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骨髓增生异常综合征RAEB、RAEB-T和老年急性髓系白血病的临床对照分析

临床血液学杂志 2009年第4期22卷 339-341页

作者：张战强杨艺红张悦杨琳刘亮聂玲李璘王建祥郝玉书肖志坚中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 北京解放军305医院血液科北京100017

目的：在WHO分类中，FAB分型中的骨髓增生异常综合征一难治性贫血伴原始细胞增多转化型（MDS—RAEBT）被划分为急性髓系白血病（AML），本文探讨该划分的合理性。方法：采用病例对照研究比较58例老年AML患者、88例骨髓增生异常综合征-... 详细信息

目的：在WHO分类中，FAB分型中的骨髓增生异常综合征一难治性贫血伴原始细胞增多转化型（MDS—RAEBT）被划分为急性髓系白血病（AML），本文探讨该划分的合理性。方法：采用病例对照研究比较58例老年AML患者、88例骨髓增生异常综合征-难治性贫血伴原始细胞增多（MDS-RAEB）10％～19％（骨髓原始细胞10％～19％）患者和37例MDS-RAEBT患者在临床和染色体核型及共同累及的染色体异常类型上的区别。结果：MDS-RAEBT和MDS-RAEB在病程、WBC、Hb、肝脾肿大比例、正常核型和复杂核型比例及共同累及的染色体异常类型上差异无统计学意义，而和老年AMI，患者比较差异有统计学意义。结论：MDS-RAEBT应该划分为MDS，该结论有待于前瞻性实验进一步验证。

关键词：白血病急性骨髓增生异常综合征难治性贫血伴原始细胞增多

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慢性淋巴细胞白血病并发自身免疫性血细胞减少症7例

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临床血液学杂志 2009年第5期22卷 491-492页

作者：吴瞳李增军王亚非赵耀忠钱林生邱录贵中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020 江西省肿瘤医院内一科南昌330029

目的:报道7例慢性淋巴细胞白血病(CLL)并发自身免疫性血细胞减少症,提高对CLL并发自身免疫性血细胞减少症的认识。方法:回顾性分析2000-2007年就诊于中国医学科学院血液病医院的7例CLL并发自身免疫性血细胞减少症患者的症状和体征、实... 详细信息

目的:报道7例慢性淋巴细胞白血病(CLL)并发自身免疫性血细胞减少症,提高对CLL并发自身免疫性血细胞减少症的认识。方法:回顾性分析2000-2007年就诊于中国医学科学院血液病医院的7例CLL并发自身免疫性血细胞减少症患者的症状和体征、实验室检查、治疗及转归,并复习相关文献。结果:6例患者诊断为自身免疫性溶血性贫血(AIHA),1例患者为Evans综合征。3例患者在诊断CLL的同时发现有溶血发作,另4例患者在CLL诊断后中位20.5个月出现溶血。5例患者用瘤可宁加激素的方案治疗,1例患者单用激素治疗,1例患者用单克隆抗体及联合化疗方案治疗。治疗有效6例,无效1例。3例在随访中溶血复发,再次治疗仍有效。1例患者对治疗反应不佳,需输血维持。随访至2008年4月,除1例患者失访外,其余6例患者全部存活。结论:自身免疫性血细胞减少症是CLL较常见的并发症。尽管激素加烷化剂的常规治疗疗效较好,但复发率较高。并发自身免疫性血细胞减少症无明显预后意义。

关键词：白血病淋巴细胞性慢性血细胞减少症免疫性

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人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白的构建和表达

人4-1BBL胞外区/抗CD20融合蛋白的构建和表达

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天津市生物医学工程学会第29届学术年会暨首届生物医学工程前沿科学研讨会

作者：刘荣姜文国刘芳张砚君范冬梅杨铭邵晓枫王金宏熊冬生杨纯正中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室滨州医学院药理教研室

目的构建和表达人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并测定该融合蛋白的生物学活性。方法采用PCR和ovelapPCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列。采用亲和层析法纯化该产物,并用150 g/L SDS-P... 详细信息

目的构建和表达人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并测定该融合蛋白的生物学活性。方法采用PCR和ovelapPCR方法构建人4-1BBL胞外区/抗CD20双功能融合蛋白,并用双脱氧终止法测定DNA序列。采用亲和层析法纯化该产物,并用150 g/L SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产物。采用FACS法鉴定纯化产

关键词：胞外区功能融合

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干细胞在血栓性血管病中的治疗作用

干细胞在血栓性血管病中的治疗作用

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中华医学会血液学分会第十二届全国血栓与止血学术会议

作者：韩忠朝中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院、实验血液学国家重点实验室国家干细胞工程技术研究中心

血栓性血管疾病是常见疾病，其治疗仍依赖各类药物融栓和扩张血管，这并不能阻断病程的发展，往往最后不得不施行血管再通或旁路搭桥手术。本文介绍了干细胞在血栓性血管疾病中的治疗作用。

关键词：血栓性血管病药物融栓扩张血管干细胞

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急性移植物抗宿主病对正常造血干/祖细胞功能的影响

急性移植物抗宿主病对正常造血干/祖细胞功能的影响

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第12届全国实验血液学会议

作者：庄晓萌胡晓霞张薇薇龚胜兰程辉黄崇媚程涛王健民第二军医大学附属长海医院血液科第二军医大学附属长海医院中心实验室中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的:急性移植物抗宿主病(aGVHD)是影响异基因造血干细胞移植成功最常见的并发症,急性GVHD患者出现造血功能障碍从而引起全血细胞减少已为临床所证实,疗效不佳,并影响造血干细胞移植患者的生存。有关aGVHD引起宿主造血功能障碍的机制目... 详细信息

目的:急性移植物抗宿主病(aGVHD)是影响异基因造血干细胞移植成功最常见的并发症,急性GVHD患者出现造血功能障碍从而引起全血细胞减少已为临床所证实,疗效不佳,并影响造血干细胞移植患者的生存。有关aGVHD引起宿主造血功能障碍的机制目前仍不清楚,阐明aGVHD时正常HSC的功能障碍的机理,具有重要的理论

关键词： aGVHD 供体来源 HSC HPC 急性移植物抗宿主病干/祖细胞

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β-catenin特异的RNA干扰对Jurkat和K562细胞的作用

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中国医学科学院学报 2008年第3期30卷 290-295页

作者：麦玉洁邱录贵李增军李新于珍李长虹王亚非李茜中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的干扰β-catenin在Jurkat和K562细胞中的表达,探讨β-catenin对细胞生长、增殖和凋亡等方面的作用。方法设计合成β-catenin的siRNA干扰序列和对照序列,阳离子脂质体法介导转入Jurkat和K562细胞,分别用RT-PCR和Western blot方法检测... 详细信息

目的干扰β-catenin在Jurkat和K562细胞中的表达,探讨β-catenin对细胞生长、增殖和凋亡等方面的作用。方法设计合成β-catenin的siRNA干扰序列和对照序列,阳离子脂质体法介导转入Jurkat和K562细胞,分别用RT-PCR和Western blot方法检测β-catenin在干扰后mRNA水平和蛋白水平的表达变化。采用台盼兰拒染法计数,MTT比色法和集落形成能力检测细胞的生长增殖,AnnexinV/PI检测细胞凋亡以及PI染色检测细胞周期。结果与对照组相比,实验组细胞β-catenin的mRNA和蛋白水平的表达均降低。在Jurkat细胞,实验组和对照组的细胞增殖抑制率分别为(49.30±9.86)%和(15.10±6.55)%(P<0.05),而在K562细胞分别为(39.40±7.56)%和(10.10±6.89)%(P<0.05),实验组细胞生长明显受抑。在Jurkat细胞,实验组和对照组的集落形成率分别为(25.00±5.13)/104细胞和(31.90±5.55)/104细胞(P<0.05),而在K562细胞分别为(39.33±6.26)/104细胞和(47.33±8.52)/104细胞(P<0.05),实验组细胞集落形成能力明显减弱。在Jurkat细胞,实验组和对照组的细胞凋亡率分别为(55.90±2.22)%和(23.50±2.82)%(P<0.05),而在K562细胞分别为(27.90±15.30)%和(14.90±8.54)%(P>0.05),实验组细胞凋亡率有所增加。在这两种细胞系中均未发现细胞周期的改变。结论β-catenin基因有可能对Jur-kat和K562细胞具有促进细胞生长、增殖,抑制凋亡的作用。

关键词： β-catenin Jurkat细胞系 K562细胞系白血病 RNA干扰

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联合常规实验室检查指标诊断骨髓增生异常综合征的初步研究

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中华血液学杂志 2008年第9期29卷 623-628页

作者：李磷聂玲于明华郑以州张悦徐泽锋郝玉书肖志坚中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的探讨联合常规实验室检查指标在骨髓增生异常综合征（MDS）的诊断和低增生性MDS与慢性再生障碍性贫血（CAA）鉴别诊断中的价值，提供基层单位适用的MDS诊断和鉴别诊断参考方案。方法回顾性分析骨髓原始细胞小于0．050的152例MDS患者... 详细信息

目的探讨联合常规实验室检查指标在骨髓增生异常综合征（MDS）的诊断和低增生性MDS与慢性再生障碍性贫血（CAA）鉴别诊断中的价值，提供基层单位适用的MDS诊断和鉴别诊断参考方案。方法回顾性分析骨髓原始细胞小于0．050的152例MDS患者和86例CAA患者初诊的常规实验室检查资料并进行统计学分析。结果MDS患者血红蛋白，红细胞体积分布宽度一变异系数、未成熟网织细胞比率、血小板计数（BPC）、骨髓原始细胞及早幼粒细胞之和与中性中幼粒细胞及中性晚幼粒细胞之和的比值（RatioG）、原始红细胞及早幼红细胞之和与中幼红细胞及晚幼红细胞之和的比值（RatioE）、巨核细胞计数（Meg）、有核红细胞糖原染色（PAS）阳性率和阳性指数、中性粒细胞碱性磷酸酶染色（N—ALP）阳性率和阳性指数、血清间接胆红素（IBIL）、乳酸脱氢酶（LDH）、尿酸（UA）、叶酸（FA）、维生素B12（VitB12）、铁蛋白（SF）水平等常规实验室指标与CAA患者比较差异有统计学意义。MDS组患者有染色体核型异常者为74例（48．7％），CAA组患者染色体核型均正常，两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。MDS组与CAA组患者均有骨髓干／祖细胞培养生长不良或不生长，均有患者出现外周血T细胞亚群比例改变，两组比较差异无统计学意义。染色体核型异常的74例MDS患者与骨髓活检结果支持CAA诊断的82例患者（CAA组-2）比较，前述差异有统计学意义的指标均仍有统计学差异。7例骨髓低增生性MDS与CAA组-2患者比较，BPC、Meg、骨髓原始粒细胞百分比（MBP）、RatioG、有核红细胞PAS阳性率和阳性指数以及血清FA水平差异有统计学意义。选取各项差异有统计学意义的常规实验室指标进行联合诊断MDS及低增生性MDS特异度〉85％，灵敏度〉70％，正确诊断指数〉0．70。结论联合BPC、RatioG、Meg、有核红PAS阳性率和阳性指数、血清IBIL水平等常规实验室检查指标有助于MDS诊断和低增生性MDS与CAA的鉴别诊断。

关键词：骨髓增生异常综合征低增生性贫血再生障碍性诊断

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中期因子在急性白血病中的表达及其意义

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中华血液学杂志 2008年第8期29卷 544-548页

作者：王洋林冬王东海徐智芳刘家卓刘向荣王建祥王敏中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所、血液病医院实验血液学国家重点实验室

目的检测中期因子（Midkine，MK）基因在白血病患者中的表达，初步探讨其与白血病的关系。方法应用实时定量逆转录PCR（RQ—RT—PCR）方法，对181例急性白血病（AL）患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测。结果中期因子... 详细信息

目的检测中期因子（Midkine，MK）基因在白血病患者中的表达，初步探讨其与白血病的关系。方法应用实时定量逆转录PCR（RQ—RT—PCR）方法，对181例急性白血病（AL）患者、31名正常人骨髓标本进行了中期因子转录本的检测。结果中期因子在初治和复发AL患者、AL完全缓解（CR）患者及正常人骨髓细胞均有表达。初治和复发AL患者中期因子表达明显高于正常人及CR患者（P〈0．01及P〈0．05）。而正常人与CR患者相比差异无统计学意义。中期因子的表达在B细胞急性淋巴细胞白血病（B—ALL）各亚型（包括pro—B—ALL，common—B—ALL，pre—B—ALL）及各年龄段均有显著升高（P〈0．01），且与T细胞急性淋巴细胞白血病（T—ALL）、急性杂合性白血病及急性髓系白血病（AML）各FAB亚型间差异均有统计学意义（P值均〈0.01）；与正常人相比，M2型患者中期因子表达明显升高（P〈0．01），与AML其他FAB亚型相比差异亦有统计学意义（P值均〈0．05）；M3患者中期因子表达也较正常人明显升高（P〈0．05），但与除B—ALL和AML—M2外的其他白血病亚型间差异无统计学意义。CD34^＋患者较CD34^-患者中期因子表达显著升高（P〈0．01），AML1-ETO融合基因阳性的M2患者较阴性的M2患者中期因子表达显著升高（P〈0．05）。结论B—ALL、AML—M2和AML—M3型白血病患者中均存在中期因子基因不同程度的表达升高，为白血病诊断及其发病机制的研究提供了新的方向。

关键词：基因,中期因子白血病聚合酶链反应,实时定量

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4-1BBL胞膜外区蛋白对人外周血淋巴细胞体外活性的调节作用

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细胞与分子免疫学杂志 2008年第5期24卷 431-433,437页

作者：郭红星程昕苏晔范冬梅邵晓枫许元富杨纯正熊冬生中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用。方法:表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)... 详细信息

目的:研究4-1BBL胞膜外区融合蛋白(ex4-1BBL)对人外周血淋巴细胞(PBL)体外活性的调节作用。方法:表达纯化人4-1BBL胞膜外区融合蛋白,台盼蓝计数观察其对淋巴细胞增殖的作用;CytoTox 96非放射性细胞毒试剂盒检测培养液的乳酸脱氢酶(LDH)水平,ELISA检测白介素-2(IL-2)水平。CytoTox 96检测其联合应用anti-CD3/anti-Pgp微型双功能抗体及PBL对靶细胞K562/A02细胞的杀伤作用。结果:4-1BBL胞膜外区融合蛋白能够促进淋巴细胞增殖,减少细胞死亡,促进IL-2分泌;联合应用ex4-1BBL的淋巴细胞组的杀伤效率优于对照组。结论:ex4-1BBL可能成为增强淋巴细胞活性的重要免疫佐剂。

关键词： 4-1BBL 淋巴细胞 anti-CD3/anti-Pgp 双功能抗体

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小鼠骨髓腔内输注人脐血造血干／祖细胞植活水平的观察

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中华血液学杂志 2008年第6期29卷 361-365页

作者：高静韬卢士红李妍涵杨舟许静郑以州中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室天津300020

目的探讨小鼠骨髓腔内输注能否增强人脐血造血干／祖细胞（HS／PC）异种移植的植活能力。方法将不同数量（1×10^3、1×10^4、0.5×10^5、1×10^5、5×10^5）的人脐血CD34^＋细胞经尾静脉和骨髓腔途径移植入经亚致... 详细信息

目的探讨小鼠骨髓腔内输注能否增强人脐血造血干／祖细胞（HS／PC）异种移植的植活能力。方法将不同数量（1×10^3、1×10^4、0.5×10^5、1×10^5、5×10^5）的人脐血CD34^＋细胞经尾静脉和骨髓腔途径移植入经亚致死剂量照射的NOD／SCID小鼠。于指定时间点处死小鼠，用PCR法检测人17号染色体α-微卫星特异性片段及用流式细胞术检测人源CD45^＋细胞，观察脐血CD34^＋细胞在移植小鼠左、右两侧胫骨和股骨及脾脏等部位的归巢及其长期植活能力。结果异种移植后24h，经骨髓腔移植5×10^5 CD34^＋细胞的小鼠肝、脾、肺组织，外周血，左右两侧胫骨和股骨、骨髓细胞均表达人17号染色体α-卫星特异性片段。不同数量的人脐血CD34^＋细胞经骨髓腔途径移植入NOD／SCID小鼠后，8周时其植活良好（检测部位包括输注部位右侧胫骨，以及非输注部位右侧股骨、左侧胫骨、左侧股骨、脾脏及外周血）。分别经尾静脉和骨髓腔两种途径输注同一来源的人脐血CD34^＋细胞1.0×10^5，8周时两组间人造血细胞植活水平分别为（44．063±20．095）％和（45．881±22．316）％，差异无统计学意义（P〈0．05）；而将移植CD34^＋细胞数降至1.0×10^4时，则经骨髓腔途径输注的人脐血CD34^＋细胞小鼠植活水平（54．019±31．338）％显著优于尾静脉输注途径[（12．197±10．350）％，P〈0．01）]；当CD34^＋细胞输注量降至1.0×10^3时，仅有骨髓腔内输注组小鼠能见到人脐血CD34^＋细胞植活，且植活部位通常为非输注部位骨骼。结论小鼠骨髓腔内移植能够增强人脐血造血干／祖细胞的植活水平。

关键词：造血干细胞移植骨髓腔注射小鼠 NOD/SCID 造血重建

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