研究进展。

关键词：甲真菌病局部外用药作用机制研究进展

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依维莫司与顺铂协同损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞机制的初步研究

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中华皮肤科杂志 2017年第10期50卷 738-741页

作者：丁敏徐松李莉毕素云周之海李岷陈旭顾恒天津医科大学总医院皮肤性病科 300070 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室

目的探讨依维莫司与顺铂联合损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的分子机制。方法依维莫司处理细胞后的信号通路实验分为对照组、50、100、200 nmol/L依维莫司处理组4组。依维莫司与顺铂联合处理的机制实验分为对照组、50 nmol/L依维莫司... 详细信息

目的探讨依维莫司与顺铂联合损伤人皮肤鳞状细胞癌COLO-16细胞的分子机制。方法依维莫司处理细胞后的信号通路实验分为对照组、50、100、200 nmol/L依维莫司处理组4组。依维莫司与顺铂联合处理的机制实验分为对照组、50 nmol/L依维莫司、25 μmol/L顺铂、50 nmol/L依维莫司＋ 25 μmol/L顺铂处理细胞组4组。通过Western印迹进行mTOR、Akt、DNA损伤相关信号以及Chk通路分析。结果 50、100、200 nmol/L依维莫司处理COLO-16细胞12、24 h后，mTOR 2448位点和2481位点的磷酸化水平降低，Rictor 1135位点磷酸化水平也降低。然而，下游信号ULK1蛋白的ser757位点的磷酸化水平、P70 S6激酶的thr389位点的磷酸化水平以及PKCα的thr638/641位点磷酸化水平的变化并不显著。依维莫司处理对Akt的总蛋白水平和磷酸化水平无明显影响。顺铂处理COLO-16细胞12、24 h后，Rictor的thr1135位点磷酸化水平和Chk1的ser345位点磷酸化水平明显升高，但依维莫司单独处理无类似效应。当依维莫司与顺铂联合处理后12和24 h，相对于顺铂单独处理的细胞，上调的Chk1和Rictor磷酸化水平受到明显抑制。结论 COLO-16细胞mTOR信号对依维莫司处理敏感，但其下游信号并非同步产生级联反应。依维莫司可能通过抑制检测点激酶1的激活增强顺铂诱导COLO-16细胞死亡，但无加重顺铂所导致的DNA损伤。

关键词：顺铂细胞凋亡 COLO-16细胞依维莫司检测点激酶1

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烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系产生肿瘤坏死因子α、活化信号分子p38丝裂原活化蛋白激酶的影响

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中华皮肤科杂志 2018年第9期51卷 653-657页

作者：童建波杜蕾蕾曾荣王丽玮刘宇甄段志敏陈青李岷中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤性病分子生物学重点实验室南京210042 江苏省血液中心南京210042

目的探讨烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子仪（TNF-α）和细胞内信号分子β38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激活的影响。方法10^6、10^7CFU／ml烟曲霉悬液（10^6和10^7CFU／ml烟曲霉组）、100mg／L阳性刺激物... 详细信息

目的探讨烟曲霉对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞分泌肿瘤坏死因子仪（TNF-α）和细胞内信号分子β38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激活的影响。方法10^6、10^7CFU／ml烟曲霉悬液（10^6和10^7CFU／ml烟曲霉组）、100mg／L阳性刺激物β-葡聚糖（β-葡聚糖组）及培养基（空白对照组）分别与2×10^5／mlTHP-1细胞共孵育1、3、6h，实时荧光定量PCR分析各组THP-1细胞TNF-α mRNA表达水平。10^7CFU／ml烟曲霉悬液（烟曲霉组）、β-葡聚糖（β-葡聚糖组）及培养基分别作用THP-1细胞24h，酶联免疫吸附法检测各组培养上清液中TNF-α含量。Western印迹法检测10^7CFU／ml烟曲霉体外作用THP-1细胞后15、30、60minβ38MAPK和磷酸化β38MAPK水平。采用20μmol／LSB203580预先与THP-1细胞共培养2h后，再用10^7CFU／ml烟曲霉、β-葡聚糖或培养基作用6h，检测各组THP-1细胞TNF-α mRNA表达水平变化。结果10^6、10^7CFU／ml烟曲霉组、100mg／L β-葡聚糖组及空白对照组TNF-α mRNA表达水平差异有统计学意义（F=110．983，P〈0．001），且随培养时间延长，THP-1细胞TNF-α mRNA水平增高（F=701．680，P〈0．001）。1^7CFU／ml烟曲霉刺激THP-1细胞24h后，TNF-α蛋白水平（6236．30±437．12ng／L）较空白对照组（132．10±0．61ng／L）明显升高（P〈0．01）。10^7CFU／ml烟曲霉作用THP-1细胞30min后磷酸化β38MAPK蛋白水平明显升高，60rain时开始减弱。SB203580阻断的烟曲霉组TNF-α mRNA表达水平（3．83±0．62）较未阻断的烟曲霉组（187．23±21．62）明显降低。结论人THP-1细胞体外与烟曲霉作用后激活信号分子β38MAPK并分泌TNF-α，表明单核细胞可能参与抗烟曲霉感染固有免疫反应。

关键词：烟曲霉菌肿瘤坏死因子α p38丝裂原活化蛋白激酶类 THP-1细胞

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TRP通道在炎症性皮肤病中的作用

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中国麻风皮肤病杂志 2023年第2期39卷 129-133页

