检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2008年第3期30卷 290-295页

作者：麦玉洁邱录贵李增军李新于珍李长虹王亚非李茜中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的干扰β-catenin在Jurkat和K562细胞中的表达,探讨β-catenin对细胞生长、增殖和凋亡等方面的作用。方法设计合成β-catenin的siRNA干扰序列和对照序列,阳离子脂质体法介导转入Jurkat和K562细胞,分别用RT-PCR和Western blot方法检测... 详细信息

目的干扰β-catenin在Jurkat和K562细胞中的表达,探讨β-catenin对细胞生长、增殖和凋亡等方面的作用。方法设计合成β-catenin的siRNA干扰序列和对照序列,阳离子脂质体法介导转入Jurkat和K562细胞,分别用RT-PCR和Western blot方法检测β-catenin在干扰后mRNA水平和蛋白水平的表达变化。采用台盼兰拒染法计数,MTT比色法和集落形成能力检测细胞的生长增殖,AnnexinV/PI检测细胞凋亡以及PI染色检测细胞周期。结果与对照组相比,实验组细胞β-catenin的mRNA和蛋白水平的表达均降低。在Jurkat细胞,实验组和对照组的细胞增殖抑制率分别为(49.30±9.86)%和(15.10±6.55)%(P<0.05),而在K562细胞分别为(39.40±7.56)%和(10.10±6.89)%(P<0.05),实验组细胞生长明显受抑。在Jurkat细胞,实验组和对照组的集落形成率分别为(25.00±5.13)/104细胞和(31.90±5.55)/104细胞(P<0.05),而在K562细胞分别为(39.33±6.26)/104细胞和(47.33±8.52)/104细胞(P<0.05),实验组细胞集落形成能力明显减弱。在Jurkat细胞,实验组和对照组的细胞凋亡率分别为(55.90±2.22)%和(23.50±2.82)%(P<0.05),而在K562细胞分别为(27.90±15.30)%和(14.90±8.54)%(P>0.05),实验组细胞凋亡率有所增加。在这两种细胞系中均未发现细胞周期的改变。结论β-catenin基因有可能对Jur-kat和K562细胞具有促进细胞生长、增殖,抑制凋亡的作用。

关键词： β-catenin Jurkat细胞系 K562细胞系白血病 RNA干扰

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联合常规实验室检查指标诊断骨髓增生异常综合征的初步研究

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中华血液学杂志 2008年第9期29卷 623-628页

作者：李磷聂玲于明华郑以州张悦徐泽锋郝玉书肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的探讨联合常规实验室检查指标在骨髓增生异常综合征（MDS）的诊断和低增生性MDS与慢性再生障碍性贫血（CAA）鉴别诊断中的价值，提供基层单位适用的MDS诊断和鉴别诊断参考方案。方法回顾性分析骨髓原始细胞小于0．050的152例MDS患者... 详细信息

目的探讨联合常规实验室检查指标在骨髓增生异常综合征（MDS）的诊断和低增生性MDS与慢性再生障碍性贫血（CAA）鉴别诊断中的价值，提供基层单位适用的MDS诊断和鉴别诊断参考方案。方法回顾性分析骨髓原始细胞小于0．050的152例MDS患者和86例CAA患者初诊的常规实验室检查资料并进行统计学分析。结果MDS患者血红蛋白，红细胞体积分布宽度一变异系数、未成熟网织细胞比率、血小板计数（BPC）、骨髓原始细胞及早幼粒细胞之和与中性中幼粒细胞及中性晚幼粒细胞之和的比值（RatioG）、原始红细胞及早幼红细胞之和与中幼红细胞及晚幼红细胞之和的比值（RatioE）、巨核细胞计数（Meg）、有核红细胞糖原染色（PAS）阳性率和阳性指数、中性粒细胞碱性磷酸酶染色（N—ALP）阳性率和阳性指数、血清间接胆红素（IBIL）、乳酸脱氢酶（LDH）、尿酸（UA）、叶酸（FA）、维生素B12（VitB12）、铁蛋白（SF）水平等常规实验室指标与CAA患者比较差异有统计学意义。MDS组患者有染色体核型异常者为74例（48．7％），CAA组患者染色体核型均正常，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。MDS组与CAA组患者均有骨髓干／祖细胞培养生长不良或不生长，均有患者出现外周血T细胞亚群比例改变，两组比较差异无统计学意义。染色体核型异常的74例MDS患者与骨髓活检结果支持CAA诊断的82例患者（CAA组-2）比较，前述差异有统计学意义的指标均仍有统计学差异。7例骨髓低增生性MDS与CAA组-2患者比较，BPC、Meg、骨髓原始粒细胞百分比（MBP）、RatioG、有核红细胞PAS阳性率和阳性指数以及血清FA水平差异有统计学意义。选取各项差异有统计学意义的常规实验室指标进行联合诊断MDS及低增生性MDS特异度〉85％，灵敏度〉70％，正确诊断指数〉0．70。结论联合BPC、RatioG、Meg、有核红PAS阳性率和阳性指数、血清IBIL水平等常规实验室检查指标有助于MDS诊断和低增生性MDS与CAA的鉴别诊断。

