检索结果-内蒙古大学图书馆

白木香AsMAPK3基因的原核表达及其在洋葱表皮瞬时表达体系中的定位研究

中草药 2018年第9期49卷 2133-2139页

作者：徐艳红田美慧吕菲菲孙佩文魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 东北林业大学黑龙江哈尔滨150040 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

目的构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体,诱导重组蛋白正确表达,并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况,为抗体制备准备材料,为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编码序列,... 详细信息

目的构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体,诱导重组蛋白正确表达,并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况,为抗体制备准备材料,为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编码序列,构建重组原核表达载体pET-28a-AsMAPK3,并诱导蛋白表达。克隆AsMAPK3基因全长编码区,构建绿色荧光蛋白(GFP)瞬时表达载体pAN580-AsMAPK3,通过基因枪法转化洋葱表皮,荧光显微镜观察GFP的发光情况。结果含有重组表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)在37℃经0.5 mmol/L异丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导4 h后,可获得相对分子质量约为39 000的融合蛋白,该融合蛋白在上清和包涵体中均有表达。瞬时转化洋葱表皮的GFP荧光观察发现,AsMAPK3主要在细胞核和质膜表达。结论成功实现了AsMAPK3的体外表达和纯化,明确了AsMAPK3的亚细胞定位,为后续开展其功能研究奠定了基础。

关键词：白木香 MAPK 原核表达瞬时表达大肠杆菌

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白木香2种外植体的组织培养

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热带作物学报 2022年第7期43卷 1467-1476页

作者：张燕孟慧吕菲菲魏建和樊小红何欣袁白雪陈波杨云中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所/海南省南药资源保护与开发重点实验室/国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所/中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室/濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

沉香是国际上极负盛名的药用和香料资源之一。在亚洲许多国家,沉香产业既是传统行业也是发展迅猛的新兴产业。沉香优良种质的大规模应用对沉香产业的可持续发展具有重大意义。因此优良沉香种质资源是近年沉香产业关注的重点和热点,但一... 详细信息

沉香是国际上极负盛名的药用和香料资源之一。在亚洲许多国家,沉香产业既是传统行业也是发展迅猛的新兴产业。沉香优良种质的大规模应用对沉香产业的可持续发展具有重大意义。因此优良沉香种质资源是近年沉香产业关注的重点和热点,但一些优良种质的品质特性无法通过有性繁殖遗传,大规模繁育存在技术障碍。植物组织培养技术在品种优良性状保持、种子资源保存、快速繁殖等方面具有非常突出的优越性,被广泛应用于中药资源保护和中药产业发展。为建立工业化生产的沉香广谱再生体系,本文以白木香无菌苗和成龄植株的枝条为材料从外植体消毒、丛生芽诱导和生根培养三方面进行组织培养研究。结果表明,通过0.1%多菌灵溶液浸泡3 min,流动水冲洗3 h处理,对采摘自大田的白木香枝条有较好的除菌效果。0.1%升汞溶液消毒6~8 min,可有效保持外植体的成活率。在培养基中适当添加灭菌剂也能有效控制材料染菌。无菌苗茎段丛生芽诱导较易,大田枝条的丛生芽诱导较难。WPM+20 g/L蔗糖+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA(G_(4))有利于无菌苗的丛生芽诱导;1/2 MS+25 g蔗糖+2 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA(I_(3)),1/4 MS+20 g/L蔗糖+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA(J_(2))和WPM+20 g蔗糖+1 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA(K_(2))有利于成龄植株枝条外植体的丛生芽诱导,将膨大的丛生芽团切割后转接于不含植物生长调节剂的WPM培养基中可促进丛生芽伸长。WPM培养基中添加10~20 g/L蔗糖,并加入0.1~0.5 mg/L NAA可诱导无菌苗和茎段外植体的新芽生根。本研究以沉香2种外植体进行组织培养,成功获得再生植株,为沉香优良种质的无性繁殖提供技术参考。

关键词：白木香组织培养外植体消毒丛生芽诱导生根培养

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通体结香技术产沉香的2-(2-苯乙基)色酮类化合物及其抗炎活性研究

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天然产物研究与开发 2018年第5期30卷 789-794页

作者：刘洋洋陈德力郑威余章昕魏建和中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口570311 中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

