检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2007年第10期28卷 677-680页

作者：俞文娟饶青王敏田征徐智芳王建祥中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室浙江大学医学院第一附属医院杭州310003

目的探讨热休克蛋白(HSP)90抑制剂17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素(17AAG)诱导白血病细胞生长抑制、分化和凋亡作用的信号传导途径。方法采用不同剂量的17AAG 处理Kasumi-1细胞,Western blot 检测处理前后 kit 蛋白(CD117)及其下游信号分... 详细信息

目的探讨热休克蛋白(HSP)90抑制剂17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素(17AAG)诱导白血病细胞生长抑制、分化和凋亡作用的信号传导途径。方法采用不同剂量的17AAG 处理Kasumi-1细胞,Western blot 检测处理前后 kit 蛋白(CD117)及其下游信号分子 AKT、STAT3水平;免疫共沉淀法检测处理前后 HSP 与 kit 蛋白的结合状态变化。结果 17AAG 降低突变 kit 蛋白及其活性水平,但并不影响 c-kit mRNA 水平;17AAG 能降低组成性活化 kit 下游信号分子 AKT 及其磷酸化水平,同时磷酸化 STAT3水平亦降低,但总 STAT3水平没有变化;免疫共沉淀法检查结果显示经17AAG 处理1 h 后,与 kit 结合的 HSP90明显减少,同时结合的 HSPT0增加。结论在诱导白血病细胞分化凋亡过程中,17AAG 能降低 Kasumi-1细胞内 Asn822Lys 突变 kit 蛋白及其磷酸化水平,同时下调 kit 蛋白下游增殖及存活信号途径的信号分子;AKT 也是 HSP90的客户蛋白之一;17AAG 所导致的 kit 蛋白与HSP90及 HSP70结合状态的变化,符合分子伴侣复合物的循环模型。

关键词：白血病急性 c-kit 突变 17AAG HSP90抑制剂信号传导分子 AKT STAT3

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实时定量RT-PCR检测白血病细胞B7-H1基因表达及其临床意义

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中华血液学杂志 2007年第12期28卷 837-840页

作者：李新王亚非葛薇李增军于珍李云涛万长春李桥川邱录贵中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 北京市朝阳医院京西院区血液肿瘤科天津300020

目的检测白血病患者骨髓单个核细胞(BMMNC)B7-H1基因的表达情况,并探讨 B7-H1基因表达的临床意义。方法应用 SYBR Green Ⅰ实时定量 RT-PCR 法(RQ-PCR)检测74例初治白血病患者及10名正常人 BMMNC B7-H1 mRNA 表达情况,并跟踪检测12例化... 详细信息

目的检测白血病患者骨髓单个核细胞(BMMNC)B7-H1基因的表达情况,并探讨 B7-H1基因表达的临床意义。方法应用 SYBR Green Ⅰ实时定量 RT-PCR 法(RQ-PCR)检测74例初治白血病患者及10名正常人 BMMNC B7-H1 mRNA 表达情况,并跟踪检测12例化疗后获得完全缓解(CR)和5例复发患者 B7-H1 mRNA 表达情况。对74例白血病患者的临床特征与 B7-H1基因表达水平进行相关性分析。结果初治白血病患者 BMMNC B7-H1 mRNA 表达阳性,但表达水平低于正常人,两组基因定量比较值 RQ 为0.125。诱导化疗获得 CR 后 B7-H1 mRNA 表达水平较治疗前升高,治疗前后两者定量比较值 RQ 为69.070,差异具有统计学意义(P=0.001);复发时 B7-H1 mRNA 表达水平较治疗前亦升高,复发与治疗前比较为4.00。B7-H1基因表达水平与患者性别、年龄、外周血白细胞计数、骨髓中幼稚细胞比例、CD34抗原阳性与否均无相关性,与治疗反应有显著相关性。诱导化疗后未获 CR 的患者,其治疗前 B7-H1 mRNA 表达水平明显高于化疗后获得 CR 的患者,两组定量比较值为26.91(P=0.005)。结论初治白血病患者 BMMNC B7-H1基因呈低水平表达,诱导化疗获得 CR后 B7-H1 mRNA 表达水平较治疗前升高。B7-H1基因表达水平与患者的治疗反应有显著相关性。

关键词：白血病基因,B7-H1 逆转录聚合酶链反应,定量

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β-catenin在白血病细胞系中表达的研究

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中国实验血液学杂志 2007年第5期15卷 919-922页