关键词：骨髓增生异常综合征低增生性贫血再生障碍性诊断

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三步法制备级纯化抗CD20(Fab′)_2

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中国医学科学院学报 2008年第5期30卷 622-625页

作者：王金宏杨铭范冬梅许元生熊冬生杨纯正中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的在小规模蛋白纯化系统AKTA prime上建立制备级纯化抗CD20(Fab′)2的方法。方法将通过高渗溶液提取的周质腔蛋白抗CD20(Fab′)2依次经过离子柱、疏水柱和亲和柱纯化,采用蛋白电泳和高效液相色谱法分析检测其分离效果及纯度,同时测定... 详细信息

目的在小规模蛋白纯化系统AKTA prime上建立制备级纯化抗CD20(Fab′)2的方法。方法将通过高渗溶液提取的周质腔蛋白抗CD20(Fab′)2依次经过离子柱、疏水柱和亲和柱纯化,采用蛋白电泳和高效液相色谱法分析检测其分离效果及纯度,同时测定其与Raji细胞的结合活性。结果在该纯化条件下一次可获得8mg纯度为96.678%的抗CD20(Fab′)2,其与CD20+Raji细胞的结合活性与采用亲和柱联合分子筛柱得到的抗体活性基本一致。结论三步法制备级纯化抗CD20(Fab′)2操作简单,能获得制备级高纯度抗CD20(Fab′)2。

关键词：抗CD20(Fab′)2 三步法纯化高效液相色谱分析

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中期因子在急性白血病中的表达及其意义

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中华血液学杂志 2008年第8期29卷 544-548页

作者：王洋林冬王东海徐智芳刘家卓刘向荣王建祥王敏中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的检测中期因子（Midkine，MK）基因在白血病患者中的表达，初步探讨其与白血病的关系。方法应用实时定量逆转录PCR（RQ—RT—PCR）方法，对181例急性白血病（AL）患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测。结果中期因子... 详细信息

目的检测中期因子（Midkine，MK）基因在白血病患者中的表达，初步探讨其与白血病的关系。方法应用实时定量逆转录PCR（RQ—RT—PCR）方法，对181例急性白血病（AL）患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测。结果中期因子在初治和复发AL患者、AL完全缓解（CR）患者及正常人骨髓细胞均有表达。初治和复发AL患者中期因子表达明显高于正常人及CR患者（P〈0．01及P〈0．05）。而正常人与CR患者相比差异无统计学意义。中期因子的表达在B细胞急性淋巴细胞白血病（B—ALL）各亚型（包括pro—B—ALL，common—B—ALL，pre—B—ALL）及各年龄段均有显著升高（P〈0．01），且与T细胞急性淋巴细胞白血病（T—ALL）、急性杂合性白血病及急性髓系白血病（AML）各FAB亚型间差异均有统计学意义（P值均〈0.01）；与正常人相比，M2型患者中期因子表达明显升高（P〈0．01），与AML其他FAB亚型相比差异亦有统计学意义（P值均〈0．05）；M3患者中期因子表达也较正常人明显升高（P〈0．05），但与除B—ALL和AML—M2外的其他白血病亚型间差异无统计学意义。CD34^＋患者较CD34^-患者中期因子表达显著升高（P〈0．01），AML1-ETO融合基因阳性的M2患者较阴性的M2患者中期因子表达显著升高（P〈0．05）。结论B—ALL、AML—M2和AML—M3型白血病患者中均存在中期因子基因不同程度的表达升高，为白血病诊断及其发病机制的研究提供了新的方向。

