检索结果-内蒙古大学图书馆

中华皮肤科杂志 2021年第5期54卷 402-407页

作者：李文锐贾苇雪张蕴斌林麟李诚让中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病医院皮肤科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 中国科学院生物化学与细胞生物学研究所上海200031

目的探讨nicastrin(nct)基因对斑马鱼黑素细胞生物学功能的影响。方法利用吗啉代寡核苷酸(MO)技术针对斑马鱼nct基因mRNA设计nct-MO序列,同时设计对照MO序列(ctrl-MO),并构建5′端为MO靶序列的增强绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA,通过显微注射... 详细信息

目的探讨nicastrin(nct)基因对斑马鱼黑素细胞生物学功能的影响。方法利用吗啉代寡核苷酸(MO)技术针对斑马鱼nct基因mRNA设计nct-MO序列,同时设计对照MO序列(ctrl-MO),并构建5′端为MO靶序列的增强绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA,通过显微注射的方式将nct-MO或ctrl-MO与EGFP mRNA共注射入斑马鱼胚胎中,验证nct-MO的沉默效率,观察其表型变化。以野生型斑马鱼作为空白对照组,实时荧光定量PCR检测黑素合成notch信号通路相关基因mitfa、tyr、tyrp1a、tyrp1b、dct、pmela、notch1a、notch1b、hey1 mRNA表达水平的变化。多组间均数比较采用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果斑马鱼受精后8 h,ctrl-MO+EGFP mRNA组斑马鱼胚胎中均有绿色荧光表达,而nct-MO+EGFP mRNA组及空白对照组胚胎均未见绿色荧光。受精后48 h,nct-MO组幼鱼尾部色素沉着区面积占比(0.169±0.083)低于ctrl-MO组(0.258±0.042,t=3.202,P=0.005),且nct-MO组色素分布紊乱。实时荧光定量PCR显示,nct-MO组、ctrl-MO组、空白对照组间pmela、tyrp1a、hey1基因mRNA相对表达量差异有统计学意义(均P<0.05),mitfa、tyr、tyrp1b、dct、notch1a、notch1b mRNA相对表达差异无统计学意义(均P>0.05);nct-MO组pmela、tyrp1a相对表达水平(0.708±0.028、0.558±0.136)低于ctrl-MO组(1.023±0.142、1.016±0.134,均P<0.05)。结论nct基因可能通过调控斑马鱼黑素合成影响黑素细胞生物学功能。

关键词：色素沉着异常化脓性汗腺炎 Nicastrin基因 γ分泌酶斑马鱼模型

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黑头粉刺痣3例

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临床皮肤科杂志 2010年第2期39卷 121-122页

作者：孙叶梅宋宁静中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病研究所江苏南京210042 上海市皮陕病性病医院上海200050

黑头粉刺痣（comedo nevus）是一种以单侧分布的先天性毛囊发育异常，外观表现为群集的黑头粉刺样丘疹性损害；组织病理学表现为表皮形成宽而深的凹陷，凹陷内充满角质栓。本病临床少见．笔者报告3例具有不同临床表现的黑头粉刺痣。

关键词：黑头粉刺痣

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微小RNA-let-7a对黑素瘤细胞系A375细胞凋亡的影响

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中华皮肤科杂志 2010年第8期43卷 575-578页

作者：王震英张捷王焱刘毅姜祎群曾学思孙建方中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京210042 山东大学附属省立医院中心实验室

目的研究微小RNA（microRNA）-let-7a对黑素瘤细胞系A375细胞凋亡的影响及其作用机制.方法采用实时荧光定量PCR法（TaqMan探针法）检测microRNA-let-7a在A375细胞及黑素细胞的表达差异;然后用microRNA-let-7a的模拟物转染A375细胞,流... 详细信息

