检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2012年第6期22卷 9-13页

作者：孙丽华卢耀增吴小闲马耀文孙井江潘菊华王阶黄世敬中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较重点实验室国家中医药管理局人类疾病三级实验室北京100021 中国中医科学院广安门医院北京100053

目的探讨SIVmac239感染中国恒河猴的血液学和血清生物化学的变化,研究艾滋病的发生机制。方法 20只恒河猴感染SIVmac239后分别在感染前和感染后2、6、9、12、15和18个月在猴空腹状态用盐酸氯胺酮麻醉下静脉釆血。抗凝血用全自动血液细... 详细信息

目的探讨SIVmac239感染中国恒河猴的血液学和血清生物化学的变化,研究艾滋病的发生机制。方法 20只恒河猴感染SIVmac239后分别在感染前和感染后2、6、9、12、15和18个月在猴空腹状态用盐酸氯胺酮麻醉下静脉釆血。抗凝血用全自动血液细胞分析仪检测血液常规,血清用全自动生化分析仪检测生化指标。结果SIV感染猴红白细胞计数呈逐渐的减少。淋巴细胞计数有较明显减/增的波动。血清酶类ALT和AST没有明显的上升,但在15月时均有所下降P<0.05～P<0.01。LDH持续降低,原因未明。CK则逐月上升,至12月时达高峰,后又有所下降。血尿素氮逐月上升,并在6～18个月时P<0.01。总蛋白量上升,白蛋白逐月降低,球蛋白升高,白蛋白/球蛋白比率倒置。SIV感染猴2个月后总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白均呈上升,至12月时略有下降,但到18月又上升。血糖(GLU)在SIV感染后逐月上升,后期上升更为明显,这可能与胰岛的损害有关。结论 SIVmac239感染猴后,通过SIV侵入相关的器官病变和体液调节失衡导致血液学和血液生物化学产生异常,从而提供有关猴艾滋病的一些基础资料,这将对研究人的艾滋病也许有所帮助。

关键词： SIVmac239病毒血液学和血液生物化学

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不同年龄小鼠造血系统辐射损伤与修复的比较观察

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国际放射医学核医学杂志 2019年第5期43卷 442-449页

作者：陈孟毅林帅吴丽贤刘冰李程程李德冠孟爱民中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室北京100021 福建医科大学药学院福建省天然药物药理学重点实验室福州350108 中国医学科学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室天津300192 原子高科股份有限公司

目的观察辐射对不同年龄小鼠(幼年鼠、青年鼠、老年鼠)造血系统的损伤及恢复的影响,探讨幼年鼠、老年鼠受照后造血系统的变化及其与青年鼠的差异。方法不同年龄(幼年鼠:3周龄、青年鼠:8周龄、老年鼠:14月龄)雄性C57BL/6小鼠各60只,按照... 详细信息

目的观察辐射对不同年龄小鼠(幼年鼠、青年鼠、老年鼠)造血系统的损伤及恢复的影响,探讨幼年鼠、老年鼠受照后造血系统的变化及其与青年鼠的差异。方法不同年龄(幼年鼠:3周龄、青年鼠:8周龄、老年鼠:14月龄)雄性C57BL/6小鼠各60只,按照随机区组法分为对照组、2 Gy照射组、4 Gy照射组,每组各20只。其中,照射组小鼠用137Csγ射线给予全身照射,对照组给予假照射。分别于照射后第3、7、14、28天取材,检测小鼠外周血计数、单侧股骨骨髓有核细胞计数、骨髓中造血干细胞(HSC)百分比、造血祖细胞(HPC)百分比及粒单系造血祖细胞集落形成单位(CFU-GM)绝对百分比。多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用t检验。结果照射组小鼠白细胞计数、单侧股骨骨髓有核细胞计数、HSC百分比和HPC百分比在第3天降至最低值,其中,幼年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的34.8%(t=6.129,P<0.05)、19.6%(t=7.084,P<0.05),青年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的43.8%(t=3.043,P<0.05)、20.0%(t=7.084,P<0.05),老年鼠2 Gy、4 Gy照射组白细胞计数分别下降至同组对照组的19.0%(t=22.080,P<0.05)、8.4%(t=24.590,P<0.05),4 Gy照射组降低程度重于2 Gy照射组,且呈剂量依赖性。第28天时幼年鼠照射组单侧股骨骨髓有核细胞计数未恢复正常,4 Gy照射组HSC绝对百分比仍低于50%,HPC绝对百分比恢复至50%左右。青年鼠照射组CFU-GM在第28天恢复至正常水平,而幼年鼠照射组(2 Gy照射:t=2.067,P<0.05;4 Gy照射:t=3.358,P<0.05)和老年鼠照射组(2 Gy照射:t=2.586,P<0.05;4 Gy照射:t=4.772,P<0.05)在第28天时显著低于青年鼠照射组,仍未恢复至正常水平。结论照射组小鼠造血系统大多数指标在第3天出现急性抑制且呈剂量依赖性,3 d后为损伤恢复期,多数指标在第28天可恢复至正常水平。与青年鼠相比,幼年鼠的血小板和造血干细胞功能对辐射损伤更为敏感,老年鼠的骨髓细胞增殖功能恢复能力下降。

