检索结果-内蒙古大学图书馆

中国组织工程研究与临床康复 2010年第23期14卷 4309-4316页

作者：徐燕孟恒星于珍李长虹邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津市300020 天津市脐带血造血干细胞库天津市300384

背景:在缺血性疾病中,机体的代偿性反应包括细小动脉形成和血管新生,而内皮祖细胞在其中发挥着重要的作用,参与了机体多种生理、病理性血管重建过程。目前对内皮祖细胞的来源、生物学特性还存在许多争议。目的:分离培养人外周血、脐带... 详细信息

背景:在缺血性疾病中,机体的代偿性反应包括细小动脉形成和血管新生,而内皮祖细胞在其中发挥着重要的作用,参与了机体多种生理、病理性血管重建过程。目前对内皮祖细胞的来源、生物学特性还存在许多争议。目的:分离培养人外周血、脐带血、骨髓以及脐带来源的内皮祖细胞,并对其生物学特性进行比较。方法:采用密度梯度离心法分离人外周血、脐带血以及骨髓单个核细胞进行贴壁培养,脐带来源的内皮祖细胞通过植块贴壁培养或胶原酶消化脐静脉内膜获得的单个核细胞进行贴壁培养。对获得的贴壁细胞进行细胞形态学、增殖活力、细胞周期、免疫表型的检测。结果与结论:①外周血与脐带血来源的贴壁细胞呈长梭形,集落状生长,其上附有成簇圆形细胞,随着培养时间延长,圆形细胞渐脱落,梭形细胞无明显增殖趋势,消化后细胞不能传代;流式显示细胞高表达CD45,部分表达KDR,但不表达CD31。②骨髓和脐带来源的贴壁细胞呈短梭形、多角形;传代后细胞增殖迅速,且细胞形态与增殖活力没有明显下降;多数细胞处于G0/G1期;流式检测显示细胞均不表达CD14、CD45,也不表达CD106、HLA-DR,但高表达CD44、CD90、CD62E、CD73、CD95、CD105;部分表达内皮系标记KDR、vWF;酶消化法获得的脐带内皮祖细胞还表达CD31;共聚焦显微镜扫描显示细胞具有吸收ac-LDL并结合UEA-1的能力。结果说明外周血、脐带血、骨髓与脐带组织中可分离培养出分化程度、增殖活力不同的内皮祖细胞。

关键词：内皮祖细胞分离培养生物学特性骨髓脐带干细胞培养与分化

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骨髓抽提物小粒和单个核细胞分别培养提高间充质干细胞富集效率(英文)

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中国实验血液学杂志 2010年第6期18卷 1552-1559页

作者：邢文刘鹏霞刘蒙杨少光赵钦军李建平卢士红任红英黄颖吴昊刘斌张磊韩忠朝中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院国家干细胞工程技术研究中心实验血液学国家重点实验室天津300020

骨髓是间充质干细胞(MSC)的主要来源。在大多数研究中,先用密度梯度离心法分离出单个核细胞(MNC),再将MNC培养得到MSC。然而,近年来的研究显示,这种标准方法分离MSC的效率并不很高。本研究探讨骨髓抽提物小粒是否是造成该法低效的原因... 详细信息

骨髓是间充质干细胞(MSC)的主要来源。在大多数研究中,先用密度梯度离心法分离出单个核细胞(MNC),再将MNC培养得到MSC。然而,近年来的研究显示,这种标准方法分离MSC的效率并不很高。本研究探讨骨髓抽提物小粒是否是造成该法低效的原因及如何更好地从骨髓抽提物小粒中分离出MSC。选取了20例患者,用标准贴壁法培养MNC,用组织块培养法培养骨髓小粒。对于1-10号患者,先从骨髓抽提物中分离得到MNC,再从剩余的骨髓抽提物中过滤出骨髓小粒,比较从MNC和骨髓小粒培养得到的成纤维样细胞的克隆数量和形态;对于11-20号患者,分离顺序正好相反,比较从MNC和骨髓小粒培养得到的贴壁细胞的免疫表型和功能,对剩余的骨髓抽提物也进行了培养。结果表明:骨髓小粒中的贴壁细胞为MSC。如果先过滤出骨髓小粒,再用密度梯度离心法分离出MNC,然后将二者分别进行培养,则可将骨髓抽提物中的MSC完全分离出来。在密度梯度离心法中大多丢掉的骨髓小粒,是骨髓中MSC的又一重要来源。骨髓小粒可用组织块培养法进行培养。结论:将骨髓抽提物小粒和MNC分别培养可以从单次骨髓抽提物中富集更多的MSC。

