检索结果-内蒙古大学图书馆

中国病理生理杂志 2015年第10期 1843-1843页

作者：王齐李元叶许华李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:探讨Sam68蛋白对白血病细胞Jurkat凋亡的影响。方法:针对Sam68靶点构建pL KO-Tet-On条件性真核表达干扰载体,制备慢病毒并感染Jurkat细胞,诱导干扰载体表达,筛选稳定表达shRNA细胞;采用实时荧光定量和免疫印迹技术检测干扰效率;应... 详细信息

目的:探讨Sam68蛋白对白血病细胞Jurkat凋亡的影响。方法:针对Sam68靶点构建pL KO-Tet-On条件性真核表达干扰载体,制备慢病毒并感染Jurkat细胞,诱导干扰载体表达,筛选稳定表达shRNA细胞;采用实时荧光定量和免疫印迹技术检测干扰效率;应用流式细胞术检测细胞凋亡,采用免疫印迹技术检测凋亡相关蛋白表达水平变化情况。结果:Sam68基因表达下

关键词：细胞凋亡基因 Sam68 Jurkat

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NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼耐药的影响

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1839-1839页

作者：李元叶张海瑞王齐许华李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:研究lipocalin家族成员NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼(imatinib)耐药性的影响及其机制。方法:构建针对NGAL的慢病毒干扰载体,建立稳定干扰NGAL的细胞系。MTT法检测细胞活力。Hoechst 33258染色和流式细胞术检测imatinib诱导的... 详细信息

目的:研究lipocalin家族成员NGAL对慢性髓系白血病细胞伊马替尼(imatinib)耐药性的影响及其机制。方法:构建针对NGAL的慢病毒干扰载体,建立稳定干扰NGAL的细胞系。MTT法检测细胞活力。Hoechst 33258染色和流式细胞术检测imatinib诱导的细胞凋亡。结果:NGAL的干扰载体成功降低了白血病K562/G01细胞系中NGAL的表达。Hoechst 33258染色和

关键词：髓系白血病细胞干扰载体 33258 流式细胞 NGAL

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急性粒细胞白血病MSC体外诱导骨髓单个核细胞药物耐受性

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1914-1914页

作者：许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:研究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)对骨髓单个核细胞增殖及耐药性的影响。方法:分离AML患者及对照MSC与骨髓单个核细胞共培养,阿糖胞苷药物处理,检测骨髓单个核细胞的增殖活性;流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡;... 详细信息

目的:研究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)对骨髓单个核细胞增殖及耐药性的影响。方法:分离AML患者及对照MSC与骨髓单个核细胞共培养,阿糖胞苷药物处理,检测骨髓单个核细胞的增殖活性;流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡;超速离心提取MSC的外泌体(exosome),电镜及Western blot检测外泌体;还将外泌体与患者骨髓单个核细胞共培养,检测其对骨髓单个核细的增殖和凋亡的影响。结果:与AML患者的MSC及其外泌体共培养的骨髓单个核细胞,被

关键词：药物耐受性外泌体骨髓造血系统粒细胞白血病粒细胞性白血病单个核细胞 MSC

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NHE1对急性粒细胞白血病MSC生物学功能的影响及机制探究

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1914-1914页

作者：许华陈龙李元叶王齐李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:探究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)病理生理变化和钠氢交换蛋白(NHE1)的影响及机制。方法:检测AML来源MSC中NHE1的表达量;检测在有无NHE1抑制剂情况下AML来源MSC的成脂成骨分化能力,MTT检测体外增殖能力,流式细胞... 详细信息

目的:探究急性粒细胞白血病(AML)患者的间充质干细胞(MSC)病理生理变化和钠氢交换蛋白(NHE1)的影响及机制。方法:检测AML来源MSC中NHE1的表达量;检测在有无NHE1抑制剂情况下AML来源MSC的成脂成骨分化能力,MTT检测体外增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell检测其迁移能力;Western blot检测NHE1、JAK、AKT等相关蛋白的表

关键词：粒细胞白血病 AML 粒细胞性白血病 NHE1 MSC

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用于诊断白血病BCR／ABL1染色体易位荧光原位杂交探针的研究

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中华生物医学工程杂志 2015年第5期21卷 436-440页

作者：胡林萍孙江漫李承文葛菁陆宏卿薛卫霞汝昆程涛缪为民中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所血液病理中心天津300020 江苏美中医疗科技有限公司南通226300

目的本文拟自主研制可以检测白血病染色体BCR／ABL1易位的荧光原位杂交（FISH）探针以满足国内科研和临床的需要。方法根据染色体基因图谱，选定合适的BAC克隆重叠群分别作为BCR和ABL1探针。将BCR探针标记绿色荧光素，ABLl探针标记红色... 详细信息

