检索结果-内蒙古大学图书馆

中华血液学杂志 2009年第7期30卷 443-445页

作者：刘亮秦铁军徐泽锋周春林张悦肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的观察小剂量马法兰治疗中、高危骨髓增生异常综合征（MDS）的疗效和药物不良反应。方法共有按MDS国际预后积分系统（IPSS）判断为中、高危组的30例初治患者入组。治疗方案为：马法兰2mg，口服，每日1次，直至病程进展所致全血细胞减... 详细信息

目的观察小剂量马法兰治疗中、高危骨髓增生异常综合征（MDS）的疗效和药物不良反应。方法共有按MDS国际预后积分系统（IPSS）判断为中、高危组的30例初治患者入组。治疗方案为：马法兰2mg，口服，每日1次，直至病程进展所致全血细胞减少加剧或骨髓原始细胞比例增高停药，达完全缓解（CR）或部分缓解（PR）者继续用药直至病情复发停药。结果按2006年MDS国际工作组（IWG）疗效修订标准判定，CR9例（30．0％），PR3例（10．0％），骨髓缓解（MCR）加血液学进步（HI）3例（10．0％），MCR1例（3．3％），病情稳定4例（13．3％），治疗失败10例（33．3％），总有效率66．7％。骨髓增生活跃及以下组患者的CR＋PR率（60．0％）和总有效率（80．0％）明显高于骨髓增生明显活跃及以上组（分别为0％和40％）（P值分别为0．002和0．045）。中位随访时间为15．5（1～52）个月，中位生存时间为18个月，中位无复发生存时间为11个月。治疗过程中3例患者出现轻度骨髓抑制，1例因血小板输注无效导致脑出血而死亡，未见其他明显药物不良反应。结论小剂量马法兰是治疗中、高危MDS患者的一种安全、有效的方法，并且可能更适用于骨髓增生低下的患者。

关键词：骨髓增生异常综合征治疗结果马法兰

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成人Ph染色体和（或）bcr—abl阳性急性淋巴细胞白血病患者细胞遗传学及预后分析

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中华血液学杂志 2009年第5期30卷 298-302页

作者：李业楠邹德慧顾敏赵耀中齐军元秘营昌王建祥邱录贵中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的分析成人Ph染色体和（或）bcr—abl阳性（Ph^＋／bcr—abl^＋）急性淋巴细胞白血病（ALL）患者细胞遗传学改变的特点，探讨其对预后的影响。方法回顾性分析1996年1月至2007年12月就诊并行染色体检查的100例成人Ph^＋／bcr—abl^＋AL... 详细信息

目的分析成人Ph染色体和（或）bcr—abl阳性（Ph^＋／bcr—abl^＋）急性淋巴细胞白血病（ALL）患者细胞遗传学改变的特点，探讨其对预后的影响。方法回顾性分析1996年1月至2007年12月就诊并行染色体检查的100例成人Ph^＋／bcr—abl^＋ALL患者的临床资料，总结其染色体畸变的类型、分布和频率特点，并进行分组研究，探讨不同组之间的临床特点及预后差异。结果①72例检出染色体异常，22例为单纯Ph染色体阳性或其变异型，44例Ph阳性伴附加染色体异常，常见的异常有＋Ph、-7、＋21、-20、＋8、9p-、del（22）等。②染色体数目分组比较：假二倍体组和高二倍体组初诊时白细胞计数明显高于正常核型组，而正常核型组总生存（OS）率较亚二倍体和假二倍体组高，无复发生存（RFS）期较亚二倍体和假二倍体组长。③染色体畸变类型分组比较：Ph阳性组初诊时白细胞计数明显高于Ph阴性组，而OS率较Ph阴性组低，RFS期较Ph阴性组短；单纯Ph阳性组与Ph阳性伴附加染色体异常组在临床特征、OS率和RFS期间的差异均无统计学意义，同时Ph阳性伴附加染色体异常组的OS期和RFS期也明显短于Ph阴性组。④核型分组比较：全部核型正常组（NN）患者较正常与异常核型共存组（AN）年龄轻，初诊时白细胞计数低，融合基因表达以P190为主，髓系抗原表达率高，RFS率和OS率高；NN组较全部核型异常组（AA）初诊时白细胞计数低，髓外浸润重，RFS率和OS率高，而AA与AN组之间各项差异均无统计学意义。⑤双Ph染色体组融合基因P190比例低于非双Ph染色体组，OS期短于非双Ph染色体组。结论成人Ph^＋／bcr—abl^＋ALL患者染色体改变复杂，假二倍体和高二倍体提示预后不良，双Ph染色体可能提示预后不良。