关键词：小鼠辐射损伤造血系统修复年龄差异

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基于微滴式数字PCR技术对猪内源逆转录病毒拷贝数的检测方法的建立及应用

基于微滴式数字PCR技术对猪内源逆转录病毒拷贝数的检测方法的建...

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第十六届中国实验动物科学年会

作者：卢天宇高虹杨博超于佳楠徐亚新王若琳秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的利用微滴式数字PCR (droplet digital PCR,ddPCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用TaqMan探针双重ddPCR方法 ,分别以GAPDH和TFR... 详细信息

目的利用微滴式数字PCR (droplet digital PCR,ddPCR)技术,对猪基因组中猪内源逆转录病毒(porcine endogenous retrovirus,PERV)拷贝数测定方法进行优化,建立PERV拷贝数的检测方法。方法采用TaqMan探针双重ddPCR方法 ,分别以GAPDH和TFRC为内参基因,确定对PERV拷贝数检测反应最适合退火温度和反应循环数。另外,通过对浓度梯度稀释的标准品质粒和猪细胞基因组进行检测,以确定最适模板浓度。采用ddPCR和qPCR两种方法测定来自猪源细胞系和巴马小型猪组织中PERV的拷贝数,比较两种检测方法的稳定性。结果基于ddPCR技术检测PERV拷贝数的最适退火温度为59.9℃,最佳反应循环数为50;模板基因组的最适浓度在1.25-7.5ng;检测同一样品来源基因组中PERV的拷贝数的变异系数在0.44%至8.29%之间。结论本研究建立了基于ddPCR技术的PERV拷贝数的检测方法并系统的探索了最佳实验条件,与传统的qPCR相比,该方法具有更高的准确性和可重复性,为异种移植研究中供体动物基因组PERV拷贝数的测定提供了灵敏的方法和可靠依据。

关键词：微滴式数字PCR 猪内源逆转录病毒拷贝数绝对定量

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耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株的筛选

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微生物与感染 2014年第2期9卷 83-88页

作者：丁海榕林树柱卢锦标邓海清王国治秦川占玲俊中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国食品药品检定研究院结核疫苗室北京100050 温州医科大学环境与公共卫生学院温州325035

本研究通过小鼠体内实验检测我国部分地区结核分枝杆菌耐药菌株的毒力,以筛选耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株。收集从我国部分省份98例结核病患者痰培养液中分离出的结核分枝杆菌,用比例法药敏试验进行结核分枝杆菌一线和二线药... 详细信息

本研究通过小鼠体内实验检测我国部分地区结核分枝杆菌耐药菌株的毒力,以筛选耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株。收集从我国部分省份98例结核病患者痰培养液中分离出的结核分枝杆菌,用比例法药敏试验进行结核分枝杆菌一线和二线药物的药敏试验,筛选出对二线药物敏感而对一线药物利福平或异烟肼耐药或敏感的菌株,然后进行小鼠体内毒力实验,对异烟肼耐药相关基因katG和利福平耐药相关基因rpoB测序并进行基因突变分析。从98株菌中筛选出药物敏感谱清晰的40株,进行小鼠体内毒力实验。结果显示,共35株半数死亡时间≤H37Rv的半数死亡时间,其中18株耐利福平合并耐异烟肼、5株单耐利福平,7株单耐异烟肼、5株对利福平和异烟肼均敏感。通过小鼠毒力研究,分别筛选出基因背景清晰,半数死亡时间≤7d的耐利福平合并耐异烟肼的菌株1株、半数死亡时间≤7d单耐利福平和异烟肼的菌株各1株,作为耐药结核分枝杆菌感染小鼠模型所用菌株及进一步进行豚鼠等其他动物模型感染用候选菌株。

