检索结果-内蒙古大学图书馆

世界科学技术-中医药现代化 2020年第9期22卷 3116-3121页

作者：韩文静徐娇朱楚然隋春魏建和中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所/中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的克隆北柴胡转录因子基因BcbZIP179的全长编码序列,原核表达融合蛋白。为进一步研究该基因在北柴胡转录调控中的功能提供理论依据。方法以北柴胡转录组数据为基础,设计特异性引物,PCR扩增BcbZIP179基因的全长编码序列,利用生物信息... 详细信息

目的克隆北柴胡转录因子基因BcbZIP179的全长编码序列,原核表达融合蛋白。为进一步研究该基因在北柴胡转录调控中的功能提供理论依据。方法以北柴胡转录组数据为基础,设计特异性引物,PCR扩增BcbZIP179基因的全长编码序列,利用生物信息学分析软件分析序列特征。利用qPCR方法分析BcbZIP179基因在不同组织器官中的表达及MeJA处理条件下的表达情况。构建原核表达载体,在不同温度和IPTG浓度下,采用2种菌株诱导表达目的蛋白。结果BcbZIP179编码序列全长432 bp,编码144个氨基酸,BcbZIP179受MeJA诱导,在MeJA处理的北柴胡不定根中,处理前24 h内,表达量逐渐升高,随后表达量降低;BcbZIP179在北柴胡的根、茎、叶、花及果实中均有表达,在果实中的表达量最高;利用大肠杆菌原核表达系统,在16℃和37℃不同温度条件下均获得了带有6×His标签的BcbZIP179融合蛋白。结论克隆到了北柴胡中的1个bZIP家族的转录因子基因BcbZIP179,在16℃、IPTG 0.05 mmol·L^(-1)条件下,可获得体外表达的蛋白,为制备抗体、分离互作蛋白和调控靶基因进而研究其功能奠定基础。

关键词：北柴胡 BcbZIP179 基因克隆表达分析原核表达

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沉香醇提物对哮喘小鼠的平喘作用及其机制研究

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中国中药杂志 2021年第16期46卷 4214-4221页

作者：王灿红彭德乾刘洋洋吴玉兰郭鹏魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 海南医学院药学院海南海口571199

沉香记载有"纳气平喘"功效,但其作用机制不清且相关研究报道稀少。为了探究沉香的平喘及其作用机制,该研究采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)+氢氧化铝(Al(OH)3)激发联合OVA滴鼻诱导小鼠哮喘模型,考察通体结香技术产沉香(简称&qu... 详细信息

沉香记载有"纳气平喘"功效,但其作用机制不清且相关研究报道稀少。为了探究沉香的平喘及其作用机制,该研究采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)+氢氧化铝(Al(OH)3)激发联合OVA滴鼻诱导小鼠哮喘模型,考察通体结香技术产沉香(简称"通体沉香")醇提物的平喘作用及机制,比较不同结香方式所产沉香平喘作用差异。首先,通过评价哮喘小鼠的哮喘次数、观察肺组织病理损伤程度及计数外周血炎性细胞白细胞和嗜酸性粒细胞数,评价通体沉香的抗炎平喘作用;其次,通过酶联免疫(enzyme-linked immunoassay, ELISA)法检测小鼠血清中白细胞介素1β(interleukin^(-1)β,IL^(-1)β)、白细胞介素17(interleukin 17,IL^(-1)7)和白细胞介素10(interleukin^(-1)0,IL^(-1)0)的分泌水平,并通过实时定量PCR(Real-time quantitative-PCR, RT-PCR)检测组织中炎症及凋亡相关基因的表达,初步探究其平喘机制。结果显示,通体沉香醇提物能显著减少小鼠的哮喘次数、缓解哮喘小鼠病理损伤程度并改善外周血白细胞数和嗜酸性粒细胞数,降低炎性细胞因子IL^(-1)β和IL^(-1)7水平,升高抗炎细胞因子IL^(-1)0水平,同时下调IL^(-1)R、tumor necrosis factor receptor R (TNFR)、nuclear transcription factor-kappaB (NF-κB)、Bax及caspase-3 mRNA的表达,但对high mobility group box 1 protein B1(HMGB1)、caspase-8和Bcl-2的表达无明显影响,同等剂量下通体沉香醇提物作用优于野生沉香和火烙沉香醇提物。研究表明,通体沉香可显著抗炎平喘,其作用机制可能与抑制炎症和抗凋亡作用有关。

