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中华血液学杂志 2015年第11期36卷 897-898页

作者：施均郑以州中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020 实验血液学国家重点实验室

再生障碍性贫血（AA）“种子”、“虫子”和“土壤”，即造血干／祖细胞（HSPC）、异常免疫及造血微环境的病理机制学说堪称经典。60％～80％的AA患者经强烈免疫抑制治疗（IST）获得疗效是支持“虫子”学说的有力证据。AA异常免疫病理... 详细信息

再生障碍性贫血（AA）“种子”、“虫子”和“土壤”，即造血干／祖细胞（HSPC）、异常免疫及造血微环境的病理机制学说堪称经典。60％～80％的AA患者经强烈免疫抑制治疗（IST）获得疗效是支持“虫子”学说的有力证据。AA异常免疫病理机制及IST策略的探索性研究贯穿于AA的研究史，极大地推动了我们对AA的认识。然而，回顾AA的研究历程，受研究技术手段的限制，我们对HSPC及造血微环境的认识仍较为肤浅。得益于近些年二代测序技术的迅猛发展，结合细胞遗传学分析技术，我们对血液系统肿瘤，特别是髓系肿瘤如骨髓增生异常综合征（MDS）的克隆性造血问题有了诸多新的认知。上述研究手段的发展同样推动了AAHSPC克隆性造血的研究。因此，如何科学认识AA与克隆性造血的关系，廓清克隆性造血在骨髓衰竭性疾病（如AA、MDS）中的病理作用，不仅有助于科学地引导AAHSPC的研究方向，更可针对性地明晰AA诊断及其与MDS鉴别诊断的临床思维。

关键词：再生障碍性贫血克隆性造血骨髓增生异常综合征免疫病理机制造血干/祖细胞细胞遗传学分析造血微环境免疫抑制治疗

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利妥昔单抗联合二线方案治疗七例复发难治性霍奇金淋巴瘤患者疗效观察

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中华血液学杂志 2015年第7期36卷 578-582页

作者：刘慧敏李姮熊文婕易树华邹德慧邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨利妥昔单抗联合二线方案治疗复发难治性霍奇金淋巴瘤（HL）患者的疗效及安全性.方法 7例复发难治性HL患者中2例接受R-GDP（E）[利妥昔单抗、吉西他滨、顺铂、地塞米松、（依托泊苷）]方案治疗,2例接受R-IGVP（利妥昔单抗、异... 详细信息

目的探讨利妥昔单抗联合二线方案治疗复发难治性霍奇金淋巴瘤（HL）患者的疗效及安全性.方法 7例复发难治性HL患者中2例接受R-GDP（E）[利妥昔单抗、吉西他滨、顺铂、地塞米松、（依托泊苷）]方案治疗,2例接受R-IGVP（利妥昔单抗、异环磷酰胺、吉西他滨、长春瑞滨、泼尼松）方案治疗,3例接受R-BEACOPP（利妥昔单抗、博来霉素、依托泊苷、多柔比星、环磷酰胺、长春新碱、甲基苄肼、泼尼松）方案治疗.观察患者治疗过程中及其后的不良反应和疗效.结果 7例患者中男3例,女4例,发病时中位年龄21（12～36）岁;结节性淋巴细胞为主型HL（NLPHL）1例,经典型HL 6例（包括4例结节硬化型,1例淋巴细胞为主型和1例混合细胞型）.中位疗程数为4（1～4）个,中位随访时间为29（24～58）个月.7例患者中4例达完全缓解,2例达疾病稳定,1例死亡.2年总生存率为85.7％.不良反应均可耐受,以骨髓抑制为主.5例患者化疗后行外周血自体造血干细胞移植治疗.结论利妥昔单抗联合二线方案治疗复发难治性HL患者安全、有效.

关键词：复发霍奇金病外周血干细胞移植利妥昔单抗

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自体造血干细胞移植治疗25例侵袭性外周T细胞淋巴瘤患者临床分析

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中华血液学杂志 2015年第6期36卷 455-459页

作者：邹德慧黄文阳刘宏傅明伟李增军隋伟薇齐军元赵耀中汝昆韩明哲邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨大剂量化疗联合自体造血干细胞移植（ASCT）治疗侵袭性外周T细胞淋巴瘤（PTCL）的疗效.方法回顾性分析1997年5月至2013年6月于完全缓解（CR）期接受ASCT治疗的25例侵袭性PTCL患者的临床资料.结果 ①25例患者中男16例,女9例,... 详细信息