关键词：间充质干细胞骨髓小粒单个核细胞密度梯度离心组织块培养

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伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病135例远期疗效观察

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白血病．淋巴瘤 2010年第11期19卷 646-650页

作者：周可树王翠翠赵耀中邢立杰钱林生于珍齐军元王建祥邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 郑州大学附属肿瘤医院河南省肿瘤医院血液科

目的对伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病（CML）的疗效及安全性进行分析,并初步探讨影响CML患者生存的因素.方法 135例CML患者应用伊马替尼治疗,监测其血常规、染色体核型、bcr-abl p210转录本表达及不良反应.结果中位随访20（3～67）个... 详细信息

目的对伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病（CML）的疗效及安全性进行分析,并初步探讨影响CML患者生存的因素.方法 135例CML患者应用伊马替尼治疗,监测其血常规、染色体核型、bcr-abl p210转录本表达及不良反应.结果中位随访20（3～67）个月.慢性期患者累积获得的完全血液学缓解（CHR）率为97.9%,主要细胞遗传学缓解（MCyR）率为78.3%,完全细胞遗传学缓解（CCyR）率为72.2%,完全分子学缓解（CMoR）率为35.1%,均显著高于加速期及急变期（P＜0.001）.慢性期低危组与高危组之间CCyR率有差异（P=0.048）.慢性期患者1、3和5年总生存（OS）率分别为：（97.8±1.5）%、（95.2±2.4）%、（91.9±3.2）%,疾病无进展生存（PFS）率分别为（92.6±2.7）%、（85.5±3.7）%、（81.3±4.3）%;加速期患者6个月、1、2年OS率分别为：（93.8±6.1）%、（72.5±11.8）%、（64.5±12.9）%,PFS率分别为：（92.3±7.4）%、（64.5±14.7）%、（53.7±15.7）%;急变期患者6、12、19个月OS率分别为：（86.4±7.3）%、（45.4±11.4）%、（19.4±9.8）%,PFS率分别为：（70.1±12.6）%、（37.6±15.6）%、（18.8±15.4）%.慢性期达到CMoR、CCyR的患者与仅达CHR者PFS及OS比较差异均有统计学意义（P≤0.001）;多因素分析显示：耐药是影响慢性期患者PFS（P=0.000,RR=46.744）及OS（P=0.007,RR=20.270）的因素.伊马替尼口服非血液学毒性较轻,患者多可耐受;血液学毒性是减量或停药的主要原因.结论伊马替尼治疗CML慢性期疗效显著优于加速期及急变期;慢性期患者达到CCyR甚至CMoR是获得长期生存的关键,伊马替尼耐药是伊马替尼治疗CML面临的主要问题.

关键词：白血病髓样慢性伊马替尼

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抗CD3/抗CD19微型双功能抗体的构建、表达及活性测定

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中国癌症杂志 2010年第4期20卷 241-246页

作者：李崴范冬梅程昕师锐赞刘荣任思楣王敏杨铭中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 天津医科大学附属肿瘤医院头颈外科天津300060

背景与目的:微型双功能抗体是基因工程抗体的一种形式,它具有两个抗原结合位点,可选择性募集效应细胞到靶细胞周围,介导特异性杀伤作用。本实验构建抗CD3/抗CD19微型双功能抗体(diabody)载体,表达纯化后测定其生物学活性。方法:用重叠PC... 详细信息

背景与目的:微型双功能抗体是基因工程抗体的一种形式,它具有两个抗原结合位点,可选择性募集效应细胞到靶细胞周围,介导特异性杀伤作用。本实验构建抗CD3/抗CD19微型双功能抗体(diabody)载体,表达纯化后测定其生物学活性。方法:用重叠PCR(overlap PCR)和PCR方法,构建抗CD3/抗CD19 diabody载体,转化感受态大肠埃希菌进行原核表达。表达产物经抗His-tag亲和层析柱分离纯化,12% SDS-PAGE电泳及Western blot鉴定。应用间接免疫荧光和竞争性免疫荧光结合流式细胞分析技术(FACS)检测生物学活性。结果:基因重组质粒经测序证实序列正确。抗CD3/抗CD19 diabody能够在原核表达系统中进行可溶性表达。12% SDS-PAGE显示28×103和26×103各有一条带,Western blot在28×103显示有条带,与预期相符。表达产物经纯化定量可达5mg/L。FACS检测抗CD3/抗CD19 diabody可与CD19+ Raji细胞和CD3+ Jurkat细胞特异结合,并能竞争性抑制HIT3a和HIT19a与上述细胞的结合活性。结论:本实验成功构建了抗CD3/抗CD19 diabody,并且能够进行可溶性表达,可与CD19+ Raji细胞和CD3+ Jurkat细胞特异结合,为以后的抗体功能实验奠定了基础。