关键词：沉香平喘作用抗炎抗凋亡

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基于SNP位点鉴定砂仁药材物种

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世界科学技术-中医药现代化 2014年第2期16卷 295-300页

作者：焦文静张鹏廖保生王丽丽韩建萍中国医学科学院北京协和医学院/药用植物研究所/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 北京化工大学生命科学与技术学院北京100029

目的:为建立基于单核苷酸多态性(SNP)技术鉴别砂仁3个基原(阳春砂Amomum villosum、海南砂Amomum longiligulare、绿壳砂Amomum villosum ***)的方法,对这3个种共计60份材料ITS2序列进行分析比较。方法:将实验所得砂仁ITS2序列,应用Codo... 详细信息

目的:为建立基于单核苷酸多态性(SNP)技术鉴别砂仁3个基原(阳春砂Amomum villosum、海南砂Amomum longiligulare、绿壳砂Amomum villosum ***)的方法,对这3个种共计60份材料ITS2序列进行分析比较。方法:将实验所得砂仁ITS2序列,应用CodonCode Aligner软件进行序列拼接比对。用MEGA 5.0导出各序列变异位点,并对变异位点进行分析。为验证结果准确性,下载砂仁3个基原GenBank的所有ITS2序列,共计34条,对结果进行验证。结果:砂仁ITS2序列比对后长度为230 bp,3个不同基原在135 bp和199 bp处存在稳定SNP(s)变异位点。结论:本研究开发的两个稳定的SNP(s)位点可以快速准确地鉴定砂仁药材3个基原。

关键词：砂仁 ITS2 SNP位点鉴定

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基于ITS2序列鉴定金樱子及其伪品

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世界科学技术-中医药现代化 2013年第3期15卷 435-440页

作者：焦文静张鹏陈晓辰廖保生王丽丽韩建萍北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的：本文选用金樱子作为研究对象验证DNA条形码鉴定中药材的稳定性及准确性。方法：通过改良的CTAB法提取10份样品的基因组DNA,扩增得到ITS2片段。将得到的片段进行双向测序,运用软件CodonCode Aligner进行拼接,其它6份样品来源于GenB... 详细信息

目的：本文选用金樱子作为研究对象验证DNA条形码鉴定中药材的稳定性及准确性。方法：通过改良的CTAB法提取10份样品的基因组DNA,扩增得到ITS2片段。将得到的片段进行双向测序,运用软件CodonCode Aligner进行拼接,其它6份样品来源于GenBank。将金樱子与混伪品ITS2序列应用MEGA 5.0软件进行序列比对,计算种内、种间距离,构建邻接树（neighbor-joining tree,NJTree）。结果：金樱子药材ITS2序列长度为219~221 bp,存在两个Poly C结构。金樱子种内平均Kimura 2-parameter（K-2-P）遗传距离为0.005,远小于与混伪品的种间平均K-2-P遗传距离0.574。NJ树结果表明金樱子与混伪品分为两枝,Bootstrap支持率为99%,表现出良好的单系性。结论：ITS2序列作为DNA条形码能准确稳定的鉴别金樱子药材,本研究为保证金樱子临床用药安全提供了技术保障。

关键词：金樱子 DNA条形码 ITS2 物种鉴定

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沉香线香燃香调节多神经递质途径的抗焦虑/抑郁作用及机制

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中国新药杂志 2023年第13期32卷 1368-1376页

作者：弓宝王灿红吴玉兰刘洋洋魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室&国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室&濒危药材繁育国家工程实验室

目的:探讨沉香线香(ALI)对小鼠焦虑模型和抑郁模型的作用及其机制。方法:采用间氯苯哌嗪(MCPP)和慢性不可预知性温和刺激(CUMS)法分别制作小鼠焦虑和抑郁模型，观察熏香后模型动物旷场活动(OFT)、明暗箱穿梭(LDT)、悬尾(TST)、游泳(FST... 详细信息

