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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：许华王齐李元叶李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:探讨靶向干扰SIRT2 基因表达对急性粒细胞白血病(AML)多药耐药细胞株HL60A 细胞增殖的影响.方法:针对SIRT2 基因构建shRNA 真核表达载体,制备慢病毒并感染HL60A 细胞.沉默SIRT2 基因之后,改良MTT 法检测对HL60A 细胞活力的影响;甲...

目的:探讨靶向干扰SIRT2 基因表达对急性粒细胞白血病(AML)多药耐药细胞株HL60A 细胞增殖的影响.方法:针对SIRT2 基因构建shRNA 真核表达载体,制备慢病毒并感染HL60A 细胞.沉默SIRT2 基因之后,改良MTT 法检测对HL60A 细胞活力的影响;甲基纤维素集落形成实验观察对HL60A 细胞集落形成能力的影响;采用流式细胞术检测分析对HL60A 细胞的细胞周期的影响.结果:干扰组SIRT2 基因的表达量被有效抑制;干扰SIRT2 基因表达量后,HL60A 细胞的细胞活力明显下降,集落形成数量减少及集落的形状减小,细胞被明显阻滞于G1/S 期.结论:shRNA 靶向干扰SIRT2 基因的表达可有效抑制急性粒细胞白血病耐药细胞系HL60A 细胞的增殖.

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急性粒细胞白血病MSC体外诱导骨髓单个核细胞药物耐受性

急性粒细胞白血病MSC体外诱导骨髓单个核细胞药物耐受性

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:研究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)对骨髓单个核细胞增殖及耐药性的影响.方法:分离AML 患者及对照MSC 与骨髓单个核细胞共培养,阿糖胞苷药物处理,检测骨髓单个核细胞的增殖活性;流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡...

目的:研究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)对骨髓单个核细胞增殖及耐药性的影响.方法:分离AML 患者及对照MSC 与骨髓单个核细胞共培养,阿糖胞苷药物处理,检测骨髓单个核细胞的增殖活性;流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡;超速离心提取MSC 的外泌体(exosome),电镜及Western blot 检测外泌体;还将外泌体与患者骨髓单个核细胞共培养,检测其对骨髓单个核细的增殖和凋亡的影响.结果:与AML 患者的MSC 及其外泌体共培养的骨髓单个核细胞,被药物诱导凋亡细胞的数量减少,细胞存活率增高.结论:AML 来源MSC 对正常骨髓单个核细胞和病人的骨髓单个核细胞有一定的药物耐受性诱导作用,外泌体可能作为载体在此过程中运输某些信号传递分子.

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沉默Sam68基因抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖

沉默Sam68基因抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：王齐王迟鹃李元叶许华李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:探讨Sam68 对急性淋巴细胞白血病Jurkat 细胞增殖的影响.方法:针对Sam68 mRNA 的第531～552 靶位点,构建pLKO-Tet-On 载体,制备慢病毒并感染、筛选Jurkat 细胞,诱导干扰载体表达;采用real-time PCR 和Western blot 技术验证干扰效...

目的:探讨Sam68 对急性淋巴细胞白血病Jurkat 细胞增殖的影响.方法:针对Sam68 mRNA 的第531～552 靶位点,构建pLKO-Tet-On 载体,制备慢病毒并感染、筛选Jurkat 细胞,诱导干扰载体表达;采用real-time PCR 和Western blot 技术验证干扰效率;用体外细胞集落形成实验观察干扰Sam68 基因表达后对细胞集落形成能力的影响;用流式细胞术检测分析Jurkat 细胞细胞周期的变化.结果:Sam68 基因表达下调能抑制了细胞的增殖和集落形成能力,导致S 期细胞比例显著增加,G2 期细胞比例显著降低,G1 期细胞比例无明显差异.结论:shRNA 靶向干扰Sam68 基因的表达能有效抑制急性淋巴细胞白血病细胞系Jurkat 细胞的增殖.

