检索结果-内蒙古大学图书馆

白血病．淋巴瘤 2010年第6期19卷 327-330页

作者：王继英张建伟李艳唐克晶王燕忠王敏邢海燕田征饶青中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的检测急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞中RhoA和CDC42蛋白的表达水平,探讨Rho GTP酶相关的骨髓微环境与造血干细胞相互作用异常在白血病细胞恶性行为中的作用.方法分离并制备54例AL患者及22名正常供者的骨髓单个核细胞的细胞裂... 详细信息

目的检测急性白血病（AL）患者骨髓单个核细胞中RhoA和CDC42蛋白的表达水平,探讨Rho GTP酶相关的骨髓微环境与造血干细胞相互作用异常在白血病细胞恶性行为中的作用.方法分离并制备54例AL患者及22名正常供者的骨髓单个核细胞的细胞裂解液,应用Western blotting方法,检测其中RhoA和CDC42蛋白的相对表达量,非配对t检验分析RhoA和CDC42蛋白在AL患者和正常供者中表达的差异,Spearman分析患者RhoA和CDC42基因的蛋白表达量与临床资料的相关性.结果初治AL患者骨髓中RhoA和CDC42的蛋白表达水平显著高于健康人,其中急性髓系白血病M2、M3,及M5亚型患者的RhoA蛋白表达升高尤为显著,M3亚型患者的CDC42蛋白表达量升高最为显著.结论初治AL患者骨髓中RhoA和CDC42表达显著上调,提示Rho GTP酶介导的白血病细胞迁移活跃导致骨髓微环境相互作用异常在白血病发生中起作用.

关键词：白血病,急性 RhoA CDC42 GTP结合蛋白质 Western blotting

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细胞死亡的分类和意义

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白血病．淋巴瘤 2010年第1期19卷 1-3页

作者：吴克复郑国光马小彤宋玉华中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

细胞死亡与细胞增殖是对立面，是机体的基本细胞生物学机制之一。近年来报道的越来越多的细胞死亡方式令人困惑。最近细胞死亡命名委员会（NCCD）的细胞死亡分类建议书梳理了相关的研究进展，使概念更清晰。文章概述其主要精神，补充一... 详细信息

细胞死亡与细胞增殖是对立面，是机体的基本细胞生物学机制之一。近年来报道的越来越多的细胞死亡方式令人困惑。最近细胞死亡命名委员会（NCCD）的细胞死亡分类建议书梳理了相关的研究进展，使概念更清晰。文章概述其主要精神，补充一些文献资料，并探讨细胞死亡研究的意义。

关键词：细胞死亡细胞凋亡坏死自噬

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IL-27通过信号通路p38 MAPK和PI3K途径调节中性粒细胞Mac-1、fMLP-R及IL-1β表达

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中国实验血液学杂志 2010年第2期18卷 391-395页

作者：李建平杨少光董春兰吴昊贾海蓉赵艳津王彤卢世红任倩赵钦军邢文张磊韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究探讨IL-27调节人外周血中性粒细胞中黏附分子Mac-1、趋化因子受体fMLP-R和促炎因子IL-1β表达的信号通路。采用Ficoll密度梯度离心及低渗裂解残存红细胞方法分离高纯度的外周血中性粒细胞。用RT-PCR方法检测中性粒细胞IL-27受体(W... 详细信息

本研究探讨IL-27调节人外周血中性粒细胞中黏附分子Mac-1、趋化因子受体fMLP-R和促炎因子IL-1β表达的信号通路。采用Ficoll密度梯度离心及低渗裂解残存红细胞方法分离高纯度的外周血中性粒细胞。用RT-PCR方法检测中性粒细胞IL-27受体(WSX-1/TCCR和gp130)mRNA表达。分别应用IL-27及信号通路p38 MAPK、PI3K和ERK抑制剂SB203580、LY294002、U0126处理中性粒细胞,用实时定量RT-PCR检测作用前后fMLP-R和IL-1βmRNA水平变化;应用放射免疫法检测作用前后培养上清液中IL-1β的水平变化;流式细胞术检测作用前后Mac-1表达水平变化。结果表明:人外周血中性粒细胞协同表达IL-27受体的两个亚单位WSX-1/TCCR和gp130,IL-27下调中性粒细胞表面黏附分子Mac-1表达(p<0.05),SB203580阻断了IL-27对Mac-1的下调作用(p<0.05),而LY294002及U0126无阻断作用(p>0.05)。相反,IL-27上调中性粒细胞中fMLP-R和IL-1βmRNA的表达并能增加IL-1β释放(p<0.05),LY294002阻断了IL-27对fMLP-R和IL-1β的上调作用(p<0.05),而SB203580及U0126无阻断作用(p>0.05)。结论:IL-27与IL-27R相互作用,可能通过p38 MAPK和PI3K信号途径调节人外周血中性粒细胞中Mac-1、fMLP-R及IL-1β表达。

