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基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS分析甘草地上部分主要化学成分

中国中药杂志 2021年第6期46卷 1449-1459页

作者：常冠华薄颖异崔洁徐露露赵梓邯王文全侯俊玲北京中医药大学中药学院北京102488 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室北京100191 中药材规范化生产教育部工程研究中心北京102488 天津市宝坻区人民医院药剂科天津301800

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术对甘草地上部分的主要化学成分进行定性分析。采用Waters Acquity UPLC BEH-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),以乙腈(A)-0.5%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速0.2 mL·min^(-1),在电... 详细信息

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap-MS技术对甘草地上部分的主要化学成分进行定性分析。采用Waters Acquity UPLC BEH-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),以乙腈(A)-0.5%甲酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,流速0.2 mL·min^(-1),在电喷雾正负离子模式下采集数据。依据高分辨质谱提供的准分子离子峰和碎片离子的精确分子质量信息,确证了有关物质及其特征碎片离子的分子组成。再结合对照品对照与相关文献数据支持,最终鉴定出甘草地上部分的55种化学成分,包括42个黄酮类,9个茋类,2个香豆素类,1个木脂素类和1个酚酸类化合物。该方法可对甘草地上部分的化学成分进行快速、准确的定性分析,为今后进一步阐明其药效物质基础和资源开发利用提供科学依据。

关键词：超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱甘草地上部分化学成分黄酮类茋类

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基于分子与形态证据的傣药"傣百解"基原考证

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广西植物 2023年第1期43卷 32-42页

作者：李金月谭运洪李海涛岩罕单龚燕雄肖云学郁文彬中国科学院西双版纳热带植物园综合保护中心云南勐腊 666303 中国科学院大学北京 100049 中国科学院东南亚生物多样性研究中心云南勐腊 666303 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所云南分所云南景洪 666100 西双版纳州傣医医院云南景洪 666100 云南省热带作物科学研究所云南景洪 666100 中国科学院西双版纳热带植物园园林园艺部云南勐腊 666303

"傣百解"是傣医常用的一种解药,其基原植物最早记录是夹竹桃科苦绳(Dregea sinensis),后来被鉴定为夹竹桃科通光散(Marsdenia tenacissima)。为进一步澄清"傣百解"的基原植物,该研究结合形态与分子证据对"傣百... 详细信息

"傣百解"是傣医常用的一种解药,其基原植物最早记录是夹竹桃科苦绳(Dregea sinensis),后来被鉴定为夹竹桃科通光散(Marsdenia tenacissima)。为进一步澄清"傣百解"的基原植物,该研究结合形态与分子证据对"傣百解"基原植物及近缘种进行了整合分析。结果表明:(1)利用3个DNA片段(psbD-trnT、trnL-trnF、ITS)重建牛奶菜属(Marsdenia)及其他牛奶菜族物种的系统发育关系,其结果显示"傣百解"样品与通光散样品构成1个独立的单系分支,并与灵药牛奶菜(***)构成姐妹类群。(2)结合形态性状与模式标本进行对比分析发现,"傣百解"基原植物与通光散模式标本基本一致,而其形态特征与姐妹种灵药牛奶菜存在明显差异。(3)进一步确定了"傣百解"的基原植物是通光散,其叶形态与花部性状差异可作为区分通光散和灵药牛奶菜的重要特征。该研究通过整合形态特征与分子证据完成了对"傣百解"的正本清源,该研究结果可用于市场药材的快速准确鉴定,为"傣百解"今后的开发与利用奠定了基础。

关键词： "傣百解" 基原植物分子系统学形态学考证

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基于HS-GC-MS及化学计量学的不同形态龙血树属含脂药材的成分差异比较研究

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中国中药杂志 2020年第14期45卷 3467-3474页

作者：苏晶李宜航周玲娟秦天道刘世芳陈曦李光马巾媛中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所云南分所云南景洪666100 西双版纳州傣药南药重点实验室云南景洪666100 西双版纳傣族自治州人民医院云南景洪666100 云南农业大学热带作物学院云南普洱665099

以4种不同形态的龙血树属含脂药材为研究对象,采用顶空进样-气相色谱-质谱联用(HS-GC-MS)的代谢组学技术和层次聚类分析(HCA)的化学计量学的方法,研究不同形态龙血树属含脂药材中挥发性成分差异,并进行代谢通路分析。偏最小二乘法判别分... 详细信息