目的研究微小RNA（microRNA）-let-7a对黑素瘤细胞系A375细胞凋亡的影响及其作用机制.方法采用实时荧光定量PCR法（TaqMan探针法）检测microRNA-let-7a在A375细胞及黑素细胞的表达差异;然后用microRNA-let-7a的模拟物转染A375细胞,流式细胞仪检测其凋亡的改变;最后采用Western印迹检测转染后半胱天冬酶-3（caspase-3）蛋白的变化.结果与黑素细胞相比,microRNA-let-7a在A375细胞中表达下降了0.462倍;采用microRNA-let-7a的模拟物转染后,与阴性对照（细胞凋亡率16.9%）相比,A375细胞凋亡（细胞凋亡率47.4%）增加;转染后caspase-3蛋白表达下调.结论 microRNA-let-7a可促进黑素瘤细胞系A375的凋亡,同时下调caspase-3蛋白的表达.

关键词：黑色素瘤细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 细胞系肿瘤 microRNA—let-7a

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烟曲霉对小鼠巨噬细胞自噬流的影响初步研究

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中华皮肤科杂志 2022年第11期55卷 962-968页

作者：杨璐段志敏徐松陈旭李岷中国医学科学院、北京协和医学院皮肤病研究所真菌科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042 南京医科大学全球健康中心南京210029

目的:探讨烟曲霉对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)自噬流的影响。方法:灭活烟曲霉体外诱导小鼠BMDM不同时间(0、0.5、4、12 h),提取细胞蛋白,Western印迹法检测自噬关键蛋白LC3-Ⅰ型/Ⅱ型的转换及磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)Ser2481的蛋... 详细信息

目的:探讨烟曲霉对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)自噬流的影响。方法:灭活烟曲霉体外诱导小鼠BMDM不同时间(0、0.5、4、12 h),提取细胞蛋白,Western印迹法检测自噬关键蛋白LC3-Ⅰ型/Ⅱ型的转换及磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)Ser2481的蛋白水平。用烟曲霉和溶酶体阻断剂[包括半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64d+胃蛋白酶抑制剂pepstatin、巴佛洛霉素-A1(BAF-A1)、氯化铵、氯喹]单独或联合体外诱导小鼠BMDM不同时间(4、12 h)后,Western印迹法检测烟曲霉对新生的LC3-Ⅱ、细胞基础自噬流的影响,并通过共聚焦荧光显微镜观察烟曲霉与LC3、Rubicon(RUN domain Beclin-1-interacting and cysteine-rich-domain-containing protein)的共定位关系。不同处理时间数据结果采用非匹配t检验分析,烟曲霉孢子和自噬溶酶体阻断剂两因素处理数据结果采用2×2析因分析方法。结果:Western印迹显示,与对照组(0 h组)比较,烟曲霉体外诱导小鼠BMDM 0.5、4、12 h后细胞内LC3-Ⅱ表达逐渐增加,差异均有统计学意义(t值分别为6.58、3.28、3.02,均P<0.05),但各组p-mTOR蛋白水平差异无统计学意义(t值分别为0.441、0.477、0.382,P值分别为0.682、0.660、0.722)。与单独氯喹处理BMDM 4 h和12 h相比,烟曲霉联合氯喹处理后LC3-Ⅱ进一步增高,差异均有统计学意义(t=2.13、2.78,均P<0.05)。与单独氯化铵处理BMDM 4 h和12 h相比,烟曲霉联合氯化铵处理后LC3-Ⅱ进一步增高,差异均有统计学意义(t=2.92、2.92,均P<0.05)。与单独BAF-A1处理BMDM 4 h和12 h相比,烟曲霉联合BAF-A1处理后LC3-Ⅱ进一步增高,差异有统计学意义(t=2.13、2.13,均P<0.05)。与单独E-64d+pepstatin处理BMDM 4 h和12 h相比,烟曲霉联合E-64d+pepstatin处理后LC3-Ⅱ进一步增高,差异有统计学意义(t=2.13、2.92,均P<0.05)。用钙荧光白荧光标记的烟曲霉孢子刺激BMDM 8 h后,共聚焦荧光显微镜显示LC3、Rubicon主要包绕于烟曲霉周围,与烟曲霉均有共定位关系。结论:烟曲霉体外诱导可增加小鼠BMDM基础自噬流。