关键词：费城染色体白血病淋巴细胞急性细胞遗传学分析预后

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急性淋巴细胞白血病FLT3基因突变的发现及临床意义

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中国医学科学院学报 2009年第5期31卷 522-526页

作者：赵欣唐克晶田征陈礼平秘营昌王建祥中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者fms样酪氨酸激酶3(FLT3)基因突变情况。方法采用PCR方法检测61例ALL患者的FLT3基因内部串联重复突变(FLT3-ITD)与ASP835突变(FLT3-TKD),并以7名健康志愿者为对照,对检测结果进行分析并探讨其临床意... 详细信息

目的研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者fms样酪氨酸激酶3(FLT3)基因突变情况。方法采用PCR方法检测61例ALL患者的FLT3基因内部串联重复突变(FLT3-ITD)与ASP835突变(FLT3-TKD),并以7名健康志愿者为对照,对检测结果进行分析并探讨其临床意义。结果61例ALL患者中,2例出现FLT3-ITD,1例出现FLT3-TKD。结论少数ALL患者体内存在FLT3突变。

关键词： FLT3基因内部串联重复 ASP835突变急性淋巴细胞白血病

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细胞酸化对P糖蛋白高表达耐药白血病细胞的影响

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中华血液学杂志 2009年第9期30卷 605-609页

作者：李庆华芦颖金薇娜蔺亚妮胡蓉华竺晓凡王建祥庞天翔中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨细胞酸化对患者原代白血病细胞P糖蛋白（P—glycoprotein，P—gp）和mdrl表达的影响，为逆转白血病多药耐药（MDR）提供新方法。方法采用实时定量RT—PCR技术检测mdrl mRNA表达水平的变化，筛选出P—gp高表达的患者白血病细胞... 详细信息

目的探讨细胞酸化对患者原代白血病细胞P糖蛋白（P—glycoprotein，P—gp）和mdrl表达的影响，为逆转白血病多药耐药（MDR）提供新方法。方法采用实时定量RT—PCR技术检测mdrl mRNA表达水平的变化，筛选出P—gp高表达的患者白血病细胞。应用钠氢离子交换蛋白1特异性抑制剂Cariporide和高钾缓冲液对细胞进行酸化，采用MTT法观察细胞酸化对细胞活力的影响。应用激光共聚焦显微镜测定细胞内pH值（Intracellular pH，pHi）及细胞酸化对细胞内阿霉素累积的影响，应用流式细胞术检测细胞酸化对细胞中P—gp功能的影响，采用Western blot检测细胞酸化对细胞P—gp表达水平的影响。结果患者细胞pHi降低到7．0，酸化1h后mdrl mRNA表达量分别降至对照组的0．532±0．110，酸化3h后降至对照组的0．166±0．070；酸化3h后P—gp的蛋白水平降至对照组的0．560±0．090；细胞pHi 7．01h后细胞内罗丹明123（Rhodaminel 123，Rh123）累积由对照组的20．07±0．39明显增加至71．03±0．47，激光共聚焦显微镜观察结果也证实酸化增加细胞内阿霉素累积。结论细胞内酸化能够抑制患者细胞P—gp表达和功能。

关键词： Cafipofide 细胞酸化 P糖蛋白抗药性,多药

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阿糖胞苷对抗CD3／抗P—gp双功能抗体介导的T淋巴细胞免疫杀伤多药耐药白血病细胞的影响

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中华血液学杂志 2009年第12期30卷 812-815页

作者：杨铭范冬梅高瀛岱周圆纪庆邵晓枫王金宏许元富熊冬生杨纯正中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨阿糖胞苷对抗CD3／抗P—gp双功能抗体介导的T淋巴细胞免疫杀伤多药耐药白血病细胞的影响。方法采用抗E-tag亲和层析柱分离纯化抗CD3／抗P—gp微型双功能抗体，用阿糖胞苷刺激K562和K562／A02细胞，并用流式细胞术检测K562和K562... 详细信息