以4种不同形态的龙血树属含脂药材为研究对象,采用顶空进样-气相色谱-质谱联用(HS-GC-MS)的代谢组学技术和层次聚类分析(HCA)的化学计量学的方法,研究不同形态龙血树属含脂药材中挥发性成分差异,并进行代谢通路分析。偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)和HCA分析结果表明,富含纤维的样品和中空木栓层样品中挥发性成分差异不大,但与通体含树脂样品和分泌树脂聚集的样品中的挥发性成分存在较大的代谢差异,并以PLS-DA的VIP和P筛选出20种差异代谢物,在通体含树脂样品和分泌树脂聚集的样品中含量明显高于在富含纤维的样品和中空木栓层样品的含量。富集差异代谢物的代谢通路(P<0.05)共16条,主要涉及萜类生物生成和苯丙烷类代谢,该结果为深入研究不同形态的龙血树属含脂药材结脂机制提供了参考,同时为建立多指标质量评价体系提供了借鉴。

关键词：龙血树属含脂药材 HS-GC-MS 化学计量学龙血竭

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金钗石斛对MPTP诱导PD小鼠的神经保护作用及机制研究

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中国比较医学杂志 2022年第1期32卷 48-56页

作者：王孟迪魏山山姜宁 Alberto Carlos Pires Dias 刘新民王琼西南医科大学附属中医医院中葡中医药国际合作中心药学院四川泸州646000 中国农业科学院农产品加工研究所北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所药理毒理研究中心北京100193 葡萄牙米尼奥大学分子和环境生物学中心生物系中葡食药资源研究中心葡萄牙布拉加4710-057

目的探究金钗石斛提取物(Dendrobium nobile Lindl,DNL)在1-甲基v-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的小鼠帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型中的神经保护作用。方法将小鼠随机分为对照组、模型组,美多芭组(阳性药组)、DNL(100、200、300 mg/kg)组,通过腹腔注射(i.p)MPTP(30 mg/(kg·d),7 d)建立亚急性小鼠PD模型,进行步态分析实验、爬杆实验、悬挂实验等评估DNL对PD小鼠运动异常的影响;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠纹状体区和皮层区肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)表达的变化;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组小鼠纹状体caspase-3和caspase-9的表达情况。结果模型组与对照组相比,推进指数、支撑时相的步态指标有显著变化(P<0.05);与模型组相比,美多芭组、DNL(100、200、300 mg/kg)组在左后、右前、右后推进指数,左后、右前、右后支撑时相均有明显改善(P<0.05);与对照组相比,模型组在爬杆上半段和总时间增加(P<0.01、P<0.001),调头时间和下半段时间无明显变化(P>0.05);与模型组相比,DNL(300 mg/kg)组可以改善上半段时间(P<0.05),美多芭和DNL(100、200 mg/kg)组无明显改善(P>0.05);与对照组相比,模型组的悬挂评分降低(P<0.05),与模型组相比,DNL(300 mg/kg)可以增加悬挂评分(P<0.05),美多芭和DNL(100、200 mg/kg)无明显改善(P>0.05);与对照组相比,模型组小鼠纹状体中TNF-α、IL-1β、IL-6含量增加(P<0.05),caspase-3和caspase-9蛋白表达水平显著增高(P<0.001);与模型组相比,美多芭、DNL(300 mg/kg)组炎症因子指标均降低(P<0.05),皮层中各组含量无差异(P>0.05);caspase-3和caspase-9蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论DNL能够改善MPTP诱导的PD小鼠行为变化,减轻脑组织中的炎症反应,抑制神经细胞凋亡,在治疗PD药物及功能食品研发方面具有较好的潜力。

关键词：金钗石斛帕金森病 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶美多芭小鼠

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白木香转录因子As WRKY25的分子克隆与表达分析

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中国药学杂志 2019年第23期54卷 1919-1925页

作者：孙佩文唐小琳吕菲菲余翠翠王彬彬高志晖金钺徐艳红魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京 100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口 570311