关键词：烟曲霉菌巨噬细胞自噬微管相关蛋白质类微管相关蛋白1轻链3 LC3相关吞噬

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白介素6在痤疮囊肿皮损中的表达及痤疮丙酸杆菌体外对THP-1细胞白介素6水平的影响

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中华皮肤科杂志 2018年第4期51卷 265-268页

作者： Xu Changchun, Du Leilei, Zeng Rong, Tong Jianbo, Liu Yuzhen, Duan Zhimin, Chen Xu, Xu Haoxiang, Gong Chunyan, Li Min 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤性病分子生物学重点实验室南京210042

目的检测寻常痤疮患者囊肿皮损中白介素6（IL-6）的表达，并观察痤疮丙酸杆菌体外对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1信号分子p38MAPK及白介素6水平的影响。方法实时荧光定量PCR检测6例痤疮患者囊肿皮损和6例健康人皮肤组织中IL-6 mRN... 详细信息

目的检测寻常痤疮患者囊肿皮损中白介素6（IL-6）的表达，并观察痤疮丙酸杆菌体外对人急性单核细胞白血病细胞系THP-1信号分子p38MAPK及白介素6水平的影响。方法实时荧光定量PCR检测6例痤疮患者囊肿皮损和6例健康人皮肤组织中IL-6 mRNA表达水平。用2 × 106、2 × 107、2 × 108 CFU/ml灭活痤疮丙酸杆菌菌悬液或脂多糖（100 μg/L）刺激THP-1细胞，同时设培养基对照组和p38MAPK抑制剂SB203580组（先用20 μmol/L SB203580处理，再用2 × 108 CFU/ml痤疮丙酸杆菌刺激），作用不同时间（1 ~ 6 h）后，实时荧光定量PCR检测IL-6 mRNA表达水平，酶联免疫吸附试验检测上清液中IL-6含量。2 × 108 CFU/ml灭活痤疮丙酸杆菌菌悬液刺激THP-1细胞15、30、60 min或脂多糖（100 μg/L）刺激30 min后，Western印迹法检测p38MAPK和磷酸化p38MAPK表达水平。结果痤疮囊肿皮损和健康对照皮肤IL-6 mRNA水平分别为3.680 ± 0.790、1.155 ± 0.250，两组比较差异有统计学意义（t = 3.047，P 〈 0.05）。双因素方差分析显示，不同浓度痤疮丙酸杆菌组、脂多糖组、培养基对照组IL-6 mRNA表达水平差异有统计学意义（F = 532.3，P 〈 0.001，ν = 4），痤疮丙酸杆菌刺激1、3、6 h之间差异也有统计学意义（F = 526.6，P 〈 0.001，ν = 2）。2 × 108 CFU/ml痤疮丙酸杆菌组、脂多糖组、培养基对照组上清液中IL-6浓度分别为（1 618.22 ± 32.23）、（3 212.06 ± 353.00）、（147.10 ± 0.53） ng/L，3组间差异有统计学意义（ν = 2，F = 102.35，P 〈 0.01）。2 × 108 CFU/ml痤疮丙酸杆菌作用于THP-1细胞15、30、60 min后磷酸化p38MAPK蛋白水平升高。SB203580组THP-1细胞IL-6 mRNA水平与未抑制组比较明显降低（t = 15.91，P = 0.004）。结论寻常痤疮患者囊肿中IL-6 mRNA水平显著升高。痤疮丙酸杆菌体外可激活人THP-1细胞信号分子p38MAPK，促进其分泌IL-6。