关键词：基因工程抗体双功能抗体 CD3 CD19 淋巴瘤免疫治疗

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特异性蛋白1在造血细胞分化中的作用

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国际输血及血液学杂志 2010年第2期33卷 140-142页

作者：张轶群(综述) 王建祥(审校) 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所/血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

特异性蛋白1（Specificity protein1，Sp1）是一种广泛表达的转录因子，在造血细胞中也有表达。研究发现，在造血细胞分化的过程中，Sp1可以调控与分化相关基因的转录，提示Sp1在造血细胞的分化中具有比较广泛的作用。造血系统恶性肿瘤... 详细信息

特异性蛋白1（Specificity protein1，Sp1）是一种广泛表达的转录因子，在造血细胞中也有表达。研究发现，在造血细胞分化的过程中，Sp1可以调控与分化相关基因的转录，提示Sp1在造血细胞的分化中具有比较广泛的作用。造血系统恶性肿瘤往往伴有分化的异常，一些癌蛋白就是通过对Sp1的异常调控而阻滞细胞分化，导致造血细胞的恶变。因此，Sp1的调控异常可能在一些血液恶性肿瘤发病中发挥着作用。本文将对Sp1的结构、转录调控机制及其在造血细胞分化中的作用进行综述。

关键词：转录因子造血细胞分化

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老年急性髓系白血病的特点及疗效分析

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临床血液学杂志 2010年第5期23卷 513-516页

作者：于凡林冬周春林秘营昌王迎付明伟刘兵城魏辉卞寿庚王建祥中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的：分析我国老年急性髓系白血病（AML）的临床、生物学特点,疗效及预后,为临床诊治提供参考。方法：回顾性分析1995年4月-2008年2月收住院诊治的AML患者共167例,采用FAB及MICM分型诊断标准确诊。运用SPSS15.0软件进行统计学分析。率... 详细信息

目的：分析我国老年急性髓系白血病（AML）的临床、生物学特点,疗效及预后,为临床诊治提供参考。方法：回顾性分析1995年4月-2008年2月收住院诊治的AML患者共167例,采用FAB及MICM分型诊断标准确诊。运用SPSS15.0软件进行统计学分析。率的比较采用χ2检验,生存分析采用生命表法及Kaplan-Meier法,不同组别的差异采用log-rank法检验。采用Cox回归分析影响生存的预后因素。结果：①我国老年AML以M2（M2a）、M5为主,染色体核型预后良好组比例低,并发慢性疾病较多,具有多种不良的预后因素。②58例接受标准＂3＋7＂方案诱导化疗的非M3患者完全缓解（CR）率达70.7%,中位总生存（OS）期为6.8（0.6~100.2）个月。41例CR患者中位无病生存（DFS）期为5.2（0.2~99.0）个月。1年DFS概率为41%,1年OS概率为51%。早期死亡率12.9%。③分析细胞生物学特征与疗效的关系,发现前驱血液病史、骨髓病态造血及染色体核型对CR率的影响具有统计学意义。结论：我国老年AML以M2（M2a）、M5为主,具有多种不良的预后因素。部分患者可受益于强诱导化疗。影响疗效的主要因素有染色体核型、前驱血液病史和骨髓病态造血。

关键词：白血病,老年,急性核型分析治疗疗效

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依据骨髓增生异常综合征患者预后分组和疗效预测模式选择合适治疗：第52届美国血液学年会报道

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白血病．淋巴瘤 2010年第12期19卷 705-706页

作者：肖志坚中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组异质性极大的疾病，随着治疗手段的改进，特别是一些新药的不断上市，如何进行“个体化”治疗选择是近年不断探究的主要问题。2010年第52届美国血液学年会（ASH）继续教育、口头发言和墙报集中反映了近... 详细信息

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组异质性极大的疾病，随着治疗手段的改进，特别是一些新药的不断上市，如何进行“个体化”治疗选择是近年不断探究的主要问题。2010年第52届美国血液学年会（ASH）继续教育、口头发言和墙报集中反映了近年在该研究领域的主要进展。

关键词：骨髓增生异常综合征治疗美国血液学年会

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Ⅱ-7逆转肿瘤细胞K562/A02耐药机制的研究

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中国药理学通报 2010年第6期26卷 750-753页