目的探讨大剂量化疗联合自体造血干细胞移植（ASCT）治疗侵袭性外周T细胞淋巴瘤（PTCL）的疗效.方法回顾性分析1997年5月至2013年6月于完全缓解（CR）期接受ASCT治疗的25例侵袭性PTCL患者的临床资料.结果 ①25例患者中男16例,女9例,中位发病年龄30（12～54）岁.病理类型包括PTCL非特指型（PTCL-U） 16例、血管免疫母细胞淋巴瘤（AITL）4例、间变大细胞淋巴瘤（ALCL）3例和肝脾T细胞淋巴瘤（HSTL）2例.临床分期Ⅲ期和Ⅳ期分别为8例和17例;其中合并骨髓侵犯者9例.移植前19例处于CR1期,另6例为CR2期.②2例HSTL均为骨髓侵犯、国际预后指数评分高危患者,联合化疗后获得CR1并行ASCT巩固治疗,但均于移植后12个月内早期复发、死亡.其余23例患者中位随访38（14～110）个月,3年无进展生存（PFS）率和总体生存（OS）率分别为（63.1±10.5）％和（71.8±9.9）％.CR1期（17例）移植者的生存有优于CR2期（6例）移植者的趋势[3年PFS率（74.9±11.0）％对（33.3±19.2）％,P=0.092;3年OS率（80.2±10.4）％对（50.0±20.4）％,P=0.043].无骨髓侵犯者的生存有优于骨髓侵犯者的趋势[3年PFS率（77.9±11.3）％对（40.0±17.4）％,P=0.142;OS率（84.4±10.2）％对（53.3±17.3）％,P=0.076].结论 ASCT改善化疗敏感侵袭性PTCL患者的生存.移植前非CR1状态和淋巴瘤骨髓侵犯可能是影响ASCT疗效的不良预后因素.HSTL患者预后差,ASCT后早期复发率高,需要进一步探索有效的治疗方案.

关键词：淋巴瘤,T细胞,外周造血干细胞移植存活率分析

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60岁以下成人Ph阴性急性淋巴细胞白血病患者自体造血干细胞移植疗效分析——单中心BDHALL2000/02方案临床研究结果

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中华血液学杂志 2015年第6期36卷 480-484页

作者：王婷玉邹德慧章艳茹李增军隋伟薇傅明伟赵耀中王建祥秘营昌冯四洲韩明哲邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨自体造血干细胞移植（AHSCT）治疗年轻成人Ph-急性淋巴细胞白血病（ALL）的疗效.方法纳入56例于2000年1月至2007年12月接受BDHALL2000/02方案治疗并于CR1期行AHSCT的成人（15～60岁）Ph ALL患者,对其进行生存和预后影响因素分... 详细信息

目的探讨自体造血干细胞移植（AHSCT）治疗年轻成人Ph-急性淋巴细胞白血病（ALL）的疗效.方法纳入56例于2000年1月至2007年12月接受BDHALL2000/02方案治疗并于CR1期行AHSCT的成人（15～60岁）Ph ALL患者,对其进行生存和预后影响因素分析.结果 56例患者中标危、中危和高危者分别为23例（41.1％）、19例（33.9％）和14例（25.0％）.中位随访75（7～177）个月.5年总生存（0S）、无事件生存（EFS）、无复发生存（RFS）、复发率分别为（51.8±6.7）％、（51.8±6.7）％、（60.5±6.9）％、（39.1±6.9）％.标、中、高危组患者的5年OS率分别为（60.9±10.2）％、（52.6±11.5）％和（35.7±12.8）％,EFS率分别为（60.9± 10.2）％、（52.6±11.5）％和（35.7±12.8）％,RFS率分别为（68.3±9.9）％、（62.5± 12.1）％和（44.9± 14.1）％,复发率分别为（31.7±9.9）％、（37.5±12.1）％和（55.1±14.1）％.标危和中危组、中危和高危组患者的上述指标比较差异均无统计学意义（P值均＞0.05）;标危组患者的OS、EFS率高于高危组（P值分别为0.040和0.029）,而RFS和复发率差异则无统计学意义（P值均＞0.05）.对年龄≥35岁、完全缓解时间超过5周、初诊白细胞水平、免疫表型（B/T）、伴髓系表达、超二倍体染色体核型、复杂核型、完全缓解至AHSCT间隔时间、预处理方案是否包含TBI等进行单因素分析,均未显示对预后存在影响（P值均＞0.05）.结论年轻成人Ph-ALL患者经BDHALL2000/02方案治疗可以获得较高的缓解率,缓解后给予早期序贯强化/巩固治疗后进行AHSCT疗效显著,是标危、中危组及无合适供者的高危组患者的合适选择.