关键词：寻常痤疮痤疮丙酸杆菌白细胞介素6 白血病单核细胞急性 p38丝裂原活化蛋白激酶类

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靶向调控皮肤恶性黑素瘤潜在致病基因CCL18的miRNA预测及表达相关性分析

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中华皮肤科杂志 2017年第9期50卷 631-635页

作者：宋昊布文博倪娜娜温斯健熊竞舒戚金亮徐秀莲孙建方中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所病理科南京210042 中国医学科学院北京协和医学院皮肤外科南京210042 南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室

目的探讨靶向调控皮肤恶性黑素瘤潜在致病基因CCL18的miRNA。方法用miRanda和TargetScan在线软件进行生物信息学分析，预测靶向调控CCL18基因的miRNA。根据人基因序列分析构建CCL18基因3＇UTR双荧光素酶报告载体及miRNA载体，共转染2... 详细信息

目的探讨靶向调控皮肤恶性黑素瘤潜在致病基因CCL18的miRNA。方法用miRanda和TargetScan在线软件进行生物信息学分析，预测靶向调控CCL18基因的miRNA。根据人基因序列分析构建CCL18基因3＇UTR双荧光素酶报告载体及miRNA载体，共转染293T细胞48 h后裂解细胞并检测荧光素酶活性。其中，CCL18基因3＇UTR双荧光素酶报告载体分3＇UTR突变型组、3＇UTR野生型组和空白对照组，miRNA载体携带筛选的miRNA。应用实时荧光定量PCR检测14例黑素瘤新鲜组织及瘤旁正常皮肤组织（对照）中CCL18和筛选miRNA的表达，并对其相关性进行分析。结果在线软件分析显示，CCL18、3＇UTR具有miR、183、miR、128、miR、33a等miRNA的作用靶点。成功构建荧光素酶报告载体及miRNA载体，荧光素酶活性检测显示，miR、183、miR、128的3＇UTR突变型组荧光素酶表达量（11.63 ± 0.42；8.80 ± 0.49）明显高于3＇UTR野生型组（4.86 ± 0.39；5.01 ± 0.54）及空白对照组（2.41 ± 0.13；2.39 ± 0.05），差异有统计学意义（均P 〈 0.01），而miR、33a的3＇UTR突变型组荧光素酶表达量与3＇UTR野生型组差异无统计学意义（6.41 ± 0.47比6.16 ± 0.22，P 〉 0.05）。实时荧光定量PCR显示，14例黑素瘤肿瘤组织中CCL18基因的相对表达量（3.52 ± 1.68）高于对照组织，而miR、183（0.49 ± 0.32）、miR、128（0.30 ± 0.20）、miR、33a（0.46 ± 0.40）的相对表达量均低于对照组织。CCL18表达水平与miR、128表达水平呈负相关（rs = 、0.548，P 〈 0.05），而与miR、183、miR、33a表达水平无相关性（P 〉 0.05）。结论 miR、128可能参与调控皮肤恶性黑素瘤潜在致病基因CCL18。

关键词：黑色素瘤微RNAs RNA,小分子干扰趋化因子CCL18

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全国性病监测点实验室检测能力调查

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中华流行病学杂志 2020年第9期41卷 1509-1513页

作者：张家晖岳晓丽李婧龚向东中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所中国疾病预防控制中心性病控制中心性病流行病学室南京210042

目的调查国家级性病监测点医疗机构开展性病实验室检测能力的现状。方法采用横断面研究方法调查105个监测点内医疗机构性病实验室检测方法开展情况,计算各检测项目的比例、比较其差异。结果 752家医疗机构开展梅毒螺旋体血清学试验和... 详细信息

