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中国实验动物学报 2021年第1期29卷 99-103页

作者：刘明娅戚菲菲鲍琳琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,流感病毒感染机体过程中,常因免疫反应过度促使细胞因子大量分泌,形成细胞因子风暴,导致肺损伤、肺衰竭甚至死亡。流感病毒感染导致的重症肺炎是流感患者死亡的重要原因之一,目前临床上用于流... 详细信息

流感是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,流感病毒感染机体过程中,常因免疫反应过度促使细胞因子大量分泌,形成细胞因子风暴,导致肺损伤、肺衰竭甚至死亡。流感病毒感染导致的重症肺炎是流感患者死亡的重要原因之一,目前临床上用于流感治疗的药物主要是抗病毒药物,通常不能调控机体的过度免疫反应,也不能减轻肺部的炎症损伤。白细胞介素-37(interleukin-37,IL-37)是新发现的白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)家族的成员,具有强大的抑炎功能,通过抑制多种炎症因子的分泌阻止细胞因子风暴的发生,在感染性疾病、自身免疫病及肿瘤等疾病中发挥重要的作用。因此,若能将IL-37的抗炎作用运用到H1N1流感病毒感染导致的重症肺炎治疗中,无疑给重症肺炎的治疗提供新的思路。

关键词：流感病毒重症肺炎细胞因子风暴 IL-37

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双光子显微镜技术下胶质瘤-壁细胞在体多荧光示踪小鼠模型的建立及应用

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中国实验动物学报 2024年第6期32卷 702-711页

作者：马铖延杨星九史旭东高苒中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 国家人类疾病动物模型资源库北京100021 国家卫生健康委员会比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021

目的建立双光子显微镜下可视化胶质瘤、壁细胞和血管的活体自发荧光的基因小鼠模型并进行评价。方法以PDGFRβ-Cre^(+/-):Rosa26-tdTomato+/-基因工程小鼠为观察壁细胞和血管结构的载体,接种GL261-CFP小鼠胶质瘤细胞并对颅骨进行透明化... 详细信息

目的建立双光子显微镜下可视化胶质瘤、壁细胞和血管的活体自发荧光的基因小鼠模型并进行评价。方法以PDGFRβ-Cre^(+/-):Rosa26-tdTomato+/-基因工程小鼠为观察壁细胞和血管结构的载体,接种GL261-CFP小鼠胶质瘤细胞并对颅骨进行透明化,通过双光子显微镜动态跟踪观察胶质瘤增殖侵袭过程中血管与壁细胞的动态变化。结果通过基因鉴定证实PDGFRβ-Cre^(+/-):Rosa26-tdTomato+/-基因工程小鼠成功繁育。对比C57BL/6小鼠,基因工程小鼠的形态外观和繁殖等无显著性差异,组织苏木素-伊红(HE)染色切片分析显示脏器发育无异常。Tamoxifen诱导下基因工程小鼠的Cre重组酶活性至第7天作用完全。接种GL261-CFP后观察到胶质瘤增殖侵袭的动态过程及肿瘤内血管形态结构紊乱、游离壁细胞增多。结论成功构建了荧光可视化壁细胞的基因工程小鼠,分别利用异硫氰酸荧光素-葡聚糖标记血管和青色荧光标记肿瘤细胞,使用玻璃圆片与固定环替代小鼠颅骨,实现了活体状态下长期稳定地动态跟踪小鼠接种脑肿瘤后血管及血管支持细胞的形态结构变化,为研究脑胶质瘤提供了病理可视化的动物模型。

关键词：双光子显微镜胶质瘤壁细胞基因工程小鼠动物模型

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心肌组织特异性Isca1敲除造成新生大鼠心脏结构异常

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中国实验动物学报 2019年第3期27卷 286-290页

作者：杨辛兰吕丹张旭董伟陈炜高珊高凯史旭东马元武张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院神经科学中心北京100730