关键词： IL-27 中性粒细胞 p38 MAPK P13K途径 Mac-1 fMLP—R IL-1β

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钠氢交换蛋白在依托泊苷诱导HL-60细胞凋亡中的作用及其机制的初步研究

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中国实验血液学杂志 2010年第3期18卷 612-616页

作者：阎妍李华文李庆华胡蓉华庞天翔中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究探讨钠氢交换蛋白(Na+/H+ exchanger-1,NHE1)在依托泊苷诱导HL-60细胞凋亡过程中的表达变化及其对凋亡过程的调控机制。应用DNA片段化检测和远末端缺口标记(TUNEL)法分析细胞凋亡;实时定量聚合酶链反应检测NHE1 mRNA表达量,Wester... 详细信息

本研究探讨钠氢交换蛋白(Na+/H+ exchanger-1,NHE1)在依托泊苷诱导HL-60细胞凋亡过程中的表达变化及其对凋亡过程的调控机制。应用DNA片段化检测和远末端缺口标记(TUNEL)法分析细胞凋亡;实时定量聚合酶链反应检测NHE1 mRNA表达量,Western blot法检测NHE1蛋白表达水平,并应用激光共聚焦显微镜分析细胞内pH值(pHi)的变化。同时应用NHE1特异抑制剂卡立泊来德(cariporide)作用于细胞观察凋亡及pHi的变化情况。结果表明:依托泊苷作用24小时后能有效诱导HL-60细胞凋亡,作用12小时后NHE1 mRNA表达增高了2.848±0.886倍(p<0.01),NHE1蛋白表达水平也升高(p<0.01)。依托泊苷作用24小时后细胞内pHi从7.11升高到7.46,而卡立泊来德预处理组的细胞在依托泊苷处理24小时后pHi没有明显升高并且凋亡率明显降低。结论:依托泊苷诱导的HL-60细胞凋亡过程中会出现NHE1表达上调,凋亡结果依赖于NHE1表达量升高导致的细胞内pH值升高。

关键词： NHE1 pHi 依托泊苷卡立泊来德细胞凋亡

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慢性淋巴细胞白血病合并血液系统自身免疫疾病的研究进展

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白血病．淋巴瘤 2010年第4期19卷 246-249页

作者：吴瞳(综述) 李增军(审校) 邱录贵(审校) 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞既是肿瘤细胞又是免疫细胞，这种病态细胞免疫功能紊乱，可诱发各种自身免疫疾病，且以血液系统自身免疫疾病为主，表现为红细胞、血小板或白细胞的减少。其发病机制尚不清楚，临床上容易误诊、漏诊。总... 详细信息

慢性淋巴细胞白血病（CLL）细胞既是肿瘤细胞又是免疫细胞，这种病态细胞免疫功能紊乱，可诱发各种自身免疫疾病，且以血液系统自身免疫疾病为主，表现为红细胞、血小板或白细胞的减少。其发病机制尚不清楚，临床上容易误诊、漏诊。总体上的治疗策略与治疗原发性自身免疫疾病类似，主要问题是如何在治疗自身免疫疾病的同时也兼顾到CLL。

关键词：白血病,淋巴细胞,慢性自身免疫疾病

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人脐带间充质干细胞增强全反式维甲酸对HL-60细胞的诱导分化作用

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中国实验血液学杂志 2010年第4期18卷 877-881页

作者：吴昊马凤霞李建平杨少光贾海蓉卢世红任倩赵钦军刑文张磊韩忠朝中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究探讨人脐带间充质干细胞(hucMSC)对全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞分化以及对HL-60增殖的影响。HL-60细胞分为4组:未经ATRA处理的对照组、与hucMSC细胞共培养的hucMSC组,经ATRA处理的ATRA组以及经ATRA处理并与hucMSC细胞共培养... 详细信息