关键词：基因,中期因子白血病聚合酶链反应,实时定量

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4-1BBL胞膜外区蛋白对人外周血淋巴细胞体外活性的调节作用

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第5期24卷 431-433,437页

作者：郭红星程昕苏晔范冬梅邵晓枫许元富杨纯正熊冬生中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用。方法:表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)... 详细信息

目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用。方法:表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)水平,ELISA检测白介素-2(IL-2)水平。CytoTox 96检测其联合应用anti-CD3/anti-Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用。结果:4-1BBL胞膜外区融合蛋白能够促进淋巴细胞增殖,减少细胞死亡,促进IL-2分泌;联合应用ex4-1BBL的淋巴细胞组的杀伤效率优于对照组。结论:ex4-1BBL可能成为增强淋巴细胞活性的重要免疫佐剂。

关键词： 4-1BBL 淋巴细胞 anti-CD3/anti-Pgp 双功能抗体

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小鼠骨髓腔内输注人脐血造血干／祖细胞植活水平的观察

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中华血液学杂志 2008年第6期29卷 361-365页

作者：高静韬卢士红李妍涵杨舟许静郑以州中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨小鼠骨髓腔内输注能否增强人脐血造血干／祖细胞（HS／PC）异种移植的植活能力。方法将不同数量（1×10^3、1×10^4、0.5×10^5、1×10^5、5×10^5）的人脐血CD34^＋细胞经尾静脉和骨髓腔途径移植入经亚致... 详细信息

目的探讨小鼠骨髓腔内输注能否增强人脐血造血干／祖细胞（HS／PC）异种移植的植活能力。方法将不同数量（1×10^3、1×10^4、0.5×10^5、1×10^5、5×10^5）的人脐血CD34^＋细胞经尾静脉和骨髓腔途径移植入经亚致死剂量照射的NOD／SCID小鼠。于指定时间点处死小鼠，用PCR法检测人17号染色体α-微卫星特异性片段及用流式细胞术检测人源CD45^＋细胞，观察脐血CD34^＋细胞在移植小鼠左、右两侧胫骨和股骨及脾脏等部位的归巢及其长期植活能力。结果异种移植后24h，经骨髓腔移植5×10^5 CD34^＋细胞的小鼠肝、脾、肺组织，外周血，左右两侧胫骨和股骨、骨髓细胞均表达人17号染色体α-卫星特异性片段。不同数量的人脐血CD34^＋细胞经骨髓腔途径移植入NOD／SCID小鼠后，8周时其植活良好（检测部位包括输注部位右侧胫骨，以及非输注部位右侧股骨、左侧胫骨、左侧股骨、脾脏及外周血）。分别经尾静脉和骨髓腔两种途径输注同一来源的人脐血CD34^＋细胞1.0×10^5，8周时两组间人造血细胞植活水平分别为（44．063±20．095）％和（45．881±22．316）％，差异无统计学意义（P〈0．05）；而将移植CD34^＋细胞数降至1.0×10^4时，则经骨髓腔途径输注的人脐血CD34^＋细胞小鼠植活水平（54．019±31．338）％显著优于尾静脉输注途径[（12．197±10．350）％，P〈0．01）]；当CD34^＋细胞输注量降至1.0×10^3时，仅有骨髓腔内输注组小鼠能见到人脐血CD34^＋细胞植活，且植活部位通常为非输注部位骨骼。结论小鼠骨髓腔内移植能够增强人脐血造血干／祖细胞的植活水平。

关键词：造血干细胞移植骨髓腔注射小鼠 NOD/SCID 造血重建

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硼替佐米为主的联合化疗方案加或不加造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤疗效分析

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中华血液学杂志 2008年第6期29卷 397-400页

作者：王亚非邓书会吴瞳徐燕邹德慧王迎赵耀中邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的观察以硼替佐米为主的联合化疗方案加或不加造血干细胞移植（SCT）治疗多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）患者的疗效及不良反应。方法31例初治或复发（难治）MM患者接受硼替佐米为主治疗。之后有6例患者接受SCT治疗。按照EBMT... 详细信息