目的探讨阿糖胞苷对抗CD3／抗P—gp双功能抗体介导的T淋巴细胞免疫杀伤多药耐药白血病细胞的影响。方法采用抗E-tag亲和层析柱分离纯化抗CD3／抗P—gp微型双功能抗体，用阿糖胞苷刺激K562和K562／A02细胞，并用流式细胞术检测K562和K562／A02细胞B7—1、B7—2分子的表达，用CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测阿糖胞苷对抗CD3／抗P—gp双功能抗体介导的T淋巴细胞免疫杀伤K562／A02细胞的影响。结果经阿糖胞苷刺激的K562和K562／A02细胞B7-1、B7-2分子的表达较未刺激的对照组明显升高。阿糖胞苷对抗CD3／抗P—gp双功能抗体介导的T淋巴细胞在效靶比0．39：1～25：1范围内，激活T细胞对耐药白血病细胞的杀伤率为（16．44±1．20）％～（60．49±2．90）％，其杀伤率与效靶比和抗体浓度呈依赖关系（P〈0．05）。结论阿糖胞苷可明显提高抗CD3／抗P—gp双功能抗体介导的人T淋巴细胞对高表达P—gp抗原的耐药白血病细胞的杀伤效府。

关键词：阿糖胞苷双功能抗体,抗CD3/抗Pgp T淋巴细胞 B7分子

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基于常规实验室检查指标的改良WPSS预后积分系统对骨髓增生异常综合征预后判断意义的初步研究

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中华血液学杂志 2009年第5期30卷 313-317页

作者：李璘聂玲于明华于阳刘亮秦铁军徐泽锋张悦肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的评价WPSS预后积分系统在我国骨髓增生异常综合征（MDS）患者预后判断中的作用，并对常规实验室检查指标用于MDS患者预后判断进行初步研究。方法对染色体核型结果可供分析的164例成人原发MDS患者进行回顾性分析。结果164例患者中位... 详细信息

目的评价WPSS预后积分系统在我国骨髓增生异常综合征（MDS）患者预后判断中的作用，并对常规实验室检查指标用于MDS患者预后判断进行初步研究。方法对染色体核型结果可供分析的164例成人原发MDS患者进行回顾性分析。结果164例患者中位随访时间19（1—138）个月，中位生存（MS）期36个月，2年预期生存（PS）率60％，5年PS率42％。按WPSS评分，极低危组、低危组、中危组、高危组和极高危组的2年PS率分别为100％、96％、81％、38％和14％，5年PS率分别为100％、83％、54％、20％和0，Log—rank检验各组总体生存（OS）率差异有统计学意义（P〈0．01）。常规实验室检查中，Hb≥80g/L、平均红细胞体积（MCV）升高（〉95fl）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）升高（〉32pg）、BPC≥100×10^9／L的患者预后较好；骨髓原始细胞比例（Blast）≥0．05的患者较〈0．05的患者预后差，骨髓细胞发育异常≥2系的患者预后较差；细胞组化检查中性粒细胞碱性磷酸酶（N-ALP）阳性指数升高（〉173．21）、有核红细胞糖原染色（E—PAS）阴性的患者预后较好，小巨核酶标染色可见淋巴样小巨核细胞（MEGly）的患者预后较差。另外，血清乳酸脱氢酶水平升高（≥300U／L）的患者预后较差。将上述单因素分析有预后意义的参数纳入COX多因素模型筛选，MCV、MEGly、Blast具有独立预后意义（P值分别为0．011、0．013、0．016）。选取MCV、MEGly及WHO分型提出改良的WPSS积分系统，低危组、中危组、高危组患者的2年PS率分别为94％、68％和49％，5年PS率分别为86％、53％和14％，经Log—rank检验各组OS率差异有统计学意义（P〈0．01）。结论与WHO分型相适应的WPSS适合用于判断我国MDS患者的预后。采用常规实验室检查指标中的MCV、MEGly及WHO分型提出的改良WPSS积分系统可望提供适于我国现阶段基层单位的MDS预后判断标准。

