检索结果-内蒙古大学图书馆

中国比较医学杂志 2021年第4期31卷 33-37页

作者：罗嘉慧卢秋翰李国萃张京京丛喆魏强北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100021

目的通过细胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)检测CD8^(+)T细胞反应强度,探究不同保存条件对CD8+T细胞活性影响。方法采集9只恒河猴外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),一部分新鲜细胞直接用于检测,剩余细胞冻存至... 详细信息

目的通过细胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)检测CD8^(+)T细胞反应强度,探究不同保存条件对CD8+T细胞活性影响。方法采集9只恒河猴外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),一部分新鲜细胞直接用于检测,剩余细胞冻存至-80℃和液氮,冻存1周和1年再用于检测,检测时用阳性刺激物进行刺激,流式分析活细胞比例,MIP-1β、TNF-α、IL-2、IFN-γ四种细胞因子分泌情况和细胞脱粒标志物CD107a的表达情况。结果随着冻存时间的增加,细胞存活率降低,且液氮冻存比-80℃冻存有更高的存活率。在细胞因子分泌和细胞脱粒标志物CD107a的表达情况中,冻存一年的细胞MIP-1β、TNF-α分泌量显著高于正常细胞,细胞状态发生了改变,冻存一周的细胞与新鲜细胞状态更为相近。结论想要保持低的细胞死亡率和正常的CD8+T细胞反应,应使用新鲜细胞或短期冻存的细胞进行测量CD8^(+)T细胞反应水平的实验。

关键词：细胞内细胞因子染色 CD8^(+)T细胞细胞活性恒河猴

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新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在三文鱼食材中的活性

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中国比较医学杂志 2021年第2期31卷 98-101页

作者：吕琦刘明娅戚菲菲龚姝然周沙沙鲍琳琳中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室北京100021

目的研究SARS-CoV-2粘附在三文鱼肉上的活性保持情况,为科学防控冠状病毒提供理论依据。方法检测在4℃和22℃条件下,粘附在三文鱼肉上和4%Na Cl仿海盐水中SARS-CoV-2病毒的活性情况。结果4℃条件下,三文鱼表面病毒活性可保持4 d,4%Na C... 详细信息

目的研究SARS-CoV-2粘附在三文鱼肉上的活性保持情况,为科学防控冠状病毒提供理论依据。方法检测在4℃和22℃条件下,粘附在三文鱼肉上和4%Na Cl仿海盐水中SARS-CoV-2病毒的活性情况。结果4℃条件下,三文鱼表面病毒活性可保持4 d,4%Na Cl仿海盐水中病毒活性可保持7 d,1 d内病毒活性均衰减超过50%。22℃条件下,三文鱼表面病毒活性可维持1 d,4%Na Cl仿海盐水中病毒活性可维持2 d,1 d内病毒活性衰减均超过50%。结论4℃~22℃条件下,三文鱼表面SARS-CoV-2病毒可存活1~4 d,4%仿海盐水中SARS-CoV-2病毒可存活2~7 d。

关键词： SARS-CoV-2 三文鱼活性 4%Na Cl仿海盐水

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遗传多样性高血压小鼠模型的建立与基因转录调控分析

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中国实验动物学报 2024年第5期32卷 576-584页

作者：黄智滨潘吉荣张伶燕赵大路王谦魏承志马旭白琳秦川中国医学科学院北京协和医学院医学实验动物研究所北京100021 国家人类疾病动物模型资源库国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发与再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京市人类重大疾病动物模型工程技术研究中心国家动物模型技术创新中心北京100021 昌平实验室(CPNL) 北京102206 呼吸健康与共病国家重点实验室北京100005

目的探讨13个品系的遗传多样性高血压小鼠的血压表型差异、肾病理变化以及相关致病通路。方法将13个品系的遗传多样性小鼠分别与Cckbr-/-小鼠进行杂交,得到不同遗传背景的Cckbr+/+、Cckbr+/-、Cckbr-/-3种基因型的小鼠。利用BP-2000无... 详细信息