关键词：造血干细胞移植白血病,淋巴样费城染色体成年人

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人诱导多能干细胞的成瘤性发生机制及干预策略

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中华血液学杂志 2015年第3期36卷 258-261页

作者：刘淑平程涛袁卫平中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

2006年Takahashi等[1]首次利用逆转录病毒作为载体将OCT4、SOX2、KLF4、c-Myc4个转录因子导入到小鼠的成纤维细胞内使之重编程为类似＂胚胎干细胞＂形态的多能干细胞,命名为＂诱导多能干细胞（iPSC）＂.随后他们证明了人皮肤成纤维细胞... 详细信息

2006年Takahashi等[1]首次利用逆转录病毒作为载体将OCT4、SOX2、KLF4、c-Myc4个转录因子导入到小鼠的成纤维细胞内使之重编程为类似＂胚胎干细胞＂形态的多能干细胞,命名为＂诱导多能干细胞（iPSC）＂.随后他们证明了人皮肤成纤维细胞也能重编程成为iPSC[2-3].2013年研究发现白血病细胞也能重编成为iPSC[4].

关键词：多能干细胞发生机制人皮肤成纤维细胞成瘤性干预逆转录病毒胚胎干细胞白血病细胞

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RRM1对胆道系统恶性肿瘤患者术后辅助化疗疗效的预测价值

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山东医药 2016年第41期56卷 46-48页

作者：韩月婷邓婷潘虹刘锐王霞巴一天津医科大学肿瘤医院.国家肿瘤临床医学研究中心.天津市"肿瘤防治"重点实验室.天津市恶性肿瘤临床医学研究中心天津300060 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所

目的：探讨胆道系统恶性肿瘤（BTC）组织中核苷酸还原酶 M1（RRM1）表达对术后辅助化疗疗效的预测价值。方法采集164例接受手术治疗的临床分期Ⅰ～Ⅲ期 BTC 患者标本，其中接受吉西他滨术后辅助化疗4周期以上者86例（化疗组），未化疗... 详细信息

目的：探讨胆道系统恶性肿瘤（BTC）组织中核苷酸还原酶 M1（RRM1）表达对术后辅助化疗疗效的预测价值。方法采集164例接受手术治疗的临床分期Ⅰ～Ⅲ期 BTC 患者标本，其中接受吉西他滨术后辅助化疗4周期以上者86例（化疗组），未化疗者78例（未化疗组）。采用免疫组化法检测肿瘤组织中 RRM1表达，Kaplan-Meier 生存曲线分析比较两组患者的中位生存时间。结果免疫组化结果显示，164例样本中 RRM1高表达率43．3％；低表达率56．7％。胆囊癌、胆管癌、壶腹癌患者 RRM1表达情况差异无统计学意义（P 均＞0．05），RRM1表达与 BTC 患者各临床病理特征无统计学相关性（P 均＞0．05）。未化疗组中，RRM1高表达者的总生存期（OS）高于低表达者（P ＜0．05）；化疗组中，RRM1高表达者 OS 低于低表达者（P ＜0．001）。结论在 BTC 术后未化疗患者中，RRM1高表达提示预后较好；而在接受吉西他滨辅助化疗患者中，RRM1低表达者更能从术后吉西他滨化疗中受益。

关键词：胆道系统恶性肿瘤核苷酸还原酶 M1 亚基吉西他滨术后辅助化疗

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scFvOD20：sTRAIL蛋白诱导BJAB细胞凋亡的实验研究

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现代免疫学 2016年第3期36卷 183-188页

作者：杨雨琪张晓龙张砚君吕军强孙睿声安鹏姣于楠楠天津医科大学药学院基础医学院天津300070 中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院血液研究所/实验血液学国家重点实验室天津300020

研究融合蛋白scFvCD20:sTRAIL诱导B淋巴瘤细胞BJAB凋亡的发生以及凋亡相关蛋白的表达变化。采用PCR、重叠PCR、酶切、连接等方法构建***20:sTRAIL、pLentiR,ISZ-sTRAIL,***20及***-FP慢病毒表达载体,瞬时转染293T细胞获得含有scFvCD20:sTRAII。融合蛋白的细胞培养上清,采用CCK8细胞增殖抑制实验检测scFvCD20:sTRAIL融合蛋白对CD20阳性NAB细胞的生长抑制作用,流式细胞仪检测其对BJAB细胞诱导凋亡,Westernblotting检测凋亡过程中内源性及外源性凋亡信号传导途径相关蛋白的变化。结果显示,成功构建了慢病毒表达载体***20:sTRAIL、***-sTRAIL、***20及***,瞬时转染293T细胞后并可获得融合蛋白的表达。与ISZ-sTRAIL比较,融合蛋白seFvCD20}sTRAIL可不同程度地提高对CD20阳性BJAB细胞的生长抑制作用,凋亡细胞增多,其中Bcl-2表达下降、Bax表达升高,Caspase8、Caspase9、Caspase3及PARP被特异性剪切活化。研究表明,融合蛋白scFvCD20:sTRAIL可诱导BJAB细胞凋亡,与bcl-2/bax的表达变化以及Caspase的剪切活化有关。

