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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：傅春燕蒋虹薛婧丛喆陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京 100021

目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响.方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937... 详细信息

目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响.方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937细胞5d后,细胞经PE-Annexin V,PerCP-7-AAD染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.采用基因沉默技术,将U937细胞中的90K/Mac-2BP基因沉默后,再经HIV-1感染,5d后检测细胞凋亡情况.结果正常人单核巨噬细胞株U937,经HIV-1感染后细胞凋亡率为(16.27±0.30)％,而90K/Mac-2BP基因沉默后的U937细胞,经HIV-1感染后细胞凋亡率分别增加至(31.26±0.35)％、(25.76±0.30)％、(23.69±0.33)％,具有统计学差异(p＜0.01).结论 90K/Mac-2BP的表达水平能调节HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡.

关键词：人单核巨噬细胞株巨细胞-2结合蛋白 HIV-1 凋亡

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恒河猴samhd1基因编码区多态性及其对蛋白结构和功能的影响

恒河猴samhd1基因编码区多态性及其对蛋白结构和功能的影响

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：熊圣文王卫董志会陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的筛查恒河猴samhd1基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件... 详细信息

目的筛查恒河猴samhd1基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件对该蛋白结构进行分析;使用SNaPshot方法筛查138只恒河猴基因背景.结果序列比对发现5个非同义突变位点C15G (2.17％)、C320T (6.88％)、G547A (13.41％)、A552T (4.35％)、T839C(17.39％);其中除C15G外的其它四个cSNP位点均处于SAMHD1蛋白重要结构域上,且G547A、A552T、T839C三个cSNP位点改变SAMHD1蛋白二级结构,可能影响SAMHD1蛋白功能.结论恒河猴samhd1基因编码区存在三个可能影响SAMHD1蛋白功能的cSNP位点,为后续研究提供了参考信息.

关键词： SAMHD1 cSNP 蛋白质结构功能恒河猴

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肠道嗜性和神经嗜性SIV毒株Gp120序列变异特点的比对分析

肠道嗜性和神经嗜性SIV毒株Gp120序列变异特点的比对分析

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：徐珮丛喆陈霆王卫薛婧骆杨吴小闲魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况.比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点.方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac... 详细信息

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况.比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点.方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac251病毒,通过有限稀释分离培养病毒单克隆,提取病毒RNA后反转录,PCR扩增病毒gp120序列进行系统进化树分析.同时分析两组不同嗜性毒株Gp120氨基酸序列及糖基化位点的变化情况.结果 SIV-mac239在四只恒河猴体内发生不同的变异进化.肠道嗜性毒株与神经嗜性毒株氨基酸序列的差异集中在V1和V4区,肠道嗜性毒株在V4区与一个糖基化位点的增加,而神经嗜性毒株的糖基化位点的变化都发生在保守区C1、C2和C3.结论 SIV肠道嗜性和神经嗜性的增强分别与包膜蛋白Gp120上V4区糖基化位点的增加和C1区的糖基化位点缺失相关,两种嗜性的差异并不表现在与嗜性形成有紧密联系的V3区上.

关键词： SIV Gp120 变异肠道嗜性神经嗜性糖基化位点

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中药提取物雷公藤内酯醇对过敏性哮喘治疗的研究进展

中药提取物雷公藤内酯醇对过敏性哮喘治疗的研究进展

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：陶婧婧秦川刘云波张星东卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心北京100021

过敏性哮喘是一种常见病，发病率呈不断升高的趋势，严重影响患者的健康，且迄今还没有较理想的治疗药物。其主要病理变化是肺组织嗜酸性粒细胞浸润性炎症。目前对病人的主要治疗药物是肾上腺糖皮质激素，但该类药物较大的副作用限制了... 详细信息

过敏性哮喘是一种常见病，发病率呈不断升高的趋势，严重影响患者的健康，且迄今还没有较理想的治疗药物。其主要病理变化是肺组织嗜酸性粒细胞浸润性炎症。目前对病人的主要治疗药物是肾上腺糖皮质激素，但该类药物较大的副作用限制了其临床应用。因此，研发新的疗效好、成本低、副作用少或没有副作用的新一代治疗药物成为当务之急。我国中药治疗过敏性哮喘历史悠久，积累了丰富的临床资料。在这个领域的深入研究可能会发现新的治疗药物的突破口。雷公藤是近年来研究比较多的一种中药，其提取物雷公藤内酯醇可能是其有效成分，具有抗肿瘤、抗炎、免疫抑制等多种作用。本文总结了近几年来雷公藤内酯醇治疗过敏性哮喘的研究概况和特点。