目的探讨13个品系的遗传多样性高血压小鼠的血压表型差异、肾病理变化以及相关致病通路。方法将13个品系的遗传多样性小鼠分别与Cckbr-/-小鼠进行杂交,得到不同遗传背景的Cckbr+/+、Cckbr+/-、Cckbr-/-3种基因型的小鼠。利用BP-2000无创血压分析系统测量小鼠血压,利用Western Blot检测小鼠肾CCKBR蛋白表达变化,利用苏木素-伊红(HE)染色、免疫组化(IHC)检测小鼠肾组织病理学变化,利用转录组测序(RNA-Seq)分析筛选原发性高血压致病相关通路。结果3个特定小鼠品系(A/J、LOT、FIM)中,收缩压(systolic blood pressure,SBP)Cckbr-/-组较Cckbr+/+组具有显著性差异(P<0.05)。HE染色及IHC发现高血压对小鼠造成了一定程度的肾损伤。通过GO与Pathway富集分析,发现差异表达基因富集在新陈代谢与昼夜节律调节等方面。结论遗传多样性高血压小鼠在血压表型、病理特征及基因表达等方面呈现显著性差异,有效模拟了人群的遗传异质性对疾病表型的影响。

关键词：遗传多样性小鼠 Cckbr 原发性高血压动物模型

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重症甲型H1N1流感病毒感染诱导小鼠胸腺凋亡萎缩

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中国免疫学杂志 2020年第14期36卷 1676-1679页

作者：王阳张须龙李枫棣安云庆刘波(指导) 曹彬(指导) 中日友好医院北京100000 首都医科大学北京100000 中国医学科学院医学实验动物研究所北京协和医学院比较医学中心国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室北京100000 山东省淄博市临淄区人民医院临床微生物科呼吸与危重症医学科淄博市呼吸感染与临床微生物重点实验室淄博255400

目的:探讨重症流感病毒感染介导的胸腺萎缩及其作用机制。方法:4~6周龄SPF级BALB/c小鼠滴鼻给予50μl TCID50甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(1×10^6个/ml),构建重症流感病毒感染小鼠模型;检测各感染时间小鼠体质量、胸腺大... 详细信息

目的:探讨重症流感病毒感染介导的胸腺萎缩及其作用机制。方法:4~6周龄SPF级BALB/c小鼠滴鼻给予50μl TCID50甲型H1N1流感病毒A/California/07/2009(1×10^6个/ml),构建重症流感病毒感染小鼠模型;检测各感染时间小鼠体质量、胸腺大小及重量;HE染色检测胸腺组织病理变化;流式细胞术检测胸腺内不同发育阶段T细胞数量及凋亡;原位TUNEL法检测胸腺细胞凋亡;细胞凋亡相关基因芯片和荧光定量PCR检测验证促凋亡和抗凋亡相关基因变化。结果:成功建立小鼠重症甲型H1N1流感病毒感染模型。感染2~3 d后小鼠胸腺萎缩变小,以胸腺皮质区萎缩为主,感染5~7 d皮质区完全消失。主要存在于皮质区的双阳性T细胞(CD4^+CD8^+),随感染过程进展逐渐减少直至消失。细胞凋亡,尤其是皮质区细胞凋亡增多是胸腺萎缩的重要原因。促凋亡相关基因表达增加,尤其Fas介导的细胞凋亡可能是胸腺皮质区细胞凋亡的重要机制。结论:重症流感病毒感染可诱导胸腺(尤其是皮质区)萎缩,FasL-Fas介导的细胞凋亡是胸腺萎缩的重要原因。

关键词：流感病毒胸腺萎缩细胞凋亡 Fas

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利用InSyTe FLECT/CT成像技术动态观察急性肺结核小鼠感染模型的构建

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医学研究杂志 2021年第6期50卷 55-60,65页

作者：李军丽石亚男占玲俊中国医学科学院医学实验动物研究所/北京协和医学院比较医学中心、新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室、北京市人类重大疾病实验动物模型工程技术研究中心、国家卫生健康委员会人类疾病比较医学重点实验室、中国医学科学院结核病中心 100021

