检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验动物学报 2009年第1期17卷 1-4,I0001页

作者：张永慈周圆杨铭范冬梅熊冬生杨纯正中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的建立整合素αvβ3高表达的黑色素瘤细胞肺转移模型。方法通过将不同数目的M21细胞经尾静脉接种裸鼠,适时处死后计数肺表面癌结节。通过实时定量PCR和明胶酶谱的方法比较肺转移灶细胞与亲代M21细胞差异。结果M21细胞1×106、2... 详细信息

目的建立整合素αvβ3高表达的黑色素瘤细胞肺转移模型。方法通过将不同数目的M21细胞经尾静脉接种裸鼠,适时处死后计数肺表面癌结节。通过实时定量PCR和明胶酶谱的方法比较肺转移灶细胞与亲代M21细胞差异。结果M21细胞1×106、2×106、5×106尾静脉接种裸鼠,均能形成肺转移灶,癌结节数目均值分别为:84±8、70±6、88±12,三组之间没有明显差异,阴性对照组未形成转移灶。M21肺转移灶细胞与亲代细胞相比,增殖增快,MMP-2活性增高,整合素αv和β3mRNA表达水平明显增高。结论M21细胞1×106经尾静脉接种裸鼠50d内即可100%成瘤。M21肺转移灶细胞具有更快的增殖能力,整合素αvβ3和MMP-2表达水平明显增高。本实验建立了稳定的肺转移模型,为黑色素瘤和整合素αvβ3的研究提供重要的动物模型。

关键词：黑色素瘤肺转移整合素αvβ3

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人脐带间充质干细胞分离培养条件的优化及其生物学特性

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第32期13卷 6289-6294页

作者：徐燕李长虹孟恒星郝牧邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津市300020 天津市脐带血造血干细胞库天津市300384

背景:由于大量获取骨髓细胞存在困难,并且骨髓间充质干细胞随年龄的增加出现数量及分化潜能下降,因此需要寻找其他间充质干细胞来源。目的:优化人脐带间充质干细胞的分离培养条件,进一步明确其生物学特性。设计、时间及地点:细胞学体外... 详细信息

背景:由于大量获取骨髓细胞存在困难,并且骨髓间充质干细胞随年龄的增加出现数量及分化潜能下降,因此需要寻找其他间充质干细胞来源。目的:优化人脐带间充质干细胞的分离培养条件,进一步明确其生物学特性。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2006-09/2008-03在中国医学科学院血液学研究所国家重点实验室完成。材料:17份脐带标本取自健康足月新生儿,由天津市中心妇产医院提供。方法:脐带采集后在6h内分别用植块法、胶原酶消化法、胶原酶与胰酶联合消化法进行分离培养,于培养第14天计数集落数,超过50个细胞计为集落。当细胞达70%～80%融合时,胰蛋白酶-乙二胺四乙酸混合消化,以(2.5～5.0)×103/cm2密度传代培养。主要观察指标:比较不同培养方法所获贴壁细胞的形态学特征、细胞产率,应用流式细胞技术分析细胞增殖活性、免疫表型,特异性染色方法鉴定细胞的多向分化潜能。结果:植块法培养6～10d可见成纤维样细胞从植块边缘爬出,形态与骨髓间充质干细胞相似,散在分布或形成小克隆,原代可获得(5.2±1.7)×105个贴壁细胞/0.5cm脐带组织,至少可稳定传15代,平均每代扩增6.2倍,在原代细胞克隆数、细胞产率、传代时间及扩增倍数上与胶原酶消化法比较存在明显差异(P<0.05);而胶原酶与胰酶联合消化法接种后未见明显贴壁细胞。人脐带间充质干细胞的倍增时间为45h,72.09%细胞处于G0/G1期,不表达造血细胞及内皮细胞标记,高表达整合素和黏附分子CD44,CD90,CD95以及CD73,CD105,在特定诱导条件下,人脐带间充质干细胞能够向成骨及成脂肪细胞方向分化。结论:应用植块法可以从人脐带组织中简便高效地分离出一群具有高增殖活性及多向分化潜能的间充质干细胞,其免疫表型类似于骨髓间充质干细胞。