目的本文拟自主研制可以检测白血病染色体BCR／ABL1易位的荧光原位杂交（FISH）探针以满足国内科研和临床的需要。方法根据染色体基因图谱，选定合适的BAC克隆重叠群分别作为BCR和ABL1探针。将BCR探针标记绿色荧光素，ABLl探针标记红色荧光素。用双盲法检测血液病临床样本20例，对自制探针和同类进口探针在各项技术参数上进行对比研究。结果自制和进口FISH探针均检测到其中相同的9例阳性样本，两种探针检测阴阳性结果相符。自制探针在SpectrumGreen和Cy3TMv1通道中信号的平均荧光强度明显提高（自制探针分别为：2440±11．83，2672±83．35；进口探针分别为：1855±62．78，1764±58．61），BCR和ABL1两种自制探针信噪比分别为进口探针的2．0倍和2．2倍。结论本文研制的白血病BCR-ABLI双色双融合试剂盒荧光信号强、灵敏度高，可用于替代价格昂贵的进口产品。

关键词：白血病荧光原位杂交染色体易位

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真性红细胞增多症患者骨髓间充质干细胞体外造血支持功能研究

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中国医药导报 2015年第36期12卷 9-12,F0003页

作者：孙仪段永娟李芳吕军强白洁刘汉芝胡晓中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 山东大学附属济南市中心医院医学实验诊断中心山东济南250013

目的研究真性红细胞增多症(PV)患者骨髓间充质干细胞(BMSC)的造血支持功能。方法从PV初诊患者和健康志愿者骨髓单个核细胞中分离培养BMSC;光学显微镜观察细胞形态;流式细胞术鉴定细胞免疫表型;诱导成骨及成脂分化鉴定细胞多向分化能力;... 详细信息

目的研究真性红细胞增多症(PV)患者骨髓间充质干细胞(BMSC)的造血支持功能。方法从PV初诊患者和健康志愿者骨髓单个核细胞中分离培养BMSC;光学显微镜观察细胞形态;流式细胞术鉴定细胞免疫表型;诱导成骨及成脂分化鉴定细胞多向分化能力;与人脐带血CD34+造血干祖细胞(HSPC)共培养检测真性红细胞增多症患者来源的骨髓间充质干细胞(PV-BMSC)的体外造血支持功能。结果 PV-BMSC的细胞形态、免疫表型与正常人来源的骨髓间充质干细胞(NM-BMSC)相比无明显差异;油红O及Von Kossa染色表明PV-BMSC具有成脂和成骨分化能力;实验共分离得9株PV-BMSC,其中55%的PV-BMSC既能支持总细胞增殖,又能支持CD34+HSPC扩增(≥1.5倍,n=5),22%的仅支持总细胞增殖(≥1.5倍,n=2),其余的既不支持总细胞增殖也不支持CD34+HSPC扩增(≤1.0倍,n=2)。结论 PV-BMSC支持CD34+HSPC增殖存在明显的个体差异。

关键词：真性红细胞增多症骨髓间充质干细胞造血支持功能造血干祖细胞

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造血系统常用Cre转基因小鼠及其应用

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中国实验血液学杂志 2014年第5期22卷 1442-1447页

作者：彭路芸程涛袁卫平中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

Cre-lox重组系统包括Cre重组酶和lox位点两个要素。Cre酶能够特异地识别并催化lox位点间的片段进行重组,lox位点的方向和位置则决定Cre酶的功能效应。小鼠造血系统由多系各个发育阶段的造血细胞组成。它们是由骨髓内的造血干细胞(Hemato... 详细信息

Cre-lox重组系统包括Cre重组酶和lox位点两个要素。Cre酶能够特异地识别并催化lox位点间的片段进行重组,lox位点的方向和位置则决定Cre酶的功能效应。小鼠造血系统由多系各个发育阶段的造血细胞组成。它们是由骨髓内的造血干细胞(Hematopoietic stem cell,HSC)分化发育而来,而造血细胞的增殖发育是在骨髓微环境中进行的。目前有利用Cre-lox重组系统建立的多种转基因小鼠运用于造血系统的研究中,本文将讨论常用于造血系统的Cre转基因小鼠以及它们在造血系统研究中的应用。

关键词：转基因小鼠 Cre-lox 造血系统

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604例低危原发性血小板增多症患者的临床特征及血栓危险因素分析

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中华血液学杂志 2014年第9期35卷 785-790页

作者：付荣凤宣旻张丽艳李慧媛孙甜甜张冬雷张岘吕翠翠薛峰刘晓帆张磊杨仁池中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的分析低危原发性血小板增多症（ET）患者的临床特征和血栓危险因素,探讨其治疗策略.方法对1982年3月至2012年5月诊断的604例低危ET患者的临床资料进行回顾性分析.结果全部604例患者中,男214例,女390例,中位发病年龄44（18～59）岁... 详细信息

目的分析低危原发性血小板增多症（ET）患者的临床特征和血栓危险因素,探讨其治疗策略.方法对1982年3月至2012年5月诊断的604例低危ET患者的临床资料进行回顾性分析.结果全部604例患者中,男214例,女390例,中位发病年龄44（18～59）岁.中位随访时间49（0～338）个月.43例（7.1％）患者发生严重血栓事件.COX风险模型表明总体缸栓事件的危险因素为JAK2V617F突变（HR=2.279,P=0.035）及心血管危险因素（CVF）（HR=2.541,P=0.006）,动脉血栓事件的危险因素为CVF（HR=2.633,P=0.008）.同时存在JAK2 V617F突变及CVF两种危险因素患者的无血栓生存率低于仅有JAK2 V617F突变（P=0.002）或CVF的患者（P=0.040）.抗血小板治疗降低了仅存在1种危险因素患者的血栓发生率（P=0.016）,而降低血小板治疗可减少JAK2 V617F突变和CVF两种危险因素并存患者的血栓事件发生（P=0.018）.结论 JAK2V617F突变和CVF是低危ET患者血栓事件的两大危险因素.低危ET患者应按照不同的危险因素选择合适的治疗措施.