关键词：骨髓增生异常综合征预后 WHO分型预后积分系统(WPSS)

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HAPO蛋白的可溶性表达、纯化及生物学活性测定

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细胞与分子免疫学杂志 2009年第11期25卷 991-993,997页

作者：李彬王晓静刘拥军韩忠朝庞天翔中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:为了得到可溶性表达的人促血液血管细胞生成素(HAPO)蛋白,构建含HAPO基因片段的pET22b(+)表达载体,获得纯化的HAPO蛋白并检测其生物学活性。方法:利用RT-PCR技术从人胎肝中获得HAPO cDNA片段,并克隆至表达载体pET22b(+)中,利用基... 详细信息

目的:为了得到可溶性表达的人促血液血管细胞生成素(HAPO)蛋白,构建含HAPO基因片段的pET22b(+)表达载体,获得纯化的HAPO蛋白并检测其生物学活性。方法:利用RT-PCR技术从人胎肝中获得HAPO cDNA片段,并克隆至表达载体pET22b(+)中,利用基因工程菌BL21(DE3)进行表达,产物利用Ni2+-螯合亲和层析及SP Sepharose FF柱层析分离纯化。采用黏附实验检测HAPO对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)黏附性的影响。结果:从人胎肝中克隆出长为897 bp HAPO目的片段,成功构建重组质粒pET22b(+)-HA-PO,其表达的融合蛋白以可溶状态存在,表达量占菌体总蛋白的10%,经分离纯化融合蛋白的纯度可达80%。活性测定结果表明HAPO以剂量依赖性方式增加HUVEC的总黏附性。结论:可溶性表达了HAPO蛋白,并用体外实验证实HAPO对造血干/祖细胞归巢有一定促进作用。

关键词：促血液血管细胞生长素可溶性表达分离纯化人脐静脉内皮细胞

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小鼠肿瘤坏死因子α增强造血干／祖细胞归巢效率的机制研究

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中华血液学杂志 2009年第2期30卷 97-102页

作者：代红胜高静韬张彤雯杨舟车永哲郑以州中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 南开大学医学院

目的探讨肿瘤坏死因子（TNF）α在调节造血干／祖细胞（HS／PC）归巢中的增效作用及其机制。方法将荧光染料CFSE标记的脐血CD34^＋细胞移植入接受照射（对照组）或联合TNFα预处理（实验组）的BALB／c受鼠。移植后20h，采用流式细胞术（... 详细信息

目的探讨肿瘤坏死因子（TNF）α在调节造血干／祖细胞（HS／PC）归巢中的增效作用及其机制。方法将荧光染料CFSE标记的脐血CD34^＋细胞移植入接受照射（对照组）或联合TNFα预处理（实验组）的BALB／c受鼠。移植后20h，采用流式细胞术（FACS）检测脐血CD34^＋细胞在BALB／c受鼠中的分布（外周血、肝脏、肺脏）与归巢（骨髓、脾脏）特征，计算其相应的归巢效率；酶联免疫吸附实验（ELISA）检测BALB／c受鼠血清基质衍生因子（SDF）-1α水平；FACS检测TNFα预处理前、后脐血CD34^＋细胞表面CXCR4表达水平的变化；免疫组化法检测BALB／c受鼠骨髓及脾脏组织切片中SDF-1α的表达水平。结果脐血CD34^＋细胞主要归巢于BALB／c受鼠骨髓和脾脏；经TNFα预处理的实验组BALB／c受鼠骨髓归巢率[（0．65±0．13）％]显著高于对照组[（0．30±0．09）％，P〈0．01]；但TNFα预处理同时显著抑制脐血CD34^＋细胞归巢于BALB／c受鼠脾脏（P〈0．01）；不同剂量的TNFα预处理不影响受鼠血清SDF-1α水平；新鲜分离的脐血CD34^＋细胞与不同浓度TNFα共孵育18h后，其表面CXCR4表达水平并无明显变化；但TNFα预处理受鼠骨髓龛组成细胞SDF—1α表达增高，且脾脏红髓区小梁动脉和小梁静脉内皮细胞SDF-1d表达增高。结论TNFα通过提升骨髓龛SDF-1α浓度梯度促进HS／PC归巢于骨髓，这一发现将有助于为临床提供可行性HS／PC归巢增效剂。