关键词：脐带间充质干细胞植块法分离培养生物学特性

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腺病毒递送BMI-1shRNA

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中国实验血液学杂志 2009年第5期17卷 1278-1282页

作者：陈振萍陈晓梨郑杰首都医科大学附属北京儿童医院血液病中心北京100045 中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院、实验血液学国家重点实验室天津300020

近年来发展了一些质粒载体介导shRNA的转录,然后在细胞酶的作用下加工成功能性的siRNAs。虽然这些载体较化学合成的siRNA有更多的优点,但仍存在相当多的缺点,如转染效率低和不能在体内使用。本研究建立一种没有上述缺点的腺病毒递送Bmih... 详细信息

近年来发展了一些质粒载体介导shRNA的转录,然后在细胞酶的作用下加工成功能性的siRNAs。虽然这些载体较化学合成的siRNA有更多的优点,但仍存在相当多的缺点,如转染效率低和不能在体内使用。本研究建立一种没有上述缺点的腺病毒递送BmihRNAs系统,设计靶向人Bmi-1的载体。以pAdTrackCMV质粒为模板扩增CMV-GFP表达盒,从pGE1BMIhRNA质粒上酶切下U6-BMI-1shRNA表达盒,克隆它们入穿梭质粒pShuttle中,然后与pAdEasy-1质粒基因重组产生腺病毒质粒pAd-BMIhRNA-CVM-GFP,转染293A包装细胞,收获病毒。病毒感染K562细胞后,在mRNA和蛋白水平上分别用RealTime-PCR和Westernblot检测BMI的表达水平。结果表明:成功构建了pGE1BMIhRNA腺病毒质粒并有效包装出病毒。感染BmihRNA腺病毒的K562细胞在mRNA和蛋白水平上均显著下调了Bmi-1的表达,而对照病毒没有明显的效果。结论:腺病毒是一种有效递送siRNA入哺乳动物细胞的载体。腺病毒递送siRNA载体可能成为siRNA药物的基因治疗载体。

关键词：腺病毒载体短发夹RNA k562细胞系

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慢性髓系白血病实时定量PCR检测的Bcr-Abl水平与临床状态关系的分析

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中国实验血液学杂志 2009年第4期17卷 861-865页

作者：王国蓉于珍赵耀中李增军李长虹钱林生邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 首都医科大学附属北京朝阳医院血液科北京100020

本研究分析bcr-abl阳性慢性髓系白血病患者实时定量PCR检测的转录本水平与临床状态的关系,以便为根据bcr-abl转录本水平的绝对值合理预测患者状态提供一些基础。采用实时定量PCR方法检测30例初诊慢性髓系白血病患者治疗前骨髓标本的bcr-... 详细信息

本研究分析bcr-abl阳性慢性髓系白血病患者实时定量PCR检测的转录本水平与临床状态的关系,以便为根据bcr-abl转录本水平的绝对值合理预测患者状态提供一些基础。采用实时定量PCR方法检测30例初诊慢性髓系白血病患者治疗前骨髓标本的bcr-abl/abl比值(%),分析获得bcr-abl阳性患者bcr-abl/abl的基线值;再检测82例患者不同时间点161份骨髓标本,比较各标本的bcr-abl/abl值相对于基线值的水平以及与该时间点患者的临床状态的关系。结果表明,初诊患者治疗前bcr-abl/abl(%)值呈正偏态分布,变异范围较大:中位值13.5631(1.0206-98.3159),算术平均值21.1491(95%CI:12.3532-29.9450),为严格判断治疗后的相对变化,因此用以参比的bcr-abl/abl(%)基线值确定为低限值,即1。在161例次标本中,bcr-abl/abl(%)高于基线值(≥1)的有33例次,其中耐药/复发/病情进展的13例次(39.4%,13/33),治疗后未缓解/尚未缓解的17例次(51.5%,17/33),完全血液学缓解的3例次(9.1%,3/33);较基线值下降0-1数量级(0.1≤bcr-abl/abl%<1)的有26例次,其中耐药/复发/病情进展的6例次(23.1%,6/26),治疗后未缓解/尚未缓解的7例次(26.9%,7/26),完全血液学缓解的7例次(26.9%,7/26),遗传学缓解的6例次(23.1%,6/26);较基线值下降1-2数量级(0.01≤bcr-abl/abl%<0.1)的19例次,其中治疗后未缓解/尚未缓解的2例次(10.5%,2/19),完全血液学缓解的3例次(15.8%,3/19),遗传学缓解(CyR)的14例次(73.7%,14/19);较基线值下降2-3数量级(0.001≤bcr-abl/abl%<0.01)的7例次,其中主要遗传学缓解(MCyR)的2例次(28.6%,2/7),完全遗传学缓解(CCyR)的5例次(71.4%,5/7);较基线值下降3个数量级以上(bcr-abl/abl%<0.001)的76例次,均为CCyR。结论:利用单次检测值较基线值下降的程度能较好判断患者该时点的临床状态;bcr-abl/abl%<0.01能可靠地反映患者获得CyR,而bcr-abl/abl%<0.001能反映患者获得CCyR。然而,患者疾病状态的判断仍以动态连续检测为佳。