目的观察以硼替佐米为主的联合化疗方案加或不加造血干细胞移植（SCT）治疗多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）患者的疗效及不良反应。方法31例初治或复发（难治）MM患者接受硼替佐米为主治疗。之后有6例患者接受SCT治疗。按照EBMT标准评价疗效，WHO标准判断不良反应。结果①有5例患者由于急性肾功能衰竭、肿瘤溶解综合征等原因终止治疗，其中3例死亡。可以统计疗效的26例患者共完成了99个疗程的治疗，总有效率（ORR）为80．8％。15例初治患者的ORR为100．0％。11例复发（难治）患者的ORR为54．6％。②15例初治患者中有7例完成了8个疗程的治疗，动态观察发现随着疗程的延长疗效不断提高。③6例初治患者化疗达完全缓解（CR）或接近CR（mCR）后行SCT治疗，其中1例复发，5例随访至移植后6-11个月仍持续CR。未采取SCT巩固的9例初治患者中除1例持续CR外有6例在停药后1-3个月复发或进展，2例失访。④多数治疗相关不良反应为1-2级，有3例患者因为末梢神经炎、窦性心动过缓等原因降低硼替佐米的用量，5例因严重不良反应终止治疗。结论硼替佐米治疗初治及复发（难治）MM疗效肯定，但可能需要进行巩固治疗（如SCT）以维持疗效。硼替佐米不良反应多数轻微且可以耐受，但也应注意少见的严重不良反应。

关键词：硼替佐米多发性骨髓瘤造血干细胞移植

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甲异靛对K562细胞her-abl信号通路的影响以及诱导细胞凋亡机制研究

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中华血液学杂志 2008年第12期29卷 815-818页

作者：刘兵城肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院、实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨甲异靛对K562细胞bcr-abl信号通路的影响以及甲异靛诱导K562细胞凋亡的机制。方法应用流式细胞术检测甲异靛诱导K562细胞凋亡的情况以及线粒体膜电位稳定性。应用Western blot技术检测bcr-abl信号通路相关蛋白、caspase以及Bcl... 详细信息

目的探讨甲异靛对K562细胞bcr-abl信号通路的影响以及甲异靛诱导K562细胞凋亡的机制。方法应用流式细胞术检测甲异靛诱导K562细胞凋亡的情况以及线粒体膜电位稳定性。应用Western blot技术检测bcr-abl信号通路相关蛋白、caspase以及Bcl一2家族成员在甲异靛作用前后的表达情况。RT-PCR技术检测甲异靛作用前后bcr-abl mRNA表达水平，用电泳移动迁移速度分析检测STA33、STATS的DNA结合能力。结果20μmol／L甲异靛可降低bcr-abl融合蛋白的表达及其磷酸化水平，但并不改变其mRNA表达水平，甲异靛可降低STATS以及CRKL的磷酸化水平，抑制STA33、STATS的DNA结合能力。5-20μmol／L甲异靛可诱导K562细胞凋亡并且具有浓度依赖性。甲异靛诱导K562细胞凋亡中伴随caspase3、8、9活化以及细胞线粒体膜电位降低，caspase3、8、9特异抑制剂z-DEVD-fmk、z-IETD-cho和z-LETD-fmk可阻断甲异靛诱导的K562细胞凋亡。甲异靛诱导K562细胞凋亡前后不伴有Bcl-2、Bax、Bid蛋白表达水平的改变。结论甲异靛通过降低bcr-abl融合蛋白的表达并抑制bcr-abl信号通路中相关蛋白活性从而抑制K562细胞的增殖。甲异靛诱导K562细胞凋亡依赖于caspase活化以及线粒体途径，但Bcl-2家族成员不参与凋亡的调控。

关键词：甲异靛 K562细胞融合蛋白质类 bcr-abl 细胞凋亡信号传导

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RAD51G135C和XRCC3C241T基因型与急性髓系白血病疗效及预后相关性研究

