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60岁以下成人Ph／BCR—ABL阳性急性淋巴细胞白血病患者疗效分析——单中心BDHALL2000／02方案临床研究结果

中华血液学杂志 2013年第6期34卷 493-497页

作者：章艳茹王婷玉邹德慧隋伟薇李增军徐燕傅明伟赵耀中齐军元王建祥秘营昌邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的评价BDHALL2000／02方案治疗60岁以下成人Ph染色体／BCR—ABL融合基因阳性（简称Ph＋）急性淋巴细胞白血病（ALL）的疗效，并比较分析不同亚组的治疗结果。方法2001年1月至2011年6月就诊的42例成人Ph＋ALL（年龄15—60岁）患者纳入... 详细信息

目的评价BDHALL2000／02方案治疗60岁以下成人Ph染色体／BCR—ABL融合基因阳性（简称Ph＋）急性淋巴细胞白血病（ALL）的疗效，并比较分析不同亚组的治疗结果。方法2001年1月至2011年6月就诊的42例成人Ph＋ALL（年龄15—60岁）患者纳入前瞻性、非随机BDHALL2000／02方案临床研究。患者接受标准VDCP±L±伊马替尼（IM）诱导治疗，缓解后予以改良Hyper—CVAD／MA方案强化巩固，有合适供者的患者在第1次完全缓解（CR，）期行异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）。无合适供者的患者序贯强化巩固治疗±IM，获得分子生物学缓解（MCR）者可选择接受自体造血干细胞移植（ASCT），ASCT后接受2年MM4-VP±IM维持治疗；其他患者继续完成再诱导、巩固、维持治疗。分析患者的无病生存（DFS）、总生存（OS）情况和复发率（RR）。结果39例（92．9％）患者获得CR，其中1个疗程CR率为83．3％。随访至2012年4月30日，28例规范治疗的患者，中位随访26．5（8～75）个月，DFS期和0s期分别为（22．0±3．5）和（37．0±5．3）个月，累积RR率为（43．7±9．7）％。化疗组7例均复发；ASCT组5例中3例移植前后未使用IM者在移植后1年内均复发，另2例应用IM者持续MCR已达移植后35和12个月；allo—HSCT组16例中移植相关死亡2例，5例复发；allo—HSCT、ASCT和化疗组中位0s期分别为未达到、22和14个月，预期3年0s率分别为（66．7±12．2）％、（25．0±21．7）％和（16．74-15．2）％（P=0．014）；三组的中位DFS期分别为未达到、24和10个月（P=0．002），预期3年DFS率分别为（56．3±12．4）％、（26．7±22．6）％和0（P=0．002）。结论IM联合化疗及Hyper—CVAD／MA强化治疗可提高Ph＋ALL患者缓解率和缓解质量，增加移植的可行性。allo-I-／SCT仍然是年轻、有合适供者患者的首选治疗方法。对于无合适供者获得MCR的患者，ASCT联合IM治疗值得进一步探讨。

关键词：白血病淋巴样成年人费城染色体

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脐带间充质干细胞降低HL-60对阿糖胞苷的敏感性

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中国实验血液学杂志 2013年第3期21卷 760-764页

作者：崔俊杰池颖杜文静杨少光李雪陈芳马凤霞卢士红韩忠朝中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究探讨脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对HL-60白血病细胞药物治疗敏感性的影响,为研究hUC-MSC对白血病细胞的调节作用提供资料。体外建立HL-60细胞与hUC-MSC的transwell及直接接触共培养体系;使用流式细胞仪检测阿糖胞苷对HL-60细胞凋... 详细信息

本研究探讨脐带间充质干细胞(hUC-MSC)对HL-60白血病细胞药物治疗敏感性的影响,为研究hUC-MSC对白血病细胞的调节作用提供资料。体外建立HL-60细胞与hUC-MSC的transwell及直接接触共培养体系;使用流式细胞仪检测阿糖胞苷对HL-60细胞凋亡的影响,并检测与hUC-MSC共培养对HL-60细胞细胞周期的影响;应用RT-PCR和Western blot检测Caspase 3 mRNA和蛋白表达变化;通过transwell共培养体系观察hUC-MSC对HL-60细胞凋亡影响的作用机制。结果表明,与hUC-MSC共培养可以显著减少阿糖胞苷诱导的HL-60细胞凋亡(P<0.05);hUC-MSC可以将HL-60细胞阻滞于G0/G1期,阻止其进入S期(P<0.05);与hUC-MSC共培养可以降低HL-60细胞中Caspase 3 mRNA和蛋白水平的表达(P<0.05);transwell体系中hUC-MSC同样可以减少阿糖胞苷诱导的HL-60细胞的凋亡(P<0.05)。结论:hUC-MSC通过分泌可溶性细胞因子减少阿糖胞苷诱导的HL-60细胞凋亡,其机制可能与通过调节HL-60细胞周期及下调Caspase 3表达有关。

