检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2023年第13期54卷 4367-4376页

作者：朋冬琴刘录祥郭会君李玉婷栗孟飞郭欣慰魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 甘肃农业大学生命科学学院干旱生境作物学国家重点实验室甘肃兰州730070 中国农业科学院作物科学研究所北京100081

辐射诱变育种是利用物理方法加速生物体自然变异、从而快速获得性状优异的新种质、并通过严格选育形成性状稳定新品种的现代育种技术之一,其不涉及外源基因导入,并可大幅缩短育种周期。通过对^(60)Co-γ辐射、重离子辐射、常温常压等离... 详细信息

辐射诱变育种是利用物理方法加速生物体自然变异、从而快速获得性状优异的新种质、并通过严格选育形成性状稳定新品种的现代育种技术之一,其不涉及外源基因导入,并可大幅缩短育种周期。通过对^(60)Co-γ辐射、重离子辐射、常温常压等离子体、中波红斑效应紫外线、激光辐射和空间诱变6种主要辐射诱变育种方法的基本原理、特点、生物学效应及在中药材育种中的应用进行综述,并探讨了相关辐射诱变技术在中药材领域的安全性和应用前景,为中药材辐射诱变育种相关研究与应用提供借鉴和参考。

关键词：辐射诱变中药材育种安全性诱变效应变异次生代谢

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八个绿色组织特异性启动子的克隆及活性比较

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分子植物育种 2023年

作者：李姬霜薛旭徐静吴斌中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所濒危药材繁育国家工程实验室中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京市海淀区植物组织培养技术实验室

为了精准调控外源基因在特定的组织或器官中进行表达，减少不必要的资源浪费，同时提高植物光合途径的能量利用效率，增加生物固定总量，本研究查阅文献并从NCBI下载了来自6种植物的8个不同的绿色组织特异性启动子序列。通过PCR扩增得... 详细信息

为了精准调控外源基因在特定的组织或器官中进行表达，减少不必要的资源浪费，同时提高植物光合途径的能量利用效率，增加生物固定总量，本研究查阅文献并从NCBI下载了来自6种植物的8个不同的绿色组织特异性启动子序列。通过PCR扩增得到这些启动子后将其分别连至pTOPO-Blunt载体上进行测序验证；接着使用无缝克隆法或者酶切法构建了pCAMBIA2300+启动子+绿色荧光蛋白(GFP)表达载体；再将重组载体热击转化根癌农杆菌EHA105，并使用农杆菌介导的瞬时法转化烟草；最后通过观察GFP荧光强度来比较8个启动子的活性强弱。研究结果表明：来自番薯的Ibrbcs和来自牵牛的PNZIP启动子的荧光强度最接近CaMV 35S启动子，而来自玉米的PEPC启动子荧光最弱，启动子活性强弱顺序依次为：CaMV 35S>Ibrbcs>PNZIP>Ntrbcs>D540、Cmrbcs、Psak>Rca>PEPC。多个绿色组织特异性启动子的克隆及活性验证，为后续在绿色组织中实现外源多基因表达提供了理论依据和材料基础。可按照代谢途径中上游至下游基因绑定的启动子整体为由强至弱的顺序等原则，将可选的启动子调控元件协同使用不同终止子，与相关外源基因共同组成多个表达框，以构建多基因表达载体，进而完成转基因操作。本研究为相关植物基因工程试验中外源基因在绿色组织中的协同表达提供了良好基础。

关键词：启动子绿色组织特异性 GFP 基因克隆活性比较

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60Co-γ辐射对北柴胡的诱变效应研究

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甘肃农业大学学报 2024年

作者：朋冬琴郭欣慰栗孟飞魏建和甘肃农业大学生命科学技术学院/农学院/生境作物学国家重点实验室中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所/中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室

【目的】探明不同剂量的60Co-γ辐射对不同品系北柴胡种子的诱变效应。【方法】采用60Co-γ射线对不同品系北柴胡干种子进行不同剂量(0、50、100、150、200和250 Gy)辐射处理，考察种子出苗率、存活率及株高等生物学特性。【结果】剂量... 详细信息

【目的】探明不同剂量的60Co-γ辐射对不同品系北柴胡种子的诱变效应。【方法】采用60Co-γ射线对不同品系北柴胡干种子进行不同剂量(0、50、100、150、200和250 Gy)辐射处理，考察种子出苗率、存活率及株高等生物学特性。【结果】剂量范围内，sm2-36-2种子出苗率在150 Gy的辐射下有所升高，存活率随辐射剂量升高而降低，株高在100～250 Gy辐射下无显著差异；sd9-21-20种子出苗率随辐射剂量升高而降低，存活率在50～100 Gy辐射下无显著差异，株高在200～250 Gy辐射下无显著差异；st2-9-1种子出苗率和存活率随辐射剂量升高而降低，株高在150 Gy辐射下相较于其他辐射剂量显著升高。【结论】本研究首次使用60Co-γ射线对北柴胡进行辐射诱变，发现辐射诱变效应与剂量及品系特性相关，不同品系对辐射的敏感性差异明显。通过计算部分品系的半致死剂量(semi-lethaldose，LD50)并提出进一步研究方向，为提高北柴胡的辐射诱变育种效率提供了基础。