对通体结香技术诱导白木香形成的沉香化学成分及其抗炎活性进行研究。采用液相和色谱技术进行分离纯化,从沉香中得到10个2-(2-苯乙基)色酮类化合物,通过理化常数和波谱分析分别鉴定为:2-(2-phenylethyl)chromone(1)、6-methoxy-2-(2-phe... 详细信息

对通体结香技术诱导白木香形成的沉香化学成分及其抗炎活性进行研究。采用液相和色谱技术进行分离纯化,从沉香中得到10个2-(2-苯乙基)色酮类化合物,通过理化常数和波谱分析分别鉴定为:2-(2-phenylethyl)chromone(1)、6-methoxy-2-(2-phenylethyl)chromone(2)、5-hydroxy-6-methoxy-2-(2-phenylethyl)chromone(3)、6,7-dimethoxy-2-[2-(4'-methoxyphenyl)ethyl]chromone(4)、7-Hydroxy-6-methoxy-2-[2-(4'-methoxyphenyl)ethyl]chromone(5)、2-[2-(4'-methoxyphenyl)ethyl]chromone(6)、6,7-dimethoxy-2-[2-(3'-hydroxy-4'-methoxyphenyl)ethyl]chromone(7)、6,7-dimethoxy-2-(2-phenyl ethyl)chromone(8)、6,8-dihydroxy-2-[2-(3'-hydroxy-4'-methoxyphenyl)ethyl]chromone(9)、6-hydroxy-2-[2-(4'-methoxyphenyl)ethyl]chromone(10)。结合脂多糖介导RAW264.7细胞模型评价其抗炎活性。其中,化合物2~4和10具有显著的抗炎活性,IC50值分别为5.31±0.75,5.57±0.62,0.57±0.02,3.78±0.64μM。化合物5为首次从白木香产沉香中分离得到,所有化合物均为首次从通体结香技术所产沉香中所得,为其品质评价提供了基础依据。

关键词：通体结香技术 2-(2-苯乙基)色酮沉香抗炎活性

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沉香熏香吸入抗焦虑、抗抑郁作用及其机制研究

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中国中药杂志 2023年第4期48卷 1023-1031页

作者：弓宝王灿红吴玉兰刘洋洋魏建和中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所海南分所、海南省南药资源保护与开发重点实验室、国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所、中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室、濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心广东茂名525099

采用间氯苯哌嗪(m-chloropheniperazine,MCPP)和慢性不可预知性温和刺激(chronic unpredictable mild stimulation,CUMS)分别制造小鼠焦虑模型和抑郁模型,通过观察旷场活动实验(OFT)、明暗箱穿梭实验(LDE)、悬尾实验(TST)、游泳实验(FST)等行为学变化,考察沉香挥发油(agarwood essential oil,AEO)、沉香香粉(agarwood fragrant powder,AFP)、沉香线香(agarwood line incense,ALI)熏香吸入抗焦虑和抗抑郁作用;采用ELISA法测定小鼠海马组织中五羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、谷氨酸(glutamic acid,Glu)、伽马氨基丁酸(γ-aminobutyric acid A receptor,GABAA)神经递质水平,同时采用蛋白印迹法(Western blot)观察对谷氨酸能系统代谢和转运相关蛋白谷氨酸受体1(glutamate receptor 1,GluR1)及囊泡谷氨酸转运蛋白1(vesicular glutamate transporter type 1,VGluT1)蛋白表达的影响,探究沉香熏香吸入抗焦虑和抗抑郁的作用机制。行为学数据显示,与焦虑模型组比较,AEO、AFP、ALI可显著减少动物运动总路程(P<0.05),降低运动速度(P<0.05),延长静止时间(P<0.05),降低焦虑模型动物在暗箱中活动路程和速度(P<0.05);与抑郁模型组比较,AEO、AFP、ALI可增加模型动物活动总路程和平均速度(P<0.05),减少静止时间(P<0.05),减少强迫游泳和悬尾不动时间(P<0.05);递质调控方面,AEO、AFP、ALI均可降低焦虑模型动物的Glu水平(P<0.05),增加GABAA、5-HT递质水平(P<0.05);AEO、AFP、ALI均可提高抑郁模型动物5-HT的水平(P<0.05),降低GABAA、Glu的水平(P<0.05);同时AEO、AFP、ALI均能提高焦虑模型和抑郁模型动物海马体中GluR1、VGluT1蛋白表达(P<0.05)。结果说明,AEO、AFP、ALI熏香均有显著的抗焦虑、抗抑郁作用,其作用机制可能与调控神经递质分泌及受体及转运体蛋白的表达有关。