关键词：脐带间充质干细胞 HL-60细胞 Caspase3 阿糖胞苷

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mTOR信号通路在造血及其它系统衰老中作用的研究进展

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中国实验血液学杂志 2013年第5期21卷 1313-1317页

作者：华春兰程涛袁卫平中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,在调节细胞的生长、增殖和存活中起着重要的作用。mTOR复合体调控mRNA的转录、核糖体的合成及代谢相关基因的表达,通过磷酸化其下游的靶蛋白如S6... 详细信息

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,在调节细胞的生长、增殖和存活中起着重要的作用。mTOR复合体调控mRNA的转录、核糖体的合成及代谢相关基因的表达,通过磷酸化其下游的靶蛋白如S6蛋白激酶和4E-BP1等来调节细胞的活动。近年来,mTOR分子及其相关信号通路在衰老调控中所起的作用渐渐被人们所认识。对mTOR信号通路在衰老中的生物学功能和调节机制的研究,不仅可以深入了解细胞自我更新和分化的机制,而且对衰老及其相关疾病的治疗、预防及寻找潜在的治疗靶点与药物具有重要意义。本文主要介绍mTOR信号通路在造血系统及其他系统衰老中研究的最新进展。

关键词： mTOR信号通路造血系统衰老

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悬滴和悬浮法相结合培养胰腺祖细胞

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中国医学科学院学报 2013年第3期35卷 270-274页

作者：马凤霞陈芳池颖杨少光卢士红韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液病医院/血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的建立悬滴和悬浮法相结合培养胰腺祖细胞的方法,研究该方法能否诱导胰腺祖细胞在体外分化为成熟的内分泌细胞。方法体外分离小鼠12.5d胚胎胰腺,消化成单个细胞,悬滴法培养24h后细胞形成球体,将细胞球转移到下层为培养基漂浮的膜上培... 详细信息

目的建立悬滴和悬浮法相结合培养胰腺祖细胞的方法,研究该方法能否诱导胰腺祖细胞在体外分化为成熟的内分泌细胞。方法体外分离小鼠12.5d胚胎胰腺,消化成单个细胞,悬滴法培养24h后细胞形成球体,将细胞球转移到下层为培养基漂浮的膜上培养6d。培养过程中,采用免疫组织化学方法检测胰腺十二指肠同源盒基因1(PDX-1)和神经源素3(Ngn3)的表达及胰岛素、胰高血糖素、羧肽酶(CPA)的表达,酶联免疫吸附法检测葡萄糖刺激后细胞球分泌胰岛素的变化,定量PCR检测培养过程中胰腺标志表达的变化。结果细胞球培养1d后,有大量PDX-1表达,而且这些PDX-1阳性细胞增殖。细胞球培养3d后,Ngn3大量表达,Ngn3阳性细胞不增殖。培养7d后,分化的胰腺细胞表达成熟内、外分泌细胞的标志,而且胰腺标志的表达与体内表达模式一致。高糖能刺激细胞球分泌胰岛素。结论悬滴和悬浮法相结合能诱导胰腺祖细胞在体外分化为成熟的内分泌细胞。

关键词：胰岛素腺十二指肠同源盒基因1 神经源素3 胰腺祖细胞

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沉默DOT1L基因对急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖的影响

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中国实验血液学杂志 2013年第4期21卷 861-865页

作者：张玉娟李华文常国强张洪菊王建蔺亚妮周家喜李庆华庞天翔中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究旨在探讨DOT1L基因对人白血病THP-1细胞增殖的影响。针对DOT1L mRNA的第732-752靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性干扰载体,制备慢病毒并感染THP-1细胞,用强力霉素(Dox)诱导干扰载体表达;应用RT-PCR的方法验证干扰效率... 详细信息

本研究旨在探讨DOT1L基因对人白血病THP-1细胞增殖的影响。针对DOT1L mRNA的第732-752靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性干扰载体,制备慢病毒并感染THP-1细胞,用强力霉素(Dox)诱导干扰载体表达;应用RT-PCR的方法验证干扰效率;采用改良MTT法检测干扰DOT1L基因后对THP-1细胞增殖能力的影响;用细胞集落形成实验观察干扰后细胞集落形成的能力;用流式细胞术分析细胞周期的变化。结果表明:THP-1细胞干扰后DOT1L基因的表达显著降低;DOT1L基因的表达下调抑制了细胞的增殖能力、集落形成能力并将细胞周期阻滞在G0/G1期。结论:利用shRNA靶向干扰DOT1L基因的表达,可以有效抑制人急性单核细胞白血病细胞THP-1的增殖。

关键词： DOT1L基因急性单核细胞白血病 THP-1细胞

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IKZF1基因IK6亚型在成人急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