关键词： Co-γ辐射北柴胡辐射剂量诱变效应

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青梅达玛树脂的化学成分研究

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中药材 2024年第11期47卷 2751-2756页

作者：冯瑞婕陈德力魏建和杨云中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所/中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所/海南省南药资源保护与开发重点实验室/国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 海南医学院药学院海南海口571199

目的:研究青梅达玛树脂的化学成分及降糖活性。方法:采用多种色谱技术对青梅达玛树脂的甲醇提取物进行分离纯化,通过各种现代谱学技术对化合物进行结构鉴定。采用葡萄糖氧化法检测分离得到的化合物对HepG2细胞的葡萄糖消耗。结果:从青... 详细信息

目的:研究青梅达玛树脂的化学成分及降糖活性。方法:采用多种色谱技术对青梅达玛树脂的甲醇提取物进行分离纯化,通过各种现代谱学技术对化合物进行结构鉴定。采用葡萄糖氧化法检测分离得到的化合物对HepG2细胞的葡萄糖消耗。结果:从青梅达玛树脂的甲醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为:28-hydroxy-20-taraxastene-3-one(1)、3-羰基齐墩果酸(2)、3-羰基熊果酸(3)、28-hydroxy-β-amyrone(4)、28-norolean-12-en-3β,17β-diol(5)、28-nor-urs-12-ene-3β,17β-diol(6)、asiatic acid(7)、28-norlup-20(29)-ene-3β,17β-diol(8)、28-hydroxylup-20(29)-en-3-one(9)、litseachromolaevane A(10)、17α-hydroxy-28-nor-18α(H)-lup-20(29)-en-3-one(11)。化合物3、5~7、10能显著促进HepG2细胞对葡萄糖的消耗(P<0.05)。结论:其中,化合物1和11为新天然产物,化合物4~6、9、10为首次从达玛树脂中分离得到。化合物3、5~7、10具有一定的降糖活性。

关键词：青梅达玛树脂化学成分三萜降糖活性

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基于毛状根培养体系的甘草转运蛋白基因GuRTNLB1功能分析

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分子植物育种 2022年

作者：谢真真薛旭李姬霜陈彩霞吴斌中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室

为探究甘草转运蛋白基因reticulon-like protein B1 (GuRTNLB1)对甘草酸合成途径下游关键酶基因的调控作用，本研究基于甘草转录组数据，通过RT-PCR技术得到了GuRTNLB1基因CDS全长，使用无缝克隆法将其构建到携带CaMV 35S启动子的植物...

为探究甘草转运蛋白基因reticulon-like protein B1 (GuRTNLB1)对甘草酸合成途径下游关键酶基因的调控作用，本研究基于甘草转录组数据，通过RT-PCR技术得到了GuRTNLB1基因CDS全长，使用无缝克隆法将其构建到携带CaMV 35S启动子的植物表达载体pCAMBIA2300上，然后热击转化发根农杆菌ACCC10060，用于侵染甘草胚轴，经过共培养和抗生素筛选培养，获得过量表达GuRTNLB1基因的甘草毛状根根系，利用PCR法验证转基因毛状根，并利用RT-qPCR法测定甘草毛状根根系中甘草酸代谢途径下游酶基因的表达水平。PCR扩增结果显示，得到长度约760、580 bp的基因片段，分别与甘草GuRTNLB1基因和发根农杆菌rolC基因长度一致，表明成功构建了甘草转基因毛状根培养体系；RT-qPCR结果显示，过表达GuRTNLB1增强了甘草酸途径下游关键酶基因的表达。本研究为解析转运蛋白基因GuRTNLB1调控甘草酸合成的分子机制提供了理论依据，筛选出2个过量表达GuRTNLB1基因甘草毛状根根系后续也可用于扩大培养，为离体提高甘草酸含量奠定良好的基础。

关键词：

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结合非靶向代谢组学和指纹图谱对通体结香技术产沉香与野生沉香化学成分的比较分析

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中草药 2022年第18期53卷 5625-5635页

作者：郁萌侯文成冯剑陈兰杨云刘洋洋魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的系统全面分析比较通体结香技术产沉香(简称通体香)与野生沉香化学成分,为通体结香技术进一步的应用和推广提供科学可靠的依据。方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)结合非靶向代... 详细信息