关键词：结核分枝杆菌利福平耐药小鼠体内毒力实验

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人羊膜上皮细胞治疗中枢神经系统疾病

人羊膜上皮细胞治疗中枢神经系统疾病

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：曲春辉秦川巨荣凯北京协和医学院中国医学科学院医学实验动物研究所病理室卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)是从胎盘内膜内壁分离纯化的一种可表达干细胞表面标记物的细胞.受精后第8天hAECs开始形成,这些细胞具有干细胞多向分化潜能.hAECs具有促进小鼠脑内神经递质水平增加、减少炎症... 详细信息

人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)是从胎盘内膜内壁分离纯化的一种可表达干细胞表面标记物的细胞.受精后第8天hAECs开始形成,这些细胞具有干细胞多向分化潜能.hAECs具有促进小鼠脑内神经递质水平增加、减少炎症反应、分泌神经营养因子等营养、支持神经元存活的作用.应用实验动物模型研究对阿尔兹海默病、帕金森氏病、脊髓损伤、脑卒中等疾病都具有治疗效果.本文根据近年发表的研究报告总结了hAECs移植对中枢神经系统疾病的治疗作用,以探讨对中枢神经损伤保护机制的理论基础.

关键词：人羊膜上皮细胞阿尔茨海默病帕金森氏病脊髓损伤脑血管病症

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天然免疫在非典型性猴免疫缺陷病毒(SIV)感染中的作用机制探讨

天然免疫在非典型性猴免疫缺陷病毒(SIV)感染中的作用机制探讨

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2017第十九届中国科协年会

作者：熊圣文王卫丛喆薛婧陈霆魏强秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

背景在不同的个体中,人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染导致差异性的疾病进程.95％以上的感染者出现典型性疾病进程,还有约5％HIV-1 感染者出现非典型疾病进程,表现为病毒感染后,病毒载量水平维持在检测线以下或出现较晚,CD4+ T 细胞绝对数下...

背景在不同的个体中,人免疫缺陷病毒(HIV-1)感染导致差异性的疾病进程.95％以上的感染者出现典型性疾病进程,还有约5％HIV-1 感染者出现非典型疾病进程,表现为病毒感染后,病毒载量水平维持在检测线以下或出现较晚,CD4+ T 细胞绝对数下降不明显,疾病进程呈现不典型性.在小剂量多次粘膜感染艾滋病猴模型研究中,研究人员也发现类似情况.部分恒河猴被猴免疫缺陷病毒(SIV)/猴-人免疫缺陷病毒(SHIV)感染后,血浆病毒载量出现明显的延迟和(或)峰值下降现象.目前研究发现细胞免疫、中和抗体等特异性免疫在非典型性SIV 感染中的作用十分有限,而天然免疫一直被认为是病毒感染早期的一种重要防御机制,包括巨噬细胞的吞噬作用、NK 细胞的ADCC 作用以及树突细胞的抗原提呈作用等;但在非典型艾滋病毒感染过程中,天然免疫发挥作用及作用机制目尚不清楚.

关键词：

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HIV-1与pDCs的相互作用

HIV-1与pDCs的相互作用

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第十二届中国实验动物科学年会

作者：彭卓颖薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的浆细胞样树突状细胞(Plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(Interferon α,IFN-α)的固有免疫细胞。在人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制... 详细信息

目的浆细胞样树突状细胞(Plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(Interferon α,IFN-α)的固有免疫细胞。在人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制并激活适应性免疫应答。在HIV慢性感染期,pDCs通过调节免疫细胞发挥免疫抑制的作用,不断破坏淋巴细胞,从而造成免疫系统崩溃,促进疾病进程。本文将就HIV-1与pDCs之间的相互作用做一综述。

关键词：浆细胞样树突状细胞人类免疫缺陷病毒 Ⅰ型干扰素

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CD45异构体对HIV-1gp120蛋白诱导T细胞凋亡的影响

CD45异构体对HIV-1gp120蛋白诱导T细胞凋亡的影响

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2017第十九届中国科协年会

作者：李克雷薛婧丛喆陈霆魏强秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

HIV感染可通过多种机制引起机体内T细胞凋亡,其中,病毒的编码蛋白可以根据其在靶细胞内的表达水平调节细胞凋亡.gp120蛋白作为HIV包膜蛋白的主要组成部分,既可以在细胞外与细胞表面的CD4分子结合导致靶细胞和旁观者细胞凋亡,又可以在细...