关键词：沉香挥发油沉香香粉沉香线香抗抑郁抗焦虑

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植物Ⅲ型聚酮合酶研究进展

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中国中药杂志 2018年第13期43卷 2639-2647页

作者：王彬彬魏建和宋振巧高志晖山东农业大学农学院山东泰安271018 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与井发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311

聚酮化合物是一大类结构各异并具有不同生物活性的天然产物,具有重要的药用价值。植物Ⅲ型聚酮合酶（polyketide synthases,PKSs）是植物中聚酮化合物生物合成的关键酶,主要通过催化初始酰基底物和二碳酰基单元的乙酰基发生一系列的缩... 详细信息

聚酮化合物是一大类结构各异并具有不同生物活性的天然产物,具有重要的药用价值。植物Ⅲ型聚酮合酶（polyketide synthases,PKSs）是植物中聚酮化合物生物合成的关键酶,主要通过催化初始酰基底物和二碳酰基单元的乙酰基发生一系列的缩合反应合成聚酮化合物骨架结构。该文简要概述了植物Ⅲ型聚酮合酶的催化机制、功能改造、表达调控及其分子进化等方面的研究进展。

关键词： Ⅲ型聚酮合酶酶工程表达调控分子进化

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2020年版《中国药典》植物药材采收期标准情况分析及建议

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中国中药杂志 2022年第3期47卷 846-852页

作者：蒋洁梅郭巧生金江群田婷刘杨王秋玲魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 南京农业大学中药材研究所江苏南京210095 重庆市药物种植研究所重庆408435

采收期标准的完善是中药材质量控制的关键环节之一。该文对2020年版《中国药典》(一部)植物药材的采收期标准收录情况进行统计分析,结合本草记载及现代研究文献分析采收期标准存在的问题,提出相应的建议,为标准提升提供参考。统计得到,... 详细信息

采收期标准的完善是中药材质量控制的关键环节之一。该文对2020年版《中国药典》(一部)植物药材的采收期标准收录情况进行统计分析,结合本草记载及现代研究文献分析采收期标准存在的问题,提出相应的建议,为标准提升提供参考。统计得到,499种植物药材中,486种有采收期标准,占97.4%;13种药材无采收期标准。只有银柴胡1种药材有采收年限标准;233种药材同时有采收季节和采收物候期标准,占46.7%;237种只规定了采收季节,占47.5%;15种只规定了采收物候期,占3.0%。222种主要来源于栽培以及51种野生与栽培来源共存的植物药材中,仅11种提及栽培品采收期,且仅银柴胡对野生品及栽培品的采收期标准进行区分描述。不同药用部位植物药材的采收期标准存在一定规律。分析采收期标准存在的问题主要有:(1)13种植物药材无采收期标准;(2)几乎全部人工栽培多年生药材的采收期标准无采收年限;(3)250种植物药材采收期标准没有物候期;(4)栽培品与野生品采收期标准的区分不明确;(5)26种全年均可采收的植物药材采收期标准缺乏依据。建议针对以上问题,加强基础研究,尽快提高完善采收期标准。

关键词：中国药典植物药材采收期质量

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基于网络药理学的2-(2-苯乙基)色酮类成分潜在作用靶点及作用机制预测

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世界科学技术-中医药现代化 2021年第7期23卷 2170-2180页

作者：肖梦君高志晖王灿红魏建和中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所\中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室\濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所海南分所\海南省南药资源保护与开发重点实验室\国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口570311

目的基于网络药理学方法预测2-(2-苯乙基)色酮类化合物的潜在作用靶点及可能干预疾病的作用机制。方法通过CNKI、Elsevier、Pub Med等数据库检索有生物活性的2-(2-苯乙基)色酮化合物,基于Swiss ADME平台进行ADME筛选;利用Swiss Target P... 详细信息