目的系统全面分析比较通体结香技术产沉香(简称通体香)与野生沉香化学成分,为通体结香技术进一步的应用和推广提供科学可靠的依据。方法采用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF-MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)结合非靶向代谢组学和指纹图谱,对通体香与野生沉香的乙醇提取物和挥发性成分进行分析。结果 16批通体香与16批野生沉香的共有成分相同,但通体香指纹图谱相似度较高,且4个倍半萜、3个小分子芳香物质和8个2-(2-苯乙基)色酮等共17个共有成分在通体香中含量较高。结论通体香和野生沉香主要化学成分组成相同,但不同批次间通体香的质量更稳定。

关键词：沉香通体结香技术 2-(2-苯乙基)色酮非靶向代谢组学指纹图谱 2,4-二叔丁基苯酚 6,7-二甲基-1,2,3,5,8,8a-六氢萘去氢蜂斗菜酮

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6种代表性沉香精油的化学成分及抗氧化、抗炎活性比较分析

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中草药 2022年第18期53卷 5720-5730页

作者：陈细钦王灿红冯剑陈德力魏建和刘洋洋中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的比较不同来源、不同提取方式的6种沉香精油化合物组成、抗氧化能力及抗炎活性的差异。方法采用气相色谱-飞行时间质谱联用仪(gas chromatography-time of flight mass spectrometry,GC-TOF MS)对6种沉香精油的化学成分进行分析,... 详细信息

目的比较不同来源、不同提取方式的6种沉香精油化合物组成、抗氧化能力及抗炎活性的差异。方法采用气相色谱-飞行时间质谱联用仪(gas chromatography-time of flight mass spectrometry,GC-TOF MS)对6种沉香精油的化学成分进行分析,并测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)与2,2-氮杂双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2-azabis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt,ABTS]自由基的能力,考察其对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7活力的影响。结果从通体香水蒸气蒸馏精油(TTS)、通体香超临界萃取精油(TTC)、板头香水蒸气蒸馏精油(BTS)、板头香超临界萃取精油(BTC)、奇楠沉香水蒸气蒸馏精油(QNS)和奇楠沉香超临界萃取精油(QNC)中鉴定出的化合物数量分别为48、55、59、71、72和35种,所含香味物质小分子芳香物质及倍半萜类成分相对含量之和分别为81.42%、87.84%、89.03%、62.05%、63.83%和28.36%,所含2-(2-苯乙基)色酮类化合物相对含量分别为0、0、0.25%、22.42%、17.48%、60.42%。6种沉香精油均具有清除DPPH和ABTS自由基能力,且质量浓度在0.5~5 mg/m L与自由基清除能力均呈正相关。3种水蒸气蒸馏沉香精油(BTS、TTS、QNS)对LPS诱导RAW264.7细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)分别为18.61、30.30、18.05μg/m L,而3种超临界CO_(2)萃取沉香精油(BTC、TTC、QNC)的IC50值分别为41.98、38.45、24.50μg/m L。结论超临界萃取沉香精油同水蒸气蒸馏沉香精油化合物组成相差较大,其能够提取出更多的脂肪酸类和色酮类化合物;板头香和通体香采用同一提取方法所得精油化学成分相似,而奇楠沉香中含有更多含量的香味物质和2-(2-苯乙基)色酮类化合物。3种超临界萃取沉香精油清除DPPH自由基能力均强于水蒸气蒸馏沉香精油,而抗炎活性则相反,且3种沉香来源中,奇楠沉香精油抗炎能力最佳。

关键词：沉香奇楠精油化学成分抗氧化能力抗炎活性 2-(2-苯乙基)色酮

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沉香中倍半萜类化合物与生物活性研究进展及其质量标志物预测分析

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中草药 2022年第4期53卷 1191-1209页

作者：王云云侯文成魏建和刘洋洋中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

沉香为名贵药材和香料,倍半萜类化合物是沉香的特征成分和主要活性成分,根据其分子骨架可将沉香倍半萜类化合物分为8类。系统地总结了从沉香中分离出的倍半萜类化合物,并对其调节中枢神经系统、抗炎、抗肿瘤细胞毒、抑菌等活性的研究现... 详细信息

沉香为名贵药材和香料,倍半萜类化合物是沉香的特征成分和主要活性成分,根据其分子骨架可将沉香倍半萜类化合物分为8类。系统地总结了从沉香中分离出的倍半萜类化合物,并对其调节中枢神经系统、抗炎、抗肿瘤细胞毒、抑菌等活性的研究现状进行综述,并在此基础上结合质量标志物(quality marker,Q-Marker)的核心概念,从生源途径、传统药效、传统药性和化学成分等方面对沉香的Q-Marker进行预测分析,α-沉香呋喃、β-沉香呋喃、沉香螺旋醇可作为沉香的Q-Marker,为建立和完善沉香质量标准提供依据,以期为沉香质量的深入研究提供参考。