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中华医学杂志 2008年第6期88卷 378-382页

作者：刘亮杨琳张悦徐泽锋于明华王建祥肖志坚中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所、血液病医院、实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨同源重组修复基因RAD51G135C和XRCC3C241T多态性位点基因型与急性髓系白血病（AML）疗效及预后的关系。方法AML患者372例，用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR-RFLP）方法分析RAD51G135C、XRCC3C241T基因型，用多... 详细信息

目的探讨同源重组修复基因RAD51G135C和XRCC3C241T多态性位点基因型与急性髓系白血病（AML）疗效及预后的关系。方法AML患者372例，用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（PCR-RFLP）方法分析RAD51G135C、XRCC3C241T基因型，用多重PCR方法检测GSTT1和GSTM1基因。比较不同基因型患者的诱导治疗完全缓解（CR）率、总体生存期、无复发生存期及不良反应。结果（1）在第一疗程诱导治疗过程中，XRCC3C241T基因型与AML伴t（15；17）／PML-RARα患者的早期病亡率有显著相关性（OR=8，750，P=0．046）。XRCC3C241T、RAD51G135C分别与GSTT1、GSTM1联合存在变异时，非M3患者诱导缓解时CR率明显降低，（P=0.028）。（2）XRCC3C241T、RAD51G135C的基因型影响AML患者的平均生存期及平均无复发生存期：RAD51G135C、GSTT1基因存在双变异及联合GSTM1基因均变异时，非M3的AML的生存期（OS）显著缩短（P〈0．05）。XRCC3C241T与GSTT1联合分析，双基因均野生型M4EO、M2患者的无复发生存期（RFS）明显长于双变异型患者的RFS期（均P〈0．05）。XRCC3C241T、GSTT1、GSTM1基因同时变异的M2患者的RFS期（10、0个月）明显短于3个基因野生型患者（64．2个月，P〈0．005）。RAD51G135C、GSTT1双基因变异M4EO患者的平均RFS期明显缩短（P=0．047）。（3）XRCC3C241T、RAD51G135C基因型与第一疗程诱导治疗过程中的不良反应（包括白细胞数、恶心呕吐、脱发和血尿）有明显的相关性（均P〈0．05）。结论XRCC3C241T、RAD51G135C单独或与GSTT1，GSTM1基因型联合变异，与AML患者第一疗程诱导治疗CR率、预后及毒副反应均有显著相关性，XRCC3C241T、RAD51G135C基因型的检测有助于指导AML患者个体化治疗方案的制定。

关键词：白血病粒细胞急性 XRCC3基因 RAD51基因

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148例侵犯骨髓的非霍奇金淋巴瘤不同方案疗效分析

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中华医学杂志 2008年第4期88卷 254-257页

作者：李桥川袁晓莉王亚非邹德慧赵耀中邱录贵中国医学科学院协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨不同化疗方案对侵犯骨髓的非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者的治疗效果。方法对148例确诊有骨髓侵犯的NHL患者的治疗情况进行回顾性分析。结果（1）148例患者治疗总有效率为80．4％，其中完全缓解（CR）率为60．7％。增强化疗剂量组和... 详细信息

目的探讨不同化疗方案对侵犯骨髓的非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者的治疗效果。方法对148例确诊有骨髓侵犯的NHL患者的治疗情况进行回顾性分析。结果（1）148例患者治疗总有效率为80．4％，其中完全缓解（CR）率为60．7％。增强化疗剂量组和CHOP方案组的总有效率分别为84．3％和64．1％。（2）89例B细胞NHL患者中，造血干细胞移植（HSCT）组和利妥昔单抗联合化疗组的3年及5年总体生存（OS）率和无进展生存（PFS）率显著高于CHOP方案组和增强化疗剂量组（P〈0．05）；增强化疗剂量组的3年及5年OS率及PFS率显著高于CHOP方案组（P〈0．05）；（3）59例T细胞NHL患者中，增强化疗剂量组和HSCT组的3年及5年OS率和PFS率显著高于CHOP方案组（P〈0．05）。结论NHL侵犯骨髓预后差，增加化疗强度或造血干细胞移植治疗可能会提高其治疗有效率及长期生存率；其中利妥昔单抗联合化疗能够显著提高CD20^＋B细胞NHL的疗效。

关键词：非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯造血干细胞移植治疗效果

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