目的克隆和表达白木香(Aquilaria sinensis)转录因子基因As WRKY25并进行特性分析,为深入研究其生物学功能奠定基础。方法以白木香愈伤组织总RNA反转录的c DNA为模版,采用聚合酶链式反应技术(PCR)克隆基因CDS全长;通过生物信息学工具... 详细信息

目的克隆和表达白木香(Aquilaria sinensis)转录因子基因As WRKY25并进行特性分析,为深入研究其生物学功能奠定基础。方法以白木香愈伤组织总RNA反转录的c DNA为模版,采用聚合酶链式反应技术(PCR)克隆基因CDS全长;通过生物信息学工具和软件分析编码蛋白的生物学特性,通过组织特异性表达分析不同组织中的基因表达模式。构建p ET-28aAs WRKY25原核表达载体,在大肠杆菌BL21 (DE3)中进行原核诱导表达及鉴定。结果从白木香愈伤组织中克隆到了As WRKY25转录因子基因,其CDS全长1 728 bp,编码575个氨基酸;该序列密码子优化后连接到p ET-28a表达载体中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功诱导表达,其适合诱导条件为1 mmol·L-1IPTG,37℃连续培养6 h。组织表达分析结果表明,As WRKY25在白木香的沉香层中的表达量最高,在根、茎、枝中的表达量最低。结论成功克隆并表达了白木香WRKY类转录因子As WRKY25,该转录因子可能参与了沉香的伤害诱导形成过程。

关键词：白木香 As WRKY25 基因克隆原核表达表达分析

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2-(2-苯乙基)色酮类化合物的生物活性及其生物合成研究进展

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中国药学杂志 2019年第23期54卷 1909-1918页

作者：肖梦君高志晖魏建和中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室濒危药材繁育国家工程实验室北京 100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室国家中医药管理局沉香可持续利用重点研究室海口 570311

2-(2-苯乙基)色酮类化合物仅分布在少数植物中,具有神经保护、抗菌和抗炎等多种生物活性,是沉香的特征性成分和主要活性成分,具有广阔的药用前景和应用价值。笔者对2-(2-苯乙基)色酮类化合物的神经保护活性、抗肿瘤细胞毒活性、抗菌活... 详细信息

2-(2-苯乙基)色酮类化合物仅分布在少数植物中,具有神经保护、抗菌和抗炎等多种生物活性,是沉香的特征性成分和主要活性成分,具有广阔的药用前景和应用价值。笔者对2-(2-苯乙基)色酮类化合物的神经保护活性、抗肿瘤细胞毒活性、抗菌活性和抗炎活性等生物活性、构效关系及生物合成途径的研究现状进行综述和展望,以期为筛选药用2-(2-苯乙基)色酮类化合物和对其生物合成途径的解析提供参考,并指出了目前生物合成研究中存在的问题。

关键词： 2-(2-苯乙基)色酮类化合物生物活性生物合成途径

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不同提取方法下温莪术油成分的GC-Q/TOF-MS分析

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中南药学 2020年第11期18卷 1879-1887页

作者：张师辉刘丹周亚奎杨美华赵祥升中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室海口570311 西南科技大学生命科学与工程学院四川绵阳621010 中国医学科学院&北京协和医学院药用植物研究所北京100193

目的运用气相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(GC-Q/TOF-MS)对温莪术油中化学成分进行研究,比较不同提取方法对其成分的影响。方法采用GC-Q/TOF-MS对超声辅助乙酸乙酯萃取、超临界CO2萃取和水蒸气蒸馏法提取温莪术油中成分进行分析,通过标... 详细信息

目的运用气相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(GC-Q/TOF-MS)对温莪术油中化学成分进行研究,比较不同提取方法对其成分的影响。方法采用GC-Q/TOF-MS对超声辅助乙酸乙酯萃取、超临界CO2萃取和水蒸气蒸馏法提取温莪术油中成分进行分析,通过标准谱库检索,对照品比对和文献分析确定化合物,峰面积归一化法计算化合物相对百分含量。结果从温莪术油中共鉴定出75个化合物,共有成分69个,3种提取方法制得温莪术油的成分基本一致,桉叶油醇、β-榄香烯、大牻牛儿烯D、莪术烯、大牻牛儿烯B、莪术醇、吉马酮、莪术二酮、新莪术二酮、莪术烯醇、莪术双环烯酮、去氢莪术二酮为温莪术油的特征性成分。结论提取方法对温莪术油的成分影响不大,超临界CO2萃取更适合莪术油的工业化生产。