目的基于网络药理学方法预测2-(2-苯乙基)色酮类化合物的潜在作用靶点及可能干预疾病的作用机制。方法通过CNKI、Elsevier、Pub Med等数据库检索有生物活性的2-(2-苯乙基)色酮化合物,基于Swiss ADME平台进行ADME筛选;利用Swiss Target Prediction获得化合物的作用靶点;运用Metascape平台分析靶点富集的疾病类型、生物过程及通路;使用Cytoscape 3.8构建"活性化合物-靶点-疾病"网络图;通过Auto Dock进行分子对接验证。结果最终获得72个活性化合物,对应292个靶点,可能作用于抑郁、肿瘤、高血压等多种疾病,主要富集通路有与神经系统相关的神经活性配体-受体互作、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)能突触等;与肿瘤相关的癌症通路、细胞周期等;与炎症免疫相关的TRP通道的炎症介质调节、IL-17信号通路等。核心靶点有HTR2B、HTR3A、ABCG2、PTGS2、DRD2、COMT等,分子对接验证显示结合能均小于-7.0 k J·mol^(-1),化合物与靶点的结合活性较好。结论本研究表明2-(2-苯乙基)色酮类化合物可能对神经精神类疾病、肿瘤、炎症等有干预治疗作用,体现了该类化合物多靶点、多通路、多功效的特点,为系统开展其药效及作用机制研究提供了参考。

关键词： 2-(2-苯乙基)色酮类化合物网络药理学潜在作用靶点干预疾病

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沉香线香燃香吸入助睡眠作用及机制探究

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世界科学技术-中医药现代化 2022年第4期24卷 1567-1574页

作者：弓宝王灿红王新腾吴玉兰魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所/海南省南药资源保护与开发重点实验室&国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所/中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室&濒危药材繁育国家工程实验室北京10019

目的探究沉香线香熏香助睡眠作用及其作用机制。方法实验动物随机分为空白对照组、氯苯丙氨酸模型组、地西泮对照组(2.5 mg·kg^(-1))及熏香吸入低剂量组(0.25 g·kg^(-1))、中剂量组(0.5 g·kg^(-1))、高剂量组(1.0 g·... 详细信息

目的探究沉香线香熏香助睡眠作用及其作用机制。方法实验动物随机分为空白对照组、氯苯丙氨酸模型组、地西泮对照组(2.5 mg·kg^(-1))及熏香吸入低剂量组(0.25 g·kg^(-1))、中剂量组(0.5 g·kg^(-1))、高剂量组(1.0 g·kg^(-1));采用自制熏香仪熏点吸入的给药方法,1次/天,1 h/次,连续7天。观察沉香线香熏点吸入后对睡眠的影响;观察小鼠行为学变化并进行评价;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定小鼠脑内伽马氨基丁酸(GABAA)、谷氨酸(Glu)、五羟色胺(5-HT)、腺苷(AD)等递质及对GABAA/Glu值的影响;采用免疫印迹法(Western Blot)检测对谷氨酸能系统代谢和转运相关蛋白——谷氨酸受体(GluR1)及囊泡谷氨酸转运蛋白(VGluT1)表达的影响。结果在一定剂量下,沉香线香熏香吸入可显著提高入睡效率和时长(P<0.05),同时减少其自主活动时间(P<0.05);熏香组可显著升高5-HT、Glu、GABAA及腺苷分泌水平(P<0.01或P<0.05),同时上调GABAA/Glu的比值(P<0.01或P<0.05);沉香线香熏香还可显著升高海马组织中GluR1及VGluT1相关蛋白的表达。结论沉香线香熏香吸入可显著抑制失眠小鼠的自主活动,较好改善睡眠状况,作用机制可能与调节脑内5-HT递质含量、调控GABA-Glu分泌平衡及Glu合成代谢和转运有关。

关键词：沉香线香熏香吸入助睡眠 GABAA/Glu平衡

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基于ISSR技术的白木香奇楠种质遗传多样性分析

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分子植物育种 2021年第15期19卷 5204-5212页

作者：张玉秀杨云吕菲菲康勇刘洋洋陈旭玉刘培卫魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京100193

本研究采用ISSR分子标记技术分析白木香奇楠种质的遗传多样性和亲缘关系。以4种常见的奇楠种质的16个居群为试验材料,普通白木香为对照,利用筛选出的10条ISSR引物进行PCR扩增,利用PopGene 32软件对不同居群的ISSR标记结果进行多态性分析... 详细信息