作者：洪安澜林彤中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院(研究所)激光科江苏南京210042 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病医院(研究所)江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室江苏南京210042

瞬时受体电位(TRP)通道是一类非特异性阳离子通道蛋白家族,在皮肤感觉神经元和非神经元细胞中广泛表达,能被多种刺激激活,参与炎症性皮肤病的发生发展。本文重点对TRP通道的不同亚型在玫瑰痤疮、特应性皮炎、银屑病、接触性皮炎等炎症... 详细信息

瞬时受体电位(TRP)通道是一类非特异性阳离子通道蛋白家族,在皮肤感觉神经元和非神经元细胞中广泛表达,能被多种刺激激活,参与炎症性皮肤病的发生发展。本文重点对TRP通道的不同亚型在玫瑰痤疮、特应性皮炎、银屑病、接触性皮炎等炎症性皮肤病中的作用进行综述,提示TRP通道有望成为炎症性皮肤病的潜在治疗靶点。

关键词：瞬时受体电位通道炎症性皮肤病玫瑰痤疮银屑病特应性皮炎

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慢病毒介导的靶向沉默HPV16 E7-shRNA对SiHa细胞DNA甲基转移酶表达的影响

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中华皮肤科杂志 2017年第2期50卷 81-85页

作者：杨佳李黎明许翠龙嘉王尧杨雪源蒋明军中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所中心实验室江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 南京农业大学生命科学与技术基地班

的探讨慢病毒携带的靶向人乳头瘤病毒16（HPV16）E7基因的短发夹干扰RNA（shRNA）对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞中4种甲基转移酶（DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L）表达水平的影响。方法构建HPV16 E7基因靶序列的shRNA重组质粒，用BLOCK-... 详细信息

的探讨慢病毒携带的靶向人乳头瘤病毒16（HPV16）E7基因的短发夹干扰RNA（shRNA）对HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞中4种甲基转移酶（DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L）表达水平的影响。方法构建HPV16 E7基因靶序列的shRNA重组质粒，用BLOCK-iT^TM Lentiviral RNAi Expression System试剂盒进行慢病毒包装，分别转染293T细胞48、72 h后收集病毒上清液。分别用含靶向HPV16 E7-shRNA重组质粒的病毒上清液与完全培养基（1∶1）的混合液（shRNA组）、含空白质粒（即不含靶向HPV16 E7-shRNA序列）的病毒上清液与完全培养基（1∶1）的混合液（阴性对照组）、完全培养基（空白对照组）培养SiHa细胞。感染0、48、96 h后，用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测3组SiHa细胞中HPV16 E7和4种甲基转移酶mRNA的表达，Western印迹检测4种甲基转移酶的蛋白表达。结果感染0 h时，shRNA组、阴性对照组、空白对照组SiHa细胞HPV16 E7、DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L mRNA相对表达量比较，差异无统计学意义（均P 〉 0.05）；感染48、96 h时，3组细胞间HPV16 E7和4种DNMT mRNA相对表达量比较，差异有统计学意义（均P 〈 0.05）。shRNA组HPV16 E7、DNMT1、DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L mRNA表达水平在48 h时的沉默效率分别为71.13%、50.53%、13.72%、46.27%和17.92%，96 h时分别为83.50%、74.2%、47.8%、64.7%和48.9%；而阴性对照组和空白对照组各时间点表达水平差异无统计学意义（均P 〉 0.05）。慢病毒感染48、96 h时，3组细胞间上述4种DNMT蛋白表达量差异有统计学意义（均P 〈 0.01）。shRNA组4种DNMT蛋白表达水平随感染时间的延长而逐渐下降，感染48 h时DNMT1、DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L蛋白表达抑制率分别为84%、37.2%、59.8%、49.3%，96 h时分别为73.1%、68.7%，55.5%、65.5%。结论靶向沉默HPV16阳性宫颈癌SiHa细胞E7基因能够干扰DNMT1、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L mRNA及蛋白的表达。

关键词：人乳头瘤病毒16 乳头瘤病毒E7蛋白质类 RNA 小分子干扰甲基转移酶类细胞系,肿瘤

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抗念珠菌天然产物的研究进展

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中国真菌学杂志 2023年第2期18卷 183-187页

作者：余宇佘晓东刘维达中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京210042 江苏省皮肤病与性病学分子生物学重点实验室南京210042

念珠菌是常见的致病真菌,已在世界范围内引起大量的人类真菌病。据报道念珠菌是医院获得性血液感染的第四大原因[1-2],白念珠菌感染是人类最常见的侵袭性念珠菌病,占50%以上[3]。发生侵袭性念珠菌感染常与糖皮质激素的大量使用、广谱抗... 详细信息

念珠菌是常见的致病真菌,已在世界范围内引起大量的人类真菌病。据报道念珠菌是医院获得性血液感染的第四大原因[1-2],白念珠菌感染是人类最常见的侵袭性念珠菌病,占50%以上[3]。发生侵袭性念珠菌感染常与糖皮质激素的大量使用、广谱抗生素的长期使用以及免疫功能受损相关。目前使用的抗真菌药物种类有限,主要包括唑类、多烯类和棘白菌素类。

关键词：天然产物抗念珠菌研究进展

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