作者：麦玉洁邱录贵李增军李新王国蓉于珍徐燕王亚非李茜中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 大连大学附属中山医院血液科大连116000

本研究检测β-catenin在白血病/淋巴瘤细胞系中的表达,探讨其与白血病的关系。采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot的方法检测β-catenin在白血病细胞系中的表达。结果表明:白血病细胞系中β-catenin在转录水平上有广泛表达,... 详细信息

本研究检测β-catenin在白血病/淋巴瘤细胞系中的表达,探讨其与白血病的关系。采用半定量RT-PCR、免疫细胞化学和Western blot的方法检测β-catenin在白血病细胞系中的表达。结果表明:白血病细胞系中β-catenin在转录水平上有广泛表达,其中:在U937、KG1a、Jurkat、K562、Namalwa细胞中存在极高表达;在HEL、HUT78、Raji、Daudi、CEM中有中等表达;而在LCL-H、HL-60、NB4、J6-1、Ramos细胞中β-cateninmRNA呈相对较低水平的表达。蛋白表达水平与mRNA表达水平结果一致。所检测的细胞系中,胞核中均可见β-catenin的表达,但程度不一;在U937、K562、KG1a和Jurkat细胞的胞核内可见大量分布。结论:β-catenin作为WNT/β-catenin信号转导途径中重要的"调节子",其在白血病细胞中的过量表达提示WNT/β-catenin信号转导途径可能在白血病细胞中有异常激活。

关键词： β-catenin 白血病细胞系 WNT/β-catenin信号转导途径

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糖尿病患者动员后外周血单个核细胞促血管新生能力

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中国医学科学院学报 2007年第2期29卷 262-267,I0004页

作者：周斌顾东生刘鹏霞郑翠玲董春兰杜伟廷武开宏韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程技术研究中心天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院小儿心胸外科北京100037

目的研究糖尿病患者来源的动员后外周血单个核细胞(M-PBMNCs)移植治疗肢体缺血的疗效,探讨糖尿病患者M-PBMNCs促血管新生能力是否有缺陷及其病理生理机制。方法体外培养内皮祖细胞并鉴定和计数。结扎链脲菌素诱导的糖尿病裸鼠股动脉,造... 详细信息

目的研究糖尿病患者来源的动员后外周血单个核细胞(M-PBMNCs)移植治疗肢体缺血的疗效,探讨糖尿病患者M-PBMNCs促血管新生能力是否有缺陷及其病理生理机制。方法体外培养内皮祖细胞并鉴定和计数。结扎链脲菌素诱导的糖尿病裸鼠股动脉,造成重度缺血模型后,将来自糖尿病患者、正常人的M-PBMNCs(106)及磷酸盐缓冲液(PBS)分别局部注射到缺血组织中。在第1、3、7、14、21、28天分别用激光多普勒检测局部血流,观察缺血肢体的活动度和缺血情况,用免疫组织化学方法检测缺血部位毛细血管密度和小动脉密度。结果体外内皮祖细胞培养显示糖尿病患者M-PBMNCs中的内皮祖细胞数量相对较少(P<0.05),裸鼠局部缺血组织血流量及血管密度均与糖尿病患者的内皮祖细胞数量呈正相关(R=0.486,P<0.05;R=0.491,P<0.05),而糖尿病患者内皮祖细胞的数量又与其病程呈负相关(R=-0.587,P<0.05)。糖尿病患者M-PBMNCs促进缺血下肢血流和功能恢复的疗效强于PBS组,但不及正常人M-PBMNCs组(P<0.05)。移植了糖尿病患者M-PBMNCs的缺血组织的毛细血管、小动脉密度均低于正常人M-PBMNCs组(P<0.05)。结论糖尿病患者M-PBMNCs的促血管新生能力存在缺陷,使其移植治疗肢体缺血的疗效减低。

关键词：糖尿病动员后外周血单个核细胞内皮祖细胞缺血

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间充质干细胞与血液系统疾病

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基础医学与临床 2007年第3期27卷 346-352页

作者：马杰史明霞赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程研究中心实验血液学国家重点实验室北京100005

近年来间充质干细胞一直是细胞生物学研究领域的热点之一,其自我更新、多向分化能力以及强的免疫调节功能等生物学特性已被广泛认识,有关它在相关疾病治疗中应用的基础与临床研究也取得了一定进展。随着研究的深入,间充质干细胞在一些... 详细信息