关键词：血小板增多,原发性血栓形成危险因素治疗

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非基因整合建立人诱导多能性干细胞方法的优化研究

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中国实验血液学杂志 2014年第3期22卷 580-587页

作者：刘淑平李彦欣许静顾海慧张鸿雁梁昊岳刘汉芝张孝兵程涛袁卫平中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院、血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

诱导多能性干细胞(iPSC)技术具有临床应用前景,但iPSC的遗传稳定性和成瘤性阻碍了其可能的临床应用。非整合质粒(Episomal)方法无外源基因整合到宿主基因组上并且方法简单,适宜推广,是目前保证iPSC遗传安全性的最佳方案之一,但其诱导效... 详细信息

诱导多能性干细胞(iPSC)技术具有临床应用前景,但iPSC的遗传稳定性和成瘤性阻碍了其可能的临床应用。非整合质粒(Episomal)方法无外源基因整合到宿主基因组上并且方法简单,适宜推广,是目前保证iPSC遗传安全性的最佳方案之一,但其诱导效率偏低,严重阻碍了其应用。本研究旨在优化Episomal方法,将脐血单个核细胞(CB MNC)重编程为诱导多能性干细胞(iPSC),建立无基因整合的iPSC的高效生成技术体系,为以后建立疾病iPSC奠定基础。利用CB MNC,通过比较不同氧含量,诱导质粒,MNC培养方法和预刺激时间等条件对Episomal方法进行优化。结果表明:CB MNC采用红系培养液,培养8 d,使用启动子为SFFV(spleen focus forming virus)的Episomal载体,在低氧(3%)条件下诱导,CB MNC重编程效率最高,可达到0.12%。通过分析最佳条件下供体细胞成分发现,表型为CD36+CD71+CD235alow的有核红细胞是重编程最主要的供体细胞来源。结论:本研究成功建立并优化出一种可推广的高效安全的,可以用于临床应用研究的iPSC诱导技术。

关键词：诱导多能性干细胞脐血单个核细胞 Episomal载体非整合

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骨髓、脐带及脂肪来源间充质干细胞的成脂能力存在差异(英文)

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中国实验血液学杂志 2014年第3期22卷 588-594页

作者：池颖韩之波徐方运王有为冯晓明陈芳马凤霞杜文静韩忠朝中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的来源非常广泛。由于不同组织来源的影响,MSC之间都会存在一定的差异。本研究分析比较脐带、脂肪及骨髓组织来源的MSC的基本生物学特性。从脐带、脂肪和骨髓分离培养MSC,在显微镜下观察这3种... 详细信息

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)的来源非常广泛。由于不同组织来源的影响,MSC之间都会存在一定的差异。本研究分析比较脐带、脂肪及骨髓组织来源的MSC的基本生物学特性。从脐带、脂肪和骨髓分离培养MSC,在显微镜下观察这3种来源的MSC的形态(UC-MSC,AD-MSC和BM-MSC),用流式细胞术诱导分化试验及定量荧光PCR分别检测UC-MSC,AD-MSC和BM-MSC的免疫表型、分化能力和过氧化物酶增殖激活受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)mRNA的表达水平。结果表明,UC-MSC、AD-MSC和BM-MSC的形态都是成纤维细胞样;经罗丹明和DAPI染色后,用共聚焦显微镜观察发现它们的细胞形态类似;这三种来源MSC的免疫表型符合MSC的鉴定标准,而且表达水平一致;这三种来源MSC的成骨分化潜能相似,而成脂分化潜能存在较明显的差异,其中AD-MSC成脂能力最强,BM-MSC次之,UC-MSC最差。检测脂肪形成早期起重要作用的过氧化物酶增殖激活受体-γ(PPAR-γ)mRNA表达水平在三种来源MSC中的基础表达水平,发现PPAR-γmRNA在AD-MSC中最高,在BM-MSC次之,而在UC-MSC中最低,与成脂能力的表现相一致。这表明三种来源MSC成脂能力存在差异可能与它们PPAR-γ的基础表达水平有关。结论:UC-MSC,AD-MSC和BM-MSC的形态类似;免疫表型符合MSC鉴定标准,表达水平一致;成骨分化能力相似,而成脂分化能力不同;PPAR-γmRNA表达水平不一。关于差异的相关机制有待进一步研究。

关键词：骨髓间充质干细胞脐带间充质干细胞脂肪间充质干细胞成脂潜能 PPAR-γ

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