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中国药学杂志 2019年第23期54卷 1919-1925页

作者：孙佩文唐小琳吕菲菲余翠翠王彬彬高志晖金钺徐艳红魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京 100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口 570311

目的克隆和表达白木香(Aquilaria sinensis)转录因子基因As WRKY25并进行特性分析,为深入研究其生物学功能奠定基础。方法以白木香愈伤组织总RNA反转录的c DNA为模版,采用聚合酶链式反应技术(PCR)克隆基因CDS全长;通过生物信息学工具... 详细信息

目的克隆和表达白木香(Aquilaria sinensis)转录因子基因As WRKY25并进行特性分析,为深入研究其生物学功能奠定基础。方法以白木香愈伤组织总RNA反转录的c DNA为模版,采用聚合酶链式反应技术(PCR)克隆基因CDS全长;通过生物信息学工具和软件分析编码蛋白的生物学特性,通过组织特异性表达分析不同组织中的基因表达模式。构建p ET-28aAs WRKY25原核表达载体,在大肠杆菌BL21 (DE3)中进行原核诱导表达及鉴定。结果从白木香愈伤组织中克隆到了As WRKY25转录因子基因,其CDS全长1 728 bp,编码575个氨基酸;该序列密码子优化后连接到p ET-28a表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导表达,其适合诱导条件为1 mmol·L-1IPTG,37℃连续培养6 h。组织表达分析结果表明,As WRKY25在白木香的沉香层中的表达量最高,在根、茎、枝中的表达量最低。结论成功克隆并表达了白木香WRKY类转录因子As WRKY25,该转录因子可能参与了沉香的伤害诱导形成过程。

关键词：白木香 As WRKY25 基因克隆原核表达表达分析

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结合非靶向代谢组学和指纹图谱对通体结香技术产沉香与野生沉香化学成分的比较分析

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中草药 2022年第18期53卷 5625-5635页

作者：郁萌侯文成冯剑陈兰杨云刘洋洋魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的系统全面分析比较通体结香技术产沉香(简称通体香)与野生沉香化学成分,为通体结香技术进一步的应用和推广提供科学可靠的依据。方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)结合非靶向代... 详细信息

目的系统全面分析比较通体结香技术产沉香(简称通体香)与野生沉香化学成分,为通体结香技术进一步的应用和推广提供科学可靠的依据。方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)结合非靶向代谢组学和指纹图谱,对通体香与野生沉香的乙醇提取物和挥发性成分进行分析。结果 16批通体香与16批野生沉香的共有成分相同,但通体香指纹图谱相似度较高,且4个倍半萜、3个小分子芳香物质和8个2-(2-苯乙基)色酮等共17个共有成分在通体香中含量较高。结论通体香和野生沉香主要化学成分组成相同,但不同批次间通体香的质量更稳定。

关键词：沉香通体结香技术 2-(2-苯乙基)色酮非靶向代谢组学指纹图谱 2,4-二叔丁基苯酚 6,7-二甲基-1,2,3,5,8,8a-六氢萘去氢蜂斗菜酮

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6种代表性沉香精油的化学成分及抗氧化、抗炎活性比较分析

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中草药 2022年第18期53卷 5720-5730页

作者：陈细钦王灿红冯剑陈德力魏建和刘洋洋中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的比较不同来源、不同提取方式的6种沉香精油化合物组成、抗氧化能力及抗炎活性的差异。方法采用气相色谱-飞行时间质谱联用仪(gas chromatography-time of flight mass spectrometry,GC-TOF MS)对6种沉香精油的化学成分进行分析,... 详细信息