目的调查国家级性病监测点医疗机构开展性病实验室检测能力的现状。方法采用横断面研究方法调查105个监测点内医疗机构性病实验室检测方法开展情况,计算各检测项目的比例、比较其差异。结果 752家医疗机构开展梅毒螺旋体血清学试验和非梅毒螺旋体血清学试验比例分别为97.5%(733/752)和91.4%(687/752);淋球菌培养和生殖道沙眼衣原体(CT)核酸检测的比例分别为48.4%(364/752)和23.4%(176/752);单纯疱疹病毒2型(HSV-2)和人乳头瘤病毒(HPV)各检测项目的比例均<40%。其中,省、地市及县区级医疗机构开展梅毒螺旋体血清学试验和非梅毒螺旋体血清学试验比例均>90%,开展淋球菌培养的比例分别为66.9%(83/124)、46.9%(197/420)和47.4%(82/173),开展CT核酸检测的比例分别为29.0%(36/124)、25.0%(105/420)和19.7%(34/173)。公立医疗机构开展梅毒与淋病检测项目、CT核酸检测的比例高于民营/合资医疗机构,皮肤性病专科医院高于综合医院、妇幼保健机构。华东和中南地区监测点开展性病检测项目的比例普遍高于其他地区,西北地区最低。结论我国性病监测点医疗机构已普遍开展梅毒血清学检测,但淋球菌培养、CT核酸检测开展不足。不同级别、类型和经营性质的医疗机构开展性病检测项目的比例不同,不同地区性病检测发展不平衡。应加强淋球菌培养、CT核酸检测的能力建设,加强基层、民营/合资以及西部欠发达地区医疗机构性病检测能力建设。

关键词：性传播疾病监测点实验室检测横断面调查

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51例女童尖锐湿疣临床分析

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中华皮肤科杂志 2018年第5期51卷 363-365页

作者：黄丹鞠梅常宝珠陈旭张小华朱艳周亚男许南陈崑顾恒中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所理疗科江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室南京210042

目的分析尖锐湿疣女童患者的临床特点及治疗转归。方法门诊收集12岁以下女性尖锐湿疣患者，采用问卷调查法询问病史并体检，PER法检钡4人乳头瘤病毒（HPV）分型。采用描述性统计法统计高危因素、皮损情况、HPV检查结果，记录激光和光动... 详细信息

目的分析尖锐湿疣女童患者的临床特点及治疗转归。方法门诊收集12岁以下女性尖锐湿疣患者，采用问卷调查法询问病史并体检，PER法检钡4人乳头瘤病毒（HPV）分型。采用描述性统计法统计高危因素、皮损情况、HPV检查结果，记录激光和光动力治疗次数等信息。结果共收集51例12岁以下女童尖锐湿疣，年龄和病程[M（R25～B75）]分别为3（2，5）岁、6（4—8）个月。其中，29例（56．9％）居住在城镇或郊区，16例（31．4％）在农村。2例患儿父母有明确的HPV感染史，12例（23．6％）平时常穿开裆裤，24例（47％）平素经常在服务场所洗浴，仅1例有明确的被性侵史。39例（76．5％）以肛周皮损为主，大菜花状皮损均发生在肛周。35例接受脱落细胞HPV检测，阳性率71．4％，阳性者全部为低危型（6／11型）。治疗过程中5例失访，剩余46例激光治疗次数中位数为2（P25-P75，1～4）次，光动力治疗次数中位数为3（P25-P75，3～4）次。治疗期[M（P25-P75）]为4（2—6）个月，5例失访，其余46例均治愈，治愈率90．2％。结论女童尖锐湿疣感染源可能以环境为主，最易累及肛周。激光和光动力治疗预后良好。

关键词：尖锐湿疣儿童皮肤表现治疗结果

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可耐受高温对黑曲霉生物膜体外模型构建的影响

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中国医学科学院学报 2017年第6期39卷 762-767页

作者：曾荣童建波刘宇甄陈青林彤李岷吕桂霞中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所南京210042 江苏省血液中心南京210042 江苏省皮肤性病学分子生物学重点实验室南京210042