关键词：雷公藤内酯醇过敏性哮喘治疗炎症

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耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株的筛选

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微生物与感染 2014年第2期9卷 83-88页

作者：丁海榕林树柱卢锦标邓海清王国治秦川占玲俊中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021 中国食品药品检定研究院结核疫苗室北京100050 温州医科大学环境与公共卫生学院温州325035

本研究通过小鼠体内实验检测我国部分地区结核分枝杆菌耐药菌株的毒力,以筛选耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株。收集从我国部分省份98例结核病患者痰培养液中分离出的结核分枝杆菌,用比例法药敏试验进行结核分枝杆菌一线和二线药... 详细信息

本研究通过小鼠体内实验检测我国部分地区结核分枝杆菌耐药菌株的毒力,以筛选耐药结核分枝杆菌感染动物模型所用菌株。收集从我国部分省份98例结核病患者痰培养液中分离出的结核分枝杆菌,用比例法药敏试验进行结核分枝杆菌一线和二线药物的药敏试验,筛选出对二线药物敏感而对一线药物利福平或异烟肼耐药或敏感的菌株,然后进行小鼠体内毒力实验,对异烟肼耐药相关基因katG和利福平耐药相关基因rpoB测序并进行基因突变分析。从98株菌中筛选出药物敏感谱清晰的40株,进行小鼠体内毒力实验。结果显示,共35株半数死亡时间≤H37Rv的半数死亡时间,其中18株耐利福平合并耐异烟肼、5株单耐利福平,7株单耐异烟肼、5株对利福平和异烟肼均敏感。通过小鼠毒力研究,分别筛选出基因背景清晰,半数死亡时间≤7d的耐利福平合并耐异烟肼的菌株1株、半数死亡时间≤7d单耐利福平和异烟肼的菌株各1株,作为耐药结核分枝杆菌感染小鼠模型所用菌株及进一步进行豚鼠等其他动物模型感染用候选菌株。

关键词：结核分枝杆菌利福平耐药小鼠体内毒力实验

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铅暴露U251细胞对钙离子信号通路的影响

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毒理学杂志 2013年第3期27卷 180-183页

作者：孟金萍王艳蓉杨旭刘云波中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的探讨铅暴露人神经胶质瘤U251细胞对钙离子信号通路的影响。方法将体外培养的人神经胶质瘤U251细胞(human U251 glioma cells,U251)分别暴露于含有乙酸铅(400μg/ml)的培养液中8和24 h,提取RNA。应用cDNA芯片技术筛选差异表达基因,... 详细信息

目的探讨铅暴露人神经胶质瘤U251细胞对钙离子信号通路的影响。方法将体外培养的人神经胶质瘤U251细胞(human U251 glioma cells,U251)分别暴露于含有乙酸铅(400μg/ml)的培养液中8和24 h,提取RNA。应用cDNA芯片技术筛选差异表达基因,并利用信息学技术进行钙离子信号通路分析。结果铅暴露U251细胞,导致2840条基因差异表达,钙离子信号通路中有45条基因表达异常。结论铅暴露U251细胞后,参与钙离子信号通路的45条基因发生了表达改变,导致细胞膜上钙离子通道发生变化,钙离子调控的生物学功能受到影响。

关键词：乙酸铅钙离子信号传导通路基因芯片生物信息学

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不同月龄SPF级布氏田鼠血液学指标与生化指标的比较

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中国卫生检验杂志 2013年第4期23卷 806-807,811页

作者：潘思丹施海霞宋铭晶中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的:本实验分别对4和12月龄SPF级布氏田鼠进行了血常规和血生化指标的检测,比较不同月龄布氏田鼠间的差异。方法:检测12项血常规指标,24项血生化指标。结果:12月龄布氏田鼠的平均血红细胞体积、红细胞分布宽度、谷丙转氨酶、乳酸脱氢... 详细信息

目的:本实验分别对4和12月龄SPF级布氏田鼠进行了血常规和血生化指标的检测,比较不同月龄布氏田鼠间的差异。方法:检测12项血常规指标,24项血生化指标。结果:12月龄布氏田鼠的平均血红细胞体积、红细胞分布宽度、谷丙转氨酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、血清总蛋白、肌酸激酶、胆固醇、免疫球蛋白、Ca、Na、Cl、K、P以及谷氨酰基转移酶高于4月龄田鼠,而血红蛋白、血小板数、平均血小板比积、平均血红蛋白浓度、血清白蛋白、血糖、肌酐、A/G以及尿素氮低于4月龄田鼠。部分指标在性别间有显著差异。结论:布氏田鼠的血液和生化指标随着月龄增长有显著变化,而且该变化存在性别差异。