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中国实验血液学杂志 2013年第3期21卷 539-543页

作者：袁田赵邢力张丽霞李庆华田征唐克晶王迎林冬李巍刘兵城周春林王敏王建祥秘营昌中国医学科学院、北京协和医学院血液病医院、血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究通过检测IKZF1基因在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓细胞中的表达亚型,探讨IK6功能缺陷亚型患者的临床特征及预后。应用巢式RT-PCR方法检测79例初诊ALL患者IKZF1基因表达亚型,统计IK6亚型阳性患者比例,分析IK6阳性患者年龄... 详细信息

本研究通过检测IKZF1基因在成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓细胞中的表达亚型,探讨IK6功能缺陷亚型患者的临床特征及预后。应用巢式RT-PCR方法检测79例初诊ALL患者IKZF1基因表达亚型,统计IK6亚型阳性患者比例,分析IK6阳性患者年龄、性别、白细胞计数、融合基因、危险分层特点,比较IK6阳性组与IK6阴性组患者总生存率、无病生存率的差异。结果表明:在ALL患者中检测到IKZF1基因表达的功能亚型为IK1、IK2/3,功能缺陷亚型主要为IK4、IK6、IK8、IK9;表达IK6亚型患者占B-ALL患者的34.4%,占T-ALL患者的22.2%;B-ALL中IK6阳性组患者BCR/ABL1阳性率及高危组患者比例均高于IK6阴性组(P=0.027,P=0.048),而两组的年龄、性别、白细胞计数无显著性差异,T-ALL中IK6阳性组与IK6阴性组的年龄、性别、白细胞计数、危险分层均无显著性差异,在Ph染色体阴性的B-ALL患者中,IK6阳性组的总生存率和无病生存率均低于IK6阴性组(P=0.009,P=0.002)。结论:在成人ALL中IKZF1基因IK6表达亚型为主要功能缺陷亚型,IK6亚型的表达可作为Ph染色体阴性的B-ALL患者预后危险因素,指导成人ALL治疗。

关键词：急性淋巴细胞白血病 IKZF1基因 IK6亚型

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先天性纯红细胞再生障碍性贫血斑马鱼模型相关microRNA的组学研究

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发育医学电子杂志 2014年第3期2卷 139-145页

作者：张倩宋斌峰万扬张昭军鲍丙浩谢尚论刘汉芝竺晓凡袁卫平贾海波方向东中国科学院北京基因组研究所中科院基因组学与信息重点实验室北京100101 华中科技大学生命科学与技术学院人类基因组研究中心分子生物物理教育部重点实验室武汉430074 中国医学科学院协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(DBA)相关microRNA的表达特征及其调控机制。方法利用morpholino技术建立核糖体蛋白基因Rps19表达不足的DBA斑马鱼模型和Rps19与p53同时表达不足的斑马鱼模型,利用新一代高通量测序(RNA-seq)技术,... 详细信息

目的探讨先天性纯红细胞再生障碍性贫血(DBA)相关microRNA的表达特征及其调控机制。方法利用morpholino技术建立核糖体蛋白基因Rps19表达不足的DBA斑马鱼模型和Rps19与p53同时表达不足的斑马鱼模型,利用新一代高通量测序(RNA-seq)技术,研究DBA斑马鱼模型的microRNA表达谱的特征及p53在其中的调控作用。结果 Rps19 MO的斑马鱼胚胎的循环血细胞明显减少,且尾部呈现出向腹侧弯曲的异常形态。而在p53敲低之后,斑马鱼的形态异常得到了一定程度的恢复。通过对microRNA表达谱的比较分析发现,在Rps19不足的斑马鱼胚胎中约1/4的microRNA表达量显著偏低,这些异常表达的microRNA可能影响到斑马鱼的正常发育过程。而在p53敲低之后,部分microRNA的表达恢复到正常水平。最终确定了47个在DBA发病过程中可能受p53调控的microRNA。结论 DBA斑马鱼模型的microRNA普遍低表达,其中部分microRNA受到p53的表达水平的调控。

关键词：纯红细胞再生障碍性贫血 microRNA Rps19 p53 RNA-seq 斑马鱼

来源：评论

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人类B细胞淋巴瘤耐药细胞株BJAB/ADR的建立及其耐药机制的初步研究

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白血病．淋巴瘤 2014年第3期23卷 144-147页

作者：鲍世琦姜琳琳张晓龙李真真邵晓枫齐怀丰杨雨琪熊冬生中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 鲁东大学生命科学学院肿瘤免疫研究实验室天津红日金博达生物技术有限公司天津医科大学药学院药学实验室

目的建立人类淋巴瘤B JAB多药耐药细胞株BJAB/ADR,并初步研究其耐药机制.方法采用多柔比星浓度梯度递增法建立人类B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法鉴定耐药细胞株对多... 详细信息