目的在可耐受高温作用下构建黑曲霉生物膜模型,探讨可耐受高温效应对其形成结构及活力的影响。方法对比37℃下,分别采用共聚焦激光扫描显微镜和甲基四氮盐法探索在不同高温效应下(39℃或41℃)体外黑曲霉生物膜形成过程中的多个时间观察... 详细信息

目的在可耐受高温作用下构建黑曲霉生物膜模型,探讨可耐受高温效应对其形成结构及活力的影响。方法对比37℃下,分别采用共聚焦激光扫描显微镜和甲基四氮盐法探索在不同高温效应下(39℃或41℃)体外黑曲霉生物膜形成过程中的多个时间观察点(4、8、10、16、24、48和72 h)的超微结构差异及活力变化。结果与37℃相比,在4 h时,温度较高的39℃组和41℃组黏附率均显著降低(t=8.603,P=0.047;t=14.550,P=0.008),黏附浓度也均显著降低(t=8.315,P=0.0021;t=11.748,P=0.0015);在8 h时,温度越高,出芽率越低(t=8.906,P=0.049;t=23.310,P=0.009)、菌丝长度越短(t=35.118,P=0.039;t=63.450,P=0.006);在10~16 h菌丝生长阶段,温度越高菌丝极性生长破坏越严重,菌丝越弯曲,且分枝越多,活力越高(t=24.262,P=0.038;t=7.556,P=0.031);24 h时,温度越高生物膜厚度越薄(t=2.375,P=0.043,t=5.263,P=0.031),菌丝方向性越差,活力越低(t=24.262,P=0.038;t=7.556,P=0.031)。结论可耐受高温作用能够在一定程度上抑制黑曲霉生物膜的形成及其活力。

关键词：黑曲霉生物膜高温作用

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Nicastrin基因突变的反常性痤疮患者皮损Notch—HES信号通路的表达

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中华皮肤科杂志 2016年第6期49卷 415-419页

作者：李诚让何艳艳张晓峰徐浩翔王宝玺福建医科大学附属协和医院皮肤科福州350001 中国医学科学院北京协和医学院皮肤病研究所江苏省皮肤病与性病分子生物学重点实验室皮肤科中国医学科学院北京协和医学院整形外科医院皮肤科

目的检测nicastrin基因突变的反常性痤疮患者皮损标本中，nicastrin及其下游Notch—HES信号通路蛋白的表达。方法免疫组化法检测nicastrin及Notch—HES信号通路分子在4例nicastrin基因突变的患者皮损石蜡标本的表达，并用6例正常皮肤组... 详细信息

目的检测nicastrin基因突变的反常性痤疮患者皮损标本中，nicastrin及其下游Notch—HES信号通路蛋白的表达。方法免疫组化法检测nicastrin及Notch—HES信号通路分子在4例nicastrin基因突变的患者皮损石蜡标本的表达，并用6例正常皮肤组织作对照，同时采用Spearman相关分析，分析nicastrin与Notch—HES信号通路分子表达的相关性。结果Nicastrin蛋白广泛表达于表皮全层、皮肤附属器，如，毛囊皮脂腺单位、大汗腺及小汗腺。在携带nicastrin基因突变的患者皮损中，表皮及毛囊漏斗部nicastrin表达较正常对照明显减少；同时，Notch—HES信号通路分子表达亦较正常对照明显减少。Nicastrin蛋白与Notchl、Notch3以及HES一1的表达呈明显正相关（r分别为0．831、0．748、0．807，P值分别〈0．01，〈0．05、〈0．01），而与Notch2、HES一5的表达之间的相关性，差异无统计学意义（r分别为0．597和0．591，均P〉0．05）。结论Nicastrin基因突变患者的皮损中nicastrin低表达，且与多种Notch—HES信号通路分子表达呈正相关，提示nicastrin表达减少可能通过影响下游Notch—HES信号通路的表达参与反常性痤疮的发病。

关键词：基因突变信号传导反常性痤疮 Nicastrin基因 Notch—HES信号通路

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