目的比较不同来源、不同提取方式的6种沉香精油化合物组成、抗氧化能力及抗炎活性的差异。方法采用气相色谱-飞行时间质谱联用仪(gas chromatography-time of flight mass spectrometry,GC-TOF MS)对6种沉香精油的化学成分进行分析,并测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)与2,2-氮杂双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2-azabis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS]自由基的能力,考察其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7活力的影响。结果从通体香水蒸气蒸馏精油(TTS)、通体香超临界萃取精油(TTC)、板头香水蒸气蒸馏精油(BTS)、板头香超临界萃取精油(BTC)、奇楠沉香水蒸气蒸馏精油(QNS)和奇楠沉香超临界萃取精油(QNC)中鉴定出的化合物数量分别为48、55、59、71、72和35种,所含香味物质小分子芳香物质及倍半萜类成分相对含量之和分别为81.42%、87.84%、89.03%、62.05%、63.83%和28.36%,所含2-(2-苯乙基)色酮类化合物相对含量分别为0、0、0.25%、22.42%、17.48%、60.42%。6种沉香精油均具有清除DPPH和ABTS自由基能力,且质量浓度在0.5~5 mg/m L与自由基清除能力均呈正相关。3种水蒸气蒸馏沉香精油(BTS、TTS、QNS)对LPS诱导RAW264.7细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)分别为18.61、30.30、18.05μg/m L,而3种超临界CO_(2)萃取沉香精油(BTC、TTC、QNC)的IC50值分别为41.98、38.45、24.50μg/m L。结论超临界萃取沉香精油同水蒸气蒸馏沉香精油化合物组成相差较大,其能够提取出更多的脂肪酸类和色酮类化合物;板头香和通体香采用同一提取方法所得精油化学成分相似,而奇楠沉香中含有更多含量的香味物质和2-(2-苯乙基)色酮类化合物。3种超临界萃取沉香精油清除DPPH自由基能力均强于水蒸气蒸馏沉香精油,而抗炎活性则相反,且3种沉香来源中,奇楠沉香精油抗炎能力最佳。

关键词：沉香奇楠精油化学成分抗氧化能力抗炎活性 2-(2-苯乙基)色酮

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基于Citespace和VOSviewer可视化分析沉香研究的发展态势

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中草药 2024年第20期55卷 7033-7046页

作者：何国浩杨云曾琳许利嘉魏建和肖培根中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室/国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的通过对近32年沉香相关研究的文献分析,探析沉香研究领域的相关热点与前沿。方法以中国知网(CNKI)、Web of Science (WOS)等国内外数据库为数据源,运用Citespace对数据进行处理筛选,运用VOSviewer、Citespace、COOC等软件对文献年... 详细信息

目的通过对近32年沉香相关研究的文献分析,探析沉香研究领域的相关热点与前沿。方法以中国知网(CNKI)、Web of Science (WOS)等国内外数据库为数据源,运用Citespace对数据进行处理筛选,运用VOSviewer、Citespace、COOC等软件对文献年度发文量、机构、关键词、作者等方面进行分析,绘制可视化图谱。结果共纳入中文文献981篇,英文文献662篇。文献数量整体呈增长趋势;研究机构主要以中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所、中国热带农业科学院热带生物技术研究所和中国林业科学研究院热带林业研究所等为代表;中英文关键词显示,沉香的主要研究方向为沉香倍半萜、结香技术、化学成分、药理作用等;目前沉香的研究热点主要为内生真菌、次生代谢产物、沉香四醇等。结论沉香研究目前处于稳定发展阶段,该领域的最新进展主要集中于对其结香技术的探究、药理作用的靶点、信号通路以及基因层面的深入研究等。

关键词：沉香文献计量学结香技术沉香倍半萜可视化分析

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沉香中倍半萜类化合物与生物活性研究进展及其质量标志物预测分析

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中草药 2022年第4期53卷 1191-1209页

作者：王云云侯文成魏建和刘洋洋中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

沉香为名贵药材和香料,倍半萜类化合物是沉香的特征成分和主要活性成分,根据其分子骨架可将沉香倍半萜类化合物分为8类。系统地总结了从沉香中分离出的倍半萜类化合物,并对其调节中枢神经系统、抗炎、抗肿瘤细胞毒、抑菌等活性的研究现... 详细信息

沉香为名贵药材和香料,倍半萜类化合物是沉香的特征成分和主要活性成分,根据其分子骨架可将沉香倍半萜类化合物分为8类。系统地总结了从沉香中分离出的倍半萜类化合物,并对其调节中枢神经系统、抗炎、抗肿瘤细胞毒、抑菌等活性的研究现状进行综述,并在此基础上结合质量标志物(quality marker,Q-Marker)的核心概念,从生源途径、传统药效、传统药性和化学成分等方面对沉香的Q-Marker进行预测分析,α-沉香呋喃、β-沉香呋喃、沉香螺旋醇可作为沉香的Q-Marker,为建立和完善沉香质量标准提供依据,以期为沉香质量的深入研究提供参考。