目的通过对心肌组织特异性Isca1敲除大鼠进行磁共振分析及病理学分析,探究心肌特异性敲除Isca1对大鼠心脏结构影响。方法繁育心肌组织特异性Isca1敲除大鼠,PCR技术鉴定大鼠基因型及基因敲除效率,对新出生0.5d及2.5d心肌组织特异性Isca1... 详细信息

目的通过对心肌组织特异性Isca1敲除大鼠进行磁共振分析及病理学分析,探究心肌特异性敲除Isca1对大鼠心脏结构影响。方法繁育心肌组织特异性Isca1敲除大鼠,PCR技术鉴定大鼠基因型及基因敲除效率,对新出生0.5d及2.5d心肌组织特异性Isca1敲除大鼠进行核磁共振影像分析,对新出生2.5d心肌组织特异性Isca1敲除大鼠心肌组织进行H&E染色及透射电镜分析。结果心肌组织特异性Isca1敲除大鼠敲除效率大于78%;与野生型相比,0.5d心肌组织特异性Isca1敲除大鼠心脏未见显著扩张;2.5d心肌组织特异性Isca1敲除大鼠心脏右室呈扩张趋势;2.5d心肌组织特异性Isca1敲除大鼠肌纤维排列不齐,出现排列紊乱,无层次或极向,部分心肌纤维出现溶解断裂,肌节和Z线模糊,出现肌膜损伤,线粒体嵴断裂,肿胀明显。结论心肌组织特异性Isca1敲除造成新生大鼠心脏结构异常。

关键词：心脏新生鼠 Isca1

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阿司匹林对控制大鼠盐敏感性高血压的作用机制研究

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中国比较医学杂志 2019年第1期29卷 35-40,46页

作者：刘雪杨宇辉付慧刘星姜晓亮杨志伟中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 首都医科大学北京100069

目的探讨阿司匹林对大鼠盐敏感性高血压的调节作用及相关机制。方法 2月龄盐敏感性大鼠(Dahl SS)及其对照盐耐受性大鼠(SS-13BN)分别给予低盐(0. 12%NaCl,LS)、高盐(8%NaCl,HS)、高盐加阿司匹林灌胃((10 mg/(kg·d)),HS+ASA)饲养至8... 详细信息

目的探讨阿司匹林对大鼠盐敏感性高血压的调节作用及相关机制。方法 2月龄盐敏感性大鼠(Dahl SS)及其对照盐耐受性大鼠(SS-13BN)分别给予低盐(0. 12%NaCl,LS)、高盐(8%NaCl,HS)、高盐加阿司匹林灌胃((10 mg/(kg·d)),HS+ASA)饲养至8周,期间尾袖法连续测量动脉血压,8周后颈总动脉插管测量大鼠动脉血压,Real-time PCR检测肾组织炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的表达,免疫荧光检测皮肤M2型巨噬细胞的数量,免疫印迹检测血管功能代表性蛋白eNOS、vWF的表达。结果 Dahl SS大鼠高盐喂养后,血压明显升高,肾组织炎症因子和血管vWF因子表达量显著增加、皮肤M2型巨噬细胞数量及血管eNOS表达量明显减少,阿司匹林能够有效改善Dahl SS大鼠高盐诱导的血压升高、炎症反应及血管功能的损伤,而SS-13BN大鼠并未出现上述情况。结论阿司匹林通过抗血小板功能抑制了Dahl SS大鼠由高盐诱导的炎症反应,抑制了血管功能损伤及高血压发生发展。

关键词：盐敏感性高血压阿司匹林血小板活化血管炎症大鼠

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二烯丙基硫醚通过靶向抑制CYP2E1对相关疾病治疗的潜在作用

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中国比较医学杂志 2019年第8期29卷 117-121页

