检索结果-内蒙古大学图书馆

中国实验动物学报 2014年第1期22卷 18-21,I0008页

作者：朱华许黎黎鲍琳琳邓巍陈霆吕琦李枫棣袁静徐艳峰黄澜李彦红刘江宁姚艳峰于品雍卫东魏强张连峰秦川中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的建立H7N9禽流感病毒小鼠感染模型。方法 1×108,1×107或1×106TCID50H7N9禽流感病毒原液(A/Anhui/1/2013)滴鼻感染BALB/c小鼠。主要观测指标:临床症状、死亡率、病理变化、病毒载量和血清抗体检测。结果被感染的小鼠... 详细信息

目的建立H7N9禽流感病毒小鼠感染模型。方法 1×108,1×107或1×106TCID50H7N9禽流感病毒原液(A/Anhui/1/2013)滴鼻感染BALB/c小鼠。主要观测指标:临床症状、死亡率、病理变化、病毒载量和血清抗体检测。结果被感染的小鼠表现为竖毛、弓背、体重下降;病理表现为间质性肺炎,感染后第2天开始在呼吸道脱落细胞中检测到病毒;免疫组化或病毒分离方法在肺、肾、脑、肠、脾等组织检测到病毒;感染后14 d在小鼠血清中血凝抑制试验特异性抗体效价达到160;淋巴细胞减少,中性粒细胞增多。结论 H7N9感染BALB/c小鼠模型与人类禽流感感染疾病的基本特征相似,为研究该病的发病机制及药物疫苗的研发提供了工作基础。

关键词： H7N9禽流感病毒感染动物模型 BALB c小鼠

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心脏组织特异性表达Neuregulin-2转基因小鼠的建立及心脏功能分析

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中国比较医学杂志 2014年第3期24卷 78-82,F0004页

作者：路迎冬鲍丹刘宁张旭马元武吕丹张连峰中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

目的神经调节蛋白2(neuregulin-2,NRG2)可促进神经系统发育,基因缺失表现早期生长延迟,NRG2在心脏中也有表达,但其在心脏发育尤其是病理刺激时对心脏结构及功能的影响尚未见报道。本文目的是建立心脏组织特异性表达NRG2转基因小鼠,分析... 详细信息

目的神经调节蛋白2(neuregulin-2,NRG2)可促进神经系统发育,基因缺失表现早期生长延迟,NRG2在心脏中也有表达,但其在心脏发育尤其是病理刺激时对心脏结构及功能的影响尚未见报道。本文目的是建立心脏组织特异性表达NRG2转基因小鼠,分析其在正常及压力负荷刺激时对心脏结构及功能的影响。方法将人NRG2基因插入到心脏特异性启动子α-MHC下游,构建转基因表达载体,显微注射法建立NRG2转基因小鼠,PCR鉴定转基因小鼠基因型,western blot鉴定NRG2蛋白在心脏中的表达并筛选高表达的转基因品系,主动脉缩窄术(transverse aortic constriction,TAC)制备压力负荷诱导的心肌肥厚小鼠模型。利用超声影像分析和病理学观察小鼠心脏结构和功能改变。结果建立了心脏组织特异性高表达NRG2转基因小鼠品系。与同窝阴性转基因小鼠相比,转基因小鼠左心室舒张末期后壁厚度(LVPWD)明显增加,3月龄时可达15.6%(P<0.05),经压力负荷刺激后,NRG2转基因手术小鼠心室壁增厚程度显著下降,心室腔增大,同时心肌排列紊乱程度和纤维化程度明显比NTG手术小鼠严重。结论在压力负荷下,转基因表达NRG2缩短了肥厚过程,同时加速了心衰进程。

关键词： NRG2 转基因压力负荷心室重构

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慢病毒载体用于转基因技术的研究进展

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中华临床医师杂志(电子版) 2014年第10期 1949-1953页

作者：张曼孙秀萍宋铭晶中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心卫生部人类疾病比较医学重点实验室

慢病毒载体作为目前研究最多的外源性转基因载体之一,已成为一种高效率的转基因和基因治疗工具。该载体最大的优势是能够感染分裂和静止状态下的细胞,并且能够高效、稳定地整合于宿主细胞内。目前研究该载体在多种动物转基因技术方面的... 详细信息

慢病毒载体作为目前研究最多的外源性转基因载体之一,已成为一种高效率的转基因和基因治疗工具。该载体最大的优势是能够感染分裂和静止状态下的细胞,并且能够高效、稳定地整合于宿主细胞内。目前研究该载体在多种动物转基因技术方面的应用,有助于我们利用除了大鼠和小鼠以外的多种实验动物来研究基因的功能,并实现通过调节基因表达治疗人类疾病的目的。

关键词：病毒整合慢病毒载体宿主细胞基因治疗

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肠道嗜性和神经嗜性SIV毒株Gp120序列变异特点的比对分析

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中国比较医学杂志 2014年第10期24卷 1-6,17页