关键词：基因表达聚合酶链反应慢病毒属细胞凋亡细胞增殖原癌基因重组融合蛋白质类转染

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双病毒共感染的人脐带间充质干细胞多重靶向肝癌细胞的治疗体系的建立

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生物医学工程与临床 2016年第5期20卷 450-457页

作者：杨圆圆卢杨张晓龙张晴李真真张砚君中国医学科学院.北京协和医学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 西安交通大学第二附属医院生物诊断治疗国家地方联合工程研究中心陕西西安710004

目的基于间充质干细胞(MSC)向肿瘤部位归巢的能力,利用E1A基因修饰的人脐带间充质干细胞(HUMSC)包装出携带人端粒酶逆转录启动子(hTERTp),以驱动抑癌基因的腺病毒,并感染HepG2肝癌细胞系。方法利用组织块贴壁法从脐带Wharton’s jelly(... 详细信息

目的基于间充质干细胞(MSC)向肿瘤部位归巢的能力,利用E1A基因修饰的人脐带间充质干细胞(HUMSC)包装出携带人端粒酶逆转录启动子(hTERTp),以驱动抑癌基因的腺病毒,并感染HepG2肝癌细胞系。方法利用组织块贴壁法从脐带Wharton’s jelly(WJ)分离培养HUMSC。以pGL3-basic、pCDH1-MSC1-EF1-Ds Red、pAd-Track等载体为基础,用聚合酶链反应(PCR)、overlap PCR、酶切、连接等技术构建pGL3-hTERTp报告基因载体、pLentiR.E1A慢病毒表达载体、pAd-hTERTp腺病毒表达载体,经测序验证其正确性。利用双荧光素酶的方法鉴定hTERTp的特异性。利用实时定量PCR的方法分别检测***+pAd-Track(共转染腺病毒及对照慢病毒的MSC)和***.E1A+pAdTrack中不同时间点的病毒相对拷贝数,用电子显微镜观察HUMSC中病毒颗粒的产生。流式细胞术检测由双病毒共感染的HUMSC包装出的腺病毒对HepG2细胞系的感染效率。Transwell方法研究双病毒感染对HUMSC向HepG2细胞趋化的影响。结果成功从脐带WJ组织中分离培养HUMSC。成功构建载体pGL3-hTERTp、pLentiR.E1A、pAd-hTERTp。双荧光素酶方法证明hTERTp在不同肿瘤细胞中具有较高的转录活性,而在正常细胞中转录活性极低。Ad-Track及LentiR.E1A共同感染HUMSC后,随着腺病毒早期复制基因E1A逐渐表达,Ad-Track启动复制程序,最终将MSC裂解并释放具有感染能力的病毒颗粒,进一步感染HepG2细胞。感染双病毒的HUMSC与对照组一致在LentiR.E1A感染后32 h内可以穿过Transwell小室,向培养HepG2细胞的下室迁移。结论经过E1A修饰的HUMSC可包装出携带hTERTp肿瘤特异启动子的复制缺陷型腺病毒,并进一步感染肿瘤细胞的多重靶向治疗系统,为肿瘤的靶向基因治疗提供了新思路。

关键词：脐带间充质干细胞 E1A 腺病毒慢病毒人端粒酶逆转录启动子(hTERTp) 载体肿瘤细胞

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沉默CIAPIN1基因对K562细胞增殖能力的影响

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1910-1911页

作者：王齐王建李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:探讨靶向干扰CIAPIN1基因表达对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系K562细胞增殖能力的影响。方法:针对CIAPIN1基因构建shRNA真核表达载体并稳定转染K562细胞系。Real-time PCR及Western blotting技术鉴定干扰效率;CIAP-

关键词：细胞增殖 K562 体内成瘤 CIAPIN1

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沉默SIRT2基因抑制AML耐药HL60A细胞株的增殖

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1913-1914页

作者：许华王齐李元叶李庆华庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:探讨靶向干扰SIRT2基因表达对急性粒细胞白血病(AML)多药耐药细胞株HL60A细胞增殖的影响。方法:针对SIRT2基因构建shRNA真核表达载体,制备慢病毒并感染HL60A细胞。沉默SIRT2基因之后,改良MTT法检测对HL60A细胞活力的影响;甲基纤维... 详细信息

目的:探讨靶向干扰SIRT2基因表达对急性粒细胞白血病(AML)多药耐药细胞株HL60A细胞增殖的影响。方法:针对SIRT2基因构建shRNA真核表达载体,制备慢病毒并感染HL60A细胞。沉默SIRT2基因之后,改良MTT法检测对HL60A细胞活力的影响;甲基纤维素集落形成实验观察对HL60A细胞集落形成能力的影响;采用流式细胞术检测分析对HL60A细胞

关键词： HL60A 细胞活力 AML SIRT2 沉默

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