近年来间充质干细胞一直是细胞生物学研究领域的热点之一,其自我更新、多向分化能力以及强的免疫调节功能等生物学特性已被广泛认识,有关它在相关疾病治疗中应用的基础与临床研究也取得了一定进展。随着研究的深入,间充质干细胞在一些疾病的发生、发展过程中所起的作用也逐渐被认识。本文就间充质干细胞与一些血液系统疾病之间的关系进行综述。

关键词：间充质干细胞血液系统疾病

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细胞周期抑制因子对干细胞的调控作用

细胞周期抑制因子对干细胞的调控作用

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第11次中国实验血液学会议

作者：程涛中国医学科学院/北京协和医学院血液学研究所/血液病医院实验血液学国家重点实验室

细胞周期是干细胞功能的根本调控环节之一。对细胞周期 G1期的分子调控可能实现对干细胞自我更新,分化,凋亡和衰老的治疗性干预。业已发现,细胞周期素依赖的激酶抑制剂 (cyclin-dependent kinase inhibitor,CKI),如 p16,p18,p21和 p27等... 详细信息

细胞周期是干细胞功能的根本调控环节之一。对细胞周期 G1期的分子调控可能实现对干细胞自我更新,分化,凋亡和衰老的治疗性干预。业已发现,细胞周期素依赖的激酶抑制剂 (cyclin-dependent kinase inhibitor,CKI),如 p16,p18,p21和 p27等,在多种干细胞中起重要作用。我们的前期工作证实了 p21和 p27在造

关键词：细胞周期抑制

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多发性骨髓瘤患者骨髓Flk1^+间充质干细胞的成骨能力降低

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基础医学与临床 2006年第6期26卷 586-592页

作者：李炳宗李静史明霞陈磊高伟波赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程研究中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学血液病研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓F lk1+间充质干细胞(F lk1+MSCs)的成骨特性,探讨其与多发性骨髓瘤骨病的关系。方法分离并鉴定MM患者骨髓源F lk1+MSCs;利用实时定量RT-PCR检测F lk1+MSCs成骨诱导前后成骨指标的表达,诱导2周后用Von-K... 详细信息

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓F lk1+间充质干细胞(F lk1+MSCs)的成骨特性,探讨其与多发性骨髓瘤骨病的关系。方法分离并鉴定MM患者骨髓源F lk1+MSCs;利用实时定量RT-PCR检测F lk1+MSCs成骨诱导前后成骨指标的表达,诱导2周后用Von-Kossa染色法测定钙盐沉积;同时测定F lk1+MSCs中转录共刺激因子(TAZ)的表达。结果MM患者骨髓F lk1+MSCs在体外经成骨诱导后,其成骨指标的表达较正常人明显降低,Von-Kossa染色也可见矿化基质沉积相应减低。同时F lk1+MSCs中TAZ的表达在MM中较正常人明显下调(P<0.05)。结论多发性骨髓瘤患者的骨髓F lk1+MSCs成骨能力较正常人减低,此因素可能参与了MM患者骨病的发病环节,而TAZ表达的减弱可能在此过程中发挥一定作用。

关键词：多发性骨髓瘤间充质干细胞成骨转录共刺激因子

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Flk1^+间充质干细胞减轻四氯化碳导致的肝纤维化的研究

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生物工程学报 2005年第3期21卷 396-401页

作者：史明霞房佰俊廖联明杨少光刘煜昊赵春华中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所组织工程中心北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4... 详细信息

许多慢性肝脏疾病都会发生肝纤维化,但是目前尚缺乏对肝纤维化切实有效的治疗手段。实验发现,Flk1(fetalliverkinase)阳性间充质干细胞(MSC)能够减轻四氯化碳(CCl4 )所致小鼠肝纤维化。取雄性BALB c小鼠骨髓,分离培养Flk1+ MSC ,用CCl4 制作雌性小鼠肝纤维化模型,在CCl4 损伤后立即或1周后经尾静脉注射Flk1+ MSC ,2或5周后检测受体小鼠肝脏的纤维化程度和供体细胞的植入。结果发现,CCl4 损伤后立即注射Flk1+ MSC ,可以使肝脏损伤程度明显减轻,减少胶原沉积,使肝脏羟脯氨酸含量及血清纤维化指标显著下降;而损伤1周后注射细胞则无明显变化。免疫荧光、PCR和荧光原位杂交方法证实,在受体肝脏中有供体细胞植入,呈上皮细胞形态,并表达白蛋白,但是数量很少。因此,Flk1+ MSC具有潜在的植入肝组织的能力,并可能启动肝组织的内源性修复,减轻CCl4 导致的肝纤维化。