本研究采用ISSR分子标记技术分析白木香奇楠种质的遗传多样性和亲缘关系。以4种常见的奇楠种质的16个居群为试验材料,普通白木香为对照,利用筛选出的10条ISSR引物进行PCR扩增,利用PopGene 32软件对不同居群的ISSR标记结果进行多态性分析,通过NTsys 2.1软件的UPGMA方法聚类并构建亲缘关系树。研究结果显示:(1)10条ISSR引物共扩增出93条DNA条带,其中多态性条带77条,多态性程度达82.8%;(2)奇楠种质居群内的多态性位点百分率(PPB)、有效等位基因数(Ne)和Shannon's指数(I)等均显著低于普通白木香;奇楠居群间遗传分化系数(Gst)为0.8154,居群间每代个体的基因流系数(Nm)为0.1132;(3)除种质T41外,其他奇楠种质不同居群间的遗传一致性高、遗传距离小,在聚类图上各自聚为一支。白木香奇楠种质在物种水平上具有较高的遗传多样性,而在居群水平上的遗传多样性水平偏低,遗传变异较少。居群间(种质间)存在较大的遗传变异,且居群间基因流动性水平低。从特异性、一致性和稳定性来看,A11、R21和B31更符合林木新品种审定的要求。本研究的开展为白木香奇楠品种的引种栽培及良种选育提供了一定的分子生物学依据。

关键词：白木香奇楠 ISSR 遗传多样性

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沉香醇提物对大鼠气滞血瘀心肌缺血的保护作用

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药物评价研究 2019年第7期42卷 1279-1285页

作者：王灿红彭德乾刘洋洋余章昕郭鹏魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室和国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海南海口570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室和濒危药材繁育国家工程实验室北京100193 海南医学院药学院海南海口571199

目的研究沉香醇提物对大鼠气滞血瘀心肌缺血损伤的保护作用及机制。方法大鼠随机分成6组:对照组、模型组、野生沉香醇提物(2.84 g/kg)组和通体沉香醇提物低、中、高剂量(0.71、1.42、2.84 g/kg)组,每天1次,连续ig给药7 d,对照组和模型... 详细信息

目的研究沉香醇提物对大鼠气滞血瘀心肌缺血损伤的保护作用及机制。方法大鼠随机分成6组:对照组、模型组、野生沉香醇提物(2.84 g/kg)组和通体沉香醇提物低、中、高剂量(0.71、1.42、2.84 g/kg)组,每天1次,连续ig给药7 d,对照组和模型组ig等体积蒸馏水。除对照组外,采用sc异丙肾上腺素(ISO)联合冰水浸泡诱导大鼠气滞血瘀心肌缺血模型,检测生化指标全血黏度(WBV)、血浆比黏度(PSV),血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性,观察心电图及心肌病理损伤情况,检测血浆中脂质过氧化物(LPO)、过氧化氢(H2O2)、总抗氧化能力(T-AOC)和过氧化氢酶(CAT)的水平,酶联免疫法(ELISA)检测血清中细胞因子5-羟色胺(5-HT)、内皮素(ET)、血栓烷素B2(TXB2)及前列腺素E2(PGE2)的分泌水平。结果与模型组比较,通体沉香醇提物各剂量组均能显著降低WBV和PSV,改善心电图的异常,显著降低心电图ST段的抬高(P<0.05、0.01),中、高剂量组显著降低血清中心肌酶CK、LDH、ALT和AST活性(P<0.05、0.01、0.001),各剂量组明显减轻心肌组织的病理损伤程度,高、中剂量组均显著降低LPO和H2O2水平,升高T-AOC和SOD水平(P<0.05、0.01、0.001),高剂量组显著降低5-HT水平,各剂量组均显著降低ET、TXB2和PEG2水平(P<0.05、0.01、0.001)。同等剂量下通体沉香醇提物与野生沉香醇提物作用相当。结论通体沉香醇提物对大鼠气滞血瘀心肌缺血有保护作用,其作用机制与抗氧化、改善血管微循环、调节内皮细胞生长及调节细胞因子的分泌有关。

关键词：沉香醇提物气滞血瘀异丙肾上腺素心肌缺血血液黏度:抗氧化作用

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