关键词：造血干细胞受体 CXCR4 归巢肿瘤坏死因子

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膜结合型干细胞因子促进白血病细胞K562的增殖和集落形成

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中国肿瘤生物治疗杂志 2009年第1期16卷 6-11页

作者：王大刚郑国光种靖慧马翠花林永敏吴克复中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:探讨膜结合型干细胞因子(membrane-bound stem cell factor,m-SCF)在白血病细胞中的作用。方法:克隆并构建携可溶型干细胞因子(soluble stem cell factor,s-SCF)前体的真核表达质粒pTARGET-s,采用Overlap PCR法去除外显子6序列,进... 详细信息

目的:探讨膜结合型干细胞因子(membrane-bound stem cell factor,m-SCF)在白血病细胞中的作用。方法:克隆并构建携可溶型干细胞因子(soluble stem cell factor,s-SCF)前体的真核表达质粒pTARGET-s,采用Overlap PCR法去除外显子6序列,进一步构建m-SCF的表达质粒pTARGET-m,DNA测序鉴定。通过脂质体介导分别将上述载体和空载体pTARGET转染白血病K562细胞,用G418筛选稳定表达细胞株,并用RT-PCR、Western blotting法鉴定。通过CCK-8细胞增殖实验以及集落形成实验观察不同细胞株体外增殖特点。结果:成功构建了s-SCF和m-SCF的真核表达载体,获得了稳定转染细胞株K562-V、K562-S、K562-M。U底培养条件下,K562-M增殖能力明显高于K562-V和K562-S(均P<0.01)。K562-M集落形成率显著高于K562-V和K562-S(均P<0.01),且集落形态大于其他两种细胞。结论:m-SCF与C-kit之间的并置性作用显著促进白血病细胞的增殖。

关键词：膜结合型干细胞因子 C-kit 白血病并置性作用

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阿糖胞苷增强白血病细胞B7分子表达及促进双功能抗体对靶细胞的杀伤

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中国肿瘤生物治疗杂志 2009年第5期16卷 447-451页

作者：杨铭范冬梅高瀛岱赵英新周圆许元富纪庆王金宏熊冬生杨纯正中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:研究阿糖胞苷(cytarabine,Ara-C)对白血病细胞共刺激分子B7表达的影响,以及联合双功能抗体anti-CD3/anti-Pgp介导T细胞对耐药白血病细胞的杀伤作用。方法:应用流式细胞术检测白血病细胞株K562和多药耐药白血病细胞株K562/A02细胞经... 详细信息

目的:研究阿糖胞苷(cytarabine,Ara-C)对白血病细胞共刺激分子B7表达的影响,以及联合双功能抗体anti-CD3/anti-Pgp介导T细胞对耐药白血病细胞的杀伤作用。方法:应用流式细胞术检测白血病细胞株K562和多药耐药白血病细胞株K562/A02细胞经Ara-C刺激不同时间后B7-1、B7-2分子的表达,RT-PCR方法检测B7-1mRNA、B7-2mRNA的表达,MTT法检测经Ara-C刺激的K562和K562/A02细胞对T淋巴细胞增殖的影响。CytoTox96非放射性细胞毒性分析检测Ara-C联合anti-CD3/anti-Pgp微型双功能抗体对人外周血淋巴细胞杀伤K562和K562/A02靶细胞的影响。结果:经Ara-C刺激的K562和K562/A02细胞B7-1、B7-2分子的表达较对照组明显升高;MTT结果显示,经Ara-C刺激的K562和K562/A02细胞能促进T淋巴细胞增殖;Ara-C联合anti-CD3/anti-Pgp双功能抗体在0.39:1～25:1效靶比范围内,随着效靶比的升高,介导T淋巴细胞对K562和K562/A02细胞的杀伤率随之提高,对高表达Pgp的耐药K562/A02细胞尤为明显。结论:Ara-C可上调白血病细胞B7分子的表达,从而增强anti-CD3/anti-Pgp双功能抗体介导的T细胞对靶细胞的体外杀伤作用。

关键词：阿糖胞苷白血病细胞 anti-CD3/anti-Pgp B7-1 B7-2 T淋巴细胞

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