本研究探讨人脐带间充质干细胞(hucMSC)对全反式维甲酸(ATRA)诱导HL-60细胞分化以及对HL-60增殖的影响。HL-60细胞分为4组:未经ATRA处理的对照组、与hucMSC细胞共培养的hucMSC组,经ATRA处理的ATRA组以及经ATRA处理并与hucMSC细胞共培养的ATRA+hucMSC组。在规定时间采用Cell Counting Kit-8(CCK8)检测对照组和hucMSC组HL-60细胞增殖情况;在光学显微镜下观察各组细胞形态、NBT阳性细胞;应用real-timePCR方法检测c-myc基因表达水平以及流式细胞术检测CD11b表面标志以比较各组中HL-60细胞的分化情况。结果表明:共培养体系中hucMSC细胞能抑制HL-60的增殖,hucMSC∶HL-60为1∶1时,48小时时p<0.05,72小时时p<0.01;hucMSC∶HL-60为1∶5时,72小时时p<0.05。在2μmol/LATRA的刺激下,ATRA+huc-MSC组与ATRA组相比,出现更多具有中性粒细胞形态的HL-60细胞和更高的NBT阳性率(p<0.05);ATRA+hucMSC组中HL-60细胞c-myc基因表达更低(p<0.05);ATRA+hucMSC组中HL-60细胞CD11b的表达更高(48小时p<0.05,72小时p<0.01)。结论:脐带间充质干细胞能抑制HL-60增殖并且增强ATRA对HL-60细胞的诱导分化作用。

关键词：脐带间充质干细胞 HL-60 全反式维甲酸诱导分化中性粒细胞

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过氧化氢酶在人脐带间充质干细胞中作用的研究

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中国实验血液学杂志 2010年第2期18卷 441-444页

作者：胡林萍高瀛岱郑国光师迎旭谢印良刘拥军袁卫平程涛中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究通过携带过氧化氢酶(catalase,CAT)基因的逆转录病毒载体转染人脐带组织源间充质干细胞(UC-MSC),探讨CAT对人UC-MSC增殖以及多向分化潜能的影响。将携带绿色荧光蛋白(GFP)空载体质粒pMSCV-GFP和携带CAT基因的pMSCV-GFP-CAT逆转录... 详细信息

本研究通过携带过氧化氢酶(catalase,CAT)基因的逆转录病毒载体转染人脐带组织源间充质干细胞(UC-MSC),探讨CAT对人UC-MSC增殖以及多向分化潜能的影响。将携带绿色荧光蛋白(GFP)空载体质粒pMSCV-GFP和携带CAT基因的pMSCV-GFP-CAT逆转录病毒载体分别转染体外培养的人UC-MSC,用流式细胞仪分析并分选获得MSC-GFP、MSC-GFP-CAT两种细胞株;用过氧化氢酶检测试剂盒检测上述细胞株和UC-MSC中过氧化氢酶活力;用cell counting kit-8检测转染后细胞的增殖能力;用von Kossa和油红O染色观察成骨和成脂定向诱导分化。结果表明:转染48小时后即可观察到UC-MSC发出绿色荧光,3天后达到稳定状态,随着细胞的传代荧光强度不会减弱。流式细胞仪检测GFP+转染率显示,MSC-GFP为(25.54±8.65)%,MSC-GFP-CAT为(35.4±18.57)%;体外传代培养后检测UC-MSC、MSC-GFP、MSC-GFP-CAT细胞CAT活性分别为:19.5、20.3、67.2U;MSC-GFP-CAT能被诱导分化为成骨和脂肪细胞;携带CAT基因载体转染对UC-MSC的增殖无显著影响(p>0.05)。结论:成功获得高表达CAT的UC-MSC,其CAT的表达水平为对照组的3.4倍,转染对UC-MSC的增殖和分化能力无显著影响,基因转移使UC-MSC保留了成骨和成脂的能力。

关键词：脐带间充质干细胞过氧化氢酶逆转录病毒载体

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同源重组细胞基因敲除与siRNA基因沉默的效果比较

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中国实验血液学杂志 2010年第1期18卷 122-126页