目的建立人类淋巴瘤B JAB多药耐药细胞株BJAB/ADR,并初步研究其耐药机制.方法采用多柔比星浓度梯度递增法建立人类B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,观察其生长规律并绘制细胞生长曲线;用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法鉴定耐药细胞株对多种化疗药物的耐药性并计算耐药指数;提取耐药细胞株RNA,实时定量聚合酶链反应（PCR）法检测相关耐药基因MDR1 mRNA的表达;流式细胞术检测细胞表面P糖蛋白（Pgp）的表达;通过罗丹明外排实验,检测Pgp功能.结果成功建立B细胞淋巴瘤耐药细胞模型BJAB/ADR,并在160 ng/ml多柔比星溶液中稳定生长,耐药细胞较敏感细胞生长缓慢,细胞形态无明显变化.MTT检测结果表明BJAB/ADR细胞对多柔比星的耐药指数为43倍,同时对柔红霉素、依托泊苷、高三尖杉酯碱（HHT）及米托蒽醌（MX）也具有一定的耐药性.实时定量PCR结果表明,耐药细胞BJAB/ADR MDRl mRNA明显高于药物敏感细胞BJAB（P＜ 0.01）.流式细胞术检测结果显示,耐药细胞表面Pgp高表达;罗丹明外排实验表明Pgp对多柔比星具有外排功能,使B JAB/ADR细胞获得耐药特性.结论建立了人类B细胞淋巴瘤的耐药细胞株BJAB/ADR,其对多柔比星耐药性稳定,并呈现多药耐药细胞的基本生物学特性,为进一步研究肿瘤多药耐药发生的机制及逆转耐药提供有利的模型.

关键词：细胞系,肿瘤淋巴瘤,B细胞 BJAB ADR细胞 P糖蛋白多柔比星

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伴t（11；12）（p15；q13）急性髓系白血病二例报告并文献复习

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中华血液学杂志 2013年第10期34卷 830-833页

作者：宫本法李其辉李巍王迎魏辉王津雨赵邢力林冬李承文刘旭平秘营昌王建祥中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院天津300020 实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨伴t（11；12）（p15；q13）急性髓系白血病（AML）的临床和实验室特征。方法结合文献分析采用细胞形态学方法诊断为AML-M，而染色体核型为t（11；12）（p15；q13）的2例患者资料。结果患者均为男性，细胞形态学、组织细胞化学... 详细信息

目的探讨伴t（11；12）（p15；q13）急性髓系白血病（AML）的临床和实验室特征。方法结合文献分析采用细胞形态学方法诊断为AML-M，而染色体核型为t（11；12）（p15；q13）的2例患者资料。结果患者均为男性，细胞形态学、组织细胞化学染色、电镜检查等支持AML-M，诊断，但染色体核型为t（11；12）（p15；q13），不具有典型的t（15；17）（q22；q12）和PML-RARer融合基因，给予维甲酸和亚砷酸治疗无效。结论AML具有高度异质性，应重视细胞、分子遗传学特征在诊断、预后分层和治疗选择中的作用。伴t（11；12）（p15；q13）的AML因临床和分子特征异质性难以归类为“伴重现性细胞遗传学异常的AML”，发病机制尚不明确。

关键词：易位遗传白血病髓样急性治疗

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内皮细胞微环境对造血干细胞调控的研究现状

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中华血液学杂志 2013年第11期34卷 980-983页

作者：顾欣袁卫平程涛中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室中国医学科学院干细胞医学中心天津300020

造血干细胞是造血组织具有自我更新和分化潜能的一类干细胞，它可分化为各种成熟血细胞和免疫细胞。造血干细胞生存在包括成骨细胞、间充质干细胞、神经细胞、脂肪细胞、血窦内皮细胞和血管周围网状细胞在内的被称为“龛”的骨髓微环境... 详细信息

造血干细胞是造血组织具有自我更新和分化潜能的一类干细胞，它可分化为各种成熟血细胞和免疫细胞。造血干细胞生存在包括成骨细胞、间充质干细胞、神经细胞、脂肪细胞、血窦内皮细胞和血管周围网状细胞在内的被称为“龛”的骨髓微环境中。尽管造血干细胞移植是治疗白血病等恶性疾病最有效的手段之一，但在临床患者体内单独移植造血干细胞效率低下，而与骨髓基质细胞共同移植可以使移植效率明显增加，可见骨髓微环境对造血干细胞有重要影响。我们就内皮细胞微环境这一主要骨髓微环境对干细胞功能的调控作用作一综述。

关键词：造血干细胞移植窦内皮细胞细胞微环境细胞调控骨髓微环境间充质干细胞骨髓基质细胞分化潜能

来源：评论

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