关键词： SPF级布氏田鼠生化

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两种核酸提取方法对小鼠诺如病毒RNA提取效能的比较

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中国比较医学杂志 2013年第9期23卷 57-60页

作者：田胜男苏静芬向志光刘云波中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部实验动物检测中心北京100021

目的比较两种核酸提取方法对小鼠诺如病毒RNA的提取效能。方法用Trizol提取法和QIAamp Viral RNA Mini Kit提取法分别提取感染小鼠诺如病毒(Murine Norovirus,MNV)的小鼠小肠组织样品RNA和细胞培养物RNA,测定RNA浓度;用MNV特异的引物对... 详细信息

目的比较两种核酸提取方法对小鼠诺如病毒RNA的提取效能。方法用Trizol提取法和QIAamp Viral RNA Mini Kit提取法分别提取感染小鼠诺如病毒(Murine Norovirus,MNV)的小鼠小肠组织样品RNA和细胞培养物RNA,测定RNA浓度;用MNV特异的引物对分离的核酸样品进行一步法RT-PCR扩增。结果Trizol提取法提取小肠组织的RNA浓度高于QIAamp Viral RNA Mini Kit提取法;QIAamp Viral RNA Mini Kit提取得到的细胞培养物RNA浓度高于Trizol提取法。经QIAamp Viral RNA Mini Kit提取的两种核酸样品均能扩增出特异条带,而Trizol提取的核酸样品未见特异条带。结论在MNV的检测中,QIAamp Viral RNA Kit更适合组织样品中MNV病毒核酸的提取。

关键词： Trizol QIAamp Viral RNA Mini Kit 小鼠诺如病毒

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恒河猴离乳幼猴B病毒动态监测

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中国比较医学杂志 2013年第2期23卷 38-42页

作者：高进权佟巍张丽芳刘先菊王艳蓉向志光刘云波中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部实验动物检测中心北京100021

目的调查恒河猴离乳幼猴BV感染的动态变化,探讨早期控制的可能。方法采用BV全病毒为抗原的ELISA试剂盒,对两批离乳后群养的54只恒河猴幼猴每月采血检测BV感染情况,连续检测13个月。结果随月龄的增加,BV感染率上升,其中12月、1月、2月、... 详细信息

目的调查恒河猴离乳幼猴BV感染的动态变化,探讨早期控制的可能。方法采用BV全病毒为抗原的ELISA试剂盒,对两批离乳后群养的54只恒河猴幼猴每月采血检测BV感染情况,连续检测13个月。结果随月龄的增加,BV感染率上升,其中12月、1月、2月、3月、4月BV阳性猴数量相对增加较明显。结论幼猴性成熟期之前BV感染率超过70%且呈现出一定的变化规律,春、冬季BV的感染率相对较高,应早期加强BV的有效预防控制,降低BV的感染,提高猴群质量。

关键词： B病毒恒河猴 ELISA 阳性率相对阳性率

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鼠诺如病毒概述

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中国比较医学杂志 2013年第7期23卷 68-71页

作者：田胜男刘云波中国医学科学院实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部实验动物检测中心北京100021

实验动物的质量与动物实验能否顺利进行关系非常密切。我国要求实验用SPF级小鼠必须排除的病毒有11种,尽管如此仍然会因为动物本身携带的微生物而干扰实验结果。鼠诺如病毒就是从意外死亡的实验小鼠中分离得到,免疫缺陷小鼠感染这种病... 详细信息

实验动物的质量与动物实验能否顺利进行关系非常密切。我国要求实验用SPF级小鼠必须排除的病毒有11种,尽管如此仍然会因为动物本身携带的微生物而干扰实验结果。鼠诺如病毒就是从意外死亡的实验小鼠中分离得到,免疫缺陷小鼠感染这种病毒后发生炎症反应甚至死亡。我国关于鼠诺如病毒的报道还比较少,其致病力及对实验研究的影响尚不完全清楚,也没有明确的感染情况调查。本文重点阐述了鼠诺如病毒的发现及危害、检测情况、病原特性和国内现状,并给出建议以便更好的了解MNV并控制该病毒的传播。

关键词：小鼠诺如病毒

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