HIV感染可通过多种机制引起机体内T细胞凋亡,其中,病毒的编码蛋白可以根据其在靶细胞内的表达水平调节细胞凋亡.gp120蛋白作为HIV包膜蛋白的主要组成部分,既可以在细胞外与细胞表面的CD4分子结合导致靶细胞和旁观者细胞凋亡,又可以在细胞内上调Fas、FasL、TNF-α、TRAIL受体DR4和DR5的表达诱导细胞凋亡,还可以使细胞滞留在G2期导致胞内ROS升高促进凋亡.研究显示,CD45分子在HIV-1gp120蛋白介导的CD4+T细胞凋亡中发挥调节作用,在gp120蛋白的作用下,CD45分子通过调节FasL的表达参与细胞凋亡.作为Ⅰ型跨膜糖蛋白,CD45分子主要以CD45RABC、CD45RO、CD45RA、CD45RB和CD45RC等异构体形式表达于淋巴细胞,其胞外结构域糖基化形式的差异对CD45异构体活性和功能具有重要影响.目前,CD45异构体在HIV感染引起的细胞凋亡方面研究甚少,为加深对CD45异构体在细胞凋亡过程中作用的理解,本研究通过构建稳定表达CD45异构体的细胞系,比较了CD45异构体在调节gp120蛋白介导的CD4+T细胞凋亡过程中的差异,并进一步分析了其下游分子Lck的活性变化.在本研究中,我们首先比较了CD45+的Jurkat细胞和CD45－的J45.01细胞受到gp120诱导时凋亡率的变化.结果显示,Jurkat细胞可发生明显凋亡现象,J45.01细胞不发生凋亡,说明CD45分子在gp120介导的凋亡过程发挥了调节作用;随后,我们构建了5种稳定表达CD45异构体的细胞系,并比较了这5种异构体在gp120介导T细胞凋亡过程中的作用.结果发现,CD45RO可以明显调节细胞凋亡,其他异构体对细胞凋亡无调节作用;接下来,我们分析了CD45的糖基化形式对细胞凋亡的影响.O-聚糖存在于除CD45RO以外的异构体上,我们通过O-糖基化抑制剂去除这几种异构体细胞表面的O-糖基化.gp120蛋白诱导凋亡处理后,去除O-糖基化后的CD45RA-J45.01细胞表现出凋亡特性,其它异构体细胞未发生明显凋亡.说明O-聚糖对HIV-1gp120蛋白介导的细胞凋亡有一定的抑制作用,但在各异构体中发挥的作用大小并不一致,这可能与CD45异构体的空间结构有关.为了进一步说明CD45异构体在调节细胞凋亡中的功能差异,在HIV-1gp120蛋白诱导各个细胞系后,我们分析了CD45异构体酪氨酸磷酸酶的活性变化.通过比较CD45对其底物Lck的活性抑制位点Tyr505的去磷酸化程度,发现CD45RO可使Lck Tyr505发生明显的去磷酸化,说明HIV-1 gp120 蛋白处理细胞后,CD45RO 的活性增强;Lck Tyr394 是Lck 的活化位点,该位点磷酸化程度增强代表Lck 活性增强.通过比较该位点磷酸化程度变化,发现在CD45RO-J45.01 细胞中Lck Tyr394 磷酸化程度增强,说明在HIV-1 gp120 蛋白处理细胞后CD45RO 促进了Lck 的活化;Lck 的活化在胞内信号转导中具有重要作用,于是我们利用Lck的特异性抑制剂PP2 处理CD45RO-J45.01 细胞和Jurkat 细胞,再经HIV-1 gp120 蛋白诱导凋亡处理,发现PP2可抑制CD45RO-J45.01 细胞和Jurkat 细胞凋亡,说明Lck 的活化参与HIV-1 gp120 蛋白介导的T 细胞凋亡.综上所述,本研究明确了CD45 异构体在调节HIV-1 gp120 蛋白介导的T 细胞凋亡中存在的差异,揭示了这一凋亡过程主要是CD45RO 通过活化Lck 促使凋亡信号向胞内传导,进而对细胞凋亡起调节作用.本研究结果为HIV-1 感染引起的旁观者细胞凋亡奠定了理论基础.