作者：徐珮丛喆陈霆王卫薛婧骆杨吴小闲魏强北京协和医学院比较医学中心、中国医学科学院医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况。比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点。方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac... 详细信息

目的研究SIVmac239在不同中国恒河猴体内由于免疫压力出现的病毒Env区的变异进化情况。比对分析可形成AIDS相关肠病和脑病的SIV病毒其Gp120序列的差异及特点。方法四株SIVmac239感染晚期发病恒河猴PBMC中分离的病毒及两株神经嗜性SIVmac251病毒,通过有限稀释分离培养病毒单克隆,提取病毒RNA后反转录,PCR扩增病毒gp120序列进行系统进化树分析。同时分析两组不同嗜性毒株Gp120氨基酸序列及糖基化位点的变化情况。结果 SIVmac239在四只恒河猴体内发生不同的变异进化。肠道嗜性毒株与神经嗜性毒株氨基酸序列的差异集中在V1和V4区,肠道嗜性毒株在V4区与一个糖基化位点的增加,而神经嗜性毒株的糖基化位点的变化都发生在保守区C1、C2和C3。结论 SIV肠道嗜性和神经嗜性的增强分别与包膜蛋白Gp120上V4区糖基化位点的增加和C1区的糖基化位点缺失相关,两种嗜性的差异并不表现在与嗜性形成有紧密联系的V3区上。

关键词： SIV Gp120 变异肠道嗜性神经嗜性糖基化位点

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猴免疫缺陷病毒(SIVmac239)多次直肠暴露对机体细胞免疫的影响

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中国比较医学杂志 2014年第8期24卷 1-6页

作者：王卫刘克剑吴芳新丛喆陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究猴免疫缺陷病毒(SIVmac239)多次直肠粘膜暴露对机体细胞免疫的影响。方法建立小剂量多次直肠粘膜暴露模型,测定实验猴的血浆病毒载量了解病毒复制水平,测定外周CD4+T细胞绝对数了解疾病进展情况,测定T细胞亚群和外周单个核细胞I... 详细信息

目的研究猴免疫缺陷病毒(SIVmac239)多次直肠粘膜暴露对机体细胞免疫的影响。方法建立小剂量多次直肠粘膜暴露模型,测定实验猴的血浆病毒载量了解病毒复制水平,测定外周CD4+T细胞绝对数了解疾病进展情况,测定T细胞亚群和外周单个核细胞IFN-γ分泌情况了解机体细胞免疫状况。结果小剂量SIVmac239病毒多次暴露能导致病毒通过直肠粘膜进入动物体内,诱导机体免疫系统出现变化,但未见SIVmac239典型感染。病毒多次直肠暴露诱导出特异性细胞免疫,但与普通病毒感染相比,水平较低。结论本研究明确了猴免疫缺陷病毒小剂量暴露对机体细胞免疫的作用,为HIV疫苗研究提供了基础信息。

关键词： SIVmac239 直肠粘膜暴露细胞免疫

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恒河猴 samhd1基因编码区多态性及其对蛋白结构和功能的影响

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中国比较医学杂志 2014年第4期24卷 1-4,I0001页

作者：熊圣文王卫董志会陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心、中国医学科学院医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京 100021

目的筛查恒河猴samhd1基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响。方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件... 详细信息

目的筛查恒河猴samhd1基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响。方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,测序比对,确定基因编码区变异位点;通过蛋白质结构分析软件对该蛋白结构进行分析;使用SNaPshot方法筛查138只恒河猴基因背景。结果序列比对发现5个非同义突变位点C15G(2.17%)、C320T(6.88%)、G547A(13.41%)、A552T(4.35%)、T839C(17.39%);其中除C15G外的其它四个cSNP位点均处于SAMHD1蛋白重要结构域上,且G547A、A552T、T839C三个cSNP位点改变SAMHD1蛋白二级结构,可能影响SAMHD1蛋白功能。结论恒河猴samhd1基因编码区存在三个可能影响SAMHD1蛋白功能的cSNP位点,为后续研究提供了参考信息。

关键词： SAMHD1 cSNP 蛋白质结构功能恒河猴

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SHIVKU-1感染猴感染晚期血浆病毒分离结果分析

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医学动物防制 2014年第12期30卷 1361-1364,1367页

作者：丛喆徐珮董志会陈霆蒋虹魏强北京协和医学院比较医学中心北京100021 中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室

目的分离SHIVKU-1感染猴G1302V血浆中的病毒,以期得到一株具有较强感染力的X4嗜性病毒中国恒河猴适应株。方法用G1302V猴安乐死当天血浆与CEMx174细胞共培养,8周后收集培养上清及细胞,分别做p27蛋白水平及gag、gp120核酸序列测定。同时... 详细信息