目的:探讨沉香线香(ALI)对小鼠焦虑模型和抑郁模型的作用及其机制。方法:采用间氯苯哌嗪(MCPP)和慢性不可预知性温和刺激(CUMS)法分别制作小鼠焦虑和抑郁模型，观察熏香后模型动物旷场活动(OFT)、明暗箱穿梭(LDT)、悬尾(TST)、游泳(FST)等行为学变化；ELISA法测定海马组织中五羟色胺(5-HT)、谷氨酸(Glu)、伽马氨基丁酸A受体(GABAA)水平；Western Blot法检测颗粒体蛋白(GRN2B)、代谢型谷氨酸受体5抗体(GRM5)、谷氨酸受体1(GluR1)及囊泡谷氨酸转运蛋白1(VGluT1)表达。结果:ALI可降低焦虑模型动物总活动路程和速度(P<0.05),增加静止时间(P<0.05),降低在暗箱中活动路程和速度(P<0.05);增加抑郁模型动物总路程和速度(P<0.05),降低静止时间(P<0.05)和强迫游泳及悬尾不动时间(P<0.05);与焦虑模型组比较，中、高剂量组的GLu水平降低(P<0.05),而GABAA,5-HT水平升高(P<0.05);与抑郁模型组比较，中、高剂量组5-HT和GLu水平升高(P<0.05),GABAA水平降低(P<0.05);ALI熏香吸入能提高焦虑模型动物GRN2B,GRM5,GluR1,VGluT1蛋白表达；可提高抑郁模型动物GRN2B,GluR1,VGluT1蛋白表达，降低GRM5蛋白表达。结论:ALI对焦虑模型和抑郁模型的行为均有改善，其作用机制可能与调控5-HT,GABAA,Glu神经递质水平和影响GRN2B,GRM5,GluR1,VGluT1的蛋白表达有关。

关键词：沉香线香燃香抗抑郁抗焦虑多神经递质

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娑罗子基原物种的DNA条形码鉴定研究

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中草药 2013年第18期44卷 2593-2599页

作者：石召华陈士林姚辉叶利春宋经元关小羽刘享平武汉爱民制药有限公司湖北鄂州436070 湖北省天然组分药物工程技术研究中心湖北鄂州436070 中国中医科学院中药研究所北京100700 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的筛选出适用于鉴定七叶树属药用植物的条形码序列。方法考察了七叶树属10个物种42份样品的核ITS、ITS2与叶绿体psbA-trnH、rbcL、matK序列的PCR扩增和测序效率、种内及种间变异、鉴定效率,对初筛后的序列进行barcoding gap检验及NJ... 详细信息

目的筛选出适用于鉴定七叶树属药用植物的条形码序列。方法考察了七叶树属10个物种42份样品的核ITS、ITS2与叶绿体psbA-trnH、rbcL、matK序列的PCR扩增和测序效率、种内及种间变异、鉴定效率,对初筛后的序列进行barcoding gap检验及NJ树聚类分析。结果 psbA-trnH序列的PCR扩增和测序效率均为100%,种间最小变异大于其种内最大变异,且鉴定效率为候选序列中最高,barcoding gap检验结果表明该序列在种间、种内变异重合比例较小,且NJ树聚类分析结果也表明psbA-trnH序列能够提供充分的辨析效果。结论 psbA-trnH序列能准确鉴定七叶树属药用植物,可作为七叶树属药用植物条形码序列。

关键词：七叶树属 DNA条形码物种鉴定 psbA-trnH rbcL matK

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植物Ⅲ型聚酮合酶研究进展

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中国中药杂志 2018年第13期43卷 2639-2647页

作者：王彬彬魏建和宋振巧高志晖山东农业大学农学院山东泰安271018 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与井发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

聚酮化合物是一大类结构各异并具有不同生物活性的天然产物,具有重要的药用价值。植物Ⅲ型聚酮合酶（polyketide synthases,PKSs）是植物中聚酮化合物生物合成的关键酶,主要通过催化初始酰基底物和二碳酰基单元的乙酰基发生一系列的缩... 详细信息

聚酮化合物是一大类结构各异并具有不同生物活性的天然产物,具有重要的药用价值。植物Ⅲ型聚酮合酶（polyketide synthases,PKSs）是植物中聚酮化合物生物合成的关键酶,主要通过催化初始酰基底物和二碳酰基单元的乙酰基发生一系列的缩合反应合成聚酮化合物骨架结构。该文简要概述了植物Ⅲ型聚酮合酶的催化机制、功能改造、表达调控及其分子进化等方面的研究进展。

关键词： Ⅲ型聚酮合酶酶工程表达调控分子进化

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蛇足石杉HsCAS1基因克隆及序列分析

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世界科学技术-中医药现代化 2012年第1期14卷 1159-1165页

作者：罗红梅张鑫牛云云宋经元陈士林殷秀梅何顺志中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 西南大学园艺园林学院重庆400716 贵阳中医学院药学院贵阳400716