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HIV-1与pDCs的相互作用

HIV-1与pDCs的相互作用

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第十二届中国实验动物科学年会（2016.南宁）

作者：彭卓颖薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室

目的浆细胞样树突状细胞(Plamcytoid dendritic cells,pDCs)是一类可以产生大量Ⅰ型干扰素(Interferonα,IFN-α)的固有免疫细胞。在人类免疫缺陷病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)急性感染期,pDCs通过分泌IFN-α抑制病毒复制并激活适应性免疫应答。在HIV慢性感染期,pDCs通过调节免疫细胞发挥免疫抑制的作用,不断破坏淋巴细胞,从而造成免疫系统崩溃,促进疾病进程。本文将就HIV-1与pDCs之间的相互作用做一综述。

关键词：浆细胞样树突状细胞人类免疫缺陷病毒 I型干扰素

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SIV感染猴外周血CD14+单核细胞CD169分子表达的变化

SIV感染猴外周血CD14+单核细胞CD169分子表达的变化

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2017第十九届中国科协年会

作者：李想丛喆薛婧魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

背景唾液酸黏附素(Siglecs)是宿主最大的一组唾液酸结合蛋白,是表达于免疫系统的Ⅰ型跨膜蛋白.Siglec-1,也被称作CD169,是第一个被发现的Siglecs 的成员,主要表达于单核巨噬细胞和树突状细胞的表面.有研究发现,HIV 感染机体后,组织巨...

背景唾液酸黏附素(Siglecs)是宿主最大的一组唾液酸结合蛋白,是表达于免疫系统的Ⅰ型跨膜蛋白.Siglec-1,也被称作CD169,是第一个被发现的Siglecs 的成员,主要表达于单核巨噬细胞和树突状细胞的表面.有研究发现,HIV 感染机体后,组织巨噬细胞和外周血单核细胞高表达CD169,并且随着外周血血浆载量的升高而升高,CD169 在外周血单核细胞中表达量的变化,可以作为研究HIV/SIV 感染的一个早期的表面标记.而在VSV 等病毒的研究中发现,病毒感染单核巨噬细胞后可以诱导细胞释放IFN-α,从而诱导细胞表达CD169.本文拟观察恒河猴感染SIVmac239 前后外周血单核细胞以及各亚群单核细胞表面CD169 分子表达量的变化,分析SIV 感染与CD169 表达的关系;并分析其变化与SIV 感染及细胞因子IFN-α作用的关系.方法本研究中,我们用SIVmac239 静脉途径感染正常中国恒河猴,运用流式细胞术检测不同感染时间外周血CD14+单核细胞及其表面分子CD169 的变化.同时采集正常恒河猴外周血,分离PBMC,流式细胞术分选CD14+单核细胞,分别使用SIVmac239 直接感染、和细胞因子IFN-α刺激CD14+单核细胞,流式细胞术检测细胞表面分子CD169 表达量的变化.结果正常恒河猴外周血CD14+单核细胞表面低表达CD169,经SIVmac239 病毒感染后,CD14+单核细胞的比例出现下降(P＜0.01),CD14+单核细胞表面CD169 表达量升高(P＜0.01),并且在感染的急性期,CD169 的表达量迅速增加.不同外周血单核细胞亚型CD14low/-CD16+,CD14++CD16- 和CD14+CD16+感染后CD169 的表达量均明显增高(P＜0.01),而CD14+CD16+单核细胞中CD169 的升高相比其他两种亚群更为明显.本研究中,我们在体外用SIV 直接感染恒河猴外周血CD14+单核细胞,不能诱导单核细胞表达CD169,而细胞因子IFN-Α可以刺激CD14+单核细胞高表达CD169 分子.结论正常恒河猴经SIVmac239 病毒感染后,外周血单核细胞高表达CD169,不同亚群单核细胞表面CD169 分子均出现明显增加,而CD14+CD16+单核细胞中CD169 的升高更为明显,提示CD14+CD16+单核细胞在感染中可能发挥重要的作用.病毒直接感染不能导致单核细胞高表达CD169,SIV 感染猴外周血单核细胞表面CD169 的升高是体内细胞因子,尤其是IFN-α作用的结果.

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