关键词：沉香质量标志物倍半萜 β-沉香呋喃 α-沉香呋喃沉香螺旋醇

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菟丝子及混伪品的DNA条形码鉴定

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中草药 2024年第17期55卷 5982-5990页

作者：秦新月金钺高志晖魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的调研市售菟丝子Cuscutae Semen混杂情况,为菟丝子药材质量的提升和安全应用提供依据。方法收集市售菟丝子25份,对样品进行ITS2基因扩增并双向测序,利用HMMer注释方法获得ITS2序列,使用MEGA6.0进行遗传距离计算并构建邻接法(neighbor... 详细信息

目的调研市售菟丝子Cuscutae Semen混杂情况,为菟丝子药材质量的提升和安全应用提供依据。方法收集市售菟丝子25份,对样品进行ITS2基因扩增并双向测序,利用HMMer注释方法获得ITS2序列,使用MEGA6.0进行遗传距离计算并构建邻接法(neighbor-joining,NJ)系统发育树;运用DNAsp5.0进行功能域检测和单倍型分析;比较菟丝子及杂质的二级结构差异;用R语言将所得序列转换成彩色条形码图片及二维码。结果通过序列分析、遗传距离分析、构建系统发育树、二级结构分析、功能域分析及单倍型分析可将菟丝子药材中不同科属及同一属的杂质准确区分;成功检测出25份菟丝子中分别含有藜种子、绿穗苋种子、虫实种子、铁苋菜种子、稗子、酸模叶蓼种子、大豆碎粒等1种或多种杂质。结论首次调研了市售菟丝子的混杂情况,表明其混杂种类多,且部分混杂种子有毒,为菟丝子相关标准制定提供了依据。此外,ITS2序列可准确鉴定菟丝子及其混伪品,为微小种子类药材鉴别提供了理论依据;与二维码技术结合可实现菟丝子监管的标准化和信息化。

关键词：菟丝子混伪品 ITS2 彩色条形码二维码 DNA条形码

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沉香属植物内生真菌多样性及功能研究进展

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中草药 2024年第4期55卷 1397-1406页

作者：黄颖孟慧何欣杨云中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室/国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

沉香Aquilariae Lignum Resinatum是沉香属植物含树脂的木材,广泛应用于传统医学、香料、宗教等领域。沉香的形成与沉香属植物应对伤害防御诱导反应有关,其中内生真菌在沉香形成过程中发挥着重要的作用。综述了沉香属植物内生真菌的多样... 详细信息

沉香Aquilariae Lignum Resinatum是沉香属植物含树脂的木材,广泛应用于传统医学、香料、宗教等领域。沉香的形成与沉香属植物应对伤害防御诱导反应有关,其中内生真菌在沉香形成过程中发挥着重要的作用。综述了沉香属植物内生真菌的多样性,概括了内生真菌在促进沉香属植物次生代谢物积累、提高抗生物胁迫能力等功能,并提出沉香内生真菌研究与开发存在的问题和对策,为沉香增产技术开发提供参考。

关键词：沉香内生真菌多样性诱导结香抗生物胁迫

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白木香转录因子AsNAC2的克隆及表达分析

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中草药 2022年第15期53卷 4807-4812页

作者：张玉秀刘培卫吕菲菲杨云徐艳红高志晖魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的对珍稀南药沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis As NAC2转录因子进行分子克隆,并对其进行生物信息学和表达模式分析。方法以白木香茎的总RNA反转录的c DNA为模板,采用PCR技术获取基因编码序列(coding sequence,CDS)全长;利用... 详细信息