关键词：实时定量PCR bcr—abl 慢性髓系白血病临床状态

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NQ01C609T，RAD51G135c和XRCC3c241T单核苷酸多态性与急性淋巴细胞白血病发病相关性研究

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中国实验血液学杂志 2009年第3期17卷 523-528页

作者：张战强杨琳张悦杨艺红聂玲李璘王建祥竺晓凡肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院/实验血液学国家重点实验室天津300020

本研究探索NQ01C609T，RAD51G135c和XRCC3c241T单核苷酸多态性与急性淋巴细胞白血病（ALL）发生的关系。对170例ALL患者和458名与患者无血缘关系的正常人，用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP）方法分析其NQ01C609T... 详细信息

本研究探索NQ01C609T，RAD51G135c和XRCC3c241T单核苷酸多态性与急性淋巴细胞白血病（ALL）发生的关系。对170例ALL患者和458名与患者无血缘关系的正常人，用聚合酶链反应一限制性内切酶片段长度多态性（PCR—RFLP）方法分析其NQ01C609T，RAD51G135c和XRCC3c241T基因型。结果表明：在单基因水平分析时NQ01C609T，RAD51G135c和XRCC3c241T基因型比例在正常对照和ALL患者之间无统计学差异，提示其单独作用时对ALL发病的影响无统计学意义。当3个基因联合分析时，NQ01C609T和RAD51G135c均为变异型时伴髓系抗原阳性的ALL和伴平衡易位ALL的发病风险增加（OR值分别为5．553和2．618）；NQ01C609T纯合变异型时农村儿童ALL的发病风险增加（OR值为2．541）。结论：NQ01C609T，RAD51G135c和XRCC3c241T基因型联合作用可能促进ALL的发病，提示多基因联合分析较单基因对ALL的发病分析可能更有预测意义。

关键词：急性淋巴细胞白血病 NQO1基因 RAD51基因 XRCC3基因同源重组修复单核苷酸多态性

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干细胞移植治疗肢体缺血应趋向标准化

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国际移植与血液净化杂志 2009年第2期7卷 23-26页

作者：郝晓红黄平平中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

干细胞具有高度自我更新及多向分化潜能,特定条件下能增殖、分化为血管内皮祖细胞,促进缺血肢体的血管新生。干细胞移植治疗肢体缺血性疾病具有广阔的应用前景,开展相关的标准化研究具有重要的意义。

关键词：干细胞移植血管新生肢体缺血标准化

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染色质重塑与血液肿瘤

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国际输血及血液学杂志 2009年第2期32卷 163-167页

作者：张建伟(综述) 王建祥(审校) 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

染色质重塑属于表观遗传学的范畴，主要参与基因转录的调控，并与细胞凋亡、DNA损伤修复、细胞增殖分化、维持基因组稳定性等方面相关。调控染色质重塑的机制主要有组蛋白修饰、ATP酶依赖的染色质重塑、DNA甲基化、RNA调控等。染色质重... 详细信息