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沉默CIAPIN1基因对K562细胞增殖能力的影响

沉默CIAPIN1基因对K562细胞增殖能力的影响

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：王齐王建李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:探讨靶向干扰CIAPIN1 基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562 细胞增殖能力的影响.方法:针对CIAPIN1基因构建shRNA 真核表达载体并稳定转染K562 细胞系.Real-time PCR 及Western blotting 技术鉴定干扰效率;CIAP-IN1 基因沉...

目的:探讨靶向干扰CIAPIN1 基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562 细胞增殖能力的影响.方法:针对CIAPIN1基因构建shRNA 真核表达载体并稳定转染K562 细胞系.Real-time PCR 及Western blotting 技术鉴定干扰效率;CIAP-IN1 基因沉默之后,改良MTT 法检测细胞活力的变化;甲基纤维素集落形成实验观察细胞集落形成大小和数量的变化;流式细胞术检测细胞周期的改变;将K562 细胞接种到裸鼠体内皮下,观察细胞在裸鼠体内成瘤能力的变化.结果:CIAPIN1 基因表达下调后,K562 细胞的活力下降;集落形成数量减少和集落减小;G1 期细胞数量增加;小鼠体内成瘤能力明显降低.结论:下调CIAPIN1 基因表达能够抑制K562 细胞在体外及体内的增殖能力.

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NHE1对急性粒细胞白血病MSC生物学功能的影响及机制探究

NHE1对急性粒细胞白血病MSC生物学功能的影响及机制探究

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:探究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)病理生理变化和钠氢交换蛋白(NHE1)的影响及机制.方法:检测AML 来源MSC 中NHE1 的表达量;检测在有无NHE1 抑制剂情况下AML 来源MSC 的成脂成骨分化能力,MTT 检测体外增殖能力,流...

目的:探究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)病理生理变化和钠氢交换蛋白(NHE1)的影响及机制.方法:检测AML 来源MSC 中NHE1 的表达量;检测在有无NHE1 抑制剂情况下AML 来源MSC 的成脂成骨分化能力,MTT 检测体外增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell 检测其迁移能力;Western blot 检测NHE1、JAK、AKT 等相关蛋白的表达.结果:AML 患者MSC 的增殖、迁移及成骨能力减弱,NHE1 表达量增高,抑制NHE1 活性后可以不同程度地恢复这些能力;MSC 细胞S 期明显延长,G2 期明显缩短;p-AKT 和p-JAK 表达量均降低.结论:AML 来源MSC 存在异常,NHE1、JAK 和AKT 不同程度参与AML 患者MSC 生物学异常.

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NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼耐药的影响

NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼耐药的影响

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中国病理生理学会第十届全国代表大会

作者：李元叶张海瑞王齐许华李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室北京100032

目的:研究lipocalin 家族成员NGAL 对慢性髓系白血病细胞伊马替尼(imatinib)耐药性的影响及其机制.方法:构建针对NGAL 的慢病毒干扰载体,建立稳定干扰NGAL 的细胞系.MTT 法检测细胞活力.Hoechst 33258 染色和流式细胞术检测imatinib诱...

目的:研究lipocalin 家族成员NGAL 对慢性髓系白血病细胞伊马替尼(imatinib)耐药性的影响及其机制.方法:构建针对NGAL 的慢病毒干扰载体,建立稳定干扰NGAL 的细胞系.MTT 法检测细胞活力.Hoechst 33258 染色和流式细胞术检测imatinib诱导的细胞凋亡.结果:NGAL 的干扰载体成功降低了白血病K562/G01 细胞系中NGAL 的表达.Hoechst 33258 染色和流式细胞术结果表明NGAL 沉默可以增强imatinib 对K562/G01 细胞的杀伤作用.

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间充质干细胞中受Interferon-γ调节的microRNA及其功能预测

间充质干细胞中受Interferon-γ调节的microRNA及其功能预测

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首届全国组织修复与再生医学大会暨国际组织修复与再生医学学术研讨会

作者：池颖宋宝全韩之波韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室 300020

目的：由于具有免疫调节功能及组织修复能力,间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)成为临床细胞治疗新的希望.MSCs的免疫调节功能需要经过外界因素刺激才能充分的发挥,Interferon (IFN)-γ即是其中之一.研究表明IFN-γ是通过诱导M...