作者：庞硕吕丹张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院神经科学中心北京100730

细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)是一种能够代谢内源性或外源性物质的细胞色素P450酶,主要位于内质网上,参与类固醇、脂肪酸、前列腺素和药物、致癌物质和环境污染物等外源性化学物质的氧化代谢。在酒精性肝病、非酒精性... 详细信息

细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)是一种能够代谢内源性或外源性物质的细胞色素P450酶,主要位于内质网上,参与类固醇、脂肪酸、前列腺素和药物、致癌物质和环境污染物等外源性化学物质的氧化代谢。在酒精性肝病、非酒精性肝病、心血管疾病、艾滋病、糖尿病、帕金森综合征等疾病的病理进程中,CYP2E1的表达水平升高,产生活性氧(reactive oxygen species,ROS),引起氧化应激、DNA、蛋白质和脂质的失活,进而造成体内重要器官损伤,因此可以通过靶向抑制CYP2E1进而治疗多种疾病的。二烯丙基硫醚(diallyl sulfide,DAS)是大蒜中的一种有效成分,后发现可作为CYP2E1的选择性抑制剂,可以通过抑制CYP2E1,降低ROS、氧化应激的产生,细胞的凋亡。本文主要综述DAS靶向抑制CYP2E1对相关疾病治疗的潜在作用。

关键词：二烯丙基硫醚 CYP2E1 活性氧氧化应激

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醋酸脱氧皮质酮(DOCA)加高盐诱导动脉瘤发生发展的作用及潜在机制

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中国比较医学杂志 2021年第1期31卷 27-34页

作者：吴献贤刘星张娜李雨涵杜星辰杨志伟中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 宁夏医科大学银川750004

目的探讨醋酸脱氧皮质酮(DOCA)加高盐在不同时间点对腹主动脉瘤的诱导作用,及潜在分子机制。方法将10月龄C57BL/6J小鼠分为两组:高盐组(HS),DOCA加高盐组(DOCA+HS)。两组小鼠在接受不同的处理一周,两周,三周时分别超声并取材,观察腹主... 详细信息

目的探讨醋酸脱氧皮质酮(DOCA)加高盐在不同时间点对腹主动脉瘤的诱导作用,及潜在分子机制。方法将10月龄C57BL/6J小鼠分为两组:高盐组(HS),DOCA加高盐组(DOCA+HS)。两组小鼠在接受不同的处理一周,两周,三周时分别超声并取材,观察腹主动脉的扩张情况和动脉瘤的形成情况;HE染色,Masson染色和弹力纤维染色检测腹主动脉病理状态、胶原沉积和弹力纤维断裂情况;免疫组织化学法检测平滑肌细胞降解,腹主动脉炎症细胞浸润;RT-PCR检测炎症因子、抗炎因子的表达;转录组测序(RNA-Sequence)分析比较两组小鼠处理三周时动脉组织差异性表达基因及差异表达基因富集的信号通路。结果与单纯高盐饮水组相比,DOCA加高盐处理一周无法诱导小鼠腹主动脉瘤的形成,处理两周能显著诱导动脉瘤的发生,动脉瘤发生率为44%,处理三周时动脉瘤发生率为65%;DOCA加高盐处理两周和三周后,腹主动脉处胶原沉积增多,出现弹力纤维断裂,平滑肌细胞降解;炎症细胞浸润明显增多,浸润的炎症细胞以巨噬细胞和T细胞为主;炎症因子表达明显增加,抗炎因子表达下降;进一步的转录组测序结果表明两组小鼠在处理三周后差异表达的基因主要富集在免疫系统和代谢通路中,并且发现介导白细胞粘附的关键分子PSGL-1在DOCA加高盐处理三周后表达明显升高。结论 DOCA加高盐处理两周即可诱导小鼠腹主动脉瘤的发生,PSGL-1及其介导的炎症反应可能在其中发挥着重要作用。

关键词：动脉瘤醋酸脱氧皮质酮高盐炎症反应

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亚致死剂量γ-射线全身照射对小鼠造血免疫功能远期影响

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中国比较医学杂志 2019年第11期29卷 50-57,64页