染色质重塑属于表观遗传学的范畴，主要参与基因转录的调控，并与细胞凋亡、DNA损伤修复、细胞增殖分化、维持基因组稳定性等方面相关。调控染色质重塑的机制主要有组蛋白修饰、ATP酶依赖的染色质重塑、DNA甲基化、RNA调控等。染色质重塑异常与血液肿瘤的发生有重要关系，针对染色质重塑异常已经研发出多种HDAC抑制剂和低甲基化药物治疗，取得一定疗效，但在基础和临床应用方面仍有待进一步研究。

关键词：染色质重塑血液肿瘤组蛋白修饰 DNA甲基化表观遗传学

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WHO（2008）骨髓增生异常综合征诊断标准

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国际输血及血液学杂志 2009年第2期32卷 109-110页

作者：肖志坚中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组异质性克隆性造血干细胞疾病，其生物学特征是髓系细胞（粒系、红系、巨核系）一系或多系发育异常和无效造血，可以伴有原始细胞增多。临床和血液学特征是外周血细胞一系或多系减少，骨髓有核细胞常增... 详细信息

骨髓增生异常综合征（MDS）是一组异质性克隆性造血干细胞疾病，其生物学特征是髓系细胞（粒系、红系、巨核系）一系或多系发育异常和无效造血，可以伴有原始细胞增多。临床和血液学特征是外周血细胞一系或多系减少，骨髓有核细胞常增多且形态异常，可伴有原始细胞增多，转化为急性髓系白血病的危险性明显增高^[1-3]。

关键词：骨髓增生异常综合征综合征诊断克隆性造血干细胞疾病原始细胞增多急性髓系白血病标准骨髓有核细胞生物学特征

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失巢凋亡逃逸与肿瘤的发生及转移

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国际肿瘤学杂志 2009年第9期36卷 659-662页

作者：王燕忠(综述) 饶青(审校) 中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

在正常生理条件下，当细胞失去与胞外基质或者邻近细胞接触后会发生失巢凋亡。虽然引发失巢凋亡的原因是一致的，但不同类型的细胞对于失巢凋亡的调控却不尽相同。参与其中的调控分子也包括很多，如细胞黏附分子、蛋白激酶、整合蛋白协... 详细信息

在正常生理条件下，当细胞失去与胞外基质或者邻近细胞接触后会发生失巢凋亡。虽然引发失巢凋亡的原因是一致的，但不同类型的细胞对于失巢凋亡的调控却不尽相同。参与其中的调控分子也包括很多，如细胞黏附分子、蛋白激酶、整合蛋白协同的信号分子、Bcl-2蛋白家族、细胞死亡受体等。失巢凋亡作为一种特殊的凋亡方式在机体发育、维持组织自身平衡中起作用。此外，还能够阻止转化的细胞在非原位组织器官再黏附并生长，所以失巢凋亡的逃逸可能与肿瘤发生及转移有关。

关键词：肿瘤转移细胞凋亡细胞黏附

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微小RNA检测技术的研究进展

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中国实验血液学杂志 2009年第6期17卷 1602-1604页

作者：赵海丰杨仁池中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

微小RNA(miRNA)是一种21-25nt长的小分子RNA,广泛存在于真核生物中,是一组不编码蛋白质的小RNA,可通过序列互补与信使RNA(mRNA)分子相结合从而降解或抑制靶基因的翻译。MicroRNA的主要功能是调控基因的表达,在生物体的生长、发育及疾病... 详细信息

微小RNA(miRNA)是一种21-25nt长的小分子RNA,广泛存在于真核生物中,是一组不编码蛋白质的小RNA,可通过序列互补与信使RNA(mRNA)分子相结合从而降解或抑制靶基因的翻译。MicroRNA的主要功能是调控基因的表达,在生物体的生长、发育及疾病发生中扮演着重要的角色。本文主要对检测microRNA的表达和功能研究的常用检测技术进行简要的综述。

关键词：微小RNA 检测技术 miRNA功能

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