目的：由于具有免疫调节功能及组织修复能力,间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)成为临床细胞治疗新的希望.MSCs的免疫调节功能需要经过外界因素刺激才能充分的发挥,Interferon (IFN)-γ即是其中之一.研究表明IFN-γ是通过诱导MSCs的因子表达(如：IDO1)调控T细胞应答从而发挥其免疫抑制能力的.除调节MSCs的免疫调节功能外IFN-y还会影响MSCs的多种生物学功能,如抑制MSCs的增殖能力、分化能力;提高MSCs的表面黏附分子表达,促进迁移能力;诱导MSCs的MHCⅠ、Ⅱ类分子表达上调等.而IFN-γ对MSCs的microRNA表达是否有影响;相关microRNA是否参与调控MSCs的功能和特性的研究尚未见报道.本课题期望筛选被IFN-γ调控的microRNA并预测其在MSCs中发挥的功能.

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非基因整合建立人诱导多能性干细胞方法的优化研究

非基因整合建立人诱导多能性干细胞方法的优化研究

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2015年全国小儿血液与肿瘤学术会议

作者：顾海慧李彦欣刘淑萍许静梁昊岳刘汉芝张孝兵袁卫平程涛中国医学科学院北京协和医学院血液病医院(血液学研究所)实验血液学国家重点实验室天津300020

目的本研究旨在优化非整合质粒(Episomal).方法将外周血单个核细胞(CB MNCs)重编程为诱导多能性干细胞(iPSCs)，建立无基因整合的iPSCs的高效生成技术体系，为以后建立疾病iPSCs 奠定基础.iPSC 技术具有临床应用前景，但iPSCs的遗传... 详细信息

目的本研究旨在优化非整合质粒(Episomal).方法将外周血单个核细胞(CB MNCs)重编程为诱导多能性干细胞(iPSCs)，建立无基因整合的iPSCs的高效生成技术体系，为以后建立疾病iPSCs 奠定基础.iPSC 技术具有临床应用前景，但iPSCs的遗传稳定性和成瘤性阻碍了其可能的临床应用.

关键词：诱导多能性干细胞外周血单个核细胞 Episomal载体非整合

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沉默Sam68基因抑制急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1911-1911页

作者：王齐王迟鹃李元叶许华李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:探讨Sam68对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖的影响。方法:针对Sam68 mRNA的第531;52靶位点,构建p LKO-Tet-On载体,制备慢病毒并感染、筛选Jurkat细胞,诱导干扰载体表达;采用real-time PCR和Western blot技术验证干扰效率;用体... 详细信息

目的:探讨Sam68对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖的影响。方法:针对Sam68 mRNA的第531;52靶位点,构建p LKO-Tet-On载体,制备慢病毒并感染、筛选Jurkat细胞,诱导干扰载体表达;采用real-time PCR和Western blot技术验证干扰效率;用体外细胞集落形成实验观察干扰Sam68基因表达后对细胞集落形成能力的影响;用流式细胞术检测分析Jurkat细胞

关键词：急性淋巴细胞白血病 Sam68 细胞增殖 Jurkat

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shRNA干扰CIAPIN1基因表达对K562细胞粒系分化的影响

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1911-1911页

作者：王齐王建李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:探讨沉默CIAPIN1基因对慢性粒细胞白血病K562细胞向粒系分化的影响。方法:针对CIAPIN1基因构建短shRNA真核表达载体并转染细胞。瑞氏染色观察细胞形态学变化;电镜观测细胞超微结构的改变;real-time PCR方法检测粒系分化标志基因mRN... 详细信息

目的:探讨沉默CIAPIN1基因对慢性粒细胞白血病K562细胞向粒系分化的影响。方法:针对CIAPIN1基因构建短shRNA真核表达载体并转染细胞。瑞氏染色观察细胞形态学变化;电镜观测细胞超微结构的改变;real-time PCR方法检测粒系分化标志基因mRNA水平的改变;Western blotting检测ERK1/2、JNK、p38 MAPK及Akt磷酸化水平的改变。结果:CIAPIN1基因沉

关键词：基因表达 K562 CIAPIN1 shRNA 细胞

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