作者：管博文卢延华苏路路李程程荆学双董银萍王月英李德冠孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心北京100021 中国医学科学院/北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室天津300192

目的观察4 Gy、6 Gy全身照射后6个月C57BL/6 J小鼠的造血和免疫等功能指标变化。方法对8~12周的C57BL/6 J小鼠分别进行4 Gy和6 Gy全身照射,照射6个月后检测外周血细胞计数及分类、胸腺系数及脾系数、外周血及脾免疫细胞分型、脾T细胞p1... 详细信息

目的观察4 Gy、6 Gy全身照射后6个月C57BL/6 J小鼠的造血和免疫等功能指标变化。方法对8~12周的C57BL/6 J小鼠分别进行4 Gy和6 Gy全身照射,照射6个月后检测外周血细胞计数及分类、胸腺系数及脾系数、外周血及脾免疫细胞分型、脾T细胞p16表达水平。结果照射后6个月外周血白细胞、红细胞计数仍然明显低于对照组。血小板与对照组无明显差异。外周血细胞分类结果显示照射组小鼠中性粒细胞比例升高、淋巴细胞比例下降,呈现细胞分化偏移现象。与对照组相比,6 Gy照射后6个月,胸腺系数明显降低(P<0. 05)。脾系数无差异。外周血流式分析,结果显示4 Gy、6 Gy照射后,B淋巴细胞、NK细胞仍然低于对照组,提示受照后6个月未完全恢复。受照组CD4比例高于对照组。CD8、单核细胞与对照组未见差异。脾免疫细胞进行流式分析,结果显示4 Gy和6 Gy照射后6个月,B220对于对照组均有明显下降,均具极显著性差异(P<0. 01)。相比于对照组,6 Gy组脾T细胞p16表达有升高的趋势,但无显著性差异。结论亚致死剂量照射后6个月各项检测基本恢复,但是外周血分类中性粒持续升高,胸腺系数及外周血、脾B淋巴细胞比例仍低于对照组。提示可能有远期损伤。本项实验数据为中高剂量照射后造血免疫功能长期损伤研究提供了基础数据。

关键词：亚致死剂量照射远期外周血细胞计数免疫脏器免疫分型小鼠

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Beta属冠状病毒亚基因组检测及应用进展

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中国比较医学杂志 2022年第11期32卷 142-148页

作者：张亚青戚菲菲鲍琳琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目前已知可以感染人类的冠状病毒(coronavirus)有7种,其中Beta冠状病毒属(beta coronavirus)有5种。人冠状病毒OC43(human coronavirus OC43,HCoV-OC43)、人冠状病毒HKU1(human coronavirus HKU1,HCoV-HKU1)感染呈现季节性特征,症状轻微。严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus, SARS-CoV)、中东呼吸综合征冠状病毒(middle east respiratory syndrome coronavirus, MERS-CoV)和严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染后迅速在人与人之间传播,病毒流行对公共卫生安全和国民经济造成严重威胁。核酸检测是鉴别、诊断和排查病毒感染患者的关键检测方法之一,但核酸阳性并不意味着病毒具有传染性,需要探索一种快速反应病毒复制能力的检测方法作为补充。研究证实Beta属冠状病毒在细胞复制过程中产生的亚基因组(subgenomic RNA,sgRNA)可以作为判断病毒活性的指标。本文对Beta属冠状病毒亚基因组的检测应用等进行综述,旨在建立亚基因组检测方法,优化病毒检测方式,完善实验室动物模型创建及药物疫苗有效性评价体系,助力开展实验研究。

关键词： Beta属冠状病毒亚基因组病毒复制检测方法

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OGR1与肿瘤微环境

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中国比较医学杂志 2019年第7期29卷 96-101页

作者：李维莎刘宏飞严立波高苒秦川国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021 首都医科大学附属北京同仁医院北京100730