作者：李庆华金薇娜张华梅茹永新庞天翔中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究比较细胞系同源重组基因敲除(gene knockout)与siRNA基因沉默(gene silence)二种技术方法用于研究蛋白功能方面的效果差异。对鸡B淋巴细胞瘤来源的DT40细胞系,应用基因打靶技术分离出Sam68基因缺失的细胞株,并且利用稳定表达siRN... 详细信息

本研究比较细胞系同源重组基因敲除(gene knockout)与siRNA基因沉默(gene silence)二种技术方法用于研究蛋白功能方面的效果差异。对鸡B淋巴细胞瘤来源的DT40细胞系,应用基因打靶技术分离出Sam68基因缺失的细胞株,并且利用稳定表达siRNA的质粒pSilencer-Sam68得到Sam68基因沉默的细胞株。与野生型细胞株相比,对这些细胞株进行Sam68的功能解析。结果表明:Sam68基因缺失细胞表现出明显的生长速度迟缓,通过细胞周期检测揭示这些细胞生长速度延迟是由于细胞周期中的G2/M期延长;但在Sam68基因沉默细胞中却没有看到这些变化。结论:针对活细胞中的蛋白功能研究,应用细胞系基因敲除技术比siRNA基因沉默技术能够得到更加清晰的实验结果。

关键词：基因敲除基因沉默 Sam68 DT40

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间充质干细胞向软骨分化及在软骨修复中应用的研究进展

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国际生物医学工程杂志 2010年第6期33卷 363-366,371页

作者：王立华刘拥军中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

关节软骨是一种负重结缔组织,常因肿瘤、运动、退行性变或老年性疾病造成损伤;然而关节软骨自身修复能力有限,给临床治愈软骨缺损造成了很大困难.近些年出现了多种治疗软骨缺损的方法,包括自体软骨细胞移植、微裂缝和镶嵌成形术,但这些... 详细信息

关节软骨是一种负重结缔组织,常因肿瘤、运动、退行性变或老年性疾病造成损伤;然而关节软骨自身修复能力有限,给临床治愈软骨缺损造成了很大困难.近些年出现了多种治疗软骨缺损的方法,包括自体软骨细胞移植、微裂缝和镶嵌成形术,但这些方法各自都有其局限性.近年来,组织工程软骨成为软骨修复研究的新热点,间充质干细胞（MSCs）是其当前最有前景的种子细胞.就MSCs在体外诱导分化为软骨细胞的培养条件及MSCs在软骨修复中应用的研究进展进行综述.

关键词：间充质干细胞分化软骨修复组织工程

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PHⅡ-7的体内外抗肿瘤活性及机制

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山东医药 2010年第15期50卷 21-23页

作者：李洪强程昕周园胡蕴慧韩勇李巍杨纯正高瀛岱中国医学科学院北京协和医学院血液病医院血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究PHⅡ-7的体内外抗肿瘤活性,为肿瘤的治疗提供新思路。方法采用MTT法检测PHⅡ-7对18种细胞系(其中包括5对敏感肿瘤细胞和相应耐药细胞株)的体外抗肿瘤活性;建立人白血病细胞K562和K562/A02裸鼠移植瘤模型,研究PHⅡ-7的体内抗肿... 详细信息

目的研究PHⅡ-7的体内外抗肿瘤活性,为肿瘤的治疗提供新思路。方法采用MTT法检测PHⅡ-7对18种细胞系(其中包括5对敏感肿瘤细胞和相应耐药细胞株)的体外抗肿瘤活性;建立人白血病细胞K562和K562/A02裸鼠移植瘤模型,研究PHⅡ-7的体内抗肿瘤活性。结果PHⅡ-7对人肿瘤细胞的生长均有抑制作用,IC50为0.35～18.68μmol/L;其对于多药耐药(MDR)类细胞亦显示出较强的抑制作用。PHⅡ-7对耐药肿瘤细胞(K562/A02)移植瘤模型的抑制率为62%,对敏感肿瘤细胞(K562)移植瘤模型的抑制率为52%。结论PHⅡ-7体内外均可抑制肿瘤细胞的生长,其抗耐药肿瘤的作用可能存在多种机制。本研究为肿瘤的治疗提供了新思路。

关键词：多药耐药氧化吲哚衍生物小分子化合物

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