关键词：间充质干细胞,肝纤维化,移植

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慢性粒细胞性白血病骨髓间充质干细胞的分离纯化及其功能特性的研究

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中华医学杂志 2005年第29期85卷 2054-2057页

作者：赵智刚唐晓琼李静史明霞邹萍华中科技大学同济医学院附属协和医院血液科武汉430022 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室

目的分离、纯化慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓间充质干细胞(MSC),并对MSC进行功能、特性鉴定。方法获取CML患者的骨髓MSC,应用极限稀释法获取单克隆来源的MSC,并在低血清培养液中培养和扩增;流式细胞术检测MSC免疫表型和细胞周期;通... 详细信息

目的分离、纯化慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓间充质干细胞(MSC),并对MSC进行功能、特性鉴定。方法获取CML患者的骨髓MSC,应用极限稀释法获取单克隆来源的MSC,并在低血清培养液中培养和扩增;流式细胞术检测MSC免疫表型和细胞周期;通过油红O染色、VonKossa染色和Western印迹检测MSC向脂肪、骨和神经细胞的分化。电镜检测CML患者骨髓MSC的超微结构;通过软琼脂培养法和裸鼠接种,确定CML来源的MSC是否存在致瘤性。结果MSC在相应的诱导条件下可以向骨、脂肪和神经细胞分化。CML来源的MSC在倒置显微镜下为梭形,表达CD29、CD44、CD105,而CD11b,CD31、CD34、CD45、HLA-DR均为阴性。CML来源的MSCBCR/ABL融合基因阴性,不具备体内和体外致瘤性。结论CML患者骨髓中存在具有多向分化能力的MSC,该细胞群体不具备体外和体内致瘤性,表现为正常MSC的生物学特征。

关键词：慢性粒细胞性白血病骨髓间充质干细胞分离纯化功能特性

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血小板内皮细胞黏附分子的剪接体在胚胎干细胞血管形成过程中的表达

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中华医学杂志 2005年第19期85卷 1299-1304页

作者：李宗金徐斌李妍涵卢士红郑以州杨仁池王征宇钱冠清韩忠朝中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程研究中心天津300020 美国哈佛大学医学院艾滋病中心

目的探讨血小板内皮细胞黏附分子(PECAM)1的剪接体在胚胎干细胞分化过程中的表达规律。方法体外培养胚胎干细胞,在细胞因子的作用下形成胚胎样小体(EB);然后将EB种植到胶原中,在细胞因子的作用下诱导出芽性血管新生。分别利用免疫组织... 详细信息

目的探讨血小板内皮细胞黏附分子(PECAM)1的剪接体在胚胎干细胞分化过程中的表达规律。方法体外培养胚胎干细胞,在细胞因子的作用下形成胚胎样小体(EB);然后将EB种植到胶原中,在细胞因子的作用下诱导出芽性血管新生。分别利用免疫组织化学、流式细胞术、逆转录聚合酶链反应等方法检测胚胎干细胞及其分化过程中PECAM1、Oct4及胚胎阶段特异性抗原(SSEA)1的表达。应用克隆分析的方法检测不同的PECAM1剪接体在EB形成和出芽性血管新生过程中的表达分布。结果PECAM1主要表达在胚胎干细胞细胞连结部位。随着胚胎干细胞的分化,Oct4及SSEA1表达下降。胚胎干细胞表达8种PECAM1的剪接体,包括全长、Δ12、Δ14、Δ15、Δ12&14、Δ12&15、Δ14&15、Δ12&14&15,其中Δ15和Δ14&15表达水平最高。在胚胎干细胞形成EB和出芽性血管新生过程中,剪接体表达水平发生变化,其中Δ12&14&15的表达明显上升,Δ15表达下降。结论未分化的胚胎干细胞表达PECAM1,剪接体的表达变化可能参与了胚胎干细胞的血管形成。

关键词：血小板内皮细胞黏附分子剪接体胚胎干细胞血管形成表达细胞培养

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