目的构建可应用于活体成像的近红外荧光减毒牛型结核分枝杆菌,并利用三维荧光发射计算机断层扫描(InSyTe FLECT/CT)成像技术动态观察不同感染途径下急性肺结核小鼠感染模型的建立。方法通过基因重组的方式将近红外荧光蛋白(near-infrare... 详细信息

目的构建可应用于活体成像的近红外荧光减毒牛型结核分枝杆菌,并利用三维荧光发射计算机断层扫描(InSyTe FLECT/CT)成像技术动态观察不同感染途径下急性肺结核小鼠感染模型的建立。方法通过基因重组的方式将近红外荧光蛋白(near-infrared fluorescent protein,iRFP)基因iRFP720插入到游离型载体pMV261质粒,将携带iRFP720基因的质粒转染至Mycobacterium bovis BCG *** 1173P2(简称BCG)中,筛选出稳定表达iRFP720荧光蛋白的单克隆菌株Mycobacterium bovis BCG *** 1173P2::pMV261-iRFP720(简称BCG-iRFP720)。体外传代扩增后分别经腹腔和尾静脉接种途径感染C57BL/6N小鼠,建立可视化急性肺结核小鼠感染模型,通过InSyTe FLECT/CT成像技术动态观察荧光菌株在小鼠体内分布情况。结果获得了高水平稳定表达近红外荧光蛋白的BCG-iRFP720荧光菌株。该荧光菌株体外多次传代后在细胞水平和动物体内水平均能被激发出明显红色荧光,将稳定表达荧光蛋白的单克隆菌株分别经腹腔和尾静脉接种途径感染小鼠,InSyTe FLECT/CT活体成像发现,腹腔注射感染后第5天可见小鼠肺部红色荧光出现,而尾静脉注射感染后第1天即可见小鼠肺部红色荧光出现。结论成功建立了稳定表达近红外荧光蛋白的减毒牛型结核分枝杆菌菌株。采用InSyTe FLECT/CT成像技术构建的可视化急性肺结核小鼠感染模型是拓展分枝杆菌在体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型。

关键词：活体荧光成像减毒牛型结核分枝杆菌荧光菌株 InSyTe FLECT/CT

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实时荧光定量Alu-PCR检测整合型SIV/SHIV DNA方法的建立

实时荧光定量Alu-PCR检测整合型SIV/SHIV DNA方法的建立

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第十四届中国实验动物科学年会

作者：童玲陈霆李想丛喆薛婧北京协和医学院比较医学中心中国医学科学院医学实验动物研究所国家卫生和计划生育委员会人类疾病比较医学重点实验室国家中医药管理局人类疾病动物模型三级实验室新发再发传染病动物模型研究北京市重点实验室

目的建立实时荧光定量Alu-PCR方法,检测SIV/SHIV感染恒河猴体内整合的前病毒DNA。方法提取SIV/SHIV感染猴PBMCs中的DNA,Alu-PCR扩增DNA上病毒LTR U3区域内长度为188bp的片段,将该片段与pGEM T载体连接,构建p GEM-SIV LTR188质粒。扩增... 详细信息

目的建立实时荧光定量Alu-PCR方法,检测SIV/SHIV感染恒河猴体内整合的前病毒DNA。方法提取SIV/SHIV感染猴PBMCs中的DNA,Alu-PCR扩增DNA上病毒LTR U3区域内长度为188bp的片段,将该片段与pGEM T载体连接,构建p GEM-SIV LTR188质粒。扩增纯化质粒并进行定量,10倍系列稀释后,做出标准曲线,作为TaqMan-MGB探针实时荧光定量Alu-PCR的标准品。结果建立的质粒标准品可精确定量到10copies/μL,利用该方法对4只SIV/SHIV感染猴PBMCs中整合型前病毒DNA进行检测,阳性率为100%,高于Alu-PCR 62.5%的阳性率。结论 TaqMan-MGB探针实时荧光定量Alu-PCR方法能够定量检测整合入宿主基因组中的前病毒DNA,灵敏度高,可以用于评价SIV/SHIV潜伏库的大小。

关键词： Alu-PCR 整合型SIV/SHIV 潜伏库

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