目的对珍稀南药沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis As NAC2转录因子进行分子克隆,并对其进行生物信息学和表达模式分析。方法以白木香茎的总RNA反转录的c DNA为模板,采用PCR技术获取基因编码序列(coding sequence,CDS)全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等特性;运用DNAMAN8.0和MEGA6.0等软件分别进行多序列比对和进化关系分析;利用qRT-PCR技术检测AsNAC2基因在不同组织和伤害胁迫下的表达特性。结果克隆获得AsNAC2基因(GenBank注册号MT130201),开放阅读框(openreadingframe,ORF)全长864bp,编码1条由287个氨基酸组成的弱酸性的稳定的亲水性蛋白,该蛋白定位在细胞核中,不存在跨膜结构域。序列比对和系统进化树分析显示,As NAC2蛋白N端具有典型的NAM结构域,与锦葵目中的可可、哥伦比亚锦葵和榴莲NAC 2-like蛋白亲缘关系近,属于NAC转录因子家族中的ATAF亚组。qRT-PCR结果显示,AsNAC2基因主要在健康白木香的根和茎中表达,全断干伤害可显著诱导茎中AsNAC2基因表达量的上调,在2 h达到峰值,此后缓慢下降,至48 h基本恢复正常。结论首次在白木香中克隆和鉴定了AsNAC2基因,该基因易受伤害诱导表达,且在伤害早期相对应。

关键词：白木香转录因子 NAC 克隆表达分析

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2-(2-苯乙基)色酮类化合物的生物活性及其生物合成研究进展

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中国药学杂志 2019年第23期54卷 1909-1918页

作者：肖梦君高志晖魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京 100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口 570311

2-(2-苯乙基)色酮类化合物仅分布在少数植物中,具有神经保护、抗菌和抗炎等多种生物活性,是沉香的特征性成分和主要活性成分,具有广阔的药用前景和应用价值。笔者对2-(2-苯乙基)色酮类化合物的神经保护活性、抗肿瘤细胞毒活性、抗菌活... 详细信息

2-(2-苯乙基)色酮类化合物仅分布在少数植物中,具有神经保护、抗菌和抗炎等多种生物活性,是沉香的特征性成分和主要活性成分,具有广阔的药用前景和应用价值。笔者对2-(2-苯乙基)色酮类化合物的神经保护活性、抗肿瘤细胞毒活性、抗菌活性和抗炎活性等生物活性、构效关系及生物合成途径的研究现状进行综述和展望,以期为筛选药用2-(2-苯乙基)色酮类化合物和对其生物合成途径的解析提供参考,并指出了目前生物合成研究中存在的问题。

关键词： 2-(2-苯乙基)色酮类化合物生物活性生物合成途径

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通体结香技术产沉香的倍半萜及其抗炎活性研究

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中国中药杂志 2019年第19期44卷 4196-4202页

作者：余章昕王灿红陈德力刘洋洋魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

综合运用多种现代色谱分离方法对通体结香技术诱导白木香形成的沉香化学成分及其抗炎活性进行研究,从二氯甲烷部位分离得到11个倍半萜类化合物。通过理化常数和波谱分析,并通过与文献对照,分别鉴定为:baimuxinol(1),5α,7α(H)-eudesm-1... 详细信息

综合运用多种现代色谱分离方法对通体结香技术诱导白木香形成的沉香化学成分及其抗炎活性进行研究,从二氯甲烷部位分离得到11个倍半萜类化合物。通过理化常数和波谱分析,并通过与文献对照,分别鉴定为:baimuxinol(1),5α,7α(H)-eudesm-11(13)-en-4α-ol(2),(7S,9S,10S)-(+)-9-hydroxy-selina-4,11-dien-14-al (3),petafolia A (4),7 (11)-eremophilen-8-one(5),neopetasane(6),petafolia B(7),11-hydroxy-valenc-1(10)-en-2-one(8),(4αβ,7β,8αβ)-3,4,4α,5,6,7,8,8α-octahydro-7-[1-(hydroxymethyl) ethenyl]-4α-methylnaphthalene-1-carboxaldehyde(9),12-hydroxy-4(5),11(13)-eudesmadien-15-al(10),(4R,5R,7S,9S,10S)-(-)-eudesma-11(13)-en-4,9-diol(11),其中,化合物1为新天然产物,其碳谱数据未见报道,4,9和10为首次从沉香属中分离得到,所有化合物均为首次从通体香中所得。结合脂多糖介导的RAW264. 7细胞模型评价了所有化合物的抗炎活性,化合物1,4和9具有较好的抗炎活性,IC50分别为(2. 5±0. 35),(3. 2±0. 2),(4. 3±0. 56)μmol·L-1,为沉香的品质评价提供了基础依据。

关键词：通体结香技术倍半萜沉香抗炎活性

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