目的分离SHIVKU-1感染猴G1302V血浆中的病毒,以期得到一株具有较强感染力的X4嗜性病毒中国恒河猴适应株。方法用G1302V猴安乐死当天血浆与CEMx174细胞共培养,8周后收集培养上清及细胞,分别做p27蛋白水平及gag、gp120核酸序列测定。同时测定感染猴安乐死时血液样本中p27蛋白水平,并进行核酸序列分析及病毒毒力滴定。结果 G1302V猴血浆病毒分离阴性。血浆p27蛋白水平阴性,TZM-bl细胞测定病毒毒力阴性。血浆病毒及血细胞前病毒DNA核酸序列检测阳性,病毒嗜性未发生改变。结论 SHIVKU-1感染猴G1302V安乐死当天血浆中的病毒嗜性未发生变化,病毒的完整性较差及病毒的毒力较低是病毒分离阴性的主要原因。

关键词： SHIVKU-1 CXCR4 病毒分离

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90 K／Mac-2 BP 基因沉默增强 HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡

引用

中国比较医学杂志 2014年第5期24卷 10-14页

作者：傅春燕蒋虹薛婧丛喆陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心、中国医学科学院医学实验动物研究所、卫生部人类疾病比较医学重点实验室、国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京 100021

目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响。方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937细... 详细信息

目的研究人单核巨噬细胞株U937的90K/Mac-2BP基因沉默后其mRNA和蛋白水平的表达及其对HIV-1感染单核巨噬细胞凋亡的影响。方法用人单核巨噬细胞株U937作为细胞模型,用R5嗜性的HIV-1全长感染性质粒包装并获得HIV-1病毒,待HIV-1感染U937细胞5 d后,细胞经PE-Annexin V,PerCP-7-AAD染色,用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。采用基因沉默技术,将U937细胞中的90K/Mac-2BP基因沉默后,再经HIV-1感染,5 d后检测细胞凋亡情况。结果正常人单核巨噬细胞株U937,经HIV-1感染后细胞凋亡率为(16.27±0.30)%,而90K/Mac-2BP基因沉默后的U937细胞,经HIV-1感染后细胞凋亡率分别增加至(31.26±0.35)%、(25.76±0.30)%、(23.69±0.33)%,具有统计学差异(P<0.05)。结论 90K/Mac-2BP的表达水平能调节HIV-1感染的单核巨噬细胞凋亡。

关键词：人单核巨噬细胞株巨细胞-2结合蛋白 HIV-1 凋亡

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恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性及其对蛋白结构和功能的影响

恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性及其对蛋白结构和功能的...

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2014第十一届中国实验动物科学年会

作者：董志会王卫熊圣文丛喆骆杨陈霆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的筛查恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴tetherin的cSNP位点;通过蛋白质结... 详细信息

目的筛查恒河猴tetherin基因编码区单核苷酸多态性(coding-region single nucleotide polymorphism,cSNP),研究其对蛋白结构和功能的影响.方法提取恒河猴外周血RNA,RT-PCR扩增,单克隆测序比对,确定猴tetherin的cSNP位点;通过蛋白质结构分析软件对蛋白结构进行预测;比较不同基因型猴SIVmac239复制水平的差异.结果序列比对发现8个非同义突变位点;经Psipred软件预测,其中G41A、T128C、C129和A333C cSNP位点可影响Tetherin蛋白二级结构.在SIV-mac239感染平台期,参考基因型猴(DLQ)病毒复制水平要高于GLQ型猴(p＜0.05),其他基因型猴之间无显著差异.结论 cSNP(G41A)可能影响Tetherin的抗病毒功能,这为后续研究提供参考信息.

关键词： Tetherin cSNP 蛋白质结构恒河猴

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表观遗传学药物的研究进展

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中国药理学通报 2013年第3期29卷 297-303页

作者：张玲盛树力秦川北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所卫生部人类疾病比较医学重点实验室北京100021

随着表观遗传学研究的不断深入,表观遗传学药物的研究取得了巨大进展。目前已有研究并批准上市的表观遗传学药物主要针对DNA异常甲基化和组蛋白的异常修饰。潜在的药物有DNA甲基转移酶抑制剂、赖氨酸去甲基化酶抑制剂、蛋白质甲基转移... 详细信息

随着表观遗传学研究的不断深入,表观遗传学药物的研究取得了巨大进展。目前已有研究并批准上市的表观遗传学药物主要针对DNA异常甲基化和组蛋白的异常修饰。潜在的药物有DNA甲基转移酶抑制剂、赖氨酸去甲基化酶抑制剂、蛋白质甲基转移酶抑制剂、组蛋白去乙酰化酶抑制剂、组蛋白乙酰基转移酶抑制剂、含溴结构域蛋白抑制剂及甲基化组蛋白结合蛋白的抑制剂等。该文综述了近年来表观遗传学治疗在药理学上的进展,以期为疾病防治和基础研究提供一些新的思路。

关键词：表观遗传学 DNA甲基化 DNA甲基转移酶组蛋白修饰组蛋白乙酰化组蛋白去乙酰化酶组蛋白甲基化

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