关键词：沉香质量标志物倍半萜 β-沉香呋喃 α-沉香呋喃沉香螺旋醇

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不同程度慢性脑低灌注导致小鼠脑白质损伤和认知功能改变的研究

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中南药学 2023年第7期21卷 1720-1725页

作者：滕李利钟奕戚舜尧孙乐马培许利嘉肖培根中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 国家教育部中草药物质基础与资源利用重点实验室北京100193

目的探究小鼠颈总动脉狭窄(BCAS)模型中不同微线圈长度对小鼠脑白质影响,并初步探究对小鼠认知功能和小胶质细胞的影响。方法用不同长度的微线圈制备BCAS模型小鼠,5周后通过各组小鼠的脏器比评估模型对脏器的影响,用旷场、新物体识别、... 详细信息

目的探究小鼠颈总动脉狭窄(BCAS)模型中不同微线圈长度对小鼠脑白质影响,并初步探究对小鼠认知功能和小胶质细胞的影响。方法用不同长度的微线圈制备BCAS模型小鼠,5周后通过各组小鼠的脏器比评估模型对脏器的影响,用旷场、新物体识别、水迷宫等3个行为学实验评估各组小鼠的学习认知能力,用LFB染色及免疫组化评估模型小鼠脑白质损伤及小胶质细胞功能的改变,用实时荧光定量(qRT-PCR)检测小鼠脑白质中Il-1β、Tnf-α、Bdnf、Gdnf的表达。结果BCAS模型并未对小鼠脏器发育造成明显影响,4.5 mm和5.5 mm微线圈显著影响慢性脑低灌注情况,造成明显的学习行为认知障碍。LFB染色显示脑白质组织疏松程度、纤维排列情况和空泡现象随线圈变长而加重。iba-1免疫组化显示阳性小胶质细胞数随线圈变长而增多。qRT-PCR结果显示随线圈变长,炎症因子Il-1β、Tnf-α在基因水平的表达上升,而神经营养因子Bdnf、Gdnf在基因水平的表达下降。结论4.5 mm的弹簧微线圈能够造成C57BL/6J小鼠适中的脑白质损伤,引起认知功能改变和小胶质活化。该模型适用于进一步研究慢性脑低灌注引起血管性认知障碍的发病机制及药效评估。

关键词：慢性脑低灌注脑白质认知损伤小胶质细胞

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白木香转录因子AsNAC2的克隆及表达分析

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中草药 2022年第15期53卷 4807-4812页

作者：张玉秀刘培卫吕菲菲杨云徐艳红高志晖魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

目的对珍稀南药沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis As NAC2转录因子进行分子克隆,并对其进行生物信息学和表达模式分析。方法以白木香茎的总RNA反转录的c DNA为模板,采用PCR技术获取基因编码序列(coding sequence,CDS)全长;利用... 详细信息

目的对珍稀南药沉香基原植物白木香Aquilaria sinensis As NAC2转录因子进行分子克隆,并对其进行生物信息学和表达模式分析。方法以白木香茎的总RNA反转录的c DNA为模板,采用PCR技术获取基因编码序列(coding sequence,CDS)全长;利用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域和亚细胞定位等特性;运用DNAMAN8.0和MEGA6.0等软件分别进行多序列比对和进化关系分析;利用qRT-PCR技术检测AsNAC2基因在不同组织和伤害胁迫下的表达特性。结果克隆获得AsNAC2基因(GenBank注册号MT130201),开放阅读框(openreadingframe,ORF)全长864bp,编码1条由287个氨基酸组成的弱酸性的稳定的亲水性蛋白,该蛋白定位在细胞核中,不存在跨膜结构域。序列比对和系统进化树分析显示,As NAC2蛋白N端具有典型的NAM结构域,与锦葵目中的可可、哥伦比亚锦葵和榴莲NAC 2-like蛋白亲缘关系近,属于NAC转录因子家族中的ATAF亚组。qRT-PCR结果显示,AsNAC2基因主要在健康白木香的根和茎中表达,全断干伤害可显著诱导茎中AsNAC2基因表达量的上调,在2 h达到峰值,此后缓慢下降,至48 h基本恢复正常。结论首次在白木香中克隆和鉴定了AsNAC2基因,该基因易受伤害诱导表达,且在伤害早期相对应。

关键词：白木香转录因子 NAC 克隆表达分析

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