肿瘤微环境曾被认为对肿瘤的生长和侵袭作用是微小的,现今人们已认识到其在肿瘤发展中扮演的角色是不可或缺的。肿瘤的一个共性是缺氧,低氧亦是肿瘤微环境的代表性特征之一,这些特性致使肿瘤细胞外氢离子浓度上升,pH下降(酸中毒),形成... 详细信息

肿瘤微环境曾被认为对肿瘤的生长和侵袭作用是微小的,现今人们已认识到其在肿瘤发展中扮演的角色是不可或缺的。肿瘤的一个共性是缺氧,低氧亦是肿瘤微环境的代表性特征之一,这些特性致使肿瘤细胞外氢离子浓度上升,pH下降(酸中毒),形成特异的酸性微环境。该酸性微环境不仅对肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、转移和治疗有重要影响;同时对免疫细胞,血管细胞和其他基质细胞的功能也具有一定作用。然而,肿瘤细胞感知和响应微环境中酸性pH的分子机制尚不清楚。有研究表明,有些受体和离子通道家族可以帮助细胞感知酸中毒,作为G蛋白偶联受体家族(G-protein coupled receptors,GPCRs)成员的卵巢癌G蛋白偶联受体1(OGR1)主要作用是由酸中毒激活并介导多个下游G蛋白信号传导途径,不仅可以调节肿瘤细胞转移和增殖,对免疫细胞的功能,炎症和血管形成也具有重要影响。本文论述了OGR1与肿瘤发生及其与肿瘤微环境,免疫反应和血管生成之间的关系。近些年来,GPCRs作为主要的药物靶标,对其pH敏感的GPCR小分子调节剂的开发已经成为研究热点。而对OGR1与肿瘤微环境相互作用之间的研究将为肿瘤的治疗和化学预防提供新策略。

关键词： OGR1 肿瘤微环境酸中毒

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A/Guangdong/Th005/2017(H7N9)禽流感病毒对禽类致病力的研究

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中国实验动物学报 2019年第5期27卷 555-560页

作者：吕琦李枫棣龚姝然戚菲菲王顺意王冠澎姜静鲍琳琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的追踪H7N9禽流感病毒在流行中对禽类的致病力变化的趋势,并分析可能的致病机制。方法通过病毒在禽类中的传代实验分析H7N9禽流感病毒在禽体内循环后病毒致病力变化情况,检测传代病毒感染鸡后,体温、体重变化,监测其临床症状,测定感... 详细信息

目的追踪H7N9禽流感病毒在流行中对禽类的致病力变化的趋势,并分析可能的致病机制。方法通过病毒在禽类中的传代实验分析H7N9禽流感病毒在禽体内循环后病毒致病力变化情况,检测传代病毒感染鸡后,体温、体重变化,监测其临床症状,测定感染鸡的咽拭子和肛拭子病毒滴度。比较第5波H7N9疫情分离株A/Guangdong/Th005/2017(Th005)和第1波病人分离株A/Anhui/1/2013(Anhui)对鸡的致病性。结果 Th005毒株对鸡的静脉注射致病指数(intravenous pathogenic index, IVPI)评分是3,为高致病性禽流感病毒。感染Th005毒株后,鸡体重显著下降,体温升高超过42℃,随后降低直至全部死亡。而感染Anhui毒株后,鸡体重持续上升,无明显临床症状。Th005毒株在鸡体内传代后对鸡仍具有致死能力。Anhui毒株在鸡体内传代后对鸡的致病力略有提高,表现为感染后出现一过性眼部水肿,可以检测到泄殖腔排毒。结论 Th005毒株对鸡表现出高致病力和排毒能力,可能对禽养殖业造成损害且增加病毒在环境中长期存在。应当加强对致病力持续上升的H7N9禽流感病毒的监控。

关键词： H7N9禽流感病毒鸡致病性

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