本研究对蛇足石杉(Huperzia serrata)环阿屯醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)基因HsCAS1编码区进行克隆及序列分析。根据本实验室已获得的蛇足石杉转录组数据,从中获得1条具有环氧角鲨烯环化酶保守结构域的编码CAS的转录本,采用RT-... 详细信息

本研究对蛇足石杉(Huperzia serrata)环阿屯醇合成酶(Cycloartenol synthase,CAS)基因HsCAS1编码区进行克隆及序列分析。根据本实验室已获得的蛇足石杉转录组数据,从中获得1条具有环氧角鲨烯环化酶保守结构域的编码CAS的转录本,采用RT-PCR方法获得该基因的编码区序列,并对HsCAS1蛋白进行理化性质、蛋白二级结构及三维结构预测分析。利用实时荧光定量PCR方法检测HsCAS1基因在蛇足石杉的根、茎、叶中的表达情况。序列分析表明,所克隆的HsCAS1基因编码区长为2,271 bp,编码756个氨基酸残基,HsCAS1与紫果冷杉(Abies magnifica)的CAS具有61%的序列相似性。生物信息学预测HsCAS1蛋白含有3个跨膜区,具有萜类环化酶等保守结构域,不含信号肽。HsCAS1在蛇足石杉的根中表达丰度高于茎和叶。本研究在国内外首次获得蛇足石杉HsCAS1基因的编码区序列,为进一步研究HsCAS1在石杉科植物甾醇合成途径中的功能及鉴定酶活性位点奠定基础。

关键词：环阿屯醇合成酶蛇足石杉甾醇次生代谢

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基于COI条形码序列的《中国药典》动物药材鉴定研究

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世界科学技术-中医药现代化 2013年第3期15卷 371-380页

作者：张辉姚辉崔丽娜杜鹤林喆高晓晨郎雪宋经元罗焜石林春陈士林长春中医药大学中医药与生物工程研发中心长春130117 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

药用动物是我国中药资源的重要组成部分,线粒体COI基因被公认为动物界中标准的DNA条形码基因,但利用此技术系统研究药用动物或动物药材鉴定的报道不多。本研究选取药典中45个动物药材,涉及基原物种51种,分析样品COI序列的种内种间变异情... 详细信息

药用动物是我国中药资源的重要组成部分,线粒体COI基因被公认为动物界中标准的DNA条形码基因,但利用此技术系统研究药用动物或动物药材鉴定的报道不多。本研究选取药典中45个动物药材,涉及基原物种51种,分析样品COI序列的种内种间变异情况,barcoding gap,鉴定效率等,考察COI序列鉴定动物药材的有效性和准确性。结果表明,种间变异最小值远大于种内变异最大值,barcoding gap图显示种间变异和种内变异重合较少,鉴定效率较高,除节肢动物门外,在物种水平和属水平上,鉴定效率均为100%,所构建的动物药材及其混伪品的NJ树能很好地区分正品来源与其混伪品。因此COI序列作为DNA条形码适用于药典中动物药材的鉴定。本研究为COI条形码准确鉴定药典中动物药材提供了分子依据,扩充了DNA条形码数据库中药用动物序列,并建立了利用此技术鉴定动物药材的具体技术流程。

关键词：动物药材药典 COI序列 DNA条形码鉴定

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白木香AsMAPK3基因的原核表达及其在洋葱表皮瞬时表达体系中的定位研究

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中草药 2018年第9期49卷 2133-2139页

作者：徐艳红田美慧吕菲菲孙佩文魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 东北林业大学黑龙江哈尔滨150040 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体,诱导重组蛋白正确表达,并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况,为抗体制备准备材料,为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编码序列,... 详细信息

目的构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体,诱导重组蛋白正确表达,并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况,为抗体制备准备材料,为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编码序列,构建重组原核表达载体pET-28a-AsMAPK3,并诱导蛋白表达。克隆AsMAPK3基因全长编码区,构建绿色荧光蛋白(GFP)瞬时表达载体pAN580-AsMAPK3,通过基因枪法转化洋葱表皮,荧光显微镜观察GFP的发光情况。结果含有重组表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)在37℃经0.5 mmol/L异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导4 h后,可获得相对分子质量约为39 000的融合蛋白,该融合蛋白在上清和包涵体中均有表达。瞬时转化洋葱表皮的GFP荧光观察发现,AsMAPK3主要在细胞核和质膜表达。结论成功实现了AsMAPK3的体外表达和纯化,明确了AsMAPK3的亚细胞定位,为后续开展其功能研究奠定了基础。

关键词：白木香 MAPK 原核表达瞬时表达大肠杆菌

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