作者：李向上林阳胡藴慧苏晔程昕杨铭杨纯正王金宏中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院/实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:阐明PHⅡ-7逆转肿瘤耐药的机制。方法:用MTT法测定阿霉素、PHⅡ-7及二者联合用药对人白血病细胞系K562及其多药耐药细胞系K562/A02的IC50值,提取不同浓度PHⅡ-7作用48h后K562和K562/A02细胞RNA,以实时定量PCR的方法分析PHⅡ-7对MDR... 详细信息

目的:阐明PHⅡ-7逆转肿瘤耐药的机制。方法:用MTT法测定阿霉素、PHⅡ-7及二者联合用药对人白血病细胞系K562及其多药耐药细胞系K562/A02的IC50值,提取不同浓度PHⅡ-7作用48h后K562和K562/A02细胞RNA,以实时定量PCR的方法分析PHⅡ-7对MDR1基因表达水平的影响,最后通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪观察PHⅡ-7作用前后,K562和K562/A02细胞内阿霉素浓度的改变。结果: PHⅡ-7本身具有抗肿瘤活性,对K562和K562/A02IC50值分别为(1.37±0.37)μmol·L-1;(1.48±0.34)μmol·L-1。此外PHⅡ-7还能协同提高阿霉素的细胞毒作用,K562组CDI值为0.22,K562/A02组CDI值为0.09,其对耐药细胞的协同作用更为明显。阿霉素和PHⅡ-7同时作用于K562/A02,随着PHⅡ-7作用剂量的增加,K562/A02细胞MDR1基因表达水平逐渐下降;细胞内阿霉素浓度伴随PHⅡ-7作用时间的延长而逐渐提高。结论: PHⅡ-7不仅本身是有效的肿瘤细胞化疗药物,还具有下调MDR1耐药基因表达的作用,从而有效逆转K562/A02细胞的耐药现象,增强化疗药物阿霉素的细胞杀伤作用。

关键词：白血病幼红细胞急性多柔比星基因 MDR 基因表达内固定器氢离子浓度药物耐受性/遗传学肿瘤/病理学人类

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干细胞因子逆转录病毒表达载体的构建及体外性质研究

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医学分子生物学杂志 2010年第2期7卷 121-125页

作者：刘淑艳王大刚胡林萍卫佳王金宏种靖慧马翠花许琳琳郑国光中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津市300020

目的通过逆转录病毒介导两种类型人干细胞因子在NIH3T3细胞中稳定表达，并研究它们对白血病细胞的作用。方法用DNA重组技术构建并鉴定可溶型及膜结合型干细胞因子的重组逆转录病毒表达载体MSCV—PGK—GFP—sSCF、MSCV—PGK—GFP—mSCF... 详细信息

目的通过逆转录病毒介导两种类型人干细胞因子在NIH3T3细胞中稳定表达，并研究它们对白血病细胞的作用。方法用DNA重组技术构建并鉴定可溶型及膜结合型干细胞因子的重组逆转录病毒表达载体MSCV—PGK—GFP—sSCF、MSCV—PGK—GFP—mSCF，与空载体对照MSCV—PGK—GFP分别转染Phoenix细胞包装病毒，并感染NIH3T3细胞，流式分选术获得3种阳性细胞，CCK8法分别检测与其共培养的K562细胞的增殖情况。结果成功构建了sSCF、mSCF逆转录病毒表达载体；经Phoenix包装的重组及对照逆转录病毒成功感染NIH3T3细胞，获得了稳定表达细胞株NIH3T3-S、NIH3T3-M和对照细胞株NIH3T3-V。共培养中NIH3T3-S、NIH3T3-M均可促进K562细胞的增殖，且在低血清条件下，NIH3T3-M的作用高于NIH3T3-S。结论可溶性及膜结合SCF分别通过旁分泌和并置性作用促进白血病细胞的增殖。

关键词：干细胞因子逆转录病毒旁分泌作用表达与调控

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原发性肺淋巴瘤一例并文献复习

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白血病．淋巴瘤 2010年第4期19卷 237-238页

作者：袁晓莉朱尊民张茵邱录贵河南省人民医院血液科郑州450003 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的报告1例原发性肺淋巴瘤（PPL）病例并复习国内外相关文献。方法对此例PPL的发病及诊治过程进行详细论述。结果该例患者最终因本病进展而死亡。结论PPL临床表现不典型，易误诊，及时行外科肺活检获取组织病理标本有利于早期诊断。

关键词：淋巴瘤肺诊断

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