关键词：温莪术挥发油提取方法四极杆飞行时间质谱

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剑叶三宝木二萜类化学成分研究

剑叶三宝木二萜类化学成分研究

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2020药植论坛暨中国(海口)沉香产业可持续发展大会

作者：王博闻马国需陈德力刘平怀海南大学化学工程与技术学院海口 570228 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室海口 570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室海口 570311 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 海南大学化学工程与技术学院海口 570228

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真菌毒素毒性及其在生物样本中检测技术研究进展

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中国药理学与毒理学杂志 2020年第10期34卷 788-800页

作者：孙梅峰豆小文张磊车轶群赵明欧阳臻杨美华江苏大学药学院江苏镇江212013 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室北京100193 国家癌症中心国家肿瘤临床医学研究中心中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院检验科北京100021

真菌毒素是真菌产生的一类具有生物体内蓄积效应的有害次生代谢物,其广泛存在于食品、饲料及中药材中,对人体和动物具有潜在危害。因此,掌握体内真菌毒素准确、快速、高效的检测前沿技术,对真菌毒素致病机制探索及人体暴露评估具有重要... 详细信息

真菌毒素是真菌产生的一类具有生物体内蓄积效应的有害次生代谢物,其广泛存在于食品、饲料及中药材中,对人体和动物具有潜在危害。因此,掌握体内真菌毒素准确、快速、高效的检测前沿技术,对真菌毒素致病机制探索及人体暴露评估具有重要意义。本文归类分析了常见单一真菌毒素如曲霉属真菌毒素、镰刀菌属真菌毒素的毒性效应及混合真菌毒素的联合毒性;剖析了尿液、血液、组织中真菌毒素及其标志物的样品制备和检测方法,如蛋白质沉淀、液液萃取、固相萃取、免疫亲和净化、直接稀释等生物样本的前处理;系统性介绍了真菌毒素毒性及其在生物样本的检测技术,如薄层色谱法、高效液相色谱法、色谱-质谱联用法、免疫分析法及其他如适配体传感器技术、噬菌体展示技术和胶体金技术等。本综述可为体内真菌毒素及其标志物检测研究和人体真菌毒素暴露风险评估提供参考。

关键词：真菌毒素生物样本体内毒性检测技术

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基于DNA条形码技术对23种未知黎药进行物种鉴定

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中国中药杂志 2019年第2期44卷 283-292页

作者：崔馨云孙伟熊超孟祥宵师玉华邬兰程丽丽李伟杰郑希龙中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所海南分所海南省南药资源保护与开发重点实验室海南海口570311 中国中医科学院中药研究所中药鉴定与安全性检测评估重点实验室北京100700 北京中医药大学东直门医院骨科北京100700

该研究利用DNA条形码技术对23种未知黎药进行物种鉴定。采用试剂盒法提取了23种药材的总DNA,并利用PCR技术扩增其ITS2,psbA-trnH序列并双向测序,利用Codon Code Aligner v7. 0. 1软件对测序峰图进行正反向序列拼接,去除引物区及低质量... 详细信息

该研究利用DNA条形码技术对23种未知黎药进行物种鉴定。采用试剂盒法提取了23种药材的总DNA,并利用PCR技术扩增其ITS2,psbA-trnH序列并双向测序,利用Codon Code Aligner v7. 0. 1软件对测序峰图进行正反向序列拼接,去除引物区及低质量序列获得ITS2,psbA-trnH序列,并将其输入到中药材DNA条形码数据库和NCBI Gen Bank数据库中进行检索,尝试对这23种药材进行物种鉴定。并以鉴定结果的相似度≥97%即确定到物种水平;介于97%和90%即确定为属级水平;低于90%即确定到科级水平这一原则作为鉴定标准,有17种药材可以鉴定到物种水平,5种药材可以鉴定到属级水平,1种可以确定到科级水平。由此可见DNA条形码技术可以快速、准确的鉴别无背景信息的未知药材。

关键词：黎药 DNA条形码 ITS2 psbA-trnH

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