检索结果-内蒙古大学图书馆

国外医学（药学分册） 2002年第4期29卷 197-200页

作者：齐静杨纯正顾振纶中国医学科学院/中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 苏州大学医学院中药研究所江苏苏州200157

Ras蛋白的异常激活或表达升高可能导致肿瘤的发生 ,近 10年来人们在Ras活化与肿瘤发生多药耐药 (MDR)关系的研究方面取得了明显进展。Ras活化诱发肿瘤MDR的机制主要集中在三个方面 :(1)Ras诱发P 糖蛋白高表达 ;(2 )Ras破坏细胞增殖与凋... 详细信息

Ras蛋白的异常激活或表达升高可能导致肿瘤的发生 ,近 10年来人们在Ras活化与肿瘤发生多药耐药 (MDR)关系的研究方面取得了明显进展。Ras活化诱发肿瘤MDR的机制主要集中在三个方面 :(1)Ras诱发P 糖蛋白高表达 ;(2 )Ras破坏细胞增殖与凋亡的稳态平衡 ;(3)Ras诱发谷胱甘肽S 转移酶高表达。

关键词： Ras蛋白多药耐药肿瘤活化

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肿瘤耐药基因表达的临床意义及其逆转研究

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中国肿瘤 2001年第3期10卷 132-136页

作者：杨纯正刘淑仪中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 北京市肿瘤防治研究所北京100034

对人白血病多药耐药细胞株K562/A02和人肺癌耐PDD细胞株A549PDD系统研究表明 ,耐药表型是多基因的 ,它随诱导的药物不同 ,肿瘤种类 ,分化程度以及宿主微环境的不同而表现为一种或几种耐药基因同时表达。临床研究肿瘤共524例包括白血病26... 详细信息

对人白血病多药耐药细胞株K562/A02和人肺癌耐PDD细胞株A549PDD系统研究表明 ,耐药表型是多基因的 ,它随诱导的药物不同 ,肿瘤种类 ,分化程度以及宿主微环境的不同而表现为一种或几种耐药基因同时表达。临床研究肿瘤共524例包括白血病260例 ,实体瘤264例 ,但目前能在临床证实跟一些肿瘤耐药相关的基因只有mdr1/P gp。用比较敏感细胞和对应的耐药细胞cDNA阵列表达水平的差别新技术发现了除已知mdr1等耐药基因以外新的与耐药相关基因。这也为基因组学在耐药基因研究开辟了新的途径。开发出新的耐药逆转剂PZT11、PND和抗耐药肿瘤新药PHⅡ 7有望在临床发挥作用。抗P gp/抗CD3

关键词：肿瘤耐药基因多药耐药糖蛋白

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巨噬细胞集落刺激因子受体的配基结合区的分析

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科学通报 2000年第2期45卷 178-182页

作者：罗寿青郑德先刘彦信饶青吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

从人胎盘中提取总ＲＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增巨噬细胞集落刺激因子受体（Ｍ－ＣＳＦＲ）胞外区的Ｄ１－３，Ｄ２－３和Ｄ３功能区，并在大肠杆菌中成功地表达了各相应的重组蛋白．酶联免疫吸附分析（ＥＩＡ）证明重组Ｄ... 详细信息

从人胎盘中提取总ＲＮＡ，利用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增巨噬细胞集落刺激因子受体（Ｍ－ＣＳＦＲ）胞外区的Ｄ１－３，Ｄ２－３和Ｄ３功能区，并在大肠杆菌中成功地表达了各相应的重组蛋白．酶联免疫吸附分析（ＥＩＡ）证明重组Ｄ１－３结合Ｍ－ＣＳＦ的能力是重组Ｄ２－３的３倍，前者的Ｋｄ为１１ｎｍｏｌ／Ｌ，后者的为３９ｎｍｏｌ／Ｌ．而重组的Ｄ３则完全没有结合能力．这些数据提示Ｄ２－３是与其配基结合的主体位点，Ｄ１为其配基结合的辅助位点，可能对配基结合位点的刚性也有贡献．

关键词：巨噬细胞集落刺激因子受体结合活性 M-CSF

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CD2胞内区结合蛋白的分子克隆与鉴定

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科学通报 2000年第11期45卷 1163-1167页

作者：邵源肖声翟文静李董刘彦信刘士廉郑德先中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为了探讨ＣＤ２分子的信号传递功能，以编码ＣＤ２胞内区（Ｔｈｒ２１１－Ｇ１ｎ３３６）肽段的ｃＤＮＡ为“钓饵”，采用酵母双杂交系统从激活的人Ｔ淋巴细胞ｃＤＮＡ文库中筛选与之相互作用蛋白的ｃＤＮＡ序列．并采用免疫共沉淀法... 详细信息

为了探讨ＣＤ２分子的信号传递功能，以编码ＣＤ２胞内区（Ｔｈｒ２１１－Ｇ１ｎ３３６）肽段的ｃＤＮＡ为“钓饵”，采用酵母双杂交系统从激活的人Ｔ淋巴细胞ｃＤＮＡ文库中筛选与之相互作用蛋白的ｃＤＮＡ序列．并采用免疫共沉淀法鉴定该蛋白在体内与ＣＤ２胞内区结合的特异性．克隆并鉴定了一个与ＣＤ２胞内区特异性结合的胞内蛋白分子，与ｖ－ｆｏｓ转化效应蛋白（Ｆｔｅ－１）同源Ｆｔｅ－１参与细胞转化、生长、蛋白合成及向线粒体转运蛋白质．蛋白数据库检索表明，Ｆｔｅ－１具有蛋白激酶ＰＫＣ的结合与作用位点。

关键词： CD2胞内区结合蛋白分子克隆鉴定

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srhM-CSFR在昆虫细胞中的表达及其配基结合活性分析

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中国生物化学与分子生物学报 2000年第4期16卷 443-447页

作者：罗寿青郑德先刘彦信李董饶青吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9... 详细信息

从人胎盘中提取总 RNA,利用 RT- PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体 ( M-CSFR)胞外区的、具有全部配基结合活性区域的前三个免疫球样蛋白结构域的 DNA,将其克隆到杆状病毒载体 pbluebac4.5中 ,与杆状病毒 DNA一同转导昆虫细胞 Sf9.经过 2轮筛选 ,获得了纯化的重组病毒 ,再用重组病毒感染昆虫细胞 ,Western印迹检测证明 srh M- CSFR得到了表达 ,它是分泌到上清液中的糖基化蛋白 .Western印迹分析了不同时间点的 srh M- CSFR表达情况 ,结果表明 srh M- CSFR的表达在 96～ 1 2 0 h时达到最大 .srh M- CSFR的产量约为 1 mg/L,EIA法进行配基结合活性分析表明 ,srh M- CSFR与 M- CSF结合的解离常数为 5nmol/L.

关键词： srhM-CSFR 杆状病毒表达系统配基综合活性

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sTRAIL在大肠杆菌中的表达及其诱导细胞凋亡活性的研究

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科学通报 1999年第9期44卷 972-975页

作者：朱迅刘彦信马正宇郑德先中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

TRAIL(TNF relatedapoptosis inducingligand ,简称TRAIL或Apo 2L)是肿瘤坏死因子家族的新成员 ,体外研究表明其具有特异性杀伤肿瘤细胞的功能 .为了进一步探索TRAIL的生物学功能及其临床应用前景 ,首次从中国正常人外周血淋巴细胞中扩... 详细信息

TRAIL(TNF relatedapoptosis inducingligand ,简称TRAIL或Apo 2L)是肿瘤坏死因子家族的新成员 ,体外研究表明其具有特异性杀伤肿瘤细胞的功能 .为了进一步探索TRAIL的生物学功能及其临床应用前景 ,首次从中国正常人外周血淋巴细胞中扩增了TRAIL胞外功能区(sTRAIL) ,并将其插入原核表达载体 ,转化大肠杆菌后 ,可溶型重组蛋白 (rsTRAIL)获得了高效稳定表达 ,其产量达到菌体总蛋白的 30 %左右 .体外研究表明 ,亲和层析纯化后的重组蛋白在 0 .1～ 1 μg/mL的浓度范围内 ,能显著诱导所试全部 7种肿瘤细胞株细胞凋亡 ,但不能诱导正常鼠成纤维细胞株细胞凋亡 ;进一步研究表明 ,rsTRAIL对贲门癌、乳腺癌和恶性胸腺瘤等原代细胞也具有强烈的杀伤作用 ,但不能杀伤正常人外周血淋巴细胞 .此实验结果为rsTRAIL特异性地诱导肿瘤细胞凋亡的生物学作用提供了新的实验证据 ,具有重要的临床应用价值 .

关键词：肿瘤细胞细胞凋亡 sTRAIL 肿瘤坏死因子

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rhM-CSFsR在大肠杆菌中的表达及其配基结合活性分析

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中国生物化学与分子生物学报 1999年第5期15卷 709-713页

作者：罗寿青郑德先饶青刘彦信马正宇吴克复中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)胞外具有结合活性区域的cDNA,经平端连接将其克隆到原核表达载体pET-28a的His-Tag下游,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,重组的人可溶型M-CSFR(rhM-CSFsR... 详细信息

从人胎盘中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增出巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSFR)胞外具有结合活性区域的cDNA,经平端连接将其克隆到原核表达载体pET-28a的His-Tag下游,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经IPTG诱导,重组的人可溶型M-CSFR(rhM-CSFsR)在宿主菌中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的38%.重组蛋白经Ni2+组氨酸结合树脂螯合层析柱纯化,获得了纯化的rhM-CSFsR,经SDS-PAGE显示为单一区带,其表观分子量为34kD.用酶联免疫吸附分析(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)证明rhM-CSFsR有明显的M-CSF专一结合活性,Kd值为7.8nmol/L,只有一个M-CSF结合位点.本实验结果显示原核表达的rhM-CSFsR具有明显的配基结合活性,提示M-CSFR的糖基化程度对于其配基结合活性不是必不可少的。

关键词：基因表达重组巨噬细胞集落刺激因子受体

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抗Pgp抗体PHMA02在肿瘤临床中的应用研究及预后分析

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中国肿瘤临床 1999年第9期26卷 645-649页

作者：许元富杨纯正熊冬生邵晓枫王珊孙云晖薛艳萍李维廉中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津市300020 重庆医科大学北京协和医院天津市第二中心医院肿瘤研究室

目的：应用单抗ＰＨＭＡ０２对１４８例肿瘤患者Ｐ－糖蛋白（Ｐｇｐ）的表达进行检测，并对该单抗的特异性、检测结果与临床符合率以及预后的准确性进行评估。方法：应用免疫组化法检测了４７例实体瘤标本，应用药敏实验检测１５ ... 详细信息

目的：应用单抗ＰＨＭＡ０２对１４８例肿瘤患者Ｐ－糖蛋白（Ｐｇｐ）的表达进行检测，并对该单抗的特异性、检测结果与临床符合率以及预后的准确性进行评估。方法：应用免疫组化法检测了４７例实体瘤标本，应用药敏实验检测１５例儿童恶性肿瘤；应用间接免疫荧光法、ＲＴ－ＰＣＲ法和药敏实验检测了１０１例急性白血病（ＡＬ）患者；用医学统计软件分析数据。结果：１）在４７例实体瘤标本中，儿童恶性肿瘤中多药耐药阳性（ＭＤＲ＋）表达率较高（８６７％），乳腺癌淋巴结转移灶中ＭＤＲ＋表达率为６６７％，显著高于乳腺癌原发灶的３００％（Ｐ＜００１）。２）在１０１例急性白血病（ＡＬ）患者中，难治和复发组的ＭＤＲ＋表达率（５２９％）显著高于初诊组（１９２％）（Ｐ＜００１）。３）单抗ＰＨＭＡ０２的检测结果与国外同型单抗ＪＳＢ－１的平行检测结果呈正的直线相关（Ｐ＜００５），与ＲＴ－ＰＣＲ的检测结果具有相关性（Ｐ＜００１）；部分标本的药敏实验结果与单抗ＰＨＭＡ０２的检测结果基本一致。结论：１）单抗ＰＨＭＡ０２的检测结果与临床有较好的符合率，可在临床上应用。２）Ｐｇｐ在成人肺癌和乳腺癌中均有一?

关键词：单克隆抗体 P-糖蛋白多药耐药肿瘤治疗

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入淋巴细胞CD2胞内区结合蛋白的分子克隆

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中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 158-158页

作者：邵源肖声李董刘彦信刘士廉郑德先中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

CD2分子,又称E受体,分布于胸腺细胞及所有成熟T淋巴细胞和大部分NK细胞的表面,是T淋巴细胞的粘附和信号分子,在T淋巴细胞分化、成熟、识别、粘附、激活和凋亡等方面都具有重要作用.CD2分子的胞内区含有能调节细胞识别作用、粘附作用和... 详细信息

CD2分子,又称E受体,分布于胸腺细胞及所有成熟T淋巴细胞和大部分NK细胞的表面,是T淋巴细胞的粘附和信号分子,在T淋巴细胞分化、成熟、识别、粘附、激活和凋亡等方面都具有重要作用.CD2分子的胞内区含有能调节细胞识别作用、粘附作用和细胞信号传递作用的不同功能区.近年的研究发现,CD2与其配体CD58、CD48的结合介导T细胞识别、粘附和激活作用.而以抗CD2不同抗原决定簇的单克隆抗体处理T细胞,则引起T细胞的不同应答反应.T112和T113处理T淋巴细胞引起细胞激活,而T11l和D66处理T淋巴细胞引起细胞激活后凋亡(activation induced cell death),其原因尚不明了.本实验室在多年研究的基础上推测,CD2胞内区可能传递不同的刺激信号,从而引起不同的细胞应答反应.为了验证这一假说,本研究采用酵母双杂交系统(two hybrid system),首次克隆得到了一与CD2胞内区结合的下游蛋白,并对该蛋白的功能进行探讨,结果如下:采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从人外周血淋巴细胞mRNA中扩增了CD2胞区cDNA片段,并将其命名为CD2c.

关键词： CD2 胞内区酵母双杂交系统 v-fos转化效应蛋白

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8-氯腺苷诱导多种肿瘤细胞凋亡

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中华肿瘤杂志 1998年第2期20卷 88-89页

作者：张四清郑德先刘士廉郑萍闵吉梅张礼和中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院分子生物学国家重点实验室中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室北京医科大学药学院天然药物与仿生药物国家重点实验室

目的研究８－氯腺苷（８ＣＡ）对肿瘤细胞生长和凋亡的作用。方法以不同浓度的８ＣＡ处理在体外培养的肿瘤细胞株，使用ＭＴＴ法测定细胞生长曲线，以光学显微镜、流式细胞仪和ＤＮＡ片段化分析细胞凋亡。结果１０μｍｏｌ／Ｌ８ＣＡ处... 详细信息

目的研究８－氯腺苷（８ＣＡ）对肿瘤细胞生长和凋亡的作用。方法以不同浓度的８ＣＡ处理在体外培养的肿瘤细胞株，使用ＭＴＴ法测定细胞生长曲线，以光学显微镜、流式细胞仪和ＤＮＡ片段化分析细胞凋亡。结果１０μｍｏｌ／Ｌ８ＣＡ处理４８小时，可显著抑制肿瘤细胞的增殖。ＭＴＴ曲线测定发现，所试细胞对８ＣＡ的敏感程度依次为：ＨＬ－６０白血病细胞系最敏感，ＭＧｃ－８０３胃癌细胞系次之，ＮＩＨ３Ｔ３正常纤维母细胞最不敏感。进一步研究发现，８ＣＡ抑制ＨＬ－６０和ＭＧｃ－８０３肿瘤细胞生长的机制是诱导肿瘤细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ），肿瘤细胞具有典型的细胞凋亡形态特征，基因组ＤＮＡ发生断裂，并在琼脂糖凝胶中呈现梯形图谱，流式细胞仪分析可检出凋亡峰。结论８ＣＡ可作为细胞凋亡诱导剂用于肿瘤治疗。

关键词：细胞